Visualizando Proteínas de Baixa Abundância e Modificações Pós-Traducionais em Embriões Vivos de Drosophila Via Injeção de Anticorpos Fluorescentes

Nosso objetivo é entender como sinais mecânicos e bioquímicos correlacionam a morfogênese animal, incluindo a detecção e a resposta a forças por células e moléculas. Descobriu-se que mais moléculas são mecanossensíveis, funcionando de forma diferente sob diferentes níveis de tensão. No entanto, o contexto fisiológico e a função desses eventos sensíveis à força permanecem em grande parte desconhecidos.

Devido à natureza dinâmica dos eventos sensíveis à força, nosso campo depende amplamente de imagens de fluorescência de alta velocidade e registro de lapso de tempo para capturar comportamentos moleculares e celulares. Muitas proteínas marcadas fluorescentemente não são brilhantes o suficiente para serem fotografadas, e requerem resolução espaço-temporal sem alvejamento significativo. Por outro lado, os métodos tradicionais de imunofluorescência só podem capturar um instantâneo da fixação molecular e celular após a fixação.

Este método abre caminho para rastrear dinamicamente a localização de muitos receptores de proteína de baixa abundância das principais vias de sinalização, como Notch, Wnt e as vias BMP. Eventualmente, além das tradicionais cascatas de sinalização linear, podemos identificar e onde os eventos de sinalização ocorrem nas escalas subcelulares.