La fonte di finanziamento per la dimostrazione laboratorio era NIGMS concessione: GM077119. Ringraziamo il Dr. Joseph R. Haywood e il Dr. Peter Cobbett per il loro supporto Short Couse in Integrativa e organo Sistemi Farmacologia. Ringraziamo anche la signora Hannah Garver per il suo supporto tecnico della manifestazione laboratorio.

Prima di qualsiasi procedura animale, la cura degli animali e l&#39;uso comitato istituzionale (IACUC) deve approvare il protocollo. Questo protocollo è stato approvato dalla Michigan State University IACUC. 1. Preparazione Pre-lab di FITC-inulina Solution <ol><li> Warm 20 ml di soluzione salina a 70 ° C e agitare lentamente in 100 mg di FITC-inulina (5 mg / ml FITC-inulina) finché tutto inulina è disciolto. </li><li> Soluzione Raffreddare a RT e aggiungere 800 mg di albumina sierica bovina (40 mg / ml BSA, polvere liofilizzata, essenzialmente globulina, basso endotossina, ≥98% di purezza mediante elettroforesi su gel di agarosio). </li><li> Filtrare la soluzione di inulina-BSA con carta da filtro (grado 1). Mettere la soluzione filtrata in una siringa da 20 ml con un filtro a siringa punta (0,2 micron) e coprire con un foglio al riparo dalla luce. </li></ol> 2. Anestesia e Chirurgia <ol><li> Posizionare il ratto in una camera di induzione riempita con 5% isoflurano per indurre anestesia. Record bodpeso y (250-350 g) e posizionare il ratto su una piattaforma chirurgica riscaldato progettato per mantenere la temperatura corporea di 37 ° C tutto l&#39;esperimento. Garantire delicatamente il topo alla piattaforma con del nastro di laboratorio sulle zampe. Mantenere anestesia con 1-2% isoflurano con grado medico di 100% O 2 al flusso d&#39;aria di 0,8-1,0 L / min. </li><li> Inserire un catetere conica (OD punta intravascolare, 2.7F) nell&#39;arteria femorale per la pressione sanguigna e il monitoraggio della frequenza cardiaca, e il prelievo di sangue. </li><li> Inserire un catetere (PE-50) nella vena femorale per inulina infusione. Fissare il catetere al tessuto con 5-O seta intrecciata sutura chirurgica 6 circostante. </li><li> Fissare il catetere arterioso ad un trasduttore di pressione estensimetri. Registrare la pressione sanguigna e la frequenza cardiaca utilizzando software di acquisizione dei dati e la visualizzazione sullo schermo di un computer in tempo reale. Questa tecnica è illustrata in dettaglio in video 6. </li><li> Esporre la vescica attraverso un&#39;incisione sovrapubica. Tagliare un piccoloforo nella punta della vescica e inserire una cannula (PE-190) con un calore svasate punta all&#39;interno della vescica per la raccolta delle urine. Fissare la cannula alla vescica con una sutura a borsa di. </li></ol> 3. urine e il prelievo di sangue <ol><li> Posizionare la siringa di FITC-inulina in una pompa a siringa con portata regolata di 1 ml / h per 100 g di peso corporeo (3 ml / h per un topo peso 300 g). Attaccare la siringa al catetere vena femorale. Avviare l&#39;infusione di inulina e consentire un periodo di equilibrio 1-2 ore. Tenere la siringa ricoperto di un foglio al riparo dalla luce. </li><li> Determinare se il flusso urinario è stabile e adeguata per l&#39;analisi del campione (20 microlitri / min) per raccogliere un campione di urina in una fiala di raccolta pre-pesato per un periodo di 10 min. Determinazione del volume di urina metodo gravimetrico con una bilancia digitale. Un volume di urina adeguata per un periodo di raccolta 10 minuti è di 0,2 ml. Continuare a raccogliere campioni di urina fino a due collezioni consecutivi indicano un flusso di urina di 20 l / min o più. </li><li> Campioni Pre-droga <ol><li> Raccogliere un campione di urina nel corso di un periodo di 20 min. Raccogliere un campione di sangue (0,5 ml) dal catetere arterioso a metà del periodo di raccolta delle urine. Fare attenzione a cancellare completamente il catetere arterioso di soluzione fisiologica prima di raccogliere un campione di sangue in una fiala di raccolta contenente 1 U eparina. Utilizzare fiale raccolta con marcature volume per facilitare la raccolta di 0,5 ml di sangue arterioso. </li><li> Lavare il catetere arterioso