Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Sendromu Tedavisinde Vajinoplasti Sırasında Laparoskopik Oosit Elde Edilmesi ve Kriyoprezervasyonda

Özet

Özel bir ekip, Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser hastalarına laparoskopik vajinoplasti sırasında kontrollü yumurtalık stimülasyonu ve oosit kriyoprezervasyonu yapma seçeneği sunabilir.

Özet

Laparoskopik vajinoplasti için planlanan ve biyolojik annelik isteği olan Mayer-Rokitansky-Kuster-Hauser Sendromu (MRKHS) hastalarında, kriyoprezervasyon için eş zamanlı laparoskopik oosit alımının yapılmasını öneriyoruz. Laparoskopinin başlangıcında oosit alımı takip edilir. Sağ ve sol 5 mm trokarlar yerleştirilir, bu sayede sırasıyla sağ ve sol yumurtalıkların delinmesi için 17 G'lik bir yumurta aspirasyon iğnesi kullanılır. Foliküllerin maruziyetini kolaylaştırmak için yumurtalıklar mobilize edilir ve laparoskopik forseps ile tutulur.

Birbirine yakın birden fazla folikülü aspire ederken, yumurtalık korteksinin transfiks sayısını azaltmak ve doğal kanama riski nedeniyle iğne ucu yumurtalıkta tutulur. Sonraki adımlar, vajinoplasti için Davydov laparoskopik modifiye tekniğine kıyasla değişmemiştir. Ameliyattan önce, gonadotropin hormonu salgılayan hormon (Gn-RH) antagonist protokolü ile kontrollü over stimülasyonu yapılır ve buna eşlik eden oosit elde etme ve vajinoplasti prosedürü, son foliküler olgunlaşma tetikleyicisinden 36 saat sonra planlanır. Foliküler sıvı, transvajinal oosit alımı sırasında kullanılan aynı 10 mL steril tüplerde toplanır ve bir ısınma bloğunda (37 °C) olgun (metafaz II) oositlerin vitrifiye edildiği yardımcı üreme laboratuvarına aktarılır.

Bu olguda, MRKH'li 23 kadından oluşan bir seride, oositler başarıyla alındı ve tüm hastalarda kriyokorundu; Vajinoplasti daha sonra modifikasyon yapılmadan yapıldı ve yatan ve ayakta tedavi sonrası bakım (üriner kateter çıkarma günü, hastaneden taburcu günü, dilatör kullanımı ve takipte konfor) etkilenmedi. Bir hastada postoperatif bir komplikasyon meydana geldi (ameliyat sonrası 5. günde gelişen ateş ve transabdominal ultrasonda intraperitoneal sıvı tespiti) ve konservatif tedaviden sonra düzeldi. MRKH hastalarında cerrahi vajinoplasti yapmak ve yumurta geri kazanımını geciktirmek yerine, bu yaklaşım her iki prosedürü tek bir laparoskopide birleştirerek cerrahi invazivliği ve anesteziyolojik riskleri en aza indirir.

Giriş

4-10.000 kadında yaklaşık 1 insidansı ile MRKHS, primer amenore vakalarının% 15'inin nedenidir. MRKHS, vajina ve uterusun üst segmentinin konjenital yokluğu ile karakterizedir, idrar yolu ve iskelet anomalileri ise değişken olarak ilişkilidir. Daha spesifik olarak, genellikle 1-2 cm derinliğe sahip bir vajinal tonoz mevcuttur ve iki ilkel uterus boynuzu^{bulunabilir 1}.

Geçmişte, MRKHS'ye olan birincil tıbbi ilgi, genellikle cerrahi olmayan veya cerrahi yaklaşımlarla bir neovajinanın inşasını gerektiren normal cinsel ilişkiyi sağlamaktı². Bununla birlikte, üreme tıbbındaki ilerlemeler şu anda MRKHS hastalarında taşıyıcı annelik ^3,4 veya daha yakın zamanda uterus nakli⁵ ile genetik anneliğe izin vermektedir. Rahim nakli hala deneysel bir prosedür olmakla birlikte, taşıyıcı annelik dünya çapında birçok ülkede mevcuttur⁶ ve bildirilen obstetrik ve psikososyal sonuçlar standart in vitro fertilizasyon ve oosit bağışı⁷ ile karşılaştırılabilir.

