Nosso objetivo é induzir uma lesão alcalina precisa e localizada na córnea e região límbica em um modelo murino. Desenvolvemos um novo método punch-trephine e, em seguida, estudamos como este método é eficaz na criação de uma deficiência de células-tronco da córnea e do limbo. Técnicas avançadas no campo do tratamento da opacidade corneana e regeneração corneana, incluindo transplante de células-tronco do limbo, transplante de exossomos e transplante de mitocôndrias, são baseadas em estudos que investigaram as respostas da córnea a várias lesões, bem como tratamentos.
Portanto, é fundamental ter um modelo de lesão padrão, preciso e confiável entre os pesquisadores. Diversas técnicas e modelos animais têm sido empregados para induzir diversas lesões corneanas e investigar vários aspectos do processo de cicatrização da córnea. O modelo de queimadura alcalina é um modelo de lesão bem estabelecido, que é realizado pela aplicação de hidróxido de sódio diretamente na superfície da córnea ou pelo uso de papel de filtro plano.
Desenvolvemos um novo método punch-trephine para criar um modelo de camundongo de deficiência de células-tronco do limbo de forma precisa e confiável, superar as limitações de técnicas anteriores e minimizar o risco de lesão insuficiente na área do limbo ou lesão adicional no fórnix e conjuntiva. Esta técnica tem várias vantagens. Lesão química efetiva em toda a superfície corneana e limbo em camundongos, lesão localizada e bem circunscrita na córnea, aplicação de qualquer líquido por uma duração pré-determinada, indução de vários tamanhos de lesão corneana com perfurações de biópsia adequadas.
Também é viável para modelos de lesões em ratos e coelhos.