Valutazione dello screening ad alto rendimento della generazione di specie reattive dell'ossigeno (ROS) utilizzando il colorante a fluorescenza diidroetidio (DHE)

Il nostro laboratorio studia l'impatto degli inquinanti ambientali, come i metalli pesanti, sulla funzionalità epatica e sulle malattie legate alla produzione di specie reattive dell'ossigeno. Questo protocollo mira a misurare quantitativamente i livelli di ROS nelle cellule utilizzando una sonda a fluorescenza di diidroetidio. Questo protocollo utilizza una piattaforma di screening ad alto contenuto per misurare quantitativamente i livelli intracellulari di specie ROS nelle linee epatocellulari.

Misurare accuratamente il livello di ROS intercellulare è di fondamentale importanza nello studio tossicologico ad alto rendimento, che è un'area chiave di interesse nel nostro laboratorio. La fluorescenza DHE è un metodo altamente specifico per misurare i livelli totali di ROS, in particolare mirando al radicale superossido, gli conferisce un vantaggio significativo rispetto ad altre sonde di fluorescenza ROS comunemente usate. Inoltre, questo protocollo offre la capacità unica di misurare il livello totale di ROS cellulare in una piattaforma ad alto rendimento.

Il nostro protocollo è una scelta robusta e riproducibile per caratterizzare la produzione intracellulare di ROS totali. Gli approcci ad alto rendimento per misurare i livelli di ROS sono utili in una varietà di studi, come la tossicologia, lo screening dei farmaci e la biologia del cancro, che saranno il nostro obiettivo in futuro.