O modelo de AVC de camundongo com oclusão intravascular traduz bem os tratamentos atuais de trombectomia e reperfusão, no entanto, não traduz as rotinas clínicas eficazes da unidade de AVC. Aqui neste vídeo, demonstramos nosso conceito comprovado de unidade de AVC de camundongo translacional e escala de avaliação neurológica padronizada. O primeiro método do nosso protocolo refere-se à unidade de traço do mouse.
Avalie o estado clínico do animal diariamente e calcule sua pontuação de certificação de risco somando os pontos conforme mostrado aqui. Adapte a frequência e a intensidade do apoio de acordo com o RSS e a fase pós-AVC do animal. Para suporte nutricional ativo, segure e segure o mouse suavemente, mas com firmeza, pelo do pescoço.
Estabilize sua bochecha com o dedo médio e deslize o dedo médio em direção ao nariz do mouse contra sua bochecha e mantenha a posição. Coloque a ponta da seringa entre os dentes em direção ao lado interno da bochecha. Dê aproximadamente 40 ou 50 microlitros de comida em gel de cada vez.
Retorne o camundongo suavemente para a gaiola e repita a alimentação após um a dois minutos. Em seguida, é demonstrada a componente focal da Escala Experimental de AVC. Comece com o teste um para paresia do membro anterior.
Levante o mouse suavemente da base da cauda e examine os membros anteriores. Pontuação zero para extensão anterior simétrica e mobilidade dos membros anteriores. Pontuação um para flexão leve e movimento reduzido do membro contralesional.
Pontuação dois para flexão leve do membro contralesional. Pontuação três para aderência do membro contralesional ao tronco e pontuação quatro para membro plégico sem movimento do membro ou do corpo. Agora avalie a paresia dos membros posteriores.
Continue segurando o mouse pela base da cauda de acordo com o teste um. Examine os membros posteriores, pontuação zero para extensão simétrica e movimento dos membros posteriores. Pontuação um para assimetria do membro posterior com movimento significativamente diminuído e posição assimétrica do membro posterior contralesional.
Continue segurando o mouse pela base da cauda para avaliar a simetria do tronco. Pontuação zero para flexão simétrica normal do tronco para ambos os lados e nenhuma flexão persistente do tronco acima de 30 graus em relação ao eixo vertical. Pontuação um para flexão acentuada do tronco acima de 30 graus em relação ao eixo vertical com predominância contralesional.
Agora teste o comportamento circular. Coloque o mouse suavemente em uma superfície plana e deixe-o se mover livremente por pelo menos um minuto. Observe seu padrão de movimento.
Pontuação zero quando o mouse se move rápida e linearmente. Marque um para a tendência de virar para um lado, mas não em círculos fechados. Marque dois para círculos inconstantes fechados para um lado.
Marque três para círculos próximos constantes para um lado e marque quatro para girar, balançar ou nenhum movimento. Agora teste a simetria do corpo. Continue a partir do teste quatro e deixe o mouse se mover livremente na superfície plana.
Observe seu eixo nariz-cauda. Pontuação zero para postura normal, tronco elevado do banco e cauda reta. Marque um para leve assimetria quando o corpo se inclina ligeiramente para um lado e a cauda está dobrada distalmente.
Pontuação dois para assimetria moderada quando o corpo se inclina ou se dobra para o lado contralesional e a cauda está dobrada proximalmente. Marque três para assimetria proeminente quando o corpo está dobrado, um lado está no banco e a cauda está claramente dobrada. E marque quatro para extrema assimetria quando o corpo está dobrado e um lado está constantemente deitado no banco.
Agora, para o teste seis, continue a partir do teste cinco e observe sua marcha. Verifique se há déficits motores da marcha. Pontuação zero para marcha normal quando os membros são flexíveis, simétricos e rápidos.
Marque um para marcha rígida, inflexível e mais lenta sem mancar. Marque dois para limping claro com movimentos assimétricos. Marque três pontos por tremer, derrapar ou cair após um empurrão suave.
Pontuação quatro para nenhuma caminhada espontânea. Agora teste o círculo obrigatório. Segure o mouse pela base da cauda e eleve-o ligeiramente da superfície para que ele ande sobre os membros anteriores.
Observe seu movimento. Pontuação zero para movimento linear normal. Marque um para a tendência de virar para um lado.
Marque dois quando o mouse circular para um lado em círculos fechados completos. Marque três quando ele gira e seu movimento é lento. E marque quatro quando o mouse não avança e a parte da frente do tronco fica no banco.
Aqui descrevemos como executar o teste de postura. Coloque o mouse na palma da mão, conforme mostrado no vídeo, e balance-o suavemente para trás e para frente. Observe como o mouse mantém sua posição vertical e se equilibra contra as forças laterais, seu corpo não entra em contato com a palma da mão ou os dedos.
Imagens de diferentes pontuações desse teste não são úteis, pois sua pontuação depende muito da detecção de movimentos rápidos e sutis do mouse que são sentidos pela mão e as dicas visuais não são suficientes para a pontuação. Descrevemos cada partitura na forma de texto para sua conveniência. Agora avalie a colocação do membro anterior.
Segure o mouse pelas costas ou pela base da cauda e direcione-o para o feixe como um alvo a ser alcançado. Observe o alcance simétrico. Então, uma vez que ele agarre a viga, puxe-a suavemente e observe a liberação simétrica dos membros anteriores.
Pontuação zero para alcance e liberação simétricos. Marque um para qualquer assimetria. Agora teste o déficit sensório-motor dos membros anteriores.
Segure o mouse pelas costas conforme demonstrado e estimule as patas dianteiras sucessivamente com uma ponta fina. Pontuação zero para movimentos normais de preensão rápida. Pontuação um para preensão ausente ou claramente tardia da pata dianteira contralesional.
Em seguida, teste sua caminhada de feixe. Coloque o mouse na viga com o eixo nariz-cauda paralelo a ela e deixe-o se equilibrar ou andar na viga. Observe equilíbrio, paresia de membros e quedas.
Mantenha sempre a mão abaixo do animal para o caso de ele cair. Marque zero quando o mouse se equilibrar com postura firme e caminhar em direção a um lado do feixe. Marque um quando ele agarrar a lateral da viga e não andar sobre ela.
Esteja ciente de que pode precisar de algum tempo para se equilibrar ainda na viga. Marque dois quando um membro cair da viga. Marque três quando dois galhos caírem da viga.
Marque quatro quando o mouse tentar se equilibrar no feixe, mas cair após 40 segundos. Esteja ciente de que neste teste o mouse deve ser observado por até 60 segundos. Pontuação cinco quando há uma queda que ocorre entre 20 e 40 segundos.
E marque seis quando não faz nenhuma tentativa de se equilibrar ou se pendurar na viga. Avalie a sensação do bigode. Coloque o mouse em uma bancada aberta e estimule com sucesso seus bigodes com um cotonete fino de ponta longa.
Vindo de um ângulo cego, observe sua resposta de giro. Pontuação zero para giro rápido normal após estimulação bilateral. Pontuação um para resposta contralesional mais lenta.
Escore dois para resposta contralesional ausente. Pontuação três para resposta contralesional ausente e ipsilesional mais lenta. E escore quatro para resposta bilateral ausente.
Teste de habilidade de escalada. Coloque o mouse no centro de uma superfície revestida de borracha em um ângulo de 45 graus e observe sua resposta enquanto ele tenta subir. Marque zero quando o mouse subir rapidamente até o topo da superfície.
Marque um quando sobe com tensão e fraqueza nos membros está presente. Marque dois pontos quando ele se agarra à inclinação e não escorrega nem sobe. Marque três quando deslizar pela encosta, apesar do esforço para evitar a queda.
E marque quatro pontos quando desliza sem nenhum esforço para evitar quedas. O protocolo da unidade de AVC de camundongo apoiou de forma reprodutível a sobrevivência de camundongos após a oclusão da artéria cerebral média filamentosa, mantendo uma taxa de sobrevivência de 80% O ESS focal se destaca na detecção de déficits neurológicos, capturando a recuperação e mantendo a sensibilidade por até seis meses após o AVC. Complementar ao ESS focal, você pode usar um teste de degrau em escada para detectar e quantificar a fraqueza dos membros anteriores e posteriores por até seis meses.
