Laparoskopische Eizellentnahme und Kryokonservierung während der Vaginoplastik zur Behandlung des Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser-Syndroms

Zusammenfassung

Ein engagiertes Team kann Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser-Patientinnen die Möglichkeit bieten, eine kontrollierte Eierstockstimulation und Kryokonservierung der Eizellen zum Zeitpunkt der laparoskopischen Vaginoplastik durchzuführen.

Zusammenfassung

Bei Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser-Syndrom (MRKHS)-Patientinnen, die für eine laparoskopische Vaginoplastik vorgesehen sind und den Wunsch nach biologischer Mutterschaft haben, schlagen wir vor, dass eine gleichzeitige laparoskopische Eizellentnahme zur Kryokonservierung durchgeführt wird. Die Eizellentnahme wird zu Beginn der Laparoskopie durchgeführt. Rechts und links sind 5 mm Trokare positioniert, durch die eine 17 G Eizellenaspirationsnadel zur Punktion des rechten bzw. linken Eierstocks verwendet wird. Um die Freilegung der Follikel zu erleichtern, werden die Eierstöcke mobilisiert und mit laparoskopischen Pinzetten gehalten.

Wenn mehrere Follikel nahe beieinander abgesaugt werden, wird die Nadelspitze im Eierstock verbleiben, um die Häufigkeit zu reduzieren, mit der die Eierstockrinde transfixiert wird, und aufgrund des inhärenten Blutungsrisikos. Die nachfolgenden Schritte sind im Vergleich zur laparoskopisch modifizierten Davydov-Technik für die Vaginoplastik unverändert. Vor der Operation wird eine kontrollierte ovarielle Stimulation mit einem Gonadotropin-Hormon-Releasing-Hormon (Gn-RH) -Antagonistenprotokoll durchgeführt, und das begleitende Verfahren der Eizellentnahme und Vaginoplastik wird 36 Stunden nach dem endgültigen Follikelreifungsauslöser geplant. Follikelflüssigkeit wird in den gleichen 10 ml sterilen Röhrchen gesammelt, die während der transvaginalen Eizellentnahme verwendet werden, und in einem Wärmeblock (37 °C) in das Labor für assistierte Reproduktion überführt, wo reife (Metaphase-II) Eizellen vitrifiziert werden.

In diesem Fall wurde eine Reihe von 23 Frauen mit MRKH, Eizellen erfolgreich entnommen und bei allen Patientinnen kryokonserviert; Die Vaginoplastik wurde anschließend ohne Modifikationen durchgeführt, und die stationäre und ambulante postoperative Versorgung (Tag der Blasenkatheterentfernung, Tag der Krankenhausentlassung, Dilatatoranwendung und Komfort bei der Nachsorge) blieb davon unberührt. Eine postoperative Komplikation trat bei einem Patienten auf (Fieberentwicklung am 5. Tag nach der Operation und intraperitonealer Flüssigkeitsnachweis im transabdominalen Ultraschall) und klang nach konservativer Behandlung ab. Anstatt eine chirurgische Vaginoplastik durchzuführen und die Eizellentnahme bei MRKH-Patientinnen zu verzögern, kombiniert dieser Ansatz beide Verfahren in einer einzigen Laparoskopie, wodurch chirurgische Invasivität und anästhetische Risiken minimiert werden.

Einleitung

Mit einer Inzidenz von etwa 1 von 4-10.000 Frauen ist MRKHS die Ursache für 15% der primären Amenorrhoe-Fälle. MRKHS ist gekennzeichnet durch das angeborene Fehlen des oberen Segments der Vagina und der Gebärmutter, während Harnwegs- und Skelettanomalien variabel assoziiert sind. Genauer gesagt ist normalerweise ein Vaginalgewölbe mit einer Tiefe von 1-2 cm vorhanden, und zwei rudimentale Gebärmutterhörner können gefunden werden¹.

In der Vergangenheit bestand das primäre medizinische Interesse bei MRKHS darin, normalen Geschlechtsverkehr zu ermöglichen, was in der Regel den Aufbau einer Neovagina durch nicht-chirurgische oder chirurgische Ansätze erfordert². Fortschritte in der Reproduktionsmedizin ermöglichen jedoch derzeit die genetische Mutterschaft bei MRKHS-Patienten, entweder durch Leihmutterschaft ^3,4 oder - in jüngerer Zeit - Gebärmuttertransplantation⁵. Während die Gebärmuttertransplantation noch ein experimentelles Verfahren ist, ist die Leihmutterschaft in vielen Ländern weltweit verfügbar⁶, und die berichteten geburtshilflichen und psychosozialen Ergebnisse sind mit denen der Standard-In-vitro-Fertilisation und der Eizellspende vergleichbar⁷.

