Nossa pesquisa visa quantificar a densidade microvascular pulmonar em vários lóbulos pulmonares de camundongos, considerando diferenças anatômicas e alterações relacionadas à idade, usando coloração com isolectina B4 e análise ImageJ. As principais questões que estamos tentando abordar são como quantificar a densidade microvascular em diferentes lóbulos pulmonares com precisão e quais mudanças ocorrem na densidade microvascular nos lóbulos com o envelhecimento. Avanços recentes na pesquisa microvascular pulmonar, incluindo técnicas aprimoradas de limpeza e fixação de tecidos, imagens avançadas e ferramentas de software para quantificação precisa.
Esses desenvolvimentos aprimoram nossa compreensão das alterações microvasculares no envelhecimento e doenças relacionadas, como asma e COVID-19, oferecendo insights para possíveis terapias. Os principais desafios são localizar com precisão as lesões, seccionar adequadamente os tecidos pulmonares, mitigar os danos teciduais relacionados ao fixador e a falta de marcadores específicos para as células endoteliais pulmonares. Os métodos tradicionais muitas vezes ignoram as variações dentro da forma e vascularização em diferentes lobos pulmonares.
Nosso protocolo aborda a lacuna, fornecendo uma abordagem abrangente para seccionar os lobos pulmonares e quantificar a densidade microvascular usando isolectina antes da coloração. A combinação da coloração IB4 com o software gratuito ImageJ para análise avançada da densidade microvascular garante resultados precisos e úteis. Os mecanismos celulares e moleculares pelos quais as lesões microvasculares pulmonares participam da progressão de doenças relacionadas ao pulmão e desenvolvem novas estratégias ou alvos para resgatar a função microvascular pulmonar para promover o reparo pulmonar e induzir a recuperação funcional.