이 방법의 목적은 작은 동물 극저온경기 모델에서 엔지니어링 된 심장 조직 이식의 기능적 결과를 평가하는 것입니다. 이 방법의 장점은 안정적인 경색 크기와 상대적으로 재현 가능한 심근 경색의 유도를 허용한다는 것입니다. 발가락 핀치에 대한 반응의 부족을 확인 한 후, 척추 위치에 섭씨 40 ~ 42도 온난화 플랫폼에 마취 기니 피그를 배치합니다.
눈 연고를 바르고 흉부를 뒤늦게 제거합니다. 노출된 피부에 25도 초음파 트랜스듀서 젤을 적용하고 심방초음파 시스템에서 트랜스듀서를 흉부에 배치하여 왼쪽 심실 정점의 동시 시각화를 통해 대동맥 판막의 평면에서 왼쪽 다리쪽으로 B 모드에서 2차원 파라스테널 긴 축 뷰를 획득하여 수술 전 좌심실 정점 기능을 조사한다. 그런 다음 트랜스듀서를 90도 돌려 중간 유두 수준에서 짧은 축 B 모드 뷰를 가져옵니다.
마지막 이미지가 입수된 후, 기니피그를 수술테이블로 옮기고 팔다리를 확산 독수리 위치에 테이프로 놓습니다. 노출된 피부를 순차요오드 2개와 80% 에탄올 스크럽으로 소독하고 기관 영역에서 1.5cm 수직 절개를 합니다. 기관진을 덮는 근육을 무뚝뚝하게 해부합니다.
기관체를 관찰할 수 있는 경우, 18게이지 IV 캐뉼라로 공기관을 뚫고 기관관으로서 캐뉼라의 유연한 부분을 삽입한다. 기관관을 동물 호흡보호구에 연결하여 시술 중에 지속적인 환기를 위해 제1늑간 공간에서 시작하여 제5간 늑간 공간을 찾습니다. 기니피그 왼쪽의 다섯 번째 늑간 공간에 2센티미터 수평 절개를 하고 비원간 근육에 도달할 때까지 근육을 전기카우테리로 해부하기 전에 피하 조직을 제거합니다.
흉막 공간에 도달하고 왼쪽 폐가 시각화 될 때까지 핀셋과 작은 가위로 늑간 근육을 부드럽게 해부합니다. 갈비뼈 사이에 리트랙터를 삽입하고 심장의 좋은 시야가 얻어지을 때까지 조심스럽게 리트랙터를 엽니다. 전방 좌심실 벽의 영역에서 약 1센티미터의 심혈구를 열고 왼쪽 심실의 저온 부상을 유발할 때 폐를 손상으로부터 보호하기 위해 왼쪽 폐에 압축을 놓습니다.
다음으로, 30초 동안 프로브를 심장의 왼쪽 전방 벽에 누르기 전에 3분 동안 액체 질소에서 단면 직경 0.5cm의 침식된 금속 스탬프의 끝을 식힙니다. 그런 다음 스탬프 내부에 200°C의 전기 납땜 철을 두어 금속을 조직에서 제거할 수 있도록 스탬프를 데우게 합니다. 세 번째 스탬프 적용 후, 늑간 공간에서 재트랙터를 제거하고 2초 동안 인공호흡기의 유출 튜브를 고정하여 폐의 감응을 피하기 위해 최대 압력으로 폐를 팽창시다.
그런 다음 갈비뼈를 4-0 봉합사 2개, 갈비뼈 위에 5-0 으로 달리는 봉합사, 5-0 봉합사 싱글 스티치로 피부를 닫습니다. 기관관을 제거한 후, 단일 8-0을 사용 봉합사는 기관지의 펑크 부위를 닫고 3 개의 단일 스티치 5-0 봉합사로 상처를 닫습니다. 저온 부상 후 7 일, 봉합사를 제거하고 왼쪽 측면의 흉터 영역에서 2 센티미터 수평 피부 절개를하고 부드럽게 여분의 흉막 접착을 해부 전기 카우테리를 사용합니다.
가위로 흉막 공간을 조심스럽게 열고 갈비뼈 스프레더를 삽입하여 심장을 노출시합니다. 건강한 주변 심근에 비해 창백한 색상으로 경색 부위를 시각적으로 식별하고 경색 부위에 엔지니어링 된 심장 조직 패치를 배치합니다. 8-0 2개로 패치 보안 심혼의 비극단 지역에 있는 양측에 봉합하고 폐의 감선출을 피하기 위하여 압력으로 폐를 팽창시다.
그런 다음 늑간 공간에서 재트랙터를 제거하고 시연된 대로 동물을 닫습니다. 심장 조직 이식을 설계 한 후 4 주, 왼쪽 심실 기능 초과 근무의 변화를 평가하기 위해 입증 된 대로 트랜스 토라시크 에코카디그래피를 수행. 극저온 상해 후 4 주 염색 메이슨 trichrome 은 평균 왼쪽 심실 심근의 25 % 이상의 큰 교반 흉터를 보여줍니다.
Dystrophin 염색은 새로 형성된 심근의 인간 기원을 확인하는 인간 Ku80에 대한 흉터에 부분적으로 근육질과 염색을 한 큰 심근 이식편을 보여줍니다. 이식된 엔지니어링 심장 조직의 트랜스소라시크 에코카티오그래피 모니터링은 좌심실 배출 분획, 분수 영역 단축, 좌심실 및 확장기 직경의 감소를 보여줍니다. 흉부 벽과 좌심실 사이의 유착이 존재할 수 있고 좌심실 심근을 손상시키는 특정 위험이 있기 때문에 이러한 종류의 재작업에서 흉막 구멍을 조심스럽게 여는 것이 필수적입니다.
인간 공학 심장 조직의 이식 후, 왼쪽 심실 배출 분획의 변화를 모니터링하는 몇 가지 방법을 사용할 수 있습니다. 에코카디그래피 외에도 압력 볼륨 루프의 침습적 측정을 사용하여 이러한 변화를 모니터링할 수 있습니다. 이 방법은 인간 공학조직 이식의 모든 측면을 조사할 수 있게 한다.
기능적 결과 뿐만 아니라 부정맥 같은 잠재적인 위험이 작은 동물 모델에서 평가될 수 있습니다.
