Somos gratos pela ajuda de Dr. Xinyu Li na preparação do manuscrito. SW foi suportado por um fundo de Startup da Universidade de Tulane, do Conselho de Pesquisa New Award do Presidente Investigador da UT Southwestern Medical Center, NIH Grant EY021862, um prêmio de desenvolvimento de carreira a partir da pesquisa para prevenir a cegueira fundação, e um prêmio brilhante Foco na Idade Degeneração Macular Relacionada à Pesquisa .

Nota: O seguinte protocolo e os resultados representativos utilizar o inibidor HDAC SAHA como um composto de exemplo. No entanto, este protocolo é de modo algum limitado ao uso de SAHA, e é recomendada como um método geral para testar os efeitos de compostos solúveis em neovascularização córnea. Pequenas modificações terão de ser feitas para o grau de diluição, assim como a frequência e duração da aplicação. Além disso, os compostos que são facilmente solúveis em água poderá ser administrada na ausência de DMSO. Declaração de ética: Todos os experimentos com animais só deve ser realizado em conformidade com a legislação nacional e os regulamentos institucionais. Este protocolo foi aprovado para uso pela Universidade de Tulane Institutional Animal Care e do Comitê Use. 1. Elaboração de Materiais (em ordem de utilização) <ol><li> Cortar um pedaço de papel de filtro de celulose (11 mm) em 2 milímetros círculos. </li><li> Prepara-se uma solução 1 M de NaOH pordissolvendo 20 g de NaOH em ​​500 ml de água destilada H 2 O. Armazenar à temperatura ambiente. CUIDADO: soluções de NaOH são corrosivos e podem causar alcalinos-queimaduras. </li><li> Preparar um cocktail anestésico por diluição de 10 ml de 100 mg / ml de cetamina e 2,5 ml de 20 mg / ml de xilazina em 37,5 ml de 1x PBS para uma concentração final de 20 mg / ml de cetamina e 4 mg / ml de xilazina. </li><li> Prepara-se uma solução de 0,5% de cloridrato de proparacaína (para analgesia tópica) por dissolução de 500 mg de cloridrato de proparacaína, em 100 ml de PBS filtrado. </li><li> Prepare 1x PBS por dissolução de 8 g de NaCl, 0,2 g de KCl, 1,44 g de Na 2 HPO 4, e 0,23 g de NaH 2 PO 4, em 900 ml de H2O destilada Ajustar o pH para 7,4. Levar a solução para um volume final de 1000 ml com H2O destilada e filtro para garantir a esterilidade. </li><li> Preparar 1000 x soluções de estoque de SAHA em ~ 100 mM em dimetil-sulfóxido (DMSO) por dissolução de 26,4 mg de SAHA em 1 ml de DMSO. Dilui-se a um 1x (~ 10 mM)solução filtrada em PBS por cada utilização. Armazene a solução de reserva, a -20 ° C durante até um mês. CUIDADO: DMSO é uma toxina conhecida e mutagênico. </li><li> Prepara-se uma solução de 4% de paraformaldeído (PFA) para fixação. Dentro de uma câmara química, dissolver 4 g de PFA em 90 ml de PBS. Levar a mistura até 65 ° C e a titulação para um pH de 7,4. Uma vez que o PFA tem dissolvido, levar a solução a um volume final de 100 ml. Armazenar a 4 ° C por até um mês. CUIDADO: PFA é um conhecido por ser alergênico, cancerígeno e tóxico. </li><li> Preparar tampão de bloqueio por diluição 1x 5 ml de soro de cabra e de 500 ul de Triton X-100 em 94,5 ml de PBS. </li><li> Preparar tampão de lavagem 1x diluindo 500 ul de Triton X-100 em 99,5 ml de PBS. </li></ol> 2. Alkali-Burn Tratamento de Lesões e Composto <ol><li> Molhe um pedaço redondo de papel de filtro, ~ 2 mm de diâmetro, em uma solução de NaOH 1 M. </li><li> Anestesiar o rato com uma injeção de 100 mg / kg de ketamina e 5 mg / kg de xilazina, which é ~ 100 l do cocktail anestésico do passo de 1,3 por 25 g mouse. A anestesia deve tomar ~ 1-2 min para definir polegadas de profundidade da anestesia pode ser determinado comprimindo suavemente o dedo do pé ou da cauda do animal, se a anestesia for suficiente deve haver nenhuma resposta. Nota: Cuidados devem ser tomados para garantir o mouse não sucumbir à hipotermia induzida anestesia. </li><li> A utilização de um conta-gotas, aplicar topicamente uma gota de cloridrato de proparacaína a 0,5% sobre a superfície da córnea para analgesia local. </li><li> Utilizando uma pinça estéril, pegar um pedaço de papel de filtro embebido NaOH. Se você notar excesso de NaOH ou agarrando-se a pingar do papel de filtro, toque brevemente o papel de filtro embebido em um pedaço de papel de filtro seco para absorver o excesso. Coloque o pedaço de papel de filtro embebido NAOH na córnea central. Deixá-lo por 30 segundos para gerar um álcali-queimadura aguda de ~ 2 x 2 mm 2 de área. Um microscópio cirúrgico é útil para colocar adequadamente o papel de filtro. Nota: Apenas um olho do rato should ser feridos com o outro serve como um