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Isolamento e Identificação de Células-Tronco Mesenquimais Derivadas do Tecido Adiposo de Ratos Sprague Dawley

Transcrição

As células-tronco mesenquimais têm um papel muito amplo na comunicação celular devido à sua função parácrina. Este protocolo obtém células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo com funcionalidade morfológica, imunofenotípica e adequada para uso no estudo de terapias para regeneração pancreática e diabetes. Tem havido um aumento do uso de terapias celulares no tratamento do diabetes.

Essas terapias incluem transplantes alogênicos de células pancreáticas, produtos derivados de células-tronco autólogas de células produtoras de insulina e tecido pancreático impresso em 3D usando tintas biológicas. A maioria das pesquisas estudou principalmente os componentes do secretoma e o papel na regulação de diferentes processos celulares. Novas técnicas como microarrays e sequenciamento de próxima geração podem investigar a função de miRNAs.

Um desafio nessa área é conseguir maior estimulação das células mesenquimais, atingindo uma composição molecular precisa no secretoma e direcionando-o para o tratamento de uma condição específica. Estaremos avaliando como os miRNAs contribuem para a degeneração do tecido pancreático exposto ao estresse oxidativo. O estudo envolverá o uso de células-tronco do tecido adiposo.

Este protocolo descreve uma metodologia para isolar e identificar células-tronco mesenquimais (CTMs) derivadas do tecido adiposo de ratos Sprague Dawley.

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Capítulos neste vídeo

0:00

Introduction

1:57

Murine Adipose Tissue Excision

2:36

Murine Adipose‐Derived Mesenchymal Cell Isolation, Maintenance, and Characterization

5:39

Immunofluorescent Detection of Adipose‐Derived Stem Cell Expression Markers

7:09

Flow Cytometric Detection of Adipose‐Derived Stem Cell Expression Markers

9:28

Adipose‐Derived Stem Cell Differentiation to the Adipogenic Lineage

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