Análise Qualitativa e Quantitativa da Produção de Siróforos de Pseudomonas aeruginosa

Os sideróforos formam complexos com ferro e o transportam para dentro da célula durante condições limitantes de ferro. Os sideróforos são potentes fatores de virulência que ajudam no estabelecimento de infecção grave no hospedeiro e são conhecidos por desempenhar um papel na regulação do quorum sensing em Pseudomonas aeruginosa. Nosso trabalho tem como objetivo estimar quantitativamente a produção de sideróforos em Pseudomonas.

Os sideróforos são moléculas extracelulares, de modo que sideróforos totais, juntamente com pioverdina e pioquelina são quantificados usando sobrenadante livre de células. Como a pioquelina não é detectada em pequeno volume, a extração é realizada a partir de um grande volume de sobrenadante livre de células. Recentemente, LCMS e biossensores foram desenvolvidos para quantificação de pioquelina.

O LCMS é uma configuração dispendiosa para pequenos laboratórios, enquanto os biossensores são capazes de quantificar apenas piochelina. Este protocolo simples e ilustrado utiliza reagentes mínimos de laboratório e instrumentação, e permite estimar o sideróforo a partir do sobrenadante livre de células usando menos tempo.