Эта методология может быть использована для воспроизведения опухолей мочевого пузыря с помощью канцерогена BBN и для изображения размера и расширения бремени опухоли мочевого пузыря через МРТ. Этот метод использует оператор независимый подход к быстрой визуализации с коротким временем приобретения при высоком диагностическом качестве для проведения высокой пропускной способности анализов мышей на промежуточных стадиях развития опухоли. Чтобы вызвать образование опухоли рака мочевого пузыря, добавить 0,05%BBN в непрозрачный контейнер питьевой воды и обеспечить водой 6-недельный C57 черный шесть мышей объявление libitum.
Затем следите за животными два раза в неделю на признаки бедствия, связанные с опухолями мочевого пузыря в соответствии с местными руководящими принципами МАКУК. Через 16-24 недели после облучения загрузите один миллилитровый шприц, оснащенный иглой калибра от 25 до 27 с 100-200 микролитров стерильного солевого раствора, и ввилите солевой подкожный раствор в обработанное BBN животное. Через 10 минут перенесите мышь в держатель магнитно-резонансного изображения и вставьте зонд прямой температуры, подключенный к компьютеру физиологической записи для мониторинга температуры тела животного.
Затем поместите 4-канальный четырехугольный приемник катушки над нижней частью живота мыши и инициировать автоматические корректировки в интегрированном программном обеспечении изображения, чтобы приобрести триаксиальный набор изображений всего тела мыши. Из этого эталонного набора изображений, определить область интереса и приобрести три набора ортогональных нарезанных изображений вдоль осяных, корональных и sagittal плоскостей. Используя истинную быструю визуализацию с последовательностью изображений с устойчивым состоянием прогрессии, установите TR до 900 миллисекунд, TE до двух миллисекунд, и FA до 70, 14 средних.
Затем выберите соответствующие геометрические параметры в программном обеспечении платформы изображений, чтобы получить серию срезов по всему мочевому пузырю толщиной 0,5 миллилитра и разрешение в плоскости 0,148 миллиметра. Когда все изображения были получены, экспортировать набор ломтиков, охватывающих весь мочевой пузырь в соответствующую программу медицинского анализа изображений и прокрутки генерируемых изображений, чтобы найти ломтик в середине мочевого пузыря, что позволяет визуализации стенки мочевого пузыря и люмена, чтобы выбрать представительный аксиальный вид в центре мочевого пузыря для количественного анализа. Затем проследите границы вокруг внешнего края и внутреннего люмена мочевого пузыря, чтобы тщательно разграничить область интереса в выбранном репрезентативном аксиевом представлении и вычесть внутренний люмен из внешнего края, чтобы вычислить площадь поверхности стенки мочевого пузыря.
Через 20 недель после воздействия BBN, очистить область разреза с 70% этанола и использовать миппы для подъема кожи брюшной стенки. Сделайте разрез средней линии от лобкового симфиза к процессу xiphoid и схватить peritoneum для того чтобы позволить острый разрез брюшной полости. Определите мочевой пузырь в средней линии нижней части живота, используя типсы, чтобы схватить купол мочевого пузыря.
Рассекают мочевой пузырь вдали от окружающих структур, включая семенные пузырьки, прямую кишку и жир. Вырежьте среднюю пуповинную связку, соединяющую купол мочевого пузыря с пупочной и брюшной стенки. Вырезать мочеточие близко к мочевому пузырю и подъема мочевого пузыря головки, сократить уретры для удаления мочевого пузыря.
Затем промыть выкакцио алкогольный мочевой пузырь с PBS и сразу же взвесить ткани на балансе. Здесь показаны репрезентативная истинная быстрая визуализация с устойчивым состоянием прогрессирования магнитно-резонансных изображений стенки мочевого пузыря 3-D реконструкций и патологических изображений мыши с большой опухолью и контрольной мыши без опухоли. Толщина стенки мочевого пузыря, полученная в результате магнитно-резонансной томографии, еженедельно коррелирует с экс-виво, полученными измерениями веса мочевого пузыря.
Изучение МРТ-производных стенки мочевого пузыря толщиной и экс-Виво получил данные веса мочевого пузыря также демонстрируют связь с стадией опухоли, а также связь при стратификации патологии немишечного инвазивного рака мочевого пузыря и мышечной инвазивных рака мочевого пузыря. Имейте в виду, что лучше всего приобретать изображения у мышей, когда они имеют полный мочевой пузырь. После МР-изображения опухолей мочевого пузыря, мыши могут быть разделены на когорты с аналогичными характеристиками опухоли, по мере необходимости.
Этот метод позволяет исследователям исследовать новые иммунотерапии и другие методы лечения для улучшения результатов для наших пациентов. Важно помнить, что BBN является канцерогеном и что соответствующие меры предосторожности всегда должны быть приняты при обработке этого соединения.