Sowohl die Leihmutterschaft als auch die Gebärmuttertransplantation erfordern die Entnahme von Eizellen und die In-vitro-Fertilisation, aber es besteht kein Konsens darüber, wie die Eizellentnahme bei Patienten mit MRKHS durchzuführen ist. Ein transvaginaler Ansatz kann aufgrund unzureichender vaginaler Elastizität⁸ auch nach Vaginoplastik, atypischer Lage der Eierstöcke⁹ oder übermäßigem Abstand zwischen den Eierstöcken und der Vaginalmanschette ^4,10 nicht durchführbar sein. In diesen Fällen stellt die laparoskopische Eizellentnahme den optimalen Ansatz in Bezug auf den chirurgischen Zugang dar. Da sich die meisten MRKHS-Patientinnen derzeit einer laparoskopischen Neovaginoplastik unterziehen, empfehlen wir jedoch, zum Zeitpunkt der Operation für die Vaginoplastik¹¹ eine laparoskopische Eizellentnahme durchzuführen, gefolgt von der Kryokonservierung der Eizellen für die zukünftige Verwendung, wodurch die Invasivität minimiert und gleichzeitig die Behandlung der sexuellen und reproduktiven Funktion von MRKHS-Patientinnen kombiniert wird.

Demographische Daten von Patienten
Dreiundzwanzig MRKH-Patienten wurden bisher mit diesem Protokoll behandelt. Anamnestische, instrumentelle und Laborbefunde von Patienten sind in Tabelle 1 zusammengefasst. Sofern in Tabelle 1 nicht anders angegeben, wurden keine assoziierten angeborenen Anomalien gefunden.

Protokoll

Die lokale Ethikkommission des tertiären Überweisungszentrums für MRKHS (IRCCS San Raffaele University Hospital, Mailand, Italien) wurde benachrichtigt und genehmigte das Protokoll vor seiner Umsetzung im Juli 2017. Alle Patientinnen oder Erziehungsberechtigten gaben eine unterzeichnete Einverständniserklärung für die laparoskopische Eizellentnahme und Kryokonservierung während der Vaginoplastik und für die Verwendung anonymisierter klinischer / Labordaten für wissenschaftliche Zwecke.

1. Teamzusammensetzung

1. Benennen Sie ein engagiertes Team, bestehend aus einem erfahrenen laparoskopischen Chirurgen, einem erfahrenen Vaginalchirurgen, einem Unfruchtbarkeitsexperten, einem engagierten Psychologen und einer engagierten Krankenschwester.
2. Unterstützen Sie den Patienten als Team während der gesamten Einrichtung und Durchführung des Verfahrens.

2. Diagnostische Abklärung und Beratung

1. Führen Sie eine transabdominale Becken- und Bauchsonographie am Patienten durch, um die Eierstöcke zu visualisieren und die Anzahl der Antralfollikel (AFC) zu schätzen. Bestimmen Sie die Blutspiegel des Anti-Müller-Hormons (AMH), um die Gonadotropin-Anfangsdosis für eine kontrollierte Stimulation der Eierstöcke zu optimieren. Durchführung serologischer Tests auf Infektionskrankheiten (HIV-Ab, HCV-Ab, HBV-Ab, RPR-TPHA) gemäß nationalen/lokalen Protokollen zur Kryokonservierung von Geweben/Gameten.
2. Beratung der Patientin über die sexuellen und reproduktiven Aspekte der MRKHS, einschließlich der nicht-chirurgischen und chirurgischen Vaginoplastik, die Kosten und Rechtsvorschriften im Zusammenhang mit der Leihmutterschaft, die Perspektive der Gebärmuttertransplantation im Rahmen eines experimentellen Programms, die verschiedenen Ansätze für die Eizellentnahme und die Durchführung der Kryokonservierung von Eizellen in Bezug auf Lebendgeburtenraten.
3. Bieten Sie der Patientin eine psychologische Untersuchung an, um sie während des Verfahrens zu unterstützen und die emotionale Stabilität und das Engagement und den Wunsch nach zukünftiger Mutterschaft zu beurteilen. Einholung einer unterschriebenen, informierten Einwilligung für die gleichzeitige laparoskopische Eizellentnahme, Gametenkryokonservierung und laparoskopische Vaginoplastik. Im Falle eines minderjährigen Patienten führen Sie die klinischen Bewertungen in Anwesenheit der Eltern durch, die auch die Einverständniserklärung des Angehörigen unterzeichnen.