Hem taşıyıcı annelik hem de uterus transplantasyonu oosit geri kazanımı ve in vitro fertilizasyon gerektirir, ancak MRKHS'li hastalarda yumurta toplamanın nasıl yapılacağı konusunda fikir birliği yoktur. Transvajinal yaklaşım, vajinoplastiden sonra bile yetersiz vajinal elastikiyeti⁸, yumurtalıkların atipik yerleşimi⁹ veya yumurtalıklar ile vajinal manşet arasındaki aşırı mesafe ^4,10 nedeniyle mümkün olmayabilir. Bu olgularda laparoskopik oosit alımı cerrahi erişim açısından en uygun yaklaşımı oluşturmaktadır. Bununla birlikte, çoğu MRKHS hastası şu anda laparoskopik neovajinoplastiye maruz kaldığından, vajinoplasti¹¹ ameliyatı sırasında laparoskopik oosit geri alımı yapılmasını ve ardından gelecekteki kullanım için oosit kriyoprezervasyonunun yapılmasını ve böylece MRKHS hastalarının cinsel ve üreme fonksiyonlarının tedavisini birleştirirken invazivliği en aza indirmeyi öneriyoruz.

Hastaların demografik verileri
Şimdiye kadar yirmi üç MRKH hastası bu protokolle tedavi edildi. Hastaların anamnestik, enstrümantal ve laboratuvar bulguları Tablo 1'de özetlenmiştir. Tablo 1'de belirtilmediği sürece eşlik eden konjenital anomali saptanmadı.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protokol

MRKHS için üçüncül sevk merkezindeki (IRCCS San Raffaele Üniversite Hastanesi, Milano, İtalya) yerel etik komite, Temmuz 2017'de uygulanmadan önce protokolü bilgilendirdi ve onayladı. Tüm hastalar veya veliler, vajinoplasti sırasında laparoskopik oosit alımı ve kriyoprezervasyonu, anonimleştirilmiş klinik/laboratuvar verilerinin bilimsel amaçlarla kullanılması için imzalı bilgilendirilmiş onam vermiştir.

1. Takım kompozisyonu

1. Deneyimli bir laparoskopik cerrah, deneyimli bir vajinal cerrah, bir kısırlık uzmanı, özel bir psikolog ve kararlı bir hemşireden oluşan özel bir ekip belirleyin.
2. Prosedürün tüm kurulumu ve performansı sırasında hastaya bir ekip olarak yardımcı olun.

2. Tanısal çalışma ve danışmanlık

1. Yumurtalıkların görüntülenmesi ve Antral Folikül Sayısının (AFC) tahmini için hastaya transabdominal pelvik ve abdominal ultrasonografi yapın. Kontrollü yumurtalık stimülasyonu için gonadotropin başlangıç dozunu optimize etmek için anti-Müllerian-hormonun (AMH) kan seviyelerini değerlendirin. Dokuların / gametlerin kriyoprezervasyonu için ulusal/yerel protokollere göre bulaşıcı hastalıklar (HIV-Ab, HCV-Ab, HBV-Ab, RPR-TPHA) için serolojik testler yapın.
2. Cerrahi olmayan ve cerrahi vajinoplasti de dahil olmak üzere MRKHS'nin hem cinsel hem de üreme yönleri, taşıyıcı annelik ile ilgili maliyetler ve mevzuat, deneysel bir program bağlamında uterus transplantasyonuna bakış açısı, yumurta geri kazanımı için mevcut farklı yaklaşımlar ve oosit kriyoprezervasyonunun canlı doğum oranları açısından performansı hakkında hastaya danışmanlık yapmak.
3. Hastaya prosedür boyunca onu desteklemek için psikolojik değerlendirme sunun ve duygusal istikrarı, bağlılığı ve gelecekteki annelik arzusunu değerlendirin. Eşlik eden laparoskopik oosit alımı, gamet kriyoprezervasyonu ve laparoskopik vajinoplasti için imzalı, bilgilendirilmiş onam alın. Reşit olmayan bir hasta söz konusu olduğunda, klinik değerlendirmeleri, akraba bilgilendirilmiş onamını da imzalayan ebeveynlerin huzurunda yapın.

