Наше исследование направлено на количественную оценку плотности легочных микрососудов в различных дольках легких мышей с учетом анатомических различий и возрастных изменений с использованием окрашивания изолектином B4 и анализа ImageJ. Ключевые вопросы, на которые мы пытаемся ответить, заключаются в том, как точно количественно определить плотность микрососудов в различных дольках легких и какие изменения в плотности микрососудов в дольках происходят с возрастом. Последние достижения в исследованиях легочных микрососудов, включая усовершенствованные методы очистки и фиксации тканей, передовую визуализацию и программные инструменты для точной количественной оценки.
Эти разработки расширяют наше понимание микрососудистых изменений при старении и связанных с ним заболеваниях, таких как астма и COVID-19, предлагая информацию о потенциальных методах лечения. Основными проблемами являются точное локализование поражений, правильный срез легочных тканей, смягчение повреждений, связанных с фиксаторами, и отсутствие специфических маркеров для эндотелиальных клеток легких. Традиционные методы часто упускают из виду различия внутренней формы и васкуляризации в разных долях легких.
Наш протокол устраняет этот пробел, обеспечивая комплексный подход к секционированию долей легких и количественной оценке микрососудистой плотности с использованием изолектина перед окрашиванием. Сочетание окрашивания IB4 с бесплатным программным обеспечением ImageJ для расширенного анализа микрососудистой плотности обеспечивает точные и полезные результаты. Клеточные и молекулярные механизмы, с помощью которых легочные микрососудистые поражения участвуют в прогрессировании заболеваний, связанных с легкими, и разрабатывают новые стратегии или мишени для спасения легочной микрососудистой функции, способствуя восстановлению легких и вызывая функциональное восстановление.