3. Planung des chirurgischen Eingriffs und der kontrollierten Stimulation der Eierstöcke

1. Planen Sie das Verfahren der gleichzeitigen laparoskopischen Eizellentnahme, Gametenkryokonservierung und laparoskopischen Vaginoplastik unter Berücksichtigung der Verfügbarkeit des klinischen Teams (siehe oben) sowie der des Laborpersonals, das die Vitrifikation der Eizellen durchführt.
2. Beginnen Sie mit der kontrollierten Stimulation der Eierstöcke (COS) am Tag -14 ab dem Tag der Operation unter Berücksichtigung einer geplanten COS-Dauer von n = 12 Tagen und den 36 Stunden, die zwischen der Auslösung des Eisprungs und der Eizellentnahme und Vitrifikation erforderlich sind.
3. Falls COS eine andere Dauer als erwartet erfordert, planen Sie die Operation entsprechend.

4. Kontrollierte Stimulation der Eierstöcke: Anfangsdosis, Dosisanpassung und -überwachung, Auslösung der endgültigen Eizellreifung

1. Starten Sie COS in jeder Phase des Eierstockzyklus, wie es üblicherweise im Zusammenhang mit "zufälligen Start" -Protokollen zur Erhaltung der Fruchtbarkeit geschieht.
2. Wählen Sie die Anfangsdosis des follikelstimulierenden Hormons (FSH) / humanen menopausalen Gonadotropins (hMG) basierend auf AFC und AMH des Patienten und weisen Sie den Patienten an, die täglich selbst verabreichten subkutanen Injektionen fortzusetzen. Führen Sie anschließend individuelle Dosisanpassungen basierend auf der ovariellen Reaktion durch.
3. Überwachung der ovariellen Reaktion durch seriellen transabdominalen Ultraschall und gleichzeitige Messungen von E₂ und P (Tag 1, Tag 6, Tag 8, Tag 10 und Tag 12).
4. Auslösen der endgültigen Eizellreifung durch subkutane Verabreichung von 0,2 ml eines Gn-RH-Analogons (Triptorelin).

5. Klinisches Verfahren (Laparoskopie): Eizellentnahme

1. Positionieren Sie den Patienten in einer modifizierten dorsalen Lithotomieposition, die einen hervorragenden gleichzeitigen Zugang zu Bauch und Perineum ermöglicht. Induktion einer Vollnarkose und intravenöse Verabreichung von 2 g Cefazolin gemäß der routinemäßigen intraoperativen Antibiotikaprophylaxe. Positionieren Sie einen intravesikalen Foley-Katheter.
2. Stellen Sie ein Pneumoperitoneum mit einer peri-umbilical Veress-Nadel her, positionieren Sie einen 10-mm-Nabeltrokar zum Einführen des Laparoskops und zwei 5-mm-Trokare im rechten und linken oberen Quadranten. Verwenden Sie unter laparoskopischem Sehen eine 17 G Einzellumennadel, die mit einer Aspirationspumpe verbunden ist, wie sie üblicherweise für die transvaginale Entnahme verwendet wird, durch den rechten und linken Trokar zur Punktion des rechten bzw. linken Eierstocks.
3. Heben und halten Sie die Eierstöcke mit einer laparoskopischen Pinzette, um die Freilegung der Follikel zu erleichtern. Wenn Sie mehrere Follikel ansaugen, die nahe beieinander liegen, behalten Sie die Nadelspitze im Eierstock bei, um die Häufigkeit der Transfixierung der Eierstockrinde und das inhärente Blutungsrisiko zu reduzieren.

6. Klinisches Verfahren (Laparoskopie): Vaginoplastik

HINWEIS: Die Schritte der Vaginoplastik bleiben im Vergleich zur laparoskopisch modifizierten Technik des Davydov unverändert¹².

