El ámbito de nuestro estudio es la inmunidad intestinal. Estamos tratando de ilustrar la fisiopatología y el mecanismo de las lesiones POI para el desarrollo de nuevas terapias. Uno de los retos es establecer modelos experimentales consistentes y reproducibles de POI en ratones.
Esto implica el control de variables como las técnicas quirúrgicas y la evaluación de protocolos en el cuidado de los animales para minimizar la variabilidad entre los grupos experimentales. Otro desafío es ilustrar los mecanismos fisiopatológicos subyacentes de la POI en ratones. Nuestro protocolo tiene como objetivo establecer un modelo reproducible con una variación mínima para estudiar la fisiopatología de la IOP y evaluar nuevas estrategias antiinflamatorias.
Nuestro objetivo es cerrar la brecha entre los hallazgos preclínicos en modelos de ratón y que haya relevancia clínica en humanos, mejorando así el potencial de los resultados experimentales para traducirse en tratamientos efectivos para la POI. Para comenzar, coloque el ratón anestesiado en la plataforma quirúrgica. Usa una afeitadora eléctrica para eliminar el vello del abdomen.
Luego, use una bola de algodón humedecida con solución salina para limpiar todo el vello suelto del abdomen. Extienda completamente las extremidades para exponer el abdomen y coloque la cabeza del ratón para mantener las vías respiratorias despejadas. Luego, con una bola de algodón empapada en alcohol al 75%, desinfecte la piel del área quirúrgica dos veces.
Después de eso, use una gasa médica seca y estéril para eliminar el exceso de alcohol del abdomen. A continuación, haga una incisión a través de la piel. Con unas pinzas, levante el músculo recto abdominal en el centro del abdomen y haga una pequeña incisión a lo largo de la línea mediana.
Asegúrese de que el margen superior de la incisión esté de seis a ocho milímetros de la apófisis xifoides del esternón, y que el margen inferior esté de seis a ocho milímetros de los genitales externos. A continuación, coloque una gasa prehumedecida con solución salina normal a ambos lados de la incisión abdominal. Fije la gasa con pinzas hemostáticas en los bordes superior e inferior de la incisión para exponerla.
Después de fijar correctamente la gasa, presione suavemente contra ambos lados de la pared abdominal con dos bastoncillos de algodón humedecidos con solución salina. A continuación, exprima una pequeña cantidad del tubo intestinal a través de la incisión y colóquela sobre la gasa para exponerla. Localiza el ciego.
Y sacar el intestino con bastoncillos de algodón humedecidos con solución salina hasta dos centímetros antes del estómago para evitar tocar el páncreas. Extender el intestino desde el extremo proximal del ligamento pancreaticoduodenal hasta el extremo distal de la región ileocecal. A continuación, aplique una presión constante a lo largo de todo el intestino delgado desde el proximal hasta el distal durante cinco minutos hasta que aparezcan pequeños puntos sangrantes.
Después de eso, use hisopos de algodón prehumedecidos para colocar con cuidado todos los intestinos delgados nuevamente en la cavidad abdominal. A continuación, masajee suavemente el abdomen a través de la gasa y la pared abdominal durante tres a cinco segundos para asegurar la posición normal del intestino y evitar la obstrucción o torsión postoperatoria. A continuación, inyecte 100 microlitros de solución salina en la cavidad abdominal para reemplazar los líquidos perdidos y lubricar el tejido abdominal.
A continuación, retire la gasa y realice un cierre de dos capas en la incisión abdominal. Después de suturar, limpie suavemente el área cerca de la incisión abdominal con una gasa médica estéril y seca para mantenerla seca y limpia de sangre, líquido tisular o solución salina normal. Aplique una pequeña cantidad de adhesivo médico para incisiones dentro y alrededor de la incisión para evitar que se parta después de la cirugía.
Una vez que el adhesivo se haya secado, coloque el ratón sobre una manta térmica a 37,5 grados centígrados y controle el ratón hasta que se recupere por completo.