con eparina-salina (20 U / ml) per cancellare il catetere di sangue (circa 0,1 ml.). La lunghezza del catetere arterioso deve essere il più breve possibile per limitare il volume di eparina-salina necessaria per irrigare. Nota: i campioni di sangue diluito producono calcoli imprecisi di GFR e l&#39;escrezione frazionale di Na e K. </li><li> Attendere 10 minuti, e ripetere la raccolta di una seconda urina pre-droga e campione di sangue. </li></ol></li><li> Dopo la raccolta di due campioni pre-droga, amministrare un dru diureticog, furosemide (10 mg / kg), tramite il catetere arterioso. Lavare il catetere arterioso con soluzione salina eparinizzata per cancellare il catetere di droga. Fare attenzione per evitare l&#39;immissione di aria attraverso il catetere arterioso. Registrare il tempo di iniezione furosemide. </li><li> Campioni post-farmaco: Ad ognuno dei 3 punti di tempo indicati, raccogliere un campione di urina durante un periodo di raccolta 10 min, e un campione di sangue (0,5 ml) a metà del periodo di raccolta delle urine. <ol><li> Per il campione post-Drug 1 - raccogliere cinque minuti dopo furosemide. </li><li> Per il campione post-Drug 2 - raccogliere dieci minuti dopo furosemide. </li><li> Per il campione post-Drug 3 - raccogliere quindici minuti dopo la furosemide. </li></ol></li><li> Dopo che tutti i campioni sono stati raccolti, eutanasia il ratto secondo procedure istituzionali da toracotomia e la rimozione del cuore. Rimuovere entrambi i reni. Decapsulate (rimuovere la membrana che circonda) e asciugare i reni per rimuovere il sangue in eccesso. Pesare i reni. </li></ol><ol><li> Misurare tutti i volumi di campione di urina con metodo gravimetrico con una bilancia digitale, e pesi record. </li><li> Campioni di centrifuga di sangue intero con una centrifuga da tavolo (1.800 xg) per separare il plasma. Trasferire campioni di plasma di piccole fiale etichettate. </li><li> Analizzare le concentrazioni di Na e K in campioni di urina e di plasma con un analizzatore di sodio / potassio. </li><li> Misura di FITC-inulina nel plasma e nelle urine <ol><li> Diluire urina pre-droga (da 1: 200 a 1: 400), e nelle urine post-droga (1,10) con tampone HEPES (500 mM, pH 7,4). </li><li> Aggiungere 40 ml di microlitri standard o campione e 60 di tampone HEPES in una piastra da 96 pozzetti (un campione per pozzetto) e lasciare mescolare per 10 minuti mentre coperto con un foglio di alluminio. </li><li> Generare una curva standard per FITC-inulina per le concentrazioni di 6,25, 12,5, 25, 50, 100, 200, 400 ug / ml (Figura 1). Determinare FITC-inulina fluorescenza in campioni e standard utilizzando un lettore di micropiastre con l&#39;excitazioni e di emissione lunghezze d&#39;onda di 485 e 538 nm, rispettivamente. </li><li> Montare i valori fluorescenti per gli standard di un 4 Parametro analisi di regressione funzione logistica. I parametri della funzione di regressione sono utilizzati per calcolare la concentrazione FITC-inulina in campioni di plasma ed urina (Tabella 1). </li></ol></li></ol> 5. Post-laboratorio Analisi dei risultati: Calcoli <ol><li> Calcola urina Portata (UV; ml / min): [volume di urina raccolto (ml)] ÷ [momento della raccolta (min)] </li><li> Calcola velocità di filtrazione glomerulare (GFR; ml / min): [concentrazione inulina Urina (mg / ml) x UV (ml / min)] ÷ [plasma inulina conc. (Mg / ml)] </li><li> Calcola filtrata carico di sodio (mmol / min): concentrazione di sodio al plasma (mmol / ml) x GFR (ml / min) </li><li> Calcola sodio escrezione Rate (U Na V; mmol / min): concentrazione di sodio Urina (mmol / ml) x UV (ml / min) </li><li> Calcola frazionale escrezione di sodio (Na FE;%): [U Na V (mmol / min)] ÷ [filtrato sodio Load (mmol / min)] x 100 </li><li> Calcola carico filtrato di potassio (mmol / min): la concentrazione di potassio del plasma (mmol / ml) x GFR (ml / min) </li><li> Calcola potassio escrezione Rate (U K V; mmol / min): concentrazione di potassio Urina (mmol / ml) x UV (ml / min) </li><li> Calcola frazionale escrezione di potassio (FE K;%): [U K V (mmol / min)] ÷ [filtrato carico di potassio (mmol / min)] x 100 </li></ol>

