Канюляция верхней брыжеечной артерии у крыс затруднена и не часто используется в качестве экспериментальной модели. Данная методика позволяет выполнить функциональную канюляцию и открывает поле экспериментов с эффектами первого прохождения внутриартериальных препаратов. Этот метод позволяет избежать кровотечений и тромбозов при согласии на канюляцию верхней брыжеечной артерии.
И допуская длительную инфузию лекарств у относительно свободного животного, которое может есть и двигаться. Фармакологические исследования препаратов, активных в кишечнике, могут принести большую пользу от этой техники. Альтернативы изучению эффекта от прямого однократного прохождения препарата нет.
Начните с разрезания более крупной канюли. Затем вырежьте меньшую канюлю и вставьте ее на один сантиметр в большую канюлю. Зафиксируйте две канюли вместе с цианоакрилатным клеем, избегая окклюзии просвета.
После этого подключите свободную конечность большей канюли к адаптеру заглушки luer, установленному на одном миллилитре шприца, заполненном солевым раствором. Заточите свободный кончик меньшей канюли ножницами, чтобы облегчить введение катетера в ветвь верхней брыжеечной артерии. Проверьте проходимость канюли, промыв солевым раствором.
Сбрите мех из хирургических областей анестезированной крысы, включая брюшную полость для ветви верхней брыжеечной артерии или сма-канюляции, и заднюю часть шеи для выхода из канюли. Очистите хирургические области асептически. И поместите животное в лежачее положение, обездвиживая четыре конечности.
Используйте лезвие скальпеля, чтобы открыть брюшную стенку с прямым трехсантиметровым разрезом на средней линии мезожелудочной области через все брюшные плоскости в брюшину. Поместите марлю, смоченную солевым раствором, вокруг разреза лапаротомии, используя швы, чтобы держать хирургический разрез открытым. Используйте ватные тампоны, чтобы идентифицировать и обнажить тонкую кишку, и извлеките брыжейку из лапаротомического разреза и положите его вниз на марлю.
Определите СМА, почувствовав пульсацию. Используя ватные тампоны, отделите брыжеечный жир и раскройте СМА и две-три его проксимальные ветви. Выберите проксимальную ветвь СМА, которая достаточно велика, чтобы позволить хирургические маневры каннуляции.
Свяжите эту ветвь на три-четыре сантиметра ниже по течению от ее начала, чтобы обеспечить ее расширение, сохраняя концы шва достаточно длинными, чтобы ими можно было манипулировать позже. Поместите жесткую опору под ветвь СМА и удерживайте конечность меньшей канюли с помощью щипцов, затем потяните концы шва другой рукой, чтобы напрячь сосуд и облегчить вход катетера. Держите кончик канюли под углом 20 градусов от плоскости сосуда в направлении, противоположном кровотоку.
Затем слегка надавите наконечником, чтобы проникнуть в стенку артерии и вставьте канюлю. Продолжайте введение канюли на один сантиметр в артериальную ветвь, близкую к источнику от СМА. Зафиксируйте канюлю на артерии хирургическим узлом и проверьте ее правильное функционирование, промыв один миллилитр стерильного физиологического раствора или путем забора крови.
Сделайте сантиметровый разрез в задней области шеи и разместите сферический клапан. Затем пропустите канюлю от лапаротомии доступа к клапану, размещенному в шее, через подкожные ткани и закройте дистальную конечность канюли катетерной пробкой, чтобы избежать притока воздуха. Замените небольшой клапан в брюшной полости и закройте брюшную стенку.
Затем закрепите клапан на следующей коже швами. Оденьте крысу в куртку, чтобы защитить клапан пуговицы. Защитите открытую часть канюли стальным стержнем во время инфузии и закрепите ее на клапане.
Подключите дистальную конечность канюли к эластомерному насосу, заполненному 50 миллилитрами стерильного физиологического раствора, и продолжайте инфузию в течение 24 часов. После инфузии разберите внешнюю инфузионную систему животного, сняв с крысы насос, рубашку, стальной стержень и клапан. Закройте и вырежьте канюлю как бы из шеи, оставив конечность под кожей шеи после намотанного шва.
В этом исследовании 15 крыс были подвергнуты этой процедуре, и среднесуточное потребление пищи и воды постепенно увеличивалось до нормы через три дня. Прибавка в весе также была регулярной и постепенно увеличивалась до конца периода наблюдения. Через 24 часа остатки солевого раствора остались только в двух баллонных насосах, в то время как остальные 13 были полностью пусты.
Кроме того, после периода инфузии 12 канюль все еще функционировали как для забора крови, так и для инфузии физиологического раствора, в то время как три канюли больше не были запатентованы. При некропсии 100% канюль располагались в филиале СМА. И ни у одной крысы не было признаков ишемии кишечника или внутрибрюшного кровотечения.
Ангиографию получили у пяти крыс путем введения йодонированного контрастного вещества в брыжеечную канюлю. Брыжеечный артериальный круг, особенно СМА и ее основные ветви, наблюдались без распространения контрастного вещества в брюшной полости, подтверждая, что канюля была хорошо размещена и закреплена на ветви СМА. Патент, тщательное опустошение ветви для канюляции лигатуры сосуда вниз по течению, проходя шов под сосудом и выбирая наиболее подходящее положение для прокола и вставки канюли, являются наиболее важными аспектами этого протокола.
Ошибки не могут быть исправлены.