controlo. </li><li> Remover o papel de filtro. Usando uma seringa de 10 ml, lavar cuidadosamente o olho com 10 ml de PBS 1x duas vezes para lavar o resíduo de NaOH 1 M. </li><li> Imediatamente aplicar uma gota de solução de trabalho de 1 x SAHA (ou um controlo de veículo que consiste em PBS diluídas contendo DMSO sem SAHA) topicamente para a córnea. Repita 3x/dia pedido de 14 dias. Nota: durante este período uma pomada antibiótica tópica não é recomendado, pois pode interferir com o desenvolvimento da lesão e da entrega do composto. Usar uma solução de antibiótico líquido, solução de gentamicina, tal como 3%, em vez disso. </li><li> Vá diretamente para Avaliação Clínica (Protocolo 3 abaixo) ou sacrificar o mouse e enuclear os olhos por córnea plana de montagem (Protocolo 4 abaixo) ou parafina / histologia congelado convencional. </li></ol> 3. Avaliação Clínica <ol><li> Executar um exame diário dos ratinhos de forma cega sob o microscópio cirúrgico e marcar corneal NV baseado na opacidade da córnea, NV, e tamanho do vaso. Use pelo menos dois observadores e gravar um escore final que é a média dos dois. <ol><li> Pontuação opacidade da córnea em uma escala de 0-4. 0 = completamente claras; 1 = um pouco obscuro, íris ea pupila facilmente visível; 2 = ligeiramente opacos, íris ea pupila ainda detectável; 3 = opacos, alunos dificilmente detectáveis; e 4 = totalmente opacos, sem vista do aluno. </li><li> Pontuação NV numa escala de 0-3. 0 = sem neovasos; 1 = neovasos no limbo da córnea; 2 = neovasos que medem o limbo da córnea e se aproximando do centro da córnea; 3 = neovasos abrangendo o centro da córnea. </li><li> Pontuação tamanho do vaso em uma escala de 0-3. 0 = sem neovasos; 1 = neovasos detectáveis ​​ao microscópio cirúrgico; 2 = neovasos facilmente vistos ao microscópio cirúrgico; 3 = neovasos facilmente visto sem o microscópio. </li></ol></li><li> Usando uma câmera digital, tirar fotos representativas do olho em 7 dias e 14 dias. </li></ol> 4.Corneal Coloração e planas Mounts <ol><li> Fix olho enucleado em PFA a 4% durante pelo menos 1 hora a 4 ° C. </li><li> Transfira o olho para 1x PBS e utilize uma pinça para remover cuidadosamente o excesso de tecido. </li><li> Com o auxílio de um microscópio cirúrgico, usar uma agulha (18 gauge) ou micro-faca para perfurar a região pericorneal do olho (Atenção: este deve liberar líquido do olho). <ol><li> A partir da perfuração feita na secção 4.3.1 usar um par de tesouras cirúrgicas para cortar a porção anterior do olho (córnea) a partir da porção posterior. </li></ol></li><li> Transferir a córnea para trás em PFA a 4% para a fixação durante a noite a 4 ° C. </li><li> Descarte a 4% PFA (ATENÇÃO: PFA é perigoso e deve ser eliminado de acordo com as normas institucionais) e enxaguar a córnea três vezes com PBS 1x de remover qualquer PFA residual. </li><li> Incubar em 1x tampão de bloqueio durante, pelo menos, 2 horas à temperatura ambiente, para permeabilizar o tecido e impedir a ligação inespecífica do anticorpo primário. <ol><li> Aplicar o anticorpo primário em tampão de bloqueio 1x, a uma diluição de dobragem 100-500. (Por exemplo, rato anti-mouse-PECAM-1 para a detecção de vasos sanguíneos a 1:100, coelho anti-rato-lyve-1 para a detecção de vasos linfáticos em 1:500, e / ou anti-mouse-F4/80 rato para a detecção de macrófagos a 1:100). Incubar a 4 ° C durante a noite. </li><li> Lavar seis vezes com 1x tampão de lavagem durante 1 hora de cada vez, à temperatura ambiente para remover totalmente o anticorpo primário não ligado. </li><li> Aplicar um anticorpo secundário em 1x tampão de bloqueamento, a uma diluição de dobragem 500-1.000. (Por exemplo, uma lâmpada fluorescente de 488 nm com etiquetas de cabra anti-rato-IgG em 1:800 ou fluorescente 594 nm com etiquetas de cabra anti-coelho-IgG de 1:800). Incubar a 4 ° C durante a noite. </li><li> Lavar três vezes com 1x PBS, durante 1 h cada, à temperatura ambiente para remover completamente o anticorpo secundário não ligado. </li></ol></li><li> Transferir a córnea em fresco 1x PBS e, com o auxílio de um microscópio cirúrgico, cuidadosamente fazer quatro incisões da periferia para o center. Isso deve dividir a córnea em quatro quadrantes de tamanho aproximadamente igual (a forma resultante deve ser um pouco como uma borboleta) e deixe-o deitado em um slide. </li><li> Monte com um apropriado meio de montagem para a imagem latente fluorescente. Para melhores resultados, as amostras devem ser fotografada imediatamente e fotografias digitais feita, mas pode ser conservada durante várias semanas, ao abrigo da luz a 4 ° C. </li></ol>