<ol>
	<li>Silverthorn, D. U. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Human Physiology: An integrated approach. , (2012).</li><li>Hall, J. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Guyton and Hall Textbook of Medical Physiology. , 303-344 (2011).</li><li>Levey, A. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+renal+function+in+chronic+renal+disease.">Measurement of renal function in chronic renal disease.</a> Kidney International. 38 (1), 167-184 (1990).</li><li>Thurau, K., Valtin, H., Schnermann, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Kidney.">Kidney.</a> Annual Review of Physiology. 30, 441-524 (1968).</li><li>Shannon, J. A., Smith, H. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+excretion+of+inulin,+xylose,+and+urea+by+normal+and+phoriziniaed+man.">The excretion of inulin, xylose, and urea by normal and phoriziniaed man.</a> Journal of Clinical Investigation. 14, 393-401 (1935).</li><li>Jespersen, B., Knupp, L., Northcott, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Femoral+arterial+and+venous+catheterization+for+blood+sampling,+drug+administration+and+conscious+blood+pressure+and+heart+rate+measurements.">Femoral arterial and venous catheterization for blood sampling, drug administration and conscious blood pressure and heart rate measurements.</a> Journal of Visualized Experiments. (59), (2012).</li><li>Sterner, G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Determining+'true'+glomerular+filtration+rate+in+healthy+adults+using+infusion+of+inulin+and+comparing+it+with+values+obtained+using+other+clearance+techniques+or+predictive+equations.">Determining 'true' glomerular filtration rate in healthy adults using infusion of inulin and comparing it with values obtained using other clearance techniques or predictive equations.</a> Scandinavian Journal of Urology and Nephrology. 42, 278-285 (2008).</li><li>Toto, R. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conventional+measurement+of+renal+function+utilizing+serum+creatinine,+creatinine+clearance,+inulin+and+para-aminohippuric+acid+clearance.">Conventional measurement of renal function utilizing serum creatinine, creatinine clearance, inulin and para-aminohippuric acid clearance.</a> Current Opinion in Nephrology and Hypertension. 4 (6), 505-509 (1995).</li><li>Matavelli, L. C., Kadowitz, P. J., Navar, L. G., Majid, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Renal+hemodynamic+and+excretory+responses+to+intra-arterial+infusion+of+peroxynitrite+in+anesthetized+rats.">Renal hemodynamic and excretory responses to intra-arterial infusion of peroxynitrite in anesthetized rats.</a> Americam Journal of Physiology. 296, F170-F176 (2009).</li><li>Davidson, W. D., Sackner, M. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Simplification+of+the+anthrone+method+for+the+determination+of+inulin+in+clearance+studies.">Simplification of the anthrone method for the determination of inulin in clearance studies.</a> Journal of Laboratory, &amp; Clinical Medicine. 62, 351-356 (1963).</li><li>Symes, A. L., Gault, M. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assay+of+inulin+in+tissues+using+anthrone.">Assay of inulin in tissues using anthrone.</a> Clinical Biochemistry. 8 (1), 67-70 (1975).</li><li>Shalmi, M., Lunau, H. E., Petersen, J. S., Bak, M., Christensen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Suitability+of+tritiated+inulin+for+determination+of+glomerular+filtration+rate.">Suitability of tritiated inulin for determination of glomerular filtration rate.</a> Americam Journal of Physiology. 260 (2 Pt 2), F283-F289 (1991).</li><li>Denton, K. M., Anderson, W. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glomerular+untrafiltration+in+rabbits+with+superficial+glomeruli.">Glomerular untrafiltration in rabbits with superficial glomeruli.</a> EUropean Journal of Physiology. 419 (3-4), 235-242 (1991).</li><li>Jobin, J., Bonjour, J. -. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Measurement+of+glomerular+filtration+rate+in+conscious+unrestrained+rats+with+inulin+infused+by+implanted+osmotic+pumps.">Measurement of glomerular filtration rate in conscious unrestrained rats with inulin infused by implanted osmotic pumps.</a> Americam Journal of Physiology. 248 (5 Pt 2), F734-F738 (1985).</li><li>Lorenz, J. N., Gruenstein, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple,+nonradioactive+method+for+evaluating+single-nephron+filtration+rate+using+FITC-inulin.">A simple, nonradioactive method for evaluating single-nephron filtration rate using FITC-inulin.</a> Americam Journal of Physiology. 276 (1 Pt 2), F172-F177 (1999).</li><li>Qi, Z., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Serial+determination+of+glomerular+filtration+rate+in+conscious+mice+using+FITC-inulin+clearance.">Serial determination of glomerular filtration rate in conscious mice using FITC-inulin clearance.</a> Americam Journal of Physiology. 286 (3), F590-F596 (2004).</li><li>Bivona, B. J., Park, S., Harrison-Bernard, L. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Glomerular+filtration+rate+determinations+in+conscious+type+II+diabetic+mice.">Glomerular filtration rate determinations in conscious type II diabetic mice.</a> Americam Journal of Physiology. 300 (3), F618-F625 (2011).</li><li>Rosen, S. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+anaesthesia+and+surgery+on+renal+hemodynamics.">Effects of anaesthesia and surgery on renal hemodynamics.</a> British Journal of Anesthesiology. 44, 252-258 (1972).</li><li>Cousins, M. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthesia+and+the+kidney.">Anesthesia and the kidney.</a> Anaesthesia and intensive care. 11 (4), 292-320 (1983).</li><li>Walter, S. J., Zewde, T., Shirley, D. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+anaesthesia+and+standard+clearance+procedures+on+renal+function+in+the+rat.">The effect of anaesthesia and standard clearance procedures on renal function in the rat.</a> Quarterly Journal of Experimental Physiology. 74, 805-812 (1989).</li><li>Rieg, T. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+high-throughput+method+for+measurement+of+glomerular+filtration+rate+in+conscious+mice.">A high-throughput method for measurement of glomerular filtration rate in conscious mice.</a> Journal of Visualized Experiments. (75), (2013).</li></ol>