3. Cerrahi prosedürün ve kontrollü yumurtalık stimülasyonunun planlanması

1. Eşzamanlı laparoskopik oosit alımı, gamet kriyoprezervasyonu ve laparoskopik vajinoplasti prosedürünü, klinik ekibin (yukarıya bakınız) ve oosit vitrifikasyonu yapan laboratuvar personelinin mevcudiyetini dikkate alarak planlayın.
2. Ameliyat gününden itibaren -14. günde kontrollü yumurtalık stimülasyonuna (COS) başlayın, n = 12 günlük planlanan COS süresini ve yumurtlamayı tetikleyen ile yumurta alımı ve vitrifikasyonu arasında ihtiyaç duyulan 36 saati dikkate alın.
3. COS'un beklenenden farklı bir süre gerektirmesi durumunda, ameliyatı buna göre yeniden planlayın.

4. Kontrollü yumurtalık stimülasyonu: başlangıç dozu, doz ayarlamaları ve izleme, son oosit olgunlaşmasını tetikleme

1. COS'u, doğurganlığın korunması için "rastgele başlangıç" protokolleri bağlamında yaygın olarak yapıldığı gibi, yumurtalık döngüsünün herhangi bir aşamasında başlatın.
2. Hastanın AFC ve AMH'sine bağlı olarak folikül uyarıcı hormon (FSH) / insan menopozal gonadotropininin (hMG) başlangıç dozunu seçin ve hastaya günlük kendi kendine uygulanan deri altı enjeksiyonlarına devam etmesini söyleyin. Daha sonra yumurtalık yanıtına bağlı olarak bireyselleştirilmiş doz ayarlamaları yapın.
3. Seri transabdominal ultrason ve eşlik eden E₂ ve P ölçümleri (gün 1, gün 6, gün 8, gün 10 ve gün 12) ile yumurtalık yanıtını izleyin.
4. Son oosit matürasyonunu, 0.2 mL'lik bir Gn-RH-analogunun (Triptorelin) deri altı uygulamasıyla tetikler.

5. Klinik prosedür (laparoskopi): yumurta geri kazanımı

1. Hastayı, karın ve perineye mükemmel eşzamanlı erişim sağlayan modifiye dorsal litotomi pozisyonunda konumlandırın. Genel anesteziyi indükleyin ve rutin intraoperatif antibiyotik profilaksisine göre intravenöz olarak 2 g Sefazolin uygulayın. İntravezikal Foley kateterini konumlandırın.
2. Bir peri-umbilikal Veress iğnesi ile pnömoperitoneum oluşturun, laparoskopun yerleştirilmesi için bir adet 10 mm göbek trokarı ve sağ ve sol üst kadranlarda iki adet 5 mm trokar konumlandırın. Laparoskopik görme altında, transvajinal geri alma için yaygın olarak kullanılan bir aspirasyon pompasına bağlı 17 G tek lümenli bir iğneyi, sırasıyla sağ ve sol yumurtalıkların delinmesi için sağ ve sol trokarlardan kullanın.
3. Foliküllerin maruz kalmasını kolaylaştırmak için yumurtalıkları laparoskopik forseps ile kaldırın ve tutun. Birbirine yakın olan birden fazla folikülü aspire ederken, yumurtalık korteksinin transfiks sayısını ve doğal kanama riskini azaltmak için iğne ucunu yumurtalıkta tutun.

6. Klinik prosedür (laparoskopi): vajinoplasti

NOT: Vajinoplasti basamakları, Davydov'un laparoskopik modifiye tekniğine kıyasla değişmeden kalır¹².

1. Peritoneal ipliği iki ilkel uterus boynuzu arasında enine kaldırıp keserek ve daha sonra insizyonu önden, lateral ve posteriordan uzatarak periton diseksiyonu.
2. Her hemipelviste polidioksanon sentetik emilebilir (PDS) 2-0 monofilamentte, mesanenin üstündeki mobilize peritondan, yuvarlak ligament, tubal istmus, uteroovarian ligament ve lateral peritoneal yaprağın ardışık transfiksasyonu ile bir çanta ipi sütürüne başlayın. Daha sonra, iki sütüre mezorektumun lateral yönünü ve rektal serozanın ön yönünü, rektosigmoid bileşkenin hemen altına dahil edin.
3. Perineal yaklaşımda vajinal gamzeyi açığa çıkarın ve H şeklinde bir kesi yapın ve vezikorektal boşluğun keskin ve künt diseksiyonu ile neovajinal bir boşluk oluşturun. Daha sonra, disseke edilmiş periton kenar boşluklarını vajinal vestibulumun kenarına doğru çekin. PDS 3-0'da peritonel-vestibüler anastomoz için pozisyon kesilmiş dikişler. Son olarak, periton kaplı neovajinaya parafin kaplı bir gazlı bez yerleştirin.

