Для просмотра этого контента требуется подписка на Jove Войдите в систему или начните бесплатную пробную версию.
Клеточные сфероиды рассматривались как одна из потенциальных моделей в области биологических приложений. В данной статье описываются протоколы для масштабируемой генерации клеточных сфероидов с использованием 3D-акустического сборочного устройства, которое обеспечивает эффективный метод надежного и быстрого изготовления однородных клеточных сфероидов.
Клеточные сфероиды являются перспективными трехмерными (3D) моделями, получившими широкое применение во многих областях биологии. В этом протоколе представлен метод изготовления высококачественных и высокопроизводительных клеточных сфероидов с использованием устройства 3D-акустической сборки с помощью маневренных процедур. Устройство акустической сборки состоит из трех преобразователей из титаната цирконата свинца (PZT), каждый из которых расположен в плоскости X/Y/Z квадратной камеры из полиметилметакрилата (ПММА). Эта конфигурация позволяет генерировать 3D-точечную матрицу левитирующих акустических узлов (ЛВС) при подаче трех сигналов. В результате ячейки в растворе желатина метакрилоила (GelMA) могут быть перемещены в ЛВС, образуя однородные клеточные агрегаты в трех измерениях. Затем раствор GelMA подвергается УФ-фотоотверждению и сшивается в качестве каркаса, поддерживающего рост клеточных агрегатов. Наконец, массы зрелых сфероидов получают и извлекают путем последующего растворения скаффолдов GelMA в мягких условиях. Предлагаемое новое 3D-устройство для сборки акустических клеток позволит масштабировать производство клеточных сфероидов и даже органоидов, предлагая большой потенциал технологии в биологической области.
3D-модели культивирования in vitro, которые обеспечивают больше структурных и морфологических характеристик in vivo по сравнению с обычными 2D-моделями культивирования, были признаны перспективными системами в различных биомедицинских приложениях, таких как тканевая инженерия, моделирование заболеваний и скрининг лекарств 1,2,3. Как один из типов 3D-модели культуры, клеточные сфероиды обычно относятся к клеточной агрегации, создавая трехмерные сфероидальные структуры, характеризующиеся усиленными межклеточными и межклеточными и межкле....
1. Изготовление устройства 3D акустической сборки
В этом исследовании было разработано устройство 3D-акустической сборки для массового производства клеточных сфероидов. Акустическое устройство состояло из квадратной камеры с двумя преобразователями PZT, прикрепленными к плоскостям X и Y на внешней поверхности камеры, и одним преобразо.......
Эффективное и стабильное изготовление клеточных сфероидов с высокой пропускной способностью с использованием таких технологий, как устройство 3D-акустической сборки, имеет большие перспективы для развития биомедицинской инженерии и скрининга лекарств 1,2,3
Авторам нечего раскрывать.
Работа была поддержана Национальной ключевой программой исследований и разработок Китая (2022YFA1104600) и Фондом естественных наук провинции Чжэцзян Китая (LQ23H160011).
....Name | Company | Catalog Number | Comments |
0.22-μm filter | Merck | SLGSM33SS | Used for GelMA solution sterilization |
35 mm-cell culture dish | Corning | 430165 | Used for culturing cells |
Confocal microscope | Nikon | A1RHD25 | Fluorescent cell observation |
DiO dye | Beyotime | C1038 | Dye used to stain cells |
DMEM | Gibco | 12430054 | Cell culture media |
FBS | Gibco | 10099141C | Cell culture media supplement |
Function generator | Rigol | DG5352 | For RF signal generation |
GelMA | Regenovo | none | Used to prepare bioink |
GelMA lysis buffer | EFL | EFL-GM-LS-001 | Used to dissolve GelMA scaffolds |
Inverted microscope | Nikon | Ti-U | Cell observation |
LAP | Sigma-Aldrich | 900889 | Used as photoinitiator |
Live-Dead kit | Beyotime | C2015M | Cell vability analysis |
PBS | Gibco | 10010002 | Used as buffer |
Penicillin-streptomycin | Gibco | 15070063 | Prevent cell culture contamination |
Power amplifer | Minicircuit | LCY-22+ | Increase the voltage amplitude of the RF signal |
PZT transducers | Yantai Xingzhiwen Trading Co.,Ltd. | PZT-41 | Functional units for acoustic assembly device |
T25 cell culture flask | Corning | 430639 | Used for culturing cells |
Trypan blue | Gibco | 15250061 | Cell counting |
Trypsin-EDTA | Gibco | 25200056 | Cell dissociation enzyme |
Запросить разрешение на использование текста или рисунков этого JoVE статьи
Запросить разрешениеThis article has been published
Video Coming Soon
Авторские права © 2025 MyJoVE Corporation. Все права защищены