Lo scopo del nostro studio è l'immunità intestinale. Stiamo cercando di illustrare la fisiopatologia e il meccanismo delle lesioni da POI per lo sviluppo di nuove terapie. Una sfida consiste nello stabilire modelli sperimentali coerenti e riproducibili di POI nel topo.
Ciò comporta il controllo di variabili come le tecniche chirurgiche e la valutazione dei protocolli nella cura degli animali per ridurre al minimo la variabilità tra i gruppi sperimentali. Un'altra sfida consiste nell'illustrare i meccanismi fisiopatologici sottostanti dei POI nel topo. Il nostro protocollo mira a stabilire un modello riproducibile con variazioni minime per lo studio della fisiopatologia dei POI e la valutazione di nuove strategie antinfiammatorie.
Il nostro obiettivo è colmare il divario tra i risultati preclinici nei modelli murini e l'esistenza di rilevanza clinica nell'uomo, aumentando così il potenziale dei risultati sperimentali per tradursi in trattamenti efficaci per i POI. Per iniziare, posizionare il topo anestetizzato sulla piattaforma chirurgica. Usa un rasoio elettrico per rimuovere i peli dall'addome.
Quindi usa un batuffolo di cotone inumidito con soluzione salina per rimuovere tutti i peli sciolti sull'addome. Estendi completamente gli arti per esporre l'addome e posiziona la testa del topo per mantenere libere le vie aeree. Quindi, utilizzando un batuffolo di cotone imbevuto di alcol al 75%, disinfettare due volte la pelle dell'area chirurgica.
Successivamente, utilizzare una garza medica sterile asciutta per rimuovere l'alcol in eccesso dall'addome. Quindi, fai un'incisione attraverso la pelle. Usando una pinzetta, solleva il muscolo retto dell'addome al centro dell'addome e fai una piccola incisione lungo la linea mediana.
Assicurarsi che il margine superiore dell'incisione sia da sei a otto millimetri dal processo xifoideo dello sterno e il margine inferiore sia da sei a otto millimetri dai genitali esterni. Quindi posizionare una garza preinumidita con soluzione fisiologica normale su entrambi i lati dell'incisione addominale. Fissare la garza con una pinza emostatica sui bordi superiore e inferiore dell'incisione per esporla.
Dopo aver fissato correttamente la garza, premere delicatamente contro entrambi i lati della parete addominale con due tamponi di cotone inumiditi con soluzione salina. Quindi spremere una piccola quantità di tubo intestinale attraverso l'incisione e posizionarlo sulla garza per esporlo. Individua il cieco.
E togli l'intestino con tamponi di cotone inumiditi con soluzione salina fino a due centimetri prima dello stomaco per evitare di toccare il pancreas. Estendere l'intestino dall'estremità prossimale del legamento pancreaticoduodenale all'estremità distale della regione ileocecale. Quindi applicare una pressione costante lungo l'intero intestino tenue dal prossimale al distale per cinque minuti fino a quando non emergono piccole macchie sanguinanti.
Successivamente, utilizzare tamponi di cotone pre-inumiditi per riposizionare con cura tutto l'intestino tenue nella cavità addominale. Quindi massaggiare delicatamente l'addome sulla garza e sulla parete addominale per tre-cinque secondi per garantire la normale posizione intestinale e prevenire l'ostruzione o la torsione post-operatoria. Successivamente, iniettare 100 microlitri di soluzione salina nella cavità addominale per sostituire i liquidi persi e lubrificare il tessuto addominale.
Quindi rimuovere la garza ed eseguire una chiusura a due strati in corrispondenza dell'incisione addominale. Dopo la sutura, strofinare delicatamente l'area vicino all'incisione addominale con una garza medica sterile asciutta per mantenerla asciutta e pulita da sangue, liquido tissutale o soluzione fisiologica. Applicare una piccola quantità di adesivo per incisioni mediche su e intorno all'incisione per evitare spaccature dopo l'intervento chirurgico.
Una volta che l'adesivo si è asciugato, posizionare il mouse su una coperta riscaldata a 37,5 gradi Celsius e monitorare il mouse fino a quando non si riprende completamente.