7. IVF laboratuvarı: Yumurta alımından bir gün önce

1. Beklenen folikül sayısına göre HEPES ile 9 mL Quinn's Advantage Medium (% 5 insan serum albümini [HSA] ile desteklenmiş) içeren 2 ila 5 yuvarlak tabanlı tüp hazırlayın ve bunları gece boyunca 37 ° C'de inkübe edin.
2. Embriyo kültürü için 0,5 mL mineral yağ ile kaplanmış 0,5 mL/kuyucuk Döllenme Ortamı (% 5 HSA ile desteklenmiş) içeren bir veya iki adet 4 delikli yemek hazırlayın ve kontrollü bir atmosferde (% 6 CO₂,% 5 O₂) gece boyunca inkübe edin.
3. 6 mL mineral yağ ile kaplanmış 9 (30 μL) damla Sürekli Tek Kültür (CSCM) ortamı (% 10 serum ikame takviyesi [SSS] ile desteklenmiş) içeren bir tabak hazırlayın. Kontrollü bir atmosferde gece boyunca 37 ° C'de kuluçkaya yatırın (% 6 CO 2,% 5 O₂).

8. IVF laboratuvarı: yumurta toplama prosedürü

1. Foliküler aspiratların toplanacağı 10 IU / mL'lik son konsantrasyonda heparin ile HEPES (% 5 HSA ile desteklenmiş) ile Quinn'in Avantaj Ortamının bir çözeltisini hazırlayın.
2. Rutin transvajinal oosit alımı^13'e benzer şekilde, foliküler aspiratları 10 mL yuvarlak dipli tüplerde toplayın, taşınabilir bir inkübatörde sıcak tutun (37 ° C) ve hemen embriyoloji laboratuvarına yaklaşık 10 dakikalık bir taşıma süresi ile taşınır.
3. Kümülüs-oosit komplekslerini (COC) tanımlamak için foliküler sıvıyı önceden ısıtılmış steril 90 mm Petri kabında inceleyin. Bir COC tespit edildikten sonra, HEPES ile (% 5 HSA ile desteklenmiş) 1 mL önceden ısıtılmış Quinn'in Avantaj Ortamı ile doldurulmuş merkezi bir kuyucukta durulayın.
4. Tüm COC'ler toplandığından, bunları Döllenme Ortamını içeren 4 kuyucuklu kaba yerleştirin ve kapağı ve alt kısmı hastanın kimliğiyle ilgili verilerle etiketleyin.
5. Onları kontrollü bir atmosferde 37 ° C'de inkübe edin (% 6 CO 2,% 5 O₂).
6. Laboratuvar personelinin ikinci bir üyesi tarafından prosedürün iki kez kontrol edildiğinden emin olun.

9. Oosit inudasyonu

1. Yumurtlama sonrası 38 saat içinde kümülüs / korona hücrelerinin çıkarılmasını sağlayın.
2. 10 IU / mL'lik son konsantrasyonda Hyaluronidaz ile HEPES (% 5 HSA ile desteklenmiş) ile Quinn'in Avantaj Ortamının bir çözeltisini hazırlayın.
3. Hyaluronidaz içeren HEPES (% 5 HSA ile desteklenmiş) ve 1 mL önceden ısıtılmış HEPES tamponlu ortam (% 5 HSA ile desteklenmiş) ile 1 mL önceden ısıtılmış Quinn's Advantage Medium içeren bir merkezi kuyucuk tabağı hazırlayın.
4. Yumurta denudasyon kaplarını hasta tanımlama verileriyle etiketleyin.
5. Kümülüs hücrelerini bir cam Pasteur pipetle dağıtmak için enzimi içeren merkezi kuyucuğa COC'leri yerleştirin ve COC'leri içeren çözeltiyi 30 saniyeye kadar yukarı ve aşağı doğru yavaşça pipetleyin.
6. Yumurtaları, sadece HEPES tamponlu ortam içeren ikinci merkezi kuyucuk kabına taşıyın ve minimum miktarda enzimin yerini aldığınızdan emin olun.
7. İç çapları azalan (170-140 μm) inkar edici pipetler kullanarak kalan korona hücrelerini çıkarın.
8. İlk polar cismin ekstrüzyonu ile karakterize metafaz II (MII) oositlerini metafaz I oositlerden (MI) ve germinal veziküllerden (GV) ayırarak oosit olgunlaşma aşamasını değerlendirin.
9. MII oositlerini, 6 mL mineral yağ ile kaplanmış dokuz (30 μL) damla Sürekli Tek Kültür (CSCM) ortamı (% 10 serum ikame takviyesi [SSS] ile desteklenmiş) içeren bir IVF kültürü 60 mm Petri kabına aktarın.
10. Onları kontrollü bir atmosferde 37 ° C'de inkübe edin (% 6 CO 2,% 5 O₂).

