La canulación de la arteria mesentérica superior en la rata es difícil y no se usa a menudo como modelo experimental. Esta técnica permite realizar una canulación funcional y abre un campo de experimentación con efectos de primer paso de fármacos intraarteriales. Este método evita el sangrado y la trombosis al tiempo que consiente la canulación de la arteria mesentérica superior.
Y permitir la infusión a largo plazo de medicamentos en un animal relativamente libre que puede comer y moverse. La investigación farmacológica sobre medicamentos activos en el intestino puede beneficiarse enormemente de esta técnica. No hay alternativa para estudiar el efecto de un solo paso directo de la droga.
Comience cortando la cánula más grande. Luego corte la cánula más pequeña e insértela un centímetro en la cánula más grande. Fije las dos cánulas junto con pegamento de cianoacrilato evitando la oclusión de la luz.
Después, conecte la extremidad libre de la cánula más grande a un adaptador luer stub montado en una jeringa de un mililitro llena de solución salina. Afila la punta libre de la cánula más pequeña con tijeras para facilitar la inserción del catéter en la rama de la arteria mesentérica superior. Compruebe la permeabilidad de la cánula enjuagando con solución salina.
Afeitar el pelaje de las regiones quirúrgicas de la rata anestesiada, incluido el abdomen para la rama de la arteria mesentérica superior o canulación de AME, y la parte posterior del cuello para la salida de la cánula. Limpie las regiones quirúrgicas asépticamente. Y coloque al animal en posición supina inmovilizando las cuatro extremidades.
Use una cuchilla de bisturí para abrir la pared abdominal con una incisión recta de tres centímetros en la línea media de la región meso gástrica a través de todos los planos abdominales hasta el peritoneo. Coloque las gasas empapadas con solución salina alrededor de la incisión de laparotomía, usando suturas para mantener abierta la incisión quirúrgica. Use hisopos de algodón para identificar y exponer el intestino delgado, y extraiga el mesenterio del corte de laparotomía y colóquelo hacia abajo sobre las gasas.
Identifique la AME sintiendo pulsación. Usando hisopos de algodón, separe la grasa mesentérica y descubra la AME y dos o tres de sus ramas proximales. Elija una rama proximal de la AME que sea lo suficientemente grande como para permitir las maniobras quirúrgicas de canulación.
Ata esta rama de tres a cuatro centímetros aguas abajo de su origen para permitir su expansión manteniendo los extremos de sutura el tiempo suficiente para ser manipulados más tarde. Coloque un soporte rígido debajo de la rama de la AME y sostenga la extremidad de la cánula más pequeña usando fórceps y luego tire de los extremos de la sutura con la otra mano para tensar el vaso y facilitar la entrada del catéter. Sostenga la punta de la cánula en un ángulo de 20 grados desde el plano del vaso en la dirección opuesta al flujo sanguíneo.
Luego presione ligeramente la punta para penetrar la pared de la arteria e inserte la cánula. Continuar la inserción de la cánula durante un centímetro en la rama arterial cercana al origen de la AME. Fije la cánula a la arteria con un nudo quirúrgico y verifique su correcto funcionamiento enjuagando un mililitro de solución salina estéril o mediante una muestra de sangre.
Haga una incisión de un centímetro en la región posterior del cuello y acomode una válvula esférica. Luego pase la cánula desde el acceso de la laparotomía a la válvula colocada en el cuello a través de los tejidos subcutáneos y cierre la extremidad distal de la cánula con un tapón de catéter para evitar la entrada de aire. Reemplace la pequeña válvula en la cavidad abdominal y cierre la pared abdominal.
Luego asegure la válvula a la siguiente piel con puntos de sutura. Viste a la rata con una chaqueta para proteger la válvula del botón. Proteja la parte expuesta de la cánula con una varilla de acero durante la infusión y asegúrela a la válvula.
Conecte la extremidad distal de la cánula a una bomba elastomérica llena de 50 mililitros de solución salina estéril y proceda con la infusión durante 24 horas. Después de la infusión, desmonte el sistema de infusión externo del animal retirando la bomba, la camisa, la varilla de acero y la válvula de la rata. Cierre y corte la cánula a medida que sale del cuello, dejando la extremidad debajo de la piel del cuello después de la sutura de la herida.
En este estudio, 15 ratas fueron sometidas a este procedimiento y la ingesta diaria promedio de alimentos y agua aumentó progresivamente hasta lo normal después de tres días. El aumento de peso también fue regular y aumentó gradualmente hasta el final del período de observación. Después de 24 horas, había residuos de solución salina en solo dos bombas de globos, mientras que las otras 13 estaban completamente vacías.
Además, después del período de infusión, 12 cánulas seguían siendo funcionales tanto para la toma de muestras de sangre como para la infusión salina, mientras que tres cánulas ya no eran patentes. En la necropsia, el 100% de las cánulas estaban ubicadas en la rama SMA. Y ninguna rata tenía signos de isquemia intestinal o sangrado intraabdominal.
Se obtuvo una angiografía en cinco ratas inyectando medio de contraste yodonado en la cánula mesentérica. El círculo arterial mesentérico, particularmente la AME y sus ramas principales se observaron sin medio de contraste que se extendía en el abdomen, lo que confirma que la cánula estaba bien colocada y fijada a la rama de la AME. Patente, una desolación meticulosa de la rama para canular la ligadura del vaso aguas abajo pasando la sutura por debajo del vaso y eligiendo la posición más adecuada para perforar e insertar la cánula son los aspectos más importantes de este protocolo.
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