Оптимизированный протокол для кишечных булочек и иммунофлуоресцентного окрашивания тканей, залитых парафином

Наше исследование направлено на понимание того, как функционирует желудочно-кишечный тракт и как на эти функции влияют различные патологические состояния. Мы заинтересованы в изучении реакции различных эпителиальных клеток кишечника на различные состояния, такие как инфекция и воспаление, ожирение и генетические мутации. Важность специфичности антител становится все более очевидной.

Тем не менее, влияние фиксации, сохранения тканей и стандартизированных методов окрашивания недооценивается в этой области. Последовательное и надежное иммунофлуоресцентное окрашивание в значительной степени зависит от качества сохранения, обработки и ориентации тканей, которые происходят на начальных этапах сбора данных. Этот протокол представляет собой простой и эффективный метод исследования различных вопросов, касающихся биологии и физиологии кишечных клеток.

В настоящее время наша лаборатория использует эти протоколы, чтобы лучше понять роль различных типов кишечных клеток в поддержании гомеостаза и ограничении воспаления. Этот протокол позволяет детально визуализировать все области кишечника мыши в одном блоке, залитом парафином. Это позволяет сэкономить на парафине и услугах по заделке парафина, времени, необходимом для разделки, и реагентах.

Он также хорошо воспроизводим с использованием различных антител.