1. Sezieren Sie das Peritoneum, indem Sie den Peritonealstrang quer zwischen den beiden rudimentalen Uterushörnern anheben und schneiden und dann den Schnitt anterior, lateral und posterior verlängern.
2. Beginnen Sie eine Handtaschennaht aus synthetisch resorbierbarem Polydioxanon (PDS) 2-0-Monofilament in jedem Hemipelvis, aus dem mobilisierten Peritoneum über der Blase, mit aufeinanderfolgender Transfixion des runden Bandes, des Tubenisthmus, des uterovariellen Bandes und des lateralen Peritonealblattes. Dann schließen Sie in die beiden Nähte den lateralen Aspekt des Mesorektums und den vorderen Aspekt der rektalen Serosa unmittelbar unterhalb der rektosigmoidalen Verbindung ein.
3. Belichten Sie das vaginale Grübchen auf dem perinealen Zugang und führen Sie einen H-förmigen Schnitt durch und schaffen Sie einen neovaginalen Raum durch scharfe und stumpfe Dissektion des vesikorektalen Raumes. Ziehen Sie dann die präparierten Peritonealränder bis zum Rand des Vaginalvestibulums herunter. Position unterbrochene Nähte bei PDS 3-0 für die peritoneal-vestibuläre Anastomose. Zum Schluss legen Sie eine paraffinbeschichtete Gaze in die peritoneumbeschichtete Neovagina.

7. IVF-Labor: am Tag vor der Eizellentnahme

1. Bereiten Sie 2 bis 5 Rundbodenröhrchen mit 9 ml Quinn's Advantage Medium mit HEPES (ergänzt mit 5% humanem Serumalbumin [HSA]) entsprechend der Anzahl der erwarteten Follikel vor und inkubieren Sie sie über Nacht bei 37 °C.
2. Bereiten Sie ein oder zwei 4-Well-Schalen mit 0,5 ml/Vertiefung Befruchtungsmedium (ergänzt mit 5% HSA) vor, die mit 0,5 ml Mineralöl für die Embryokultur bedeckt sind, und inkubieren Sie es über Nacht bei 37 °C in kontrollierter Atmosphäre (6% CO₂, 5%_O2).
3. Bereiten Sie eine Schale mit 9 (30 μL) Tropfen Continuous Single Culture (CSCM) medium (ergänzt mit 10% Serumersatzpräparat [SSS]) vor, die mit 6 ml Mineralöl bedeckt sind. Über Nacht bei 37 °C in kontrollierter Atmosphäre (6% CO2, 5%_O2) inkubieren.

8. IVF-Labor: Eizellentnahme

1. Bereiten Sie eine Lösung von Quinn's Advantage Medium mit HEPES (ergänzt mit 5% HSA) mit Heparin in einer Endkonzentration von 10 IE / ml vor, in der follikuläre Aspirate gesammelt werden.
2. Ähnlich wie bei der routinemäßigen transvaginalen Eizellentnahme 13 die follikulären Aspirate in 10 ml Rundbodenröhrchen sammeln, in einem tragbaren Inkubator warm gehalten (37 °C) und sofort in das embryologische Labor transportiert, mit einer Transportzeit von ca.¹⁰ min.
3. Untersuchen Sie die Follikelflüssigkeit in einer vorgewärmten sterilen 90-mm-Petrischale, um Cumulus-Eizell-Komplexe (COC) zu identifizieren. Sobald ein COC erkannt wurde, spülen Sie es in einer zentralen Well-Schale, die mit 1 ml vorgewärmtem Quinn's Advantage Medium mit HEPES (ergänzt mit 5% HSA) gefüllt ist.
4. Wenn alle COCs gesammelt sind, legen Sie sie in die 4-Well-Schale, die das Befruchtungsmedium enthält, und beschriften Sie den Deckel und den Boden mit Daten zur Identität des Patienten.
5. Sie werden bei 37 °C in kontrollierter Atmosphäre (6% CO2, 5%_O2) inkubiert.
6. Stellen Sie sicher, dass eine doppelte Überprüfung des Verfahrens durch ein zweites Mitglied des Laborpersonals durchgeführt wird.

