Предметом нашего исследования является кишечный иммунитет. Мы пытаемся проиллюстрировать патофизиологию и механизм повреждений POI для разработки новых методов лечения. Одна из задач состоит в том, чтобы создать согласованные и воспроизводимые экспериментальные модели POI у мышей.
Это включает в себя контроль переменных, таких как хирургические методы и оценка протоколов ухода за животными, чтобы свести к минимуму вариабельность между экспериментальными группами. Еще одной проблемой является иллюстрация основных патофизиологических механизмов POI у мышей. Наш протокол направлен на создание воспроизводимой модели с минимальными вариациями для изучения патофизиологии POI и оценки новых противовоспалительных стратегий.
Наша цель состоит в том, чтобы преодолеть разрыв между доклиническими результатами на мышиных моделях и тем, что они имеют клиническую значимость у людей, тем самым увеличивая потенциал экспериментальных результатов для эффективного лечения POI. Для начала поместите мышь под наркозом на операционную платформу. Используйте электрическую бритву для удаления волос с живота.
Затем с помощью ватного тампона, смоченного солевым раствором, сотрите все выпавшие волосы на животе. Полностью вытяните конечности, чтобы обнажить живот, и расположите голову мыши, чтобы обеспечить чистоту дыхательных путей. Затем с помощью ватного тампона, смоченного в 75% спирте, дважды продезинфицируйте кожу хирургической области.
После этого с помощью сухой стерильной медицинской марли удаляют излишки спирта из области живота. Далее сделайте разрез через кожу. С помощью пинцета приподнимите прямую мышцу живота в середине живота и сделайте небольшой разрез по срединной линии.
Убедитесь, что верхний край разреза находится на расстоянии от шести до восьми миллиметров от мечевидного отростка грудины, а нижний край — от шести до восьми миллиметров от наружных половых органов. Затем положите марлю, предварительно смоченную обычным физиологическим раствором, с обеих сторон от разреза на животе. Зафиксируйте марлю с помощью кровоостанавливающих щипцов на верхнем и нижнем краях разреза, чтобы обнажить его.
После правильной фиксации марли аккуратно надавите на обе стороны брюшной стенки двумя ватными палочками, смоченными солевым раствором. Затем выдавите небольшое количество кишечной трубки через разрез и поместите его на марлю, чтобы обнажить его. Найдите слепую кишку.
И выньте кишечник смоченными в физлевом растворе ватными тампонами за два сантиметра до желудка, чтобы не задеть поджелудочную железу. Протяните кишечник от проксимального конца панкреатодуоденальной связки до дистального конца илеоцекальной области. Затем надавливайте последовательно вдоль всей тонкой кишки от проксимального к дистальному в течение пяти минут, пока не появятся небольшие кровоточащие пятна.
После этого с помощью предварительно смоченных ватных тампонов аккуратно поместите все тонкие кишки обратно в брюшную полость. Затем аккуратно массируйте брюшную полость через марлю и брюшную стенку в течение трех-пяти секунд, чтобы обеспечить нормальное положение кишечника и предотвратить послеоперационную непроходимость или перекрут. Далее введите в брюшную полость 100 микролитров физиологического раствора, чтобы восполнить потерянную жидкость и смазать ткани брюшной полости.
Затем снимите марлю и выполните двухслойное закрытие на разрезе брюшной полости. После наложения швов аккуратно протрите область возле разреза брюшной полости сухой стерильной медицинской марлей, чтобы она оставалась сухой и чистой от крови, тканевой жидкости или обычного физиологического раствора. Нанесите небольшое количество медицинского клея для разреза на разрез и вокруг него, чтобы избежать расслоения после операции.
Как только клей высохнет, положите мышь на одеяло с подогревом при температуре 37,5 градусов Цельсия и наблюдайте за мышью, пока она полностью не восстановится.