<ol>
	<li>Pascolini, D., Mariotti, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Global+estimates+of+visual+impairment.">Global estimates of visual impairment.</a> Br. J. Ophthalmol. 96 (5), 614-618 (2010).</li><li>Whitcher, J., Srinivasan, M., Upadhyay, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+Blindness:+A+Global+Perspective.">Corneal Blindness: A Global Perspective.</a> Bull. World Health Org. 79 (3), 214-221 (2003).</li><li>Gupta, D., Illingworth, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Treatments+for+corneal+neovascularization:+a+review.">Treatments for corneal neovascularization: a review.</a> Cornea. 30 (8), 927-938 (2011).</li><li>Cursiefen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Consensus+statement+on+indications+for+anti-angiogenic+therapy+in+the+management+of+corneal+diseases+associated+with+neovascularisation:+outcome+of+an+expert+roundtable.">Consensus statement on indications for anti-angiogenic therapy in the management of corneal diseases associated with neovascularisation: outcome of an expert roundtable.</a> Br. J. Ophthalmol. 96 (1), 3-9 (2012).</li><li>Delmonte, D., Kim, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anatomy+and+Physiology+of+the+Cornea.">Anatomy and Physiology of the Cornea.</a> J. Cataract Refract. Surg. 37 (3), 588-598 (2011).</li><li>Cursiefen, C., Seitz, B., Dana, M. R., Streilein, J. W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Angiogenesis+and+lymphangiogenesis+in+the+cornea.+Pathogenesis,+clinical+implications+and+treatment+options.">Angiogenesis and lymphangiogenesis in the cornea. Pathogenesis, clinical implications and treatment options.</a> Der Ophthalmologe. 100 (4), 292-229 (2003).</li><li>Chang, J., Gabison, E., Kato, T., Azar, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+Neovascularization.">Corneal Neovascularization.</a> Curr. Opin Ophthalmol. 12 (4), 242-249 (2001).</li><li>Ambati, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Corneal+Avascularity+is+due+to+Soluble+VEGF+Receptor-1.">Corneal Avascularity is due to Soluble VEGF Receptor-1.</a> Nature. 443 (7114), 993-997 (2006).</li><li>Cursiefen, C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=VEGF-A+Stimulates+Lymphangiogenesis+and+Hemangiogenesis+in+Inflammatory+Neovascularization+via+Macrophage+Recruitment.">VEGF-A Stimulates Lymphangiogenesis and Hemangiogenesis in Inflammatory Neovascularization via Macrophage Recruitment.</a> J. Clin. Invest. 113 (7), 1040-1050 (2004).</li><li>Jiri, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Paper+Strips+and+Rings+as+Simple+Tools+for+Standardization+of+Experimental+Eye+Injuries.">Paper Strips and Rings as Simple Tools for Standardization of Experimental Eye Injuries.</a> Ophthal. Res. 1975 (7), 363-367 (2009).</li><li>Ormerod, L., Abelson, M., Kenyon, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Standard+Models+of+Corneal+Injury+Using+Alkali-Immersed+Filter+Discs+Invest.">Standard Models of Corneal Injury Using Alkali-Immersed Filter Discs Invest.</a> Ophthalmol. Vis. Sci. 30 (10), 2148-2153 (1989).</li><li>Saika, S., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Therapeutic+effects+of+adenoviral+gene+transfer+of+bone+morphogenic+protein-7+on+a+corneal+alkali+injury+model+in+mice.">Therapeutic effects of adenoviral gene transfer of bone morphogenic protein-7 on a corneal alkali injury model in mice.</a> Lab. Invest. 85 (4), 474-486 (2005).</li><li>Ferrari, G., Bignami, F., Giacomini, C., Franchini, S., Rama, P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety+and+efficacy+of+topical+infliximab+in+a+mouse+model+of+ocular+surface+scarring.">Safety and efficacy of topical infliximab in a mouse model of ocular surface scarring.</a> Invest. Ophthalmol. Vis. Sci. 54 (3), 1680-1688 (2013).</li><li>Sosne, G., Christopherson, P., Barrett, R., Fridman, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Thymosin-beta4+modulates+corneal+matrix+metalloproteinase+levels+and+polymorphonuclear+cell+infiltration+after+alkali+injury.Invest.">Thymosin-beta4 modulates corneal matrix metalloproteinase levels and polymorphonuclear cell infiltration after alkali injury.Invest.</a> Ophthalmol. Vis. Sci. 46 (7), 2388-2395 (2005).</li><li>Li, X., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Inhibition+of+Multiple+Pathogenic+Pathways+by+Histone+Deacetylase+Inhibitor+SAHA+in+a+Corneal+Alkali-Burn+Injury+Model.">Inhibition of Multiple Pathogenic Pathways by Histone Deacetylase Inhibitor SAHA in a Corneal Alkali-Burn Injury Model.</a> Mol. Pharm. 10 (1), 307-318 (2013).</li><li>Yoeruek, E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Safety,+penetration+and+efficacy+of+topically+applied+bevacizumab:+evaluation+of+eyedrops+in+corneal+neovascularization+after+chemical+burn.">Safety, penetration and efficacy of topically applied bevacizumab: evaluation of eyedrops in corneal neovascularization after chemical burn.</a> Acta Ophthalmol. 86 (3), 322-328 (2008).</li><li>Bucher, F., Parthasarathy, A., Bergua, A., Onderka, J., Regenfu&#223;, B., Cursiefen, C., Bock, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Topical+Ranibizumab+inhibits+inflammatory+corneal+hem-+and+lymphangiogenesis.">Topical Ranibizumab inhibits inflammatory corneal hem- and lymphangiogenesis.</a> Acta Ophthalmol. , (2012).</li><li>Hajrasouliha, A., Sadrai, Z., Chauhan, S., Dana, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=b-FGF+induces+corneal+blood+and+lymphatic+vessel+growth+in+a+spatially+distinct+pattern.">b-FGF induces corneal blood and lymphatic vessel growth in a spatially distinct pattern.</a> Cornea. 31 (7), 804-809 (2012).</li><li>Rogers, M., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+albino+mutation+of+tyrosinase+alters+ocular+angiogenic+responsiveness.">The albino mutation of tyrosinase alters ocular angiogenic responsiveness.</a> Angiogenesis. 16 (3), 639-646 (2013).</li><li>Connor, K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Quantification+of+oxygen-induced+retinopathy+in+the+mouse:+a+model+of+vessel+loss,+vessel+regrowth+and+pathological.">Quantification of oxygen-induced retinopathy in the mouse: a model of vessel loss, vessel regrowth and pathological.</a> Nat. Protoc. 4 (11), 1565-1573 (2009).</li></ol>

