A fonte de financiamento para a demonstração laboratório estava concessão NIGMS: GM077119. Agradecemos ao Dr. Joseph R. Haywood e Dr. Peter Cobbett pelo apoio do Short Couse em Integrative e Órgão Sistemas de Farmacologia. Agradecemos também a Senhora Hannah Garver por seu apoio técnico da demonstração laboratorial.

Antes de qualquer procedimento animal, o cuidado com os animais e uso comitê institucional (IACUC) deve aprovar o protocolo. Este protocolo foi aprovado pela Michigan State University IACUC. 1. Preparação de pré-laboratório de solução de FITC-inulina <ol><li> Aqueça 20 ml de solução salina a 70 ° C e agita-se lentamente em 100 mg de FITC-inulina (5 mg / ml de FITC-inulina) de inulina é até que todo dissolvido. </li><li> Solução arrefecer até à TA e adicionar 800 mg de albumina de soro de bovino (40 mg / ml de BSA, em pó liofilizada, essencialmente livre globulina, baixa endotoxina, ≥98% de pureza por electroforese em gel de agarose). </li><li> Filtra-se a solução de inulina-BSA com papel de filtro (grau 1). Coloque a solução filtrada em uma seringa de 20 ml com um filtro de seringa com ponta (0,2 um) e cobrir com folha de a proteger da luz. </li></ol> 2. Anestesia e Cirurgia <ol><li> Coloque o rato em uma câmara de indução preenchido com 5% de isoflurano para induzir a anestesia. Grave bodpeso y (250-350 g) e colocar o rato numa plataforma cirúrgica aquecido concebido para manter 37 ° C a temperatura do corpo durante todo o experimento. Segurar cuidadosamente o rato para a plataforma com fita de laboratório sobre as patas. Manter a anestesia com 1-2% de isoflurano com classe médica 100% O 2 a taxa de fluxo de ar de 0,8-1,0 L / min. </li><li> Inserir um cateter cônico (OD ponta intravascular, 2.7F) na artéria femoral para pressão arterial e monitoramento da freqüência cardíaca, e coleta de sangue. </li><li> Inserir um cateter (PE-50) na veia femoral para infusão de inulina. Prenda o cateter ao tecido com 5-O trançado de seda de sutura cirúrgica 6 circundante. </li><li> Fixe o cateter arterial a um transdutor de pressão calibre de tensão. Pressão arterial e freqüência cardíaca registro usando o software de aquisição de dados e exibição em uma tela de computador em tempo real. Esta técnica é demonstrado em detalhe em vídeo 6. </li><li> Expor a bexiga através de uma incisão suprapúbica. Corte um pequenoorifício na ponta da bexiga e da inserção de uma cânula (PE-190) com uma ponta de calor queimado no interior da bexiga para a recolha de urina. Fixe a cânula para a bexiga com uma sutura em bolsa. </li></ol> 3. urina e coleta de sangue <ol><li> Colocar a seringa de FITC-inulina em uma bomba de seringa com velocidade de fluxo definido de 1 ml / h por 100 g de peso corporal (3 ml / h durante um rato pesando 300 g). Fixe a seringa para o cateter na veia femoral. Iniciar a infusão de inulina e permitir um período de equilíbrio de 1-2 horas. Manter seringa coberto de uma camada para proteger da luz. </li><li> Determinar se o ritmo de fluxo de urina é estável e adequado para a análise de amostras (20 ul / min) através da recolha de uma amostra de urina de uma pré-pesados ​​para um frasco de recolha período de 10 min. Determinar o volume de urina por gravimetria com uma balança digital. Um volume de urina suficiente durante um período de recolha de 10 min é de 0,2 ml. Continuar a recolher amostras de urina até duas coleções consecutivos indicam uma taxa de fluxo de urina de 20 l / mou mais. </li><li> Amostras pré-droga <ol><li> Recolher uma amostra de urina durante um período de 20 min. Recolher uma amostra de sangue (0,5 ml) a partir do cateter arterial, no ponto médio do período de recolha de urina. Tenha o cuidado de limpar completamente o cateter arterial de solução salina antes de coletar uma amostra de sangue em um frasco contendo uma coleção U heparina. Use frascos de coleta com marcações de volume para facilitar a recolha de 0,5 ml de sangue arterial. </li><li> Lave o catéter arterial com heparina-solução salina (20 U / mL) para limpar o cateter de sangue (aprox. 0,1 mL). O comprimento do cateter arterial deve ser tão curto quanto possível, para limitar o volume de solução salina de heparina-necessária para descarregar. Nota: as amostras de sangue diluído produzir cálculos imprecisos de TFG e excreção fracionada de Na e K. </li><li> Aguarde 10 minutos e repita a cobrança de uma segunda urina Pré-drogas e amostra de sangue. </li></ol></li><li> Após a coleta de duas amostras de pré-droga, administrar um diurético drug, a furosemida (10 mg / kg), através do cateter arterial. Lave o cateter arterial com solução salina heparinizada para limpar o cateter de drogas. Ter o cuidado de evitar a injecção de ar através do cateter arterial. Anote o tempo da injeção de furosemida. </li><li> As amostras post-droga: Em cada um dos três pontos de tempo a seguir, recolher uma amostra de urina durante um período de recolha de 10 min, e uma amostra de sangue (0,5 ml) no ponto médio do período de recolha de urina. <ol><li> Para Sample Post-Drogas 1 - coletar cinco minutos após a furosemida. </li><li> Para Post-Drogas Amostra 2 - recolher dez minutos após a furosemida. </li><li> Para Sample Post-Drogas 3 - recolher quinze minutos após a furosemida. </li></ol></li><li> Depois de todas as amostras foram coletadas, eutanásia do rato em conformidade com os procedimentos institucionais por toracotomia e remoção do coração. Remova ambos os rins. Decapsulate (remover a membrana que envolve) e apagar os rins para remover o excesso de sangue. Pesar os rins. </li></ol><ol><li> Meça todos os volumes de amostras de urina por gravimetria com uma balança digital, e pesos recordes. </li><li> Amostras de sangue total de centrifugação, utilizando uma centrífuga de bancada (1800 x g) para separar o plasma. Transferir as amostras de plasma para pequenos frascos rotulados. </li><li> Analisar as concentrações de sódio e potássio em amostras de urina e plasma com um analisador de sódio / potássio. </li><li> Medição de FITC-inulina no plasma e urina <ol><li> Dilui-se a urina de pré-droga (de 1: 200 a 1: 400), e na urina pós-fármaco (1:10) com tampão HEPES (500 mM, pH 7,4). </li><li> Adicionar 40 ul de padrão ou de amostra ul e 60 de tampão HEPES numa placa de 96 cavidades (uma amostra por cavidade) e deixa-se misturar durante 10 min enquanto se coberto com folha de alumínio. </li><li> Gerar uma curva padrão para FITC-inulina, relativamente às concentrações de 6,25, 12,5, 25, 50, 100, 200, 400 ug / ml (Figura 1). Determinar a fluorescência de FITC-inulina em amostras e padrões usando um leitor de microplacas com excitação e comprimentos de onda de emissão de 485 e 538 nm, respectivamente. </li><li> Encaixe os valores fluorescentes para os padrões de uma análise de regressão função logística de 4 paramter. Os parâmetros da função de regressão são usados ​​para calcular a concentração de FITC-inulina em amostras de plasma e de urina (Tabela 1). </li></ol></li></ol> 5. Pós-laboratório Análise de Resultados: Cálculos <ol><li> Calcular Urina Taxa de Fluxo (UV; ml / min): [volume de urina recolhida (ml)] ÷ [tempo da recolha (min)] </li><li> Calcular Taxa de Filtração Glomerular (GFR; ml / min): [a concentração de inulina urina (ug / ml) x UV (ml / min)] ÷ [inulina conc plasma. (Ug / ml)] </li><li> Calcular filtrada Carga de sódio (pmol / min): concentração de sódio no plasma (nmol / ml) x TFG (ml / min) </li><li> Calcular excreção de sódio Classificação (U Na V; umol / min): concentração de sódio na urina (pmol / ml) x UV (ml / min) </li><li> Calcule Fractional excreção de sódio (FE Na;%): [L Na V (pmol / min)] ÷ [Carga de sódio filtrado (pmol / min)] x 100 </li><li> Calcular carga filtrada potássio (pmol / min): a concentração de potássio no plasma (nmol / ml) x TFG (ml / min) </li><li> Calcular excreção de potássio Classificação (L K V; umol / min): concentração de potássio da urina (pmol / ml) x UV (ml / min) </li><li> Calcule Fractional excreção de potássio (K FE;%): [U K V (mmol / min)] ÷ [Load potássio filtrado (mmol / min)] x 100 </li></ol>