Gli autori dichiarano di non avere interessi finanziari in competizione. I pareri o le affermazioni contenute nel presente documento sono le opinioni personali dell&#39;autore e non sono da intendersi come ufficiale o come riflesso le opinioni del Dipartimento dell&#39;Esercito o il Dipartimento della Difesa.

Un indicatore adeguato per la misura GFR devono soddisfare quattro criteri: essere liberamente filtrato a livello glomerulare, essere non legato alle proteine ​​plasmatiche, e né essere assorbiti né secreto nel nefrone. L&#39;inulina è un polimero di fruttosio che soddisfa questi criteri. Come risultato, la clearance renale dell&#39;inulina è considerato lo standard per misurare GFR 7. La tecnica dimostrata rappresenta l&#39;approccio tradizionale di determinare la clearance renale di inulina utilizza...

The most important function of the kidney is the homeostatic regulation of extracellular water and electrolyte content. The kidneys closely regulate extracellular water, sodium (Na) and potassium (K) to maintain normal physiological levels. Disturbances in renal function can result in serious metabolic disorders which can be fatal. The basic renal process occurs in the nephron and begins with the filtration of plasma at the glomerulus and ends with the excretion of urine. Other processes that determine the final concentration of water, Na and K in the urine are secretion and reabsorption within the nephron. Measurements of glomerular filtration rate (GFR) and the fractional excretion of Na and K are critical in assessing renal function in health and disease. The reader is referred to previously published review articles and textbooks for a more thorough discussion of kidney function1-4. 
GFR can be measured as the steady state renal clearance of inulin which is filtered at the glomerulus, but not secreted or reabsorbed along the nephron5. While this technique requires anesthesia, surgical preparation, and a terminal experiment, it is considered the gold standard of GFR measurement. Using inulin that is tagged with fluorescein-isothiocyanate (FITC), plasma and urine concentration of FITC-inulin can be easily measured in small volumes and used to calculate GFR during multiple time points of an experiment. The fractional excretion of Na and K can be determined from the concentration of Na and K in plasma and urine. 
The conceptual understanding of how to measure renal function can easily be demonstrated in a short lab designed to allow students to actively participate in some aspects of the experiment. This video depicts the pre-lab preparation, the renal function demonstration, and the post-lab evaluation of results. The surgical techniques necessary for making measurements of GFR are demonstrated in an anesthetized rat. In addition, example calculations for GFR, and the fractional excretion of Na and K are shown before and after administration of a diuretic drug.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="1011">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
</table>
<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0">
	<tbody>
		<tr>
			<td>5-0 Braided Silk Surgical Suture</td>
			<td>Surgical Specialties Corp</td>
			<td>SP1033</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Assay Plate, 96-Well</td>
			<td>Costar&#160;</td>
			<td>3922</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Bovine Serum Albumin</td>
			<td>Sigma Chemical Co</td>
			<td>A2934-25G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Centrifuge</td>
			<td>Beckman Coulter</td>
			<td>MicroFuge 18, 357160</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Conical Sample Tubes</td>
			<td>Dot Scientific Inc.&#160;</td>
			<td>#711-FTG</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Cotton Tipped Applicators</td>
			<td>Solon Manufacturing Co</td>
			<td>56200</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Data Acquisition Software</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>LabChart Pro 7.0</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Digital Scale&#160;</td>
			<td>Denver Instrument</td>
			<td>APX-4001</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>FITC-Inulin</td>
