Наше исследование относилось к области расстройств, связанных с употреблением алкоголя. В данном исследовании освещается методология, обычно используемая в созданной модели Alco зависимости мыши. Эта модель представляет собой хронический прерывистый пар этанола в паре с парадигмой выбора двух бутылок.
Парадигма выбора двух бутылок CIE. Автоматизированное оборудование для выбора двух бутылок позволяет отслеживать поведение мыши при употреблении алкоголя, записывая частоту суперприкосновений. Это позволяет нам получать дополнительную информацию, выходящую за рамки потребляемого объема, например, время выпивки в течение сеанса выпивки.
В доклинических исследованиях расстройства, связанного с употреблением алкоголя, часто используются такие подходы, как визуализация всего мозга, химиогенетика и оптогенетика с различными вирусными трансгенетическими мышами, для продвижения исследований в этой области. Также используются другие подходы, такие как вычислительное моделирование. Модель CIE с выбором двух бутылок для лечения алкогольной зависимости была разработана в течение многих лет.
Тем не менее, мы надеемся сделать принятие этого подхода более доступным для более широкого исследовательского сообщества. Сравните с другими методами, используемыми для изучения расстройства, связанного с употреблением алкоголя. Выбор двух бутылок и парадигма CIE имеют ряд преимуществ, которые увеличивают трансляционную значимость, такие как индукция значительного абстинентного синдрома и развитие эскалации потребления алкоголя.
Этот подход идеально подходит для изучения соответствующих нейробиологических изменений, вызванных алкогольной зависимостью. Чтобы начать заселение, переместите мышей в их индивидуальные клетки для питья за 30 минут до выключения света. Запишите объем каждой бутылки для питья, а затем дайте мышам напиться в течение двух часов.
Записывайте объемы бутылок после периода питья. Теперь подвергните мышей по крайней мере двухнедельному базовому употреблению двух бутылок, чтобы установить стабильное потребление этанола. Протестируйте мышей, дав им бутылку с водой и вторую бутылку, содержащую 15% этанола.
Записывайте объем каждой бутылки до и после двухчасового периода питья. Как только мыши достигнут стабильного базового уровня потребления этанола, разделите их на две группы в зависимости от их потребления и верните в домашнюю клетку. Внутрибрюшинно вводите мышам раствор этанола-пиразола.
Вводите всем воздушным регуляторам и другим группам одинаковую дозу пиразола, смешанную с физиологическим раствором. После инъекций поместите мышей с контролем подачи воздуха в их домашние клетки, а клетки CIE поместите внутрь испарительной камеры. Заприте дверцы и установите насос на соответствующий уровень пара.
Затем установите время выполнения эксперимента и нажмите кнопку «Пуск» на экране управления испарительной камерой CIE за 30 минут до выключения паровой системы. Определите концентрацию этанола в крови мышей. После сбора крови верните мышей к тестированию с выбором двух флаконов через неделю после CIE.
Центрифугируйте образцы крови при 208 G в течение 1,0 минут при четырех градусах Цельсия, чтобы отделить плазму. Используйте анализатор уровня кислорода для определения концентрации этанола в крови. Первоначальное исходное потребление этанола в течение трехнедельного периода стабилизировалось на уровне 2,00 плюс-минус 0,21 грамма на килограмм до CIE.
Апостериорный тест Бонферрони показал, что мыши CIE значительно увеличили потребление этанола на шестой неделе после пара по сравнению с их исходным объемом питья. Мыши CIE потребляли значительно больше этанола, чем независимые мыши при PV6. Апостериорный тест Бонферрони также показал, что при PV6 мыши, зависимые от этанола, потребляли значительно больше этанола по сравнению с их собственными исходными и независимыми мышами.
Проанализированные концентрации этанола в крови в группе CIE показали средненедельный показатель 173,12 мг на децилитр.