<ol>
	<li>Silverthorn, D. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Human Physiology: An integrated approach. , (2012).</li><li>Hall, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guyton and Hall Textbook of Medical Physiology. , 303-344 (2011).</li><li>Levey, A. 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A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Femoral+arterial+and+venous+catheterization+for+blood+sampling,+drug+administration+and+conscious+blood+pressure+and+heart+rate+measurements.">Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements.</a> Journal of Visualized Experiments. (59), (2012).</li><li>Sterner, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determining+'true'+glomerular+filtration+rate+in+healthy+adults+using+infusion+of+inulin+and+comparing+it+with+values+obtained+using+other+clearance+techniques+or+predictive+equations.">Determining 'true' glomerular filtration rate in healthy adults using infusion of inulin and comparing it with values obtained using other clearance techniques or predictive equations.</a> Scandinavian Journal of Urology and Nephrology. 42, 278-285 (2008).</li><li>Toto, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conventional+measurement+of+renal+function+utilizing+serum+creatinine,+creatinine+clearance,+inulin+and+para-aminohippuric+acid+clearance.">Conventional measurement of renal function utilizing serum creatinine, creatinine clearance, inulin and para-aminohippuric acid clearance.</a> Current Opinion in Nephrology and Hypertension. 4 (6), 505-509 (1995).</li><li>Matavelli, L. C., Kadowitz, P. J., Navar, L. G., Majid, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+hemodynamic+and+excretory+responses+to+intra-arterial+infusion+of+peroxynitrite+in+anesthetized+rats.">Renal hemodynamic and excretory responses to intra-arterial infusion of peroxynitrite in anesthetized rats.</a> Americam Journal of Physiology. 296, F170-F176 (2009).</li><li>Davidson, W. D., Sackner, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplification+of+the+anthrone+method+for+the+determination+of+inulin+in+clearance+studies.">Simplification of the anthrone method for the determination of inulin in clearance studies.</a> Journal of Laboratory, &amp; Clinical Medicine. 62, 351-356 (1963).</li><li>Symes, A. L., Gault, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assay+of+inulin+in+tissues+using+anthrone.">Assay of inulin in tissues using anthrone.</a> Clinical Biochemistry. 8 (1), 67-70 (1975).</li><li>Shalmi, M., Lunau, H. E., Petersen, J. S., Bak, M., Christensen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suitability+of+tritiated+inulin+for+determination+of+glomerular+filtration+rate.">Suitability of tritiated inulin for determination of glomerular filtration rate.</a> Americam Journal of Physiology. 260 (2 Pt 2), F283-F289 (1991).</li><li>Denton, K. M., Anderson, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glomerular+untrafiltration+in+rabbits+with+superficial+glomeruli.">Glomerular untrafiltration in rabbits with superficial glomeruli.</a> EUropean Journal of Physiology. 419 (3-4), 235-242 (1991).</li><li>Jobin, J., Bonjour, J. -. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+glomerular+filtration+rate+in+conscious+unrestrained+rats+with+inulin+infused+by+implanted+osmotic+pumps.">Measurement of glomerular filtration rate in conscious unrestrained rats with inulin infused by implanted osmotic pumps.</a> Americam Journal of Physiology. 248 (5 Pt 2), F734-F738 (1985).</li><li>Lorenz, J. N., Gruenstein, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple,+nonradioactive+method+for+evaluating+single-nephron+filtration+rate+using+FITC-inulin.">A simple, nonradioactive method for evaluating single-nephron filtration rate using FITC-inulin.</a> Americam Journal of Physiology. 276 (1 Pt 2), F172-F177 (1999).</li><li>Qi, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serial+determination+of+glomerular+filtration+rate+in+conscious+mice+using+FITC-inulin+clearance.">Serial determination of glomerular filtration rate in conscious mice using FITC-inulin clearance.</a> Americam Journal of Physiology. 286 (3), F590-F596 (2004).</li><li>Bivona, B. J., Park, S., Harrison-Bernard, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glomerular+filtration+rate+determinations+in+conscious+type+II+diabetic+mice.">Glomerular filtration rate determinations in conscious type II diabetic mice.</a> Americam Journal of Physiology. 300 (3), F618-F625 (2011).</li><li>Rosen, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+anaesthesia+and+surgery+on+renal+hemodynamics.">Effects of anaesthesia and surgery on renal hemodynamics.</a> British Journal of Anesthesiology. 44, 252-258 (1972).</li><li>Cousins, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthesia+and+the+kidney.">Anesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and intensive care. 11 (4), 292-320 (1983).</li><li>Walter, S. J., Zewde, T., Shirley, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+anaesthesia+and+standard+clearance+procedures+on+renal+function+in+the+rat.">The effect of anaesthesia and standard clearance procedures on renal function in the rat.</a> Quarterly Journal of Experimental Physiology. 74, 805-812 (1989).</li><li>Rieg, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+method+for+measurement+of+glomerular+filtration+rate+in+conscious+mice.">A high-throughput method for measurement of glomerular filtration rate in conscious mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (75), (2013).</li></ol>

Os autores declaram que não têm interesses financeiros concorrentes. As opiniões ou afirmações contidas neste documento são os pontos de vista particulares do autor e não devem ser interpretadas como funcionário ou como refletindo os pontos de vista do Departamento do Exército ou do Departamento de Defesa.