10. Yumurta vitrifikasyonu

1. MII oositlerinin vitrifikasyonunu, oosit inudasyonundan hemen sonra, vitrifikasyon kitinin üreticisi tarafından sağlanan protokolü izleyerek gerçekleştirin.
2. Oda sıcaklığına getirin (25-27 °C): denge çözeltisi (ES), vitrifikasyon çözeltisi (VS) ve yıkama çözeltisi (WS), işlemden yaklaşık 30 dakika önce.
   NOT: Üreticiler tarafından bildirildiği üzere, ES, M-199 HEPES tamponlu Ortamda %7,5 DMSO, %7,5 etilen glikol, %20 dekstran serum takviyesi (DSS), Gentamisin içerir; VS, M-199 HEPES tamponlu bir Ortamda %15 DMSO, %15 etilen glikol, 0,5 M sakaroz, %20 DSS, Gentamisin ve M-199 HEPES tamponlu Ortamda %20 DSS, Gentamisin içerir.
3. Bir kriyocihaz için, plastik bir tutamağa tutturulmuş ince bir şeffaf film şeridinden oluşan Cryotop kullanın.
4. Kriyocihazları hastanın adı, doğum tarihi, kimliği, kriyoprezervasyon tarihi ve tek bir cihaza yüklenen oosit sayısı ile etiketleyin.
5. Vitrifikasyon kabını hastanın adı ve kimliği ile etiketleyin.
6. Bir tanık operatörün kriyocihazlar ve çanak üzerindeki doğru hasta verilerini kontrol ettiğinden emin olun.
7. Bir soğutma kutusunu en üste kadar taze sıvı azotla doldurun ve dağılmayı ve buharlaşmayı en aza indirmek için kullanana kadar örtün.
8. Manipülasyon sırasında yumurtalara zarar vermemek için iç çapı 170 μm olan bir striptizci pipet kullanın.
9. Kullanmadan önce içeriği karıştırmak için her bir ES, VS ve WS şişesini hafifçe sallayın.
10. 60 mm'lik bir Petri kabının kapağını bir damla 50 μL WS1 ile hazırlayın (Şekil 1A).
11. Orta buharlaşmayı sınırlamak için kullanımdan hemen önce damlaları yerleştirin.
12. Oosit kabını inkübatörden alın ve MII oositlerini (bir seferde 3'e kadar) kültür kabından 50 μL WS'ye minimum hacimli ortamla aktarın.
13. WS2, ES1 ve ES2'nin 50 μL damlalarını yakın mesafede dağıtın ve oositleri WS1 damlasından WS2 damlasına aktarın (Şekil 1B).
14. ES1'in düşüşünü WS2'ye birleştirin ve her iki çözeltinin kendiliğinden karışması için 2 dakika bekleyin.
15. Ardından, ES2 damlasını daha önce birleştirilmiş damlalarla birleştirin ve 2 dakika daha bekletin.
16. Son olarak, yeni bir 100 μL ES3 damlasını daha önce birleştirilmiş damlalarla birleştirin ve 1 dakika daha bekletin.
17. Yumurtaları 10 dakika boyunca 100 μL'lik bir ES4 damlasına yerleştirin (Şekil 1C).
18. İki adet 50 μL VS damlası ve bir adet 100 μL VS dağıtın (Şekil 1D).
19. Yumurtaları sırayla 60 sn boyunca üç damla VS'ye taşıyın, böylece oositler ~ 20 s boyunca her damlada kalır.
20. 60 sn inkübasyonun bitiminden önce yaklaşık 10 s kaldığında, kriyocihazı mikroskop altına yerleştirin.
21. Yumurtaları pipetin ucunda taşıyın ve minimum VS miktarı ile kriyocihazın üzerine yerleştirin.
22. VS'nin fazlalığını aspire edin, oositleri ince bir VS tabakası ile örtün.
23. Kriyocihazı doğrudan sıvı azotun içine daldırın ve hızla hareket ettirin. Cihazı sıvı azot içinde tutun ve koruyucu kapakla örtün.
24. Kriyocihazı bir depolama sisteminde (örneğin, visiotube) saklayın ve kriyojenik tanka yerleştirin. Kriyoprezervasyon verilerini laboratuvar veri tabanına ve sayfasına kaydeder.

