Эта модель может помочь ответить на ключевые вопросы в области функции сокращения мышц. Такие, как механизм силового производства, во время прогрессирования заболевания. Основным преимуществом этого метода является то, что эта процедура является неинвазивной, которая может быть выполнена на одном и том же животном в разные моменты времени, для мониторинга прогрессирования заболевания и лечения.
Визуальная демонстрация этого метода имеет решающее значение, так как изменение любого из этих шагов может привести к увеличению изменчивости результатов. Таким образом, практика может позволить вам получить более последовательные результаты. Чтобы начать эту процедуру, установите коленный зажим мыши на платформе, а также мышеловку на предуцера.
Затем включите нагревательной платформы до 37 градусов по Цельсию. Откройте динамическое программное обеспечение для управления мышцами на рабочем столе. При установке опустите список, выберите мгновенный стебель и измените параметры времени времени работать до 120 секунд.
В окне помечены autosave базы, ввнести имя местоположения файла autosave. Нажмите на чек-бокс слева от базового окна autosave и измените его, чтобы автозавещать. В верхней части экрана управления DMC нажмите секвенсор, который откроет новое всплывающее окно.
Выберите открытую последовательность и выберите протокол, который будет использоваться. Затем нажмите последовательность загрузки и закройте окно. Чтобы подготовить животное к эксперименту, удалите волосы на правой ноге мыши с помощью электрических ножниц для волос.
Поместите животное в положение на спине на нагретой платформе и очистите правую ногу 70%-ым алкоголем и йодом. На данный момент, настроить Isoflurane до 2%с потоком кислорода на один литр в минуту. Поместите ногу на подножье и закрепте ее с помощью медицинской ленты.
Затем нанесите проводящий гель на кожу, где будут размещены электроды. Затем зажим колена, чтобы стабилизировать ногу во время процедуры. Используйте ручки на платформе, чтобы распоить заднюю конечность, чтобы сформировать угол 90 градусов на лодыжке.
После того, как мышь закреплена на платформе, располагаем электродами под кожей правой ноги, один рядом с головой малоберцовой кости, а другой электрод более distally на боковой стороне ноги. Электроды расположены осторожно для того, чтобы достичь достаточной стимуляции перонеального нерва. Также это положение можно настроить, чтобы достичь стабильного пика, визуализировать на экране.
Как только эти шаги будут достигнуты, отрегулируйте стимулятор высокой мощности двух фаз, чтобы получить стимуляцию перонеального нерва, что приводит к максимальному крутящему моменту дорсифлексии. Во время стимуляции, поверните предуктор по часовой стрелке, чтобы дать отрицательные значения, которые важны для обеспечения того, чтобы электроды стимулируют только мышцы сгибателя dorsi перонеальным нервом. Как только этот шаг будет достигнут, стабилизировать электроды с помощью зажима, с тем чтобы предотвратить любое движение во время процедуры.
Достижение отрицательного пика медленно и постепенно важно проверить, что электроды находятся в правильном положении, а напряжения достаточно для достижения максимальной силы. Впоследствии остановите мгновенный стебель программного обеспечения. На главном экране включите кнопку с пометкой "последовательность старта", чтобы начать предыдущую последовательность установки.
Как только измерения силы закончены, снимите электроды, удалите ленту для ног и отпустите зажим колена. Выключите Isoflurane и поддерживать доставку кислорода в течение нескольких минут, чтобы помочь животному восстановления. Как только мышь начинает двигаться и приходит в сознание, верните ее в клетку.
На этом графике показаны данные кривой частоты репрезентативной силы мыши во времени, где процедура повторялась один раз в неделю до тех пор, пока не были завершены пять точек времени. Эти наблюдения показали согласованные значения производства силы на протяжении всех точек времени. Эта процедура также показала, чтобы быть последовательным между различными мышами, как указано в репрезентативной области, под кривой стимуляции FFC, в течение пяти различных наблюдений в шести мышей испытания один раз в неделю.
После его развития, этот метод позволяет исследователям в области нервно-мышечных заболеваний исследовать временные изменения в функции мышц в зеркальных моделях заболевания.