Um marcador apropriado para a medição de GFR deve atender quatro critérios: ser livremente filtrada no glomérulo, ser independente para proteínas do plasma, e nem ser absorvido nem secretada no néfron. A inulina é um polímero de frutose, que satisfaz estes critérios. Como resultado, a depuração renal da inulina é considerada o padrão ouro para medir GFR 7. A técnica demonstrada representa a abordagem tradicional da determinação da eliminação renal de inulina utilizando recolhas de urina cron...

The most important function of the kidney is the homeostatic regulation of extracellular water and electrolyte content. The kidneys closely regulate extracellular water, sodium (Na) and potassium (K) to maintain normal physiological levels. Disturbances in renal function can result in serious metabolic disorders which can be fatal. The basic renal process occurs in the nephron and begins with the filtration of plasma at the glomerulus and ends with the excretion of urine. Other processes that determine the final concentration of water, Na and K in the urine are secretion and reabsorption within the nephron. Measurements of glomerular filtration rate (GFR) and the fractional excretion of Na and K are critical in assessing renal function in health and disease. The reader is referred to previously published review articles and textbooks for a more thorough discussion of kidney function1-4. 
GFR can be measured as the steady state renal clearance of inulin which is filtered at the glomerulus, but not secreted or reabsorbed along the nephron5. While this technique requires anesthesia, surgical preparation, and a terminal experiment, it is considered the gold standard of GFR measurement. Using inulin that is tagged with fluorescein-isothiocyanate (FITC), plasma and urine concentration of FITC-inulin can be easily measured in small volumes and used to calculate GFR during multiple time points of an experiment. The fractional excretion of Na and K can be determined from the concentration of Na and K in plasma and urine. 
The conceptual understanding of how to measure renal function can easily be demonstrated in a short lab designed to allow students to actively participate in some aspects of the experiment. This video depicts the pre-lab preparation, the renal function demonstration, and the post-lab evaluation of results. The surgical techniques necessary for making measurements of GFR are demonstrated in an anesthetized rat. In addition, example calculations for GFR, and the fractional excretion of Na and K are shown before and after administration of a diuretic drug.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1011">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
</table>
<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5-0 Braided Silk Surgical Suture</td>
			<td>Surgical Specialties Corp</td>
			<td>SP1033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Assay Plate, 96-Well</td>
			<td>Costar&#160;</td>
			<td>3922</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma Chemical Co</td>
			<td>A2934-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>MicroFuge 18, 357160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Sample Tubes</td>
			<td>Dot Scientific Inc.&#160;</td>
			<td>#711-FTG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Tipped Applicators</td>
			<td>Solon Manufacturing Co</td>
			<td>56200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data Acquisition Software</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>LabChart Pro 7.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Scale&#160;</td>
			<td>Denver Instrument</td>
			<td>APX-4001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC-Inulin</td>
			<td>Sigma Chemical Co</td>
			<td>F3272-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponges</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>2146</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heated Surgical Bed</td>
			<td>EZ-Anesthesia</td>
			<td>EZ-212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Sagnet</td>
			<td>NDC 25021-402-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma Chemical Co</td>
			<td>H3375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abbott Animal Health</td>
			<td>IsoFlo, 5260-04-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane Vaporizer</td>
			<td>EZ-Anesthesia</td>
			<td>EZ-190F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Forceps</td>
			<td>Biomedical Research Instruments Inc.</td>
			<td>70-1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microplate Reader - Fluoroskan</td>
			<td>ThermoScientific</td>
			<td>Ascent FL, 5210460</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOVA 5+ Sodium/Potassium Analyzer</td>
			<td>NOVA BioMedical</td>
			<td>14156</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olsen-Hegar Needle Holders with Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-190 (for bladder catheter)</td>
			<td>BD Medical</td>
			<td>427435</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressure Transducer&#160;</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>MLT1199</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrex Culture Tubes</td>
			<td>Corning Inc.</td>
			<td>99445-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Femoral Tapered Artery Catheter</td>
			<td>Strategic Applications Inc.</td>
			<td>RFA-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Salix Furosemide 5%</td>
			<td>Intervet</td>
			<td>#34-478</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Strabismus Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14075-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Student Surgical Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91402-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Gloves</td>
			<td>Kimberly-Clark</td>
			<td>Sterling Nitrile Gloves</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe pump</td>
			<td>Razel Scientific</td>
			<td>R99-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91121-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Scissors</td>
			<td>George Tiemann&#160; Co</td>
			<td>105-420</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
5-0 Braided Silk Surgical Suture Surgical Specialties Corp SP1033 Assay Plate, 96-Well Costar&#160; 3922 Bovine Serum Albumin Sigma Chemical Co A2934-25G Centrifuge Beckman Coulter MicroFuge 18, 357160 Conical Sample Tubes Dot Scientific Inc.&#160; #711-FTG Cotton Tipped Applicators Solon Manufacturing Co 56200 Data Acquisition Software ADInstruments LabChart Pro 7.0 Digital Scale&#160; Denver Instrument APX-4001 FITC-Inulin Sigma Chemical Co F3272-1G Gauze Sponges Covidien 2146 Heated Surgical Bed EZ-Anesthesia EZ-212 Heparin Sagnet NDC 25021-402-10 HEPES Sigma Chemical Co H3375 Isoflurane Abbott Animal Health IsoFlo, 5260-04-05 Isoflurane Vaporizer EZ-Anesthesia EZ-190F Micro Dissecting Forceps Biomedical Research Instruments Inc. 70-1020 Microplate Reader - Fluoroskan ThermoScientific Ascent FL, 5210460 NOVA 5+ Sodium/Potassium Analyzer NOVA BioMedical 14156 Olsen-Hegar Needle Holders with Scissors Fine Science Tools 12002-12 PE-190 (for bladder catheter) BD Medical 427435 Pressure Transducer&#160; ADInstruments MLT1199 Pyrex Culture Tubes Corning Inc. 99445-12 Rat Femoral Tapered Artery Catheter Strategic Applications Inc. RFA-01 Salix Furosemide 5% Intervet #34-478 Strabismus Scissors Fine Science Tools 14075-11 Student Surgical Scissors Fine Science Tools 91402-12 Surgical Gloves Kimberly-Clark Sterling Nitrile Gloves Syringe pump Razel Scientific R99-E Tissue Forceps Fine Science Tools 91121-12 Tissue Scissors George Tiemann&#160; Co 105-420

physiology lab demonstration: glomerular filtration rate in a rat

Measurements of glomerular filtration rate (GFR), and the fractional excretion of sodium (Na) and potassium (K) are critical in assessing renal function in health and disease. GFR is measured as the steady state renal clearance of inulin which is filtered at the glomerulus, but not secreted or reabsorbed along the nephron. The fractional excretion of Na and K can be determined from the concentration of Na and K in plasma and urine. The renal clearance of inulin can be demonstrated in an anesthetized animal which has catheters in the femoral artery, femoral vein and bladder. The equipment and supplies used for this procedure are those commonly available in a research core facility, and thus makes this procedure a practical means for measuring renal function. The purpose of this video is to demonstrate the procedures required to perform a lab demonstration in which renal function is assessed before and after a diuretic drug. The presented technique can be utilized to assess renal function in rat models of renal disease.

O diurético usado no laboratório demonstração foi furosemida que muito rapidamente inibe a reabsorção de Na e K filtrada pelo rim, resultando em aumento de Na, K, e a excreção de água dentro de minutos após a administração da droga. Por seu mecanismo primário, furosemida deve ter efeitos mínimos sobre a TFG e da carga filtrada de Na e K, mas vai aumentar o fluxo de urina, e fração de excreção de Na e K. Os resultados representativos da Tabela 3 mostram que,...

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Physiology Lab Demonstration: Glomerular Filtration Rate in a Rat

The purpose of this protocol is to demonstrate the principles and techniques for measuring and calculating glomerular filtration rate, urine flow rate, and excretion of sodium and potassium in a rat. This demonstration can be used to provide students with an overall conceptual understanding of how to measure renal function.

Laboratório de Fisiologia Demonstração: Taxa de filtração glomerular em um Rat

Measurements of glomerular filtration rate (GFR), and the fractional excretion of sodium (Na) and potassium (K) are critical in assessing renal function ...

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17.1K visualizações.  U.S. Army Institute of Surgical Research. The purpose of this protocol is to demonstrate the principles and techniques for measuring and calculating glomerular filtration rate, urine flow rate, and excretion of sodium and potassium in a rat. This demonstration can be used to provide students with an overall conceptual understanding of how to measure renal function. 