9. Eizelldenudation

1. Führen Sie die Entfernung von Kumulus- / Koronazellen innerhalb von 38 Stunden nach dem Ovulationsauslöser durch.
2. Bereiten Sie eine Lösung von Quinn's Advantage Medium mit HEPES (ergänzt mit 5% HSA) mit Hyaluronidase in einer Endkonzentration von 10 I.E./ml vor.
3. Bereiten Sie eine zentrale Wellschale mit 1 ml vorgewärmtem Quinn's Advantage Medium mit HEPES (ergänzt mit 5% HSA) mit Hyaluronidase und einer weiteren mit 1 ml vorgewärmtem HEPES-gepuffertem Medium (ergänzt mit 5% HSA) vor.
4. Beschriften Sie das Eizelldenudationsgeschirr mit Patientenidentifikationsdaten.
5. Legen Sie COCs in die zentrale Vertiefung, die das Enzym enthält, um die Cumuluszellen mit einer Pasteur-Pipette aus Glas zu dispergieren, und pipettieren Sie die Lösung mit den COCs vorsichtig bis zu 30 s lang auf und ab.
6. Bewegen Sie die Eizellen in die zweite zentrale Well-Schale, die nur HEPES-gepuffertes Medium enthält, und achten Sie darauf, eine minimale Menge des Enzyms zu verdrängen.
7. Entfernen Sie die restlichen Koronazellen mit entblößenden Pipetten mit abnehmendem Innendurchmesser (170-140 μm).
8. Beurteilen Sie das Stadium der Eizellreifung, wobei Metaphase-II-Eizellen (MII), die durch die Extrusion des ersten Polkörpers gekennzeichnet sind, von Metaphase-I-Eizellen (MI) und Keimbläschen (GV) getrennt werden.
9. Transfer der MII-Eizellen in eine IVF-Kultur 60 mm Petrischale mit neun (30 μL) Tropfen Continuous Single Culture (CSCM) Medium (ergänzt mit 10% Serumersatzergänzung [SSS]), die mit 6 ml Mineralöl bedeckt sind.
10. Sie werden bei 37 °C in kontrollierter Atmosphäre (6% CO2, 5%_O2) inkubiert.

10. Vitrifikation der Eizellen

1. Führen Sie die Vitrifikation von MII-Eizellen unmittelbar nach der Eizelldenudation gemäß dem vom Hersteller des Vitrifikationskits bereitgestellten Protokoll durch.
2. Auf Raumtemperatur (25-27 °C) bringen: die Gleichgewichtslösung (ES), die Vitrifikationslösung (VS) und die Waschlösung (WS), fast 30 min vor dem Eingriff.
   HINWEIS: Wie von den Herstellern berichtet, enthält ES 7,5% DMSO, 7,5% Ethylenglykol, 20% Dextran-Serumergänzung (DSS), Gentamicin in M-199 HEPES-gepuffertem Medium; VS enthält 15% DMSO, 15% Ethylenglykol, 0,5 M Saccharose, 20% DSS, Gentamicin in einem M-199 HEPES-gepufferten Medium und WS enthält 20% DSS, Gentamicin in einem M-199 HEPES-gepufferten Medium.
3. Verwenden Sie für ein Kryogerät Cryotop, das aus einem feinen Streifen transparenter Folie besteht, der an einem Kunststoffgriff befestigt ist.
4. Beschriften Sie die Kryogeräte mit dem Namen der Patientin, dem Geburtsdatum, der ID, dem Datum der Kryokonservierung und der Anzahl der Eizellen, die auf ein einzelnes Gerät geladen sind.
5. Beschriften Sie die Vitrifikationsschale mit dem Namen und der ID des Patienten.
6. Stellen Sie sicher, dass ein Zeugenbediener die korrekten Patientendaten auf den Kryogeräten und der Schüssel überprüft.
7. Füllen Sie eine Kühlbox bis oben mit frischem flüssigem Stickstoff und decken Sie sie bis zum Gebrauch ab, um die Dispersion und Verdunstung zu minimieren.
8. Verwenden Sie eine Stripperpipette mit einem Innendurchmesser von 170 μm, um eine Beschädigung der Eizellen während der Manipulation zu vermeiden.
9. Schütteln Sie jede Durchstechflasche mit ES, VS und WS vorsichtig, um den Inhalt vor Gebrauch zu mischen.
10. Bereiten Sie den Deckel einer 60-mm-Petrischale mit einem Tropfen 50 μL WS1 vor (Abbildung 1A).
11. Tropfen kurz vor Gebrauch platzieren, um die Verdunstung des Mediums zu begrenzen.
12. Nehmen Sie die Eizellschale aus dem Inkubator und übertragen Sie die MII-Eizellen (bis zu 3 gleichzeitig) mit minimalem Volumen des Mediums aus der Kulturschale in die 50 μL WS.
13. Geben Sie 50 μL Tropfen WS2, ES1 und ES2 in unmittelbarer Nähe ab und übertragen Sie Eizellen vom Tropfen WS1 in den Tropfen WS2 (Abbildung 1B).
14. Verschmelzen Sie den Tropfen von ES1 zu WS2 und warten Sie 2 Minuten auf das spontane Mischen beider Lösungen.
15. Verschmelzen Sie dann den Tropfen von ES2 mit den zuvor zusammengeführten Tropfen und lassen Sie ihn weitere 2 Minuten einwirken.
16. Zum Schluss einen neuen 100 μL Tropfen ES3 zu den zuvor zusammengeführten Tropfen verschmelzen und 1 weitere Minute einwirken lassen.
17. Geben Sie die Eizellen für 10 min in einen 100 μL Tropfen ES4 (Abbildung 1C).
18. Geben Sie zwei 50-μl-Tropfen VS und einen 100-μL-VS-Tropfen ab (Abbildung 1D).
19. Bewegen Sie die Eizellen nacheinander für 60 s in die drei VS-Tropfen, so dass die Eizellen für ~ 20 s in jedem Tropfen bleiben.
20. Wenn etwa 10 s vor dem Ende der 60 s Inkubationszeit übrig sind, legen Sie das Kryogerät unter das Mikroskop.
21. Tragen Sie die Eizellen an der Spitze der Pipette und legen Sie sie mit der minimalen Menge an VS auf das Kryogerät.
22. Saugen Sie den Überschuss an VS ab und lassen Sie die Eizellen von einer dünnen Schicht VS bedeckt.
23. Tauchen Sie das Kryogerät direkt in flüssigen Stickstoff und bewegen Sie es schnell. Halten Sie das Gerät in flüssigem Stickstoff und decken Sie es mit dem Schutzdeckel ab.
24. Lagern Sie das Kryogerät in einem Speichersystem (z. B. Visiotube) und legen Sie es in den kryogenen Tank. Zeichnen Sie Kryokonservierungsdaten in der Labordatenbank und auf dem Laborblatt auf.

11. Stationäre postoperative Versorgung

1. Entfernen Sie den Blasenkatheter und die mit vaginalem Paraffin beschichtete Gaze 48 h nach der Operation.
2. Erkunden Sie die Neovagina des Patienten nach der Entfernung digital und weisen Sie den Patienten an, wie er die digitale Erkundung durchführen soll. Beschichten Sie dann eine Vaginalform (9 cm lang und 2 cm im Durchmesser) mit Östrogengel (um die Epithelisierung zu begünstigen) und weisen Sie den Patienten an, wie der Schimmel eingeführt und gepflegt werden soll.
3. Ab Tag 3 nach der Operation und an jedem folgenden Tag weisen Sie den Patienten an, wie die Form positioniert und für mindestens 2 Stunden täglich an Ort und Stelle gehalten werden soll.
4. Wenn keine Komplikationen auftreten, entlassen Sie den Patienten am Tag 5-6 nach der Operation.

12. Ambulante postoperative Versorgung

1. Weisen Sie den Patienten an, wie er eine neovaginale Dilatation für 2 Monate mit dem gleichen Schimmel (9 cm Länge und 2 cm Durchmesser) durchführt, der während des Krankenhausaufenthalts verwendet wird, und dann einem größeren (11 cm lang und 2,5 cm im Durchmesser).
2. Lassen Sie die Patientin nach dem 3-monatigen Besuch mit der sexuellen Aktivität beginnen und informieren Sie sie, die Schimmelpilze an den Tagen ohne Geschlechtsverkehr weiter zu verwenden.

