이러한 방법론은 BBN 발암물질을 사용하여 방광 종양을 재현적으로 생성하고 MRI를 통해 방광 종양 부담의 크기와 확장을 이미지화하는 데 사용될 수 있다. 이 기술은 종양 발달의 중간 단계에서 마우스의 높은 처리량 acsays를 수행하기 위하여 높은 진단 질에 짧은 취득 시간을 가진 연석 독립적인 급속한 화상 진찰 접근을 이용합니다. 방광암 종양 형성을 유도하기 위하여는, 불투명한 식수 용기에 0.05%BBN을 추가하고 6주 된 C57 흑색 6마우스 광고 리비툼에 물을 제공합니다.
그런 다음 현지 IACUC 지침에 따라 방광 종양과 관련된 조난의 표시를 위해 일주일에 두 번 동물을 모니터링합니다. 노출 후 16~24주, 멸균 식염수 100~200마이크로리터가 장착된 25~27게이지 바늘을 장착한 밀리리터 주사기를 실어 BBN 처리동물에 피하로 주입한다. 10분 후, 마우스를 자기 공명 이미서의 이미징 홀더로 옮기고 생리적 기록 컴퓨터에 연결된 직장 온도 프로브를 삽입하여 동물의 체온을 모니터링합니다.
다음으로, 마우스의 하부 복부에 4채널 사분수 수신기 코일을 놓고 통합 이미징 소프트웨어에서 자동 조정을 시작하여 마우스 본체 전체의 삼각형 이미지 세트를 획득한다. 이 참조 이미지 세트에서 관심 영역을 식별하고 축, 관상 및 척동 평면을 따라 세 세트의 직교 슬라이스 이미지를 획득합니다. 정상 상태 진행 이미징 서열을 사용하여 TR을 900밀리초로 설정하고 TE를 2밀리초로 설정하고 FA를 70, 14평균으로 설정합니다.
그런 다음 이미징 플랫폼 소프트웨어 내에서 적절한 기하학적 매개 변수를 선택하여 0.5 밀리리터 두께의 전체 방광과 0.148mm의 평면 해상도에 걸쳐 일련의 조각을 얻습니다. 모든 이미지가 입수되면 방광 전체를 덮는 슬라이스 세트를 적절한 의료 영상 분석 소프트웨어 프로그램으로 내보내고 생성된 이미지를 스크롤하여 방광 벽과 루멘의 시각화를 허용하는 방광의 중간점에서 슬라이스를 찾아 방광벽과 루멘의 대표적인 축보기를 선택하여 정량적 분석을 위해 양적 분석을 한다. 그런 다음 방광의 외부 가장자리와 내부 루멘 주위의 경계를 추적하여 선택한 대표 축 보기 내에서 관심 영역을 신중하게 묘사하고 방광 벽의 표면적을 계산하기 위해 외부 가장자리에서 내부 루멘을 뺍니다.
BBN 노출 후 20주 후, 절개 부위를 70%에탄올로 청소하고 집게를 사용하여 복벽 피부를 들어올립니다. 음모 대칭에서 xiphoid 과정에 중간 선 절개를 하고 복막 구멍을 날카로운 절개를 허용 하기 위해 복막을 파악 합니다. 중음절 하복부의 방광을 식별하여 집게를 사용하여 방광의 돔을 파악합니다.
정액 소포, 직장 및 지방을 포함하여 주변 구조물에서 멀리 방광을 해부합니다. 방광의 돔을 배꼽과 복부 벽에 연결하는 중앙 배꼽 인대를 잘라냅니다. 방광에 가까운 요관을 자르고 방광 세팔라드를 들어 올리고, 요도를 잘라 방광을 제거합니다.
그런 다음 PBS로 절제된 방광을 헹구고 즉시 균형을 이면 조직을 무게가 측정합니다. 여기서, 방광벽 3차원 재구성 및 종양이 없는 대조마우스의 병리학적 이미지의 정상 상태 진행 자기 공명 이미지를 가진 대표적인 진정한 고속 이미징이 나타난다. 자기 공명 화상 진찰에서 파생된 방광 벽 두께는 전 생체 약수 수득한 방광 중량 측정과 매주 상관관계가 있습니다.
MRI 유래 방광벽 두께 및 전 생체내 수득방체중 데이터의 검사는 또한 비근육 침습적 방광암 및 근육 침습성 방광암에 의한 병리학을 계층화할 때종양 단계뿐만 아니라 연관성을 입증한다. 그들은 전체 방광이있을 때 마우스에서 이미지를 취득하는 것이 가장 좋습니다 명심하십시오. 방광 종양의 MR 화상 진찰에 따라, 마우스는 적당한로 유사한 종양 특성을 가진 코호트로 분할될 수 있습니다.
이 기술은 연구원이 우리의 환자를 위한 결과를 향상하기 위하여 새로운 면역 요법 및 그밖 처리를 탐구하는 것을 허용합니다. BBN은 발암 물질이며이 화합물을 처리 할 때 적절한 예방 조치를 항상 취해야한다는 것을 기억하는 것이 중요합니다.
