Высокопроизводительная скрининговая оценка генерации активных форм кислорода (АФК) с использованием флуоресцентного красителя дигидроэтидия (ДГЭ)

Наша лаборатория изучает влияние загрязнителей окружающей среды, таких как тяжелые металлы, на функцию печени и заболевания, связанные с образованием активных форм кислорода. Этот протокол направлен на количественное измерение уровней АФК в клетках с помощью флуоресцентного зонда дигидроэтидия. В этом протоколе используется скрининговая платформа с высоким содержанием для количественного измерения внутриклеточных уровней видов АФК в гепатоцеллюлярных линиях.

Точное измерение уровня межклеточных АФК имеет решающее значение в высокопроизводительных токсикологических исследованиях, что является ключевой областью интересов нашей лаборатории. Флуоресценция DHE является высокоспецифичным методом измерения общих уровней АФК, особенно нацеленным на супероксидный радикал, что дает ему значительное преимущество перед другими широко используемыми флуоресцентными зондами АФК. Кроме того, этот протокол предлагает уникальную возможность измерения общего уровня сотовых АФК на платформе с высокой пропускной способностью.

Наш протокол является надежным и воспроизводимым выбором для характеристики внутриклеточной общей продукции АФК. Высокопроизводительные подходы к измерению уровней АФК полезны в различных исследованиях, таких как токсикология, скрининг лекарств и биология рака, которые будут в центре нашего внимания в будущем.