Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.
Описан протокол оценки кривых «доза-реакция» при экстракраниальной стимуляции с точки зрения измерений электрического поля мозга и соответствующего биомаркера – мозгового кровотока. Поскольку этот протокол включает в себя инвазивное размещение электродов в головном мозге, необходима общая анестезия, при этом предпочтение отдается спонтанному дыханию, а не контролируемому дыханию.
Обнаружение ответов мозгового кровотока (КБФ) на различные формы активации нейронов имеет решающее значение для понимания динамической функции мозга и вариаций в снабжении мозга субстратом. В данной работе описан протокол измерения ответов КБФ на транскраниальную стимуляцию переменным током (тОКС). Кривые «доза-реакция» оцениваются как по изменению КБФ, происходящему при тОКС (мА), так и по внутричерепному электрическому полю (мВ/мм). Мы оцениваем внутричерепное электрическое поле на основе различных амплитуд, измеряемых стеклянными микроэлектродами в каждой стороне мозга. В этой статье мы описываем экспериментальную установку, которая включает в себя использование либо билатеральных лазерных допплеровских зондов (LD), либо лазерной спекл-визуализации (LSI) для измерения CBF; В результате, эта установка требует анестезии для установки и стабильности электрода. Мы представляем корреляцию между реакцией CBF и током в зависимости от возраста, показывая значительно больший отклик при более высоких токах (1,5 мА и 2,0 мА) у молодых контрольных животных (12-14 недель) по сравнению с более старыми животными (28-32 недели) (p < разница 0,005). Мы также продемонстрировали значительный отклик CBF при напряженности электрического поля <5 мВ/мм, что является важным фактором для возможных исследований на людях. На эти реакции CBF также сильно влияет использование анестезии по сравнению с бодрствующими животными, контроль дыхания (т.е. интубированное или спонтанное дыхание), системные факторы (например, CO2) и местная проводимость в кровеносных сосудах, которая опосредована перицитами и эндотелиальными клетками. Кроме того, более детальные методы визуализации/регистрации могут ограничить размер поля всего мозга только небольшой областью. Описано использование экстракраниальных электродов для применения стимуляции tACS, включая как самодельные, так и коммерческие конструкции электродов для грызунов, одновременное измерение КБВ и внутричерепного электрического поля с помощью двусторонних стеклянных регистрирующих электродов постоянного тока, а также подходы к визуализации. В настоящее время мы применяем эти методы для реализации формата замкнутого цикла для увеличения CBF на животных моделях болезни Альцгеймера и инсульта.
Транскраниальная электростимуляция (tES; с синусоидальной стимуляцией, tACS) является распространенным внешним, неинвазивным подходом к нейромодуляции головного мозга 1,2. Ранее мы предположили, что в определенных дозах tES (и особенно tACS) может увеличивать мозговой кровоток (CBF) в нижележащих областях мозга3. Кроме того, может существовать зависимость «доза-эффект» между внешним током или внутричерепным электрическим полем и результирующими реакциями КБФ. Тем не менее, большинство протоколов клинической стимуляции сосредоточены на максимально комфортном уровне стимуляции кожи (т.е. ....
Все процедуры с животными были одобрены Комитетом по уходу за животными и их использованию в Университете Дьюка или аналогичным местным органом власти, регулирующим исследования с участием животных. Подробные сведения обо всех материалах, инструментах и оборудовании, используемых в этом протоколе, см. в таблице материалов .
1. Подготовка инструмента
Репрезентативные результаты показаны на рисунках 4, 5 и 6. На рисунке 4 показан пример четырех каналов с двумя внутричерепными регистрирующими электродами на верхних каналах и ответами КБФ на нижних каналах. tACS симметрична.......
Этот протокол фокусируется на измерении in vivo под наркозом ответа CBF в качестве биомаркера для оценки реакции мозга на tES14. Долгосрочные биомаркеры ответа на тЭС включают гистологические эффекты лечения, такие как предотвращение или изменение образования амилоидных б?.......
У авторов нет конфликта интересов, о котором можно было бы заявлять.
Это исследование было поддержано следующими грантами (D.A.T.): NIA RO1 AG074999, NIA R21AG051103, VA I21RX002223 и VA I21 BX003023.
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
Alcohol pads | HenryShein | 112-6131 | |
Baby mineral oil | Johnson & Johnson | ||
BD 1 mL syringe | Becton Dikinson | REF 305699 | |
C3 Flat Surface Electrodes | Neuronexus | ||
C57BI mice | from NIH colonies | ||
Copper skull electrods | In house preparation | ||
Digidata 1440, Clampex | Axon Instruments | ||
Dumont #5 forceps | FST | #5 | |
Dumont #7 forceps curved | Dumont | RS-5047 | |
Eye ointment | Major | LubiFresh P.M. NDC-0904-6488-38 | |
Flaming/Brown micropipette puller | Sutter instrument Co. | Model P-87 | |
Forceps 11.5 cm slight curve serrated | Roboz | RS-8254 | |
Intramedic needle 23 G | Becton Dikinson | REF 427565 | |
KCl 1 M | In house preparation | ||
Laser Doppler Probes | Moor Instruments | 0.46 mm laser doppler probes | |
Laser Speckle Imaging Device | RWD | RFLSI-ZW | |
Micro curette 13 cm | FST | 10080-05 | |
Micro Dissecting Scissors, 11.5 cm | Roboz | RS-5914 | |
Mouse anesthesia fixation | Stoelting | ||
Neuroconn-DS | Neurocare | DC-Stimulator Plus | |
PhysioSuite Monitoring | Kent Scientific | ||
Q-tips | Fisherbrand | 22363167 | |
Saline 0.9% NaCl solution | Baxter | 281322 | |
Sensicam QE | PCO Instruments | ||
Software | Axon Instruments Clampex | ||
Surgical glue | Covetrus | 31477 | |
Surgical tape | 3M Transpore | T9784 |
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеThis article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены