A canulação da artéria mesentérica superior no rato é difícil e não é frequentemente usada como modelo experimental. Esta técnica possibilita a realização de uma cannulação funcional e abre um campo de experimentação com efeitos de primeira passagem de drogas intra-arteriais. Este método evita sangramento e trombose ao consentir a cannulação da artéria mesentérica superior.
E permitindo a infusão a longo prazo de drogas em um animal relativamente livre que pode comer e se mover. Pesquisas farmacológicas sobre drogas ativas no intestino podem se beneficiar muito dessa técnica. Não há alternativa para estudar o efeito de uma passagem direta única da droga.
Comece cortando a cânula maior. Em seguida, corte a cânula menor, e insira-a um centímetro na cânula maior. Fixar as duas cânulas junto com cola cianoacrilato evitando a oclusão do lúmen.
Depois, conecte a extremidade livre da cânula maior a um adaptador de stub luer montado em uma seringa de um mililitro cheia de solução salina. Afie a ponta livre da cânula menor com uma tesoura para facilitar a inserção do cateter no ramo da artéria mesentérica superior. Verifique a patency da cânula lavando com solução salina.
Raspe a pele das regiões cirúrgicas do rato anestesiado, incluindo o abdômen para o ramo da artéria mesentérica superior ou cannulação SMA, e a parte de trás do pescoço para a saída da cânula. Limpe as regiões cirúrgicas asepticamente. E coloque o animal em uma posição supina imobilizando os quatro membros.
Use uma lâmina de bisturi para abrir a parede abdominal com uma incisão de três centímetros na linha média da região meso gástrica através de todos os planos abdominais no peritônio. Coloque gazes encharcadas com solução salina ao redor da incisão laparotomia, usando suturas para manter a incisão cirúrgica aberta. Use cotonetes de algodão para identificar e expor o intestino delgado, e extrair o mesentery do corte de laparotomia e colocá-lo para baixo nas gazes.
Identifique o SMA sentindo pulsação. Usando cotonetes de algodão, separe a gordura mesentérica e descubra a SMA e dois ou três de seus ramos proximais. Escolha um ramo proximal da SMA que seja suficientemente grande para permitir as manobras cirúrgicas de cannulação.
Amarre este ramo de três a quatro centímetros a jusante de sua origem para permitir sua expansão mantendo as extremidades da sutura tempo suficiente para serem manipuladas mais tarde. Coloque um suporte rígido sob o ramo do SMA e segure a extremidade da cânula menor usando fórceps e puxe as extremidades da sutura com a outra mão para esticar o vaso e facilitar a entrada do cateter. Segure a ponta da cânula em um ângulo de 20 graus do plano da nave na direção oposta ao fluxo sanguíneo.
Em seguida, pressione levemente a ponta para penetrar na parede da artéria e insira a cânula. Continue a inserção da cânula por um centímetro no ramo arterial próximo à origem da SMA. Fixar a cânula na artéria com um nó cirúrgico, e verificar seu funcionamento correto, lavando um mililitro de solução salina estéril ou por amostragem de sangue.
Faça uma incisão de um centímetro na região posterior do pescoço e acomode uma válvula esférica. Em seguida, passe a cânula do acesso à laparotomia à válvula colocada no pescoço através de tecidos subcutâneos e feche a extremidade distal da cânula com um plugue de cateter para evitar o fluxo de ar. Substitua a pequena válvula na cavidade abdominal e feche a parede abdominal.
Em seguida, fixe a válvula na próxima pele com pontos. Vista o rato com uma jaqueta para proteger a válvula do botão. Proteja a parte exposta da cânula com uma haste de aço durante a infusão e fixe-a na válvula.
Conecte a extremidade distal da cânula a uma bomba elastomérica cheia de 50 mililitros de solução salina estéril e proceda com infusão por 24 horas. Após a infusão, desmonte o sistema de infusão externa do animal removendo a bomba, a jaqueta, a haste de aço e a válvula do rato. Feche e corte a cânula como ela fora do pescoço, deixando a extremidade sob a pele do pescoço após a sutura da ferida.
Neste estudo, 15 ratos foram submetidos a este procedimento e a ingestão diária média de alimentos e água aumentou progressivamente até o normal após três dias. O ganho de peso também foi regular e gradualmente aumentando até o final do período de observação. Depois de 24 horas, havia resíduo salino em apenas duas bombas de balão, enquanto as outras 13 estavam completamente vazias.
Além disso, após o período de infusão, 12 cânulas ainda estavam funcionais tanto para amostragem de sangue quanto para infusão de soro fisiológico, enquanto três cânulas não eram mais patente. Na necropsia, 100% das cânulas estavam localizadas no ramo da SMA. E nenhum rato tinha sinais de isquemia intestinal ou hemorragia intraabdominal.
Uma angiografia foi obtida em cinco ratos injetando meio de contraste iodoado na cânula mesentérica. O círculo arterial mesenérico, particularmente o SMA e seus principais ramos foram observados sem contraste de meio de propagação no abdômen, confirmando que a cânula estava bem colocada e fixada ao ramo da SMA. Patente, uma desolação meticulosa do ramo para canonizar a ligadura do vaso a jusante passando a sutura sob o vaso e escolhendo a posição mais adequada para perfurar e inserir a cânula são os aspectos mais importantes deste protocolo.
Erros são incorretíveis.