11. Yatarak ameliyat sonrası bakım

1. Ameliyattan 48 saat sonra idrar kateteri ve vajinal parafin kaplı gazlı bezi çıkarın.
2. Çıkarıldıktan sonra hastaların neovajinalarını dijital olarak keşfedin ve hastaya dijital keşfin nasıl yapılacağı konusunda talimat verin. Daha sonra, vajinal kalıbı (9 cm uzunluğunda ve 2 cm çapında) östrojen jeli ile (epitelizasyonu desteklemek için) kaplayın ve hastaya kalıbın nasıl yerleştirileceği ve korunacağı konusunda talimat verin.
3. Ameliyat sonrası 3. günden başlayarak ve takip eden her gün, hastaya kalıbın nasıl yerleştirileceği ve günde en az 2 saat boyunca yerinde nasıl tutulacağı konusunda talimat verin.
4. Herhangi bir komplikasyon meydana gelmezse, hastayı ameliyat sonrası 5-6. günde taburcu edin.

12. Ayakta ameliyat sonrası bakım

1. Hastaya, hastanede kalış süresince kullanılan aynı kalıpla (9 cm uzunluğunda ve 2 cm çapında) ve daha sonra daha büyük bir kalıpla (11 cm uzunluğunda ve 2,5 cm çapında) 2 ay boyunca neovajinal dilatasyonun nasıl yapılacağı konusunda talimat verin.
2. 3 aylık ziyaretten sonra, hastanın cinsel aktiviteye başlamasına izin verin ve cinsel ilişkinin olmadığı günlerde kalıpları kullanmaya devam etmesini sağlayın.

13. Takip

1. Takip ziyaretlerini prosedürden 1, 3, 6 ve 12 ay sonra planlayın.
2. Her takip ziyaretinde, dilatasyon egzersizlerine uyumu değerlendirin ve hastaya günlük yaşam aktiviteleri, ağrı, idrar semptomları veya cinsel işlev bozukluğunda herhangi bir sınırlama yaşayıp yaşamadığını sorun (ameliyattan sonraki üçüncü aydan sonraki ziyaretten itibaren). Adneksanın vajinal genişliğini, uzunluğunu, süspansiyonunu ve hareketliliğini ölçmek için her takip ziyaretinde jinekolojik muayene yapın.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Sonuçlar

Tablo 2'de hastaların yumurtalık stimülasyon verileri yer alırken, başlıca cerrahi ve fonksiyonel sonuçlar Tablo 3'te açıklanmıştır. Oosit redüksiyonu ve vajinoplastinin eşlik eden laparoskopik prosedürleri tüm hastalarda başarılı bir şekilde birleştirildi. Ortalama 11.4 ± 5.4 (ortalama ± SD) oosit alındı ve 9.6 ± 4.3 MII oosit kriyokorundu (Tablo 3). YÜT uygulanan hastalarda oosit kriyoprezervasyonu ile ilgili deneyimlerimize göre, intrasitop...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Tartışmalar

Bu protokol, vajinoplasti ve oosit geri kazanımı prosedürlerini birleştirerek MRKHS tedavisinde invazivliği azaltır. Bu amaçla, COS'un zamanlamasının, cerrahi prosedürün ve oosit vitrifikasyonunun verimli bir şekilde planlanmasını sağlamak için özel bir ekibin atanması çok önemlidir.

Bu kombine laparoskopik yöntemin en faydalı olması beklenen MRKHS hastaları, pelvik duvarlar¹⁴ boyunca lateral olarak yerleştirilmiş ekstrapelvik yumurtalıklar ve...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
Oocyte retrieval procedure
Equipment
CO2 O2 Incubator	Sanyo
Incubator	Thermo Scientific
Laminar Flow Hood	Cooper Surgical
Portable incubator	Cooper Surgical
Stereomicroscope	Nikon
Consumables
14 mL Polystyrene Round-Bottom Tube	Falcon	352057
