Two-Photon Calcium Imaging of Mouse Superior Colliculus Neurons

После имплантации головной пластины и заглушки закрепите животное на вращающейся беговой дорожке с помощью головной пластины. Поместите беговую дорожку под двухфотонным микроскопом и отрегулируйте высоту до соответствующего положения. Поместите черный алюминиевый конус между объективом и головной пластиной, чтобы предотвратить световое загрязнение монитора для визуальной стимуляции.

Чтобы выполнить двухфотонную визуализацию, отрегулируйте мощность лазера в плоскости образца в диапазоне от 20 до 80 милливатт. Сканирование с полем зрения 600 на 600 микрометров с частотой 4,8 Гц с пространственным разрешением 2,4 микрометра на пиксель и нейронной активностью изображения глубиной до 350 микрометров. С помощью поворотного энкодера запишите локомоцию мыши на беговой дорожке.

Используйте камеру с 50-миллиметровым объективом, чтобы записать размер и положение зрачка. Наконец, синхронизируйте эти записи и полученные изображения с визуальной стимуляцией, записывая триггеры, посылаемые компьютером стимуляции. Представлены кальциевые ответы нейронов СК мыши дикого типа и проекция стандартного отклонения флуоресценции на изображения.