Purificação baseada no sistema MultiBac e caracterização biofísica da miosina-7a humana

Estamos tentando responder por que mutações nos motores de miosina causam doenças humanas e quais papéis essas proteínas desempenham no processo auditivo. Nossa pesquisa se concentra na compreensão dos mecanismos moleculares da miosina-7a e como ela funciona com as proteínas de Usher para montar e manter a maquinaria celular necessária para a audição. Compreender os mecanismos estruturais e funcionais da miosina-7a requer proteína intacta de alta qualidade, o que tem sido um desafio de longa data no campo.

Recentemente, fizemos progressos significativos e purificamos com sucesso a enzima oca Myosina-7a de comprimento total, permitindo uma investigação mais aprofundada dessa importante proteína. Com essa proteína agora disponível, podemos investigar as principais características desse motor, incluindo sua estrutura, geração de força e motilidade. Esses insights são cruciais para entender os mecanismos da miosina-7a na audição e os defeitos moleculares que levam à surdez em pacientes humanos.

No futuro, nosso laboratório aproveitará nossa experiência no sistema multi vac para produzir recombinantemente grandes complexos biomoleculares, por exemplo, o complexo Usher 1, que é crítico para as funções sensoriais humanas. Essa abordagem nos permitirá determinar suas estruturas e os princípios subjacentes aos seus papéis nas células sensoriais.