13. Follow-up

1. Planen Sie Follow-up-Besuche 1, 3, 6 und 12 Monate nach dem Eingriff.
2. Beurteilen Sie bei jedem Follow-up-Besuch die Einhaltung der Dilatationsübungen und fragen Sie die Patientin, ob sie eine Einschränkung ihrer täglichen Aktivitäten, Schmerzen, Harnwegssymptome oder sexuelle Dysfunktion erlebt hat (ab dem Besuch nach dem dritten Monat nach der Operation). Führen Sie bei jedem Folgebesuch eine gynäkologische Untersuchung durch, um die Breite, Länge, Suspension und Beweglichkeit der Adnexa zu messen.

Ergebnisse

Tabelle 2 enthält ovarielle Stimulationsdaten der Patientinnen, während die wichtigsten chirurgischen und funktionellen Ergebnisse in Tabelle 3 beschrieben sind. Die begleitenden laparoskopischen Verfahren der Eizellentnahme und Vaginoplastik wurden bei allen Patientinnen erfolgreich kombiniert. Durchschnittlich wurden 11,4 ± 5,4 (mittlere ± SD) Eizellen entnommen und 9,6 ± 4,3 MII-Eizellen wurden kryokonserviert (Tabelle 3). Nach unserer Erfahrung mit der Kryokonse...

Diskussion

Dieses Protokoll reduziert die Invasivität bei der Behandlung von MRKHS durch die Kombination der Verfahren der Vaginoplastik und der Eizellentnahme. Zu diesem Zweck ist es entscheidend, dass ein engagiertes Team benannt wird, um sicherzustellen, dass der Zeitpunkt des COS, der chirurgische Eingriff und die Vitrifikation der Eizellen effizient geplant werden.

MRKHS-Patienten, für die diese kombinierte laparoskopische Methode voraussichtlich am vorteilhaftesten ist, sind^diej...

Materialien

Name	Company	Catalog Number	Comments
Oocyte retrieval procedure
Equipment
CO2 O2 Incubator	Sanyo
Incubator	Thermo Scientific
Laminar Flow Hood	Cooper Surgical
Portable incubator	Cooper Surgical
Stereomicroscope	Nikon
Consumables
14 mL Polystyrene Round-Bottom Tube	Falcon	352057
4-well dish	Nunc	144444
60 mm Petri dish	Nunc	FA9150270
90 mm Petri dish	Nunc	FA9150360
Human Serum Albumin 100 mg/ml in Normal Saline (5%)	Origio	3001
Mineral oil for embryo culture	Origio	4008
One Well Dish	Oosafe	OOPW-CW05
Quinn’s Advantage Fertilization medium SAGE	Origio	1020
Quinn’s Advantage medium with HEPES	Origio	1024
Sterile glass pasteur pipettes
Oocyte denudation
Equipment
CO2 O2 Incubator	Sanyo
Flexipet adjustable handle set	Cook	G18674
Incubator	Thermo Scientific
Laminar Flow Hood	Cooper Surgical
Stereomicroscope	Nikon
Consumables
4-well dish	Nunc	144444
CSCM (Continuos single culture) medium	Fujifilm irvine Scientific	90165
Human Albumin 100 mg/mL in Normal Saline (5%)	Origio	3001
Hyaluronidase	Fujifilm Irvine Scientific	90101
IVF culture 60 mm petri dish	Nunc	FA9150270
Mineral oil for embryo culture	Origio	4008
One Well Dish	Oosafe	OOPW-CW05
Quinn’s Advantage medium with HEPES	Origio	1024
Serum Substitute Supplement	Fujifilm irvine Scientific	99193
Sterile glass pasteur pipettes
Stripping pipette tips (140 μm)	Cook	K-FPIP-1140-10BS-5
Stripping pipette tips (170 μm)	Cook	K-FPIP-1170-10BS-5
Oocyte vitrification
35 mm Petri dish	NUNC	150255
60 mm Petri dish	NUNC	150270
90 mm Petri dish	NUNC	150360
Container for Cooling rack	Kitazato
Cryodevice/cryotop	Kitazato	81111
Electronic timer
Flexipet	COOK	K- 1000
Gilson Pipetman	Gilson	F123601
Lab Printer LabXpert	Brady	XSL-86-461
Tips 20-200 µL	Thermo Scientific	2160G
Tips 2-20 µL	Thermo Scientific	2139-HR
Visotubes	Cryo Bio System	20
Vitrification Freeze Kit	Fujifilm Irvine Scientific	90133-SO
Vitrification Thaw kit	Fujifilm Irvine Scientific	90137-SO