Os autores não têm nada a revelar.

O protocolo aqui apresentado resulta em níveis reprodutíveis de hemangiogenesis, lymphangiogenesis e inflamação, tornando-se um sistema ideal para estudar estes três processos (inter-relacionadas). Enquanto este método produz NV córnea centralizado, vários métodos que foram desenvolvidos para causar mais direcionado NV, ou seja, a sutura da córnea 17 e implantados do fator de crescimento expressando pelotas 18, também pode ser do seu interesse. Nosso protocolo é projetado para uso no ra...

Cegueira da córnea é a quarta causa mais comum de cegueira, responsável por cerca de 4% de todos os casos de 1. Neovascularização da córnea (NV) desempenha um papel importante em muitas destas patologias, incluindo a ceratite herpética (a principal causa infecciosa de cegueira no Ocidente) e tracoma (a principal causa de cegueira no mundo inteiro infeccioso) 2. As terapias atuais incluem esteróides, medicamentos anti-inflamatórios não-esteróides (AINE), terapias anti-VEGF e ciclosporina A, bem como as técnicas cirúrgicas convencionais ou a laser 3. No entanto, a natureza altamente debilitante de patologias NV base da córnea, a escassez de instalações cirúrgicas capazes de tratar NV córnea, ea falta de uma opção farmacológica fortemente a realização de uma mesa redonda liderada especialista recente a concluir que, apesar das terapias existentes, a necessidade médica fundamentais apresentado por estas patologias permanece insatisfeita 4. A córnea humanaé composto por 5 camadas, 3 camadas celulares (epitelial, estroma e endotélio) e 2 de interface (membrana de Bowman e membrana Descemet). Ela funciona como uma barreira mecânica e a superfície de refracção para o olho. A sua natureza transparente é a conseqüência de um delicado equilíbrio de seus componentes, e é parte integrante da sua função própria 5. Normalmente avascular, a córnea recebe sangue microvasos que correm ao longo do seu bordo exterior, que são alimentados a partir da ciliar e artérias oftálmicas. Corneal NV ocorre quando um estimulo promove a angiogénese dos vasos, permitindo-lhes crescer em direcção ao centro da córnea e assim limitar a visão 6. Angiogênese corneana inclui hemangiogenesis e lymphangiogenesis, o que resultará no crescimento interno dos vasos sanguíneos e vasos linfáticos da arcada vascular do limbo em direção ao centro da córnea. Isto leva a uma quebra de córnea &quot;privilégio angiogênico&quot;, um aumento na opacidade da córnea e fibrose, rompimento da córnea laYERS, edema e 7. Os gatilhos precisas de NV córnea são inúmeras, que vão desde uma resposta a doenças infecciosas, como o tracoma a um estado induzido quimicamente causado medicamentos tradicionais, produtos químicos industriais, ou até mesmo agentes de guerra química. Os mecanismos moleculares deste processo não são, ainda, totalmente caracterizado; no entanto, alguns jogadores-chave foram identificados. Sob condições normais, a córnea possui um único &#39;privilégio angiogénico &quot;mantida por um conjunto redundante de factores anti-angiogénicos (tais como solúveis de VEGF-R1) 8. No entanto, em resposta a um estímulo externo (por exemplo, uma lesão), não haverá uma regulação positiva locais de factores pró-angiogénicos (por exemplo, VEGF-D). Este dicas o equilíbrio de fatores pró e anti-angiogênicos que subjaz privilégio angiogênico da córnea, e leva a hemangiogenesis, lymphangeogenesis e inflamação, portanto, causando patologia da córnea e até cegueira 9. &lt;p class = &quot;jove_content&quot;&gt; Dada a necessidade médica não atendida desta patologia altamente debilitante, é de interesse para o campo para ter um modelo animal confiável de NV córnea. Aqui apresentamos um modelo desse tipo: controlado lesão álcali-queimadura. Vários modelos olho-lesão com base em uso de anéis de papel de filtro são usados ​​desde 1970 10. Em 1989, um grupo de oftalmologistas Harvard Medical School caracterizado um modelo padrão de lesão da córnea alcalino-queimadura central em coelhos com base no embebendo um pedaço de papel de filtro circular com hidróxido de sódio (NaOH) e aplicando-a à córnea a uma gama específica de concentrações 11. Desde então esta técnica tem sido adaptada para uso no rato 12-14. Recentemente, o laboratório de Wang estudou os efeitos terapêuticos da histona deacetilase (HDAC) SAHA na patogênese da NV córnea utilizando um modelo de lesão da córnea alcalino-burn rato 15. A metodologia do modelo de lesão da córnea do rato alcalino-burn aqui apresentado foi construídoprincipalmente no trabalho prévio de dois outros jornais 14,16.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="598">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">1 mL Syringe</td>
			<td style="width:96px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:119px;">309659</td>
			<td style="width:167px;"></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">18 Guage Needle</td>
			<td style="width:96px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:119px;">305918</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">10 mL Syringe</td>
			<td style="width:96px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:119px;">306575</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">25 Guage Needle</td>
			<td style="width:96px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:119px;">305916</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Anti-F4/80 (rat anti-mouse)</td>
			<td style="width:96px;">AbD Serotech</td>
			<td>MCA497RT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Anti-LYVE-1 (rabbit anti-mouse)</td>
			<td style="width:96px;">Abcam</td>
			<td style="width:119px;">ab14917</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Anti-PECAM-1 (rat anti-mouse)</td>
			<td style="width:96px;">BD</td>
			<td align="right" style="width:119px;">553370</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Anti-IgG Alexa488 (goat anti-rat)</td>
			<td style="width:96px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">A11006</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Anti-IgG Alexa594 (goat anti-rabbit)</td>
			<td style="width:96px;">Invitrogen</td>
			<td style="width:119px;">A11012</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Camera</td>
			<td style="width:96px;">Tucsen</td>
			<td style="width:119px;">TCC 5.0 ICE</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Coverslips</td>
			<td style="width:96px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">12-548-B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">DMSO</td>
			<td style="width:96px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">D4540-1L</td>
			<td>Caution: Mutagenic, Toxic</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Forceps (Blunt), Iris</td>
			<td style="width:96px;">WPI</td>
			<td align="right" style="width:119px;">15915</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Forceps (Sharp), Dumont #4</td>
			<td style="width:96px;">WPI</td>
			<td align="right" style="width:119px;">500340</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">KCl</td>
			<td style="width:96px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">P217-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Ketamine Solution</td>
			<td style="width:96px;">MedVet</td>
			<td>RXKETAMINE</td>
			<td>Controlled substance, proper license required for use.</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Light Source for Microscope</td>
			<td style="width:96px;">AmScope</td>
			<td style="width:119px;">LED-14M-YA</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Microscope (Stereo 7X-45X)</td>
			<td style="width:96px;">AmScope</td>
			<td style="width:119px;">SM-1B</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Mounting Medium, Vectashield</td>
			<td style="width:96px;">Vector</td>
			<td style="width:119px;">H-1000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaCl</td>
			<td style="width:96px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">S271-10</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="25">
			<td height="25" style="height:25px;">NaH2PO4</td>
			<td style="width:96px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">S397-500</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">NaOH</td>
			<td style="width:96px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">S318-1</td>
			<td>Caution: Corrosive</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Paraformaldehyde</td>
			<td style="width:96px;"></td>
			<td style="width:119px;">P6148-500G</td>
			<td>Caution: Allergenic, Carcenogenic, Toxic</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Proparacaine Hydrochloride</td>
			<td style="width:96px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">P4554-1G</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Scissors (5mm blade), Vanas</td>
			<td style="width:96px;">WPI</td>
			<td align="right" style="width:119px;">14003</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Goat Serum</td>
			<td style="width:96px;">MPBio</td>
			<td align="right" style="width:119px;">92939249</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Microscope Slides</td>
			<td style="width:96px;">Fisher</td>
			<td style="width:119px;">12-550-15</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Triton X-100</td>
			<td style="width:96px;">Sigma</td>
			<td style="width:119px;">T8787-100ML</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Whatman Grade 1 Filter Paper</td>
			<td style="width:96px;">Whatman</td>
			<td style="width:119px;">1001-6508</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Xylazine Solution</td>
			<td style="width:96px;">MedVet</td>
			<td style="width:119px;">RXANASED-20</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

