Обнаружение двухцепочечных разрывов ДНК в ооцитах мышей

Наше исследование направлено на то, чтобы понять, как регулируется клеточный цикл в ооцитах млекопитающих и в преимплантационных эмбрионах. Ключевым аспектом нашего исследования является изучение способности к репарации и реакции на повреждение ДНК в различных состояниях созревания в ооцитах, а также в преимплантационных эмбрионах. Нас особенно интересует понимание того, как реагируют контрольные точки и какие механизмы репарации возникают после потенциального повреждения ДНК.

Наша лаборатория была первой, кто механически исследовал реакцию на повреждение ДНК в ооцитах млекопитающих. Показано отсутствие контрольной точки повреждения ДНК профазы G2 в ооцитах млекопитающих. Кроме того, мы отметили важность контрольной точки узла шпинделя для установления метафазной остановки после повреждения.

С помощью этого протокола можно с высокой точностью обнаруживать двухцепочечные разрывы ДНК и определять, есть ли у ооцитов повреждения ДНК и восстанавливается ли повреждение ДНК. Этот протокол предполагает использование иммунофлюоресценции, которая позволяет выявить точные места повреждения ДНК.