Analisi qualitativa e quantitativa della produzione di siderofori da Pseudomonas aeruginosa

I siderofori formano complessi con il ferro e lo trasportano nella cellula durante le condizioni limitanti del ferro. I siderofori sono potenti fattori di virulenza che aiutano a stabilire una grave infezione nell'ospite e sono noti per svolgere un ruolo nella regolazione del quorum sensing in Pseudomonas aeruginosa. La nostra ricerca mira a stimare quantitativamente la produzione di siderofori in Pseudomonas.

I siderofori sono molecole extracellulari, quindi i siderofori totali, insieme alla pioverdina e alla piochelina, vengono quantificati utilizzando il surnatante privo di cellule. Poiché la piochelina non viene rilevata in piccoli volumi, l'estrazione viene eseguita da un grande volume di surnatante privo di cellule. Recentemente, LCMS e biosensori sono stati sviluppati per la quantificazione della piochelina.

L'LCMS è una configurazione costosa per i piccoli laboratori, mentre i biosensori sono in grado di quantificare solo la piochelina. Questo protocollo semplice e illustrato utilizza una quantità minima di reagenti e strumentazione di laboratorio e consente la stima del sideroforo da surnatante privo di cellule utilizzando meno tempo.