an alkali-burn injury model of corneal neovascularization in the mouse

Sob condições normais, a córnea é avascular, e esta transparência é essencial para manter uma boa acuidade visual. Neovascularização (NV) da córnea, o que pode ser causado por trauma, ceratoplastia ou doença infecciosa, decompõe o chamado &#39;privilégio angiogénico&#39; da córnea e forma a base de várias patologias visuais que podem mesmo conduzir à cegueira. Embora existam várias opções de tratamento disponíveis, a necessidade médica fundamentais apresentados por patologias neovascular córnea permanece inacabado. A fim de desenvolver terapias seguras, eficazes e direcionados, é necessário um modelo confiável de NV córnea e intervenção farmacológica. Aqui, descrevemos um modelo de neovascularização corneana lesão álcali-queimadura no mouse. Este protocolo fornece um método para a aplicação de uma lesão alcalino-queima controlada para a córnea, a administração de um composto farmacológico de interesse, e a visualização do resultado. Este método poderia ser instrumentaltal para o estudo dos mecanismos e oportunidades de intervenção em NV córnea e outros distúrbios neovascular.

Após lesão alcalino-queimadura, NV córnea ocorre em, dependente do tempo de forma previsível. Figura 1 demonstra a diferença gritante tanto na neovascularização e opacidade da córnea entre um animal não tratado (Figura 1A) e de um animal tratado com o inibidor de HDAC SAHA (Figura 1B ) no ponto de tempo de 7 dias. As Figuras 2A e 2B mostram uma montagem plana da córnea de um olho de controlo não t...

Watch this Scientific Journal Video about An Alkali-burn Injury Model of Corneal Neovascularization in the Mouse at JoVE.com

An Alkali-burn Injury Model of Corneal Neovascularization in the Mouse

A neovascularização (NV) da córnea pode complicar múltiplas patologias visuais. Utilizando um modelo controlado lesão alcalino-queima, um nível quantificável da NV córnea pode ser produzido para o estudo mecanicista da NV córnea e avaliação de potenciais terapias para doenças neovascular.

Um ferimento Modelo Alkali queima de córnea neovascularização no Rato

Under normal conditions, the cornea is avascular, and this transparency is essential for maintaining good visual acuity. Neovascularization (NV) of the ...

an-alkali-burn-injury-model-of-corneal-neovascularization-in-the-mouse

Research

JoVE Journal

Medicine

16.4K visualizações.  Tulane University.  A neovascularização (NV) da córnea pode complicar múltiplas patologias visuais. Utilizando um modelo controlado lesão alcalino-queima, um nível quantificável da NV córnea pode ser produzido para o estudo mecanicista da NV córnea e avaliação de potenciais terapias para doenças neovascular. 

Vídeo: An Alkali-burn Injury Model of Corneal Neovascularization in the Mouse

Renal Ischaemia Reperfusion Injury: A Mouse Model of Injury and Regeneration

Renal ischaemia reperfusion injury (IRI) is a common cause of acute kidney injury (AKI) in patients and occlusion of renal blood flow is unavoidable during renal transplantation. Experimental models that accurately and reproducibly recapitulate renal IRI are crucial in dissecting the pathophysiology of AKI and the development of novel therapeutic agents. Presented here is a mouse model of renal IRI that results in reproducible AKI. This is achieved by a midline laparotomy approach for the surgery with one incision allowing both a right nephrectomy that provides control tissue and clamping of the left renal pedicle to induce ischaemia of the left kidney. By careful monitoring of the clamp position and body temperature during the period of ischaemia this model achieves reproducible functional and structural injury. Mice sacrificed 24 hr&#160;following surgery demonstrate loss of renal function with elevation of the serum or plasma creatinine level as well as structural kidney damage with acute tubular necrosis evident. Renal function improves and the acute tissue injury resolves during the course of 7 days following renal IRI such that this model may be used to study renal regeneration. This model of renal IRI has been utilized to study the molecular and cellular pathophysiology of AKI as well as analysis of the subsequent renal regeneration.

The mouse model of renal ischaemia reperfusion injury described here comprises of a right nephrectomy that provides control tissue and clamping of the left renal pedicle to induce ischaemia that results in acute kidney injury. This model uses a midline laparotomy approach with all steps performed via one incision.

Renal Isquemia Reperfusão: um modelo do rato de lesão e regeneração

Renal ischaemia reperfusion injury (IRI) is a common cause of acute kidney injury (AKI) in patients and occlusion of renal blood flow is unavoidable ...

Medicina

A Neonatal Mouse Spinal Cord Compression Injury Model

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal cord. A major current area of research is focused on the mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous or induced functional recovery following SCI. Spontaneous functional recovery is reported to be greater early in life, raising interesting questions about how adaptive plasticity changes as the spinal cord develops. To facilitate investigation of this dynamic, we have developed a SCI model in the neonatal mouse. The model has relevance for pediatric SCI, which is too little studied. Because neural plasticity in the adult involves some of the same mechanisms as neural plasticity in early life1, this model may potentially have some relevance also for adult SCI. Here we describe the entire procedure for generating a reproducible spinal cord compression (SCC) injury in the neonatal mouse as early as postnatal (P) day 1. SCC is achieved by performing a laminectomy at a given spinal level (here described at thoracic levels 9-11) and then using a modified Yasargil aneurysm mini-clip to rapidly compress and decompress the spinal cord. As previously described, the injured neonatal mice can be tested for behavioral deficits or sacrificed for ex vivo physiological analysis of synaptic connectivity using electrophysiological and high-throughput optical recording techniques1. Earlier and ongoing studies using behavioral and physiological assessment have demonstrated a dramatic, acute impairment of hindlimb motility followed by a complete functional recovery within 2 weeks, and the first evidence of changes in functional circuitry at the level of identified descending synaptic connections1.

This article describes a method for generating a reproducible spinal cord compression injury (SCI) in the neonatal mouse. The model provides an advantageous platform for studying mechanisms of adaptive plasticity that underlie spontaneous functional recovery.

A Neonatal do rato Spinal Cord Injury Compression Modelo

Spinal cord injury (SCI) typically causes devastating neurological deficits, particularly through damage to fibers descending from the brain to the spinal ...

A Mouse Model for Laser-induced Choroidal Neovascularization

The mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) model has been a crucial mainstay model for neovascular age-related macular degeneration (AMD) research. By administering targeted laser injury to the RPE and Bruch&#8217;s membrane, the procedure induces angiogenesis, modeling the hallmark pathology observed in neovascular AMD. 
First developed in non-human primates, the laser-induced CNV model has come to be implemented into many other species, the most recent of which being the mouse. Mouse experiments are advantageously more cost-effective, experiments can be executed on a much faster timeline, and they allow the use of various transgenic models. The miniature size of the mouse eye, however, poses a particular challenge when performing the procedure. Manipulation of the eye to visualize the retina requires practice of fine dexterity skills as well as simultaneous hand-eye-foot coordination to operate the laser. However, once mastered, the model can be applied to study many aspects of neovascular AMD such as molecular mechanisms, the effect of genetic manipulations, and drug treatment effects. 
The laser-induced CNV model, though useful, is not a perfect model of the disease. The wild-type mouse eye is otherwise healthy, and the chorio-retinal environment does not mimic the pathologic changes in human AMD. Furthermore, injury-induced angiogenesis does not reflect the same pathways as angiogenesis occurring in an age-related and chronic disease state as in AMD.
Despite its shortcomings, the laser-induced CNV model is one of the best methods currently available to study the debilitating pathology of neovascular AMD. Its implementation has led to a deeper understanding of the pathogenesis of AMD, as well as contributing to the development of many of the AMD therapies currently available.

Here, we present the mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) protocol, an experimental model that re-creates the vascular hallmarks of neovascular age-related macular degeneration (AMD). Once mastered, it can reliably and effectively induce CNV as a model system to test various experimental measures.

Um modelo de rato para induzida por laser coróide Neovascularização

The mouse laser-induced choroidal neovascularization (CNV) model has been a crucial mainstay model for neovascular age-related macular degeneration (AMD) ...

A Mouse Model of Single and Repetitive Mild Traumatic Brain Injury

Mild Traumatic Brain Injury (mTBI) can result in the acute loss of brain function, including a period of confusion, a loss of consciousness (LOC), focal neurological deficits and even amnesia. Athletes participating in contact sports are at high risk of exposure to large number of mTBIs. In terms of the level of injury in a sporting athlete, a mTBI is defined as a mild injury that does not cause gross pathological changes, but does cause short-term neurological deficits that are spontaneously resolved. Despite previous attempts to model mTBI in mice and rats, many have reported gross adverse effects including skull fractures, intracerebral bleeding, axonal injury and neuronal cell death. Herein, we describe our highly reproducible animal model of mTBI that reproduces clinically relevant symptoms. This model uses a custom made pneumatic impactor device to deliver a closed-head trauma. This impact is made under precise velocity and deformation parameters, creating a reliable and reproducible model to examine the mechanisms that contribute to effects of single or repetitive concussive mTBI.

Athletes absorb several hundred mild traumatic brain injuries (mTBI)/concussions every year; however, the consequence of these on the brain is poorly understood. Therefore, an animal model of single and repetitive mTBI that consistently replicates clinically relevant symptoms provides the means to advance the study of mTBI and concussion.

Um modelo de mouse de lesões cerebrais traumáticas leves simples e repetitivas

Mild Traumatic Brain Injury (mTBI) can result in the acute loss of brain function, including a period of confusion, a loss of consciousness (LOC), focal ...

Puncture-Induced Iris Neovascularization as a Mouse Model of Rubeosis Iridis

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant for targeting neovascular glaucoma, a sight-threatening complication of diabetic retinopathy. This method is based on the induction of iris vascular response by a series of self-sealing uveal punctures on BALB/c mice and takes advantage of the postpartum maturation of mouse ocular vasculature. Mouse pups undergo uveal punctures from postnatal day 12.5, when the pups naturally open their eyes, until postnatal day 24.5. Due to the transparency of the cornea, iris vasculature can be analyzed easily through time by noninvasive in vivo methods. Furthermore, the semitransparent iris of BALB/c mice can be flatmounted for detailed immunohistologic analysis with minimal non-specific background staining. In this model, angiogenesis is mainly driven by the inflammatory and plasminogen activating systems. The puncture-induced model is the first to induce iris neovascularization in small rodents, and has the advantage of allowing direct noninvasive in vivo analysis of the angiogenic process. Moreover, the model can be combined with angiogenic modulating substances, which highlights its potential in the study of angiogenesis with an in vivo perspective.

Iris neovascularization, a common complication of ischemic retinal disease, may lead to sight-threatening neovascular glaucoma. Here, we describe a murine protocol for inducing experimental iris neovascularization that may be used for noninvasive evaluation of angiogenesis-modulating substances.

Induzida por punção neovascularização de Iris como um modelo do rato da Rubeosis Iridis

We describe a model of puncture-induced iris neovascularization as a general model for noninvasive evaluation of angiogenesis. The model is also relevant ...

Isometric Contractility Measurement of the Mouse Mesenteric Artery Using Wire Myography

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and drugs. It is widely used in many studies on the physiological functions of vascular smooth muscle, the pathogenesis of vascular diseases such as hypertension, and the development of smooth muscle relaxant drugs. The mouse is a widely used model animal with a large pool of disease models and genetically modified strains. We introduced this method to measure the isometric contraction of mouse mesenteric artery in detail. A 1.4-mm segment of mouse mesenteric resistance artery was isolated and mounted on a myograph chamber by passing two steel wires through its lumen. After equilibration and normalization steps, the vessel segment was potentiated by a high-K+ solution twice prior to the contraction assay. As an example of the application of this method in drug development, we measured the relaxant effect of a novel natural substance, neoliensinine, isolated from a Chinese herb, embryos of the lotus seed (Nelumbo nucifera Gaertn.) on mouse mesenteric arteries. The vessel segments mounted on the myograph chamber were stimulated with a high-K+ solution. When the force tension reached a stable sustained phase, cumulative doses of neoliensinine were added to the chamber. We found that neoliensinine had a dose-dependent relaxant effect on smooth muscle contraction, thus suggesting that it bears potential activity against hypertension. In addition, as the vessel segment can survive at least 4 hours after mounting and maintain contractility induced by the high-K+ solution for many times, we suggest that the wire myograph system may be used for the time-consuming process of drug screening.