			<td>Sigma Chemical Co</td>
			<td>F3272-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Gauze Sponges</td>
			<td>Covidien</td>
			<td>2146</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heated Surgical Bed</td>
			<td>EZ-Anesthesia</td>
			<td>EZ-212</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Heparin</td>
			<td>Sagnet</td>
			<td>NDC 25021-402-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>HEPES</td>
			<td>Sigma Chemical Co</td>
			<td>H3375</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane</td>
			<td>Abbott Animal Health</td>
			<td>IsoFlo, 5260-04-05</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Isoflurane Vaporizer</td>
			<td>EZ-Anesthesia</td>
			<td>EZ-190F</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Micro Dissecting Forceps</td>
			<td>Biomedical Research Instruments Inc.</td>
			<td>70-1020</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Microplate Reader - Fluoroskan</td>
			<td>ThermoScientific</td>
			<td>Ascent FL, 5210460</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>NOVA 5+ Sodium/Potassium Analyzer</td>
			<td>NOVA BioMedical</td>
			<td>14156</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Olsen-Hegar Needle Holders with Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>12002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>PE-190 (for bladder catheter)</td>
			<td>BD Medical</td>
			<td>427435</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pressure Transducer&#160;</td>
			<td>ADInstruments</td>
			<td>MLT1199</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Pyrex Culture Tubes</td>
			<td>Corning Inc.</td>
			<td>99445-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Rat Femoral Tapered Artery Catheter</td>
			<td>Strategic Applications Inc.</td>
			<td>RFA-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Salix Furosemide 5%</td>
			<td>Intervet</td>
			<td>#34-478</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Strabismus Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>14075-11</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Student Surgical Scissors</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91402-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Surgical Gloves</td>
			<td>Kimberly-Clark</td>
			<td>Sterling Nitrile Gloves</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Syringe pump</td>
			<td>Razel Scientific</td>
			<td>R99-E</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Forceps</td>
			<td>Fine Science Tools</td>
			<td>91121-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr>
			<td>Tissue Scissors</td>
			<td>George Tiemann&#160; Co</td>
			<td>105-420</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>
5-0 Braided Silk Surgical Suture Surgical Specialties Corp SP1033 Assay Plate, 96-Well Costar&#160; 3922 Bovine Serum Albumin Sigma Chemical Co A2934-25G Centrifuge Beckman Coulter MicroFuge 18, 357160 Conical Sample Tubes Dot Scientific Inc.&#160; #711-FTG Cotton Tipped Applicators Solon Manufacturing Co 56200 Data Acquisition Software ADInstruments LabChart Pro 7.0 Digital Scale&#160; Denver Instrument APX-4001 FITC-Inulin Sigma Chemical Co F3272-1G Gauze Sponges Covidien 2146 Heated Surgical Bed EZ-Anesthesia EZ-212 Heparin Sagnet NDC 25021-402-10 HEPES Sigma Chemical Co H3375 Isoflurane Abbott Animal Health IsoFlo, 5260-04-05 Isoflurane Vaporizer EZ-Anesthesia EZ-190F Micro Dissecting Forceps Biomedical Research Instruments Inc. 70-1020 Microplate Reader - Fluoroskan ThermoScientific Ascent FL, 5210460 NOVA 5+ Sodium/Potassium Analyzer NOVA BioMedical 14156 Olsen-Hegar Needle Holders with Scissors Fine Science Tools 12002-12 PE-190 (for bladder catheter) BD Medical 427435 Pressure Transducer&#160; ADInstruments MLT1199 Pyrex Culture Tubes Corning Inc. 99445-12 Rat Femoral Tapered Artery Catheter Strategic Applications Inc. RFA-01 Salix Furosemide 5% Intervet #34-478 Strabismus Scissors Fine Science Tools 14075-11 Student Surgical Scissors Fine Science Tools 91402-12 Surgical Gloves Kimberly-Clark Sterling Nitrile Gloves Syringe pump Razel Scientific R99-E Tissue Forceps Fine Science Tools 91121-12 Tissue Scissors George Tiemann&#160; Co 105-420

