Detección de roturas de ADN bicatenario en ovocitos de ratón

Nuestra investigación tiene como objetivo comprender cómo se regula el ciclo celular en ovocitos de mamíferos y en embriones preimplantacionales. Un aspecto clave de nuestra investigación consiste en examinar la capacidad de reparación y la respuesta al daño del ADN en diferentes estados de maduración en ovocitos y también en embriones preimplantacionales. Estamos particularmente interesados en comprender cómo responden los puntos de control y qué mecanismos de reparación se establecen después de un posible daño en el ADN.

Nuestro laboratorio fue el primero en examinar mecánicamente la respuesta al daño del ADN en ovocitos de mamíferos. Hemos demostrado la ausencia del punto de control de daño en el ADN de la profase G2 en ovocitos de mamíferos. Y observamos la importancia del punto de control del ensamblaje del husillo para establecer la detención de la metafase después del daño.

Mediante el uso de este protocolo, es posible detectar roturas de doble cadena de ADN con precisión y determinar si los ovocitos tienen daño en el ADN y si el daño en el ADN se está reparendo. Este protocolo implica el uso de inmunofluorescencia que nos permite identificar los sitios exactos de daño al ADN.