The wire myograph technique is used to investigate vascular smooth muscle functions and screen new drugs. We report a detailed protocol for measuring the isometric contractility of the mouse mesenteric artery and for screening new relaxants of vascular smooth muscle.

Medição de contratilidade isométrica da artéria mesentérica Mouse usando fio miografia

The wire myograph technique is used to assess the contractility of vascular smooth muscles in response to depolarization, GPCR agonists/inhibitors and ...

Corneal Epithelial Abrasion with Ocular Burr As a Model for Cornea Wound Healing

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to injury. In fact, the most common type of eye injury found in clinic is a corneal abrasion. Here, we utilize an ocular burr to induce an abrasion resulting in removal of the corneal epithelium in vivo on anesthetized mice. This method allows for targeted and reproducible epithelial disruption, leaving other areas intact. In addition, we describe the visualization of the abraded epithelium with fluorescein staining and provide concrete advice on how to visualize the abraded cornea. Then, we follow the timeline of wound healing 0, 18, and 72 h after abrasion, until the wound is re-epithelialized. The epithelial abrasion model of corneal injury is ideal for studies on epithelial cell proliferation, migration and re-epithelialization of the corneal layers. However, this method is not optimal to study stromal activation during wound healing, because the ocular burr does not penetrate to the stromal cell layers. This method is also suitable for clinical applications, for example, pre-clinical test of drug effectiveness.

This protocol describes a method to inflict an abrasion to the ocular surface of the mouse, and to follow the wound healing process thereafter. The protocol takes advantage of an ocular burr to partially remove the surface epithelium of the eye in anaesthetized mice.

Cicatrização de feridas abrasão epitelial da córnea com Burr Ocular como um modelo para córnea

The murine cornea provides an excellent model to study wound healing. The cornea is the outermost layer of the eye, and thus is the first defense to ...

A Novel Approach to Monitoring Graft Neovascularization in the Human Gingiva

Laser speckle contrast imaging (LSCI) is a novel method for measuring superficial blood perfusion over large areas. Since it is non-invasive and avoids direct contact with the measured area, it is suitable for monitoring blood flow changes during wound healing in human patients. Vestibuloplasty is periodontal surgery to the oral vestibule, aiming to restore vestibular depth with simultaneous enlargement of the keratinized gingiva. In this special clinical case, a split thickness flap was elevated at the first upper premolar and a xenogenic collagen matrix was adapted to the resulting recipient bed. LSCI was used to monitor the re- and neovascularization of the graft and the surrounding mucosa for one year. A protocol is introduced for the correct adjustment of microcirculation measurement in the oral mucosa, highlighting difficulties and possible failures.
The clinical case study presented demonstrated that &#8212; following the appropriate protocol &#8212; LSCI is a suitable and reliable method for following up microcirculation in a healing wound in the human oral mucosa and gives useful information on graft integration.

This study introduces a protocol for measuring microcirculation in human oral mucosa by laser speckle contrast imaging. The monitoring of wound healing after vestibuloplasty combined with a xenogenic collagen graft is presented on a clinical case.

Uma nova abordagem para o monitoramento de neovascularização de enxerto na gengiva humana

Laser speckle contrast imaging (LSCI) is a novel method for measuring superficial blood perfusion over large areas. Since it is non-invasive and avoids ...

Blood Circuit Reconstruction in an Abdominal Mouse Heart Transplantation Model

The surgical technique of heterotopic abdominal heart transplantation in mice is a standard model for research in transplantation immunology. Here, the established technique for a modified blood circuit reconstruction in a heterotopic abdominal heart transplantation model is presented. This method uses the intrathoracic inferior vena cava (IIVC) instead of the pulmonary artery of the donor heart for the anastomosis to the inferior vena cava of the recipient. It is facilitating and improving success rates for abdominal heart transplantation in mice.

A novel technique for blood circuit reconstruction in a heterotopic abdominal mouse heart transplantation model is demonstrated.

Reconstrução do circuito sanguíneo em um modelo de transplante de coração de rato abdominal

The surgical technique of heterotopic abdominal heart transplantation in mice is a standard model for research in transplantation immunology. Here, the ...

An Effective Mouse Model of Unilateral Renal Ischemia-Reperfusion Injury

Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the leading cause of acute renal failure and is a significant contributor to delayed graft function. Animal models are the only available resources that mimic the complexities of the IRI-associated damage encountered in vivo. This paper describes an effective mouse model of unilateral renal IRI that delivers highly reproducible data. Ischemia is induced by occluding the right renal pedicle for 30 min followed by reperfusion. In addition to the surgical procedure, a sequential overview of the expected physiological and histopathological changes following renal IRI will be provided by comparing data from seven different reperfusion times (4 h, 8 h, 16 h, 1 day, 2 days, 4 days, and 7 days). Critical data for planning experiments ahead, such as mean surgical time, average anesthetic consumption, and body weight changes over time, will be shared. This work will help researchers implement a reliable renal IRI model and select the appropriate reperfusion time that aligns with their intended investigative goals.

Renal ischemia-reperfusion injury is associated with high morbidity and mortality in hospitalized patients. Here, we present a simple and effective mouse model of unilateral renal ischemia-reperfusion injury and provide a sequential overview of representative pathological changes observed in the kidney.

Um modelo eficaz de rato de isquemia renal unilateral-reperfusão lesão

Ischemia-reperfusion injury (IRI) is the leading cause of acute renal failure and is a significant contributor to delayed graft function. Animal models ...