physiology lab demonstration: glomerular filtration rate in a rat

Measurements of glomerular filtration rate (GFR), and the fractional excretion of sodium (Na) and potassium (K) are critical in assessing renal function in health and disease. GFR is measured as the steady state renal clearance of inulin which is filtered at the glomerulus, but not secreted or reabsorbed along the nephron. The fractional excretion of Na and K can be determined from the concentration of Na and K in plasma and urine. The renal clearance of inulin can be demonstrated in an anesthetized animal which has catheters in the femoral artery, femoral vein and bladder. The equipment and supplies used for this procedure are those commonly available in a research core facility, and thus makes this procedure a practical means for measuring renal function. The purpose of this video is to demonstrate the procedures required to perform a lab demonstration in which renal function is assessed before and after a diuretic drug. The presented technique can be utilized to assess renal function in rat models of renal disease.

Il diuretico usato nella dimostrazione laboratorio era furosemide che inibisce molto rapidamente il riassorbimento di Na e K filtrati dal rene con conseguente aumento Na, K, e l&#39;escrezione dell&#39;acqua entro minuti dalla somministrazione del farmaco. Con il suo meccanismo primario, furosemide dovrebbe avere effetti minimi sul GFR e il carico filtrato di Na e K, ma aumenterà il flusso di urina, e l&#39;escrezione frazionale di Na e K. I risultati rappresentativi in Tabella 3</s...

Watch this Scientific Journal Video about Physiology Lab Demonstration: Glomerular Filtration Rate in a Rat at JoVE.com

Physiology Lab Demonstration: Glomerular Filtration Rate in a Rat

The purpose of this protocol is to demonstrate the principles and techniques for measuring and calculating glomerular filtration rate, urine flow rate, and excretion of sodium and potassium in a rat. This demonstration can be used to provide students with an overall conceptual understanding of how to measure renal function.

Fisiologia Lab Dimostrazione: filtrazione glomerulare in un ratto

Measurements of glomerular filtration rate (GFR), and the fractional excretion of sodium (Na) and potassium (K) are critical in assessing renal function ...

physiology-lab-demonstration-glomerular-filtration-rate-in-a-rat

Research

Education

JoVE Journal

JoVE Core

Biology

Human Biology

Osmoregulation and Excretion

SCIENTISTS IN ACTION

17.1K Views.  U.S. Army Institute of Surgical Research. The purpose of this protocol is to demonstrate the principles and techniques for measuring and calculating glomerular filtration rate, urine flow rate, and excretion of sodium and potassium in a rat. This demonstration can be used to provide students with an overall conceptual understanding of how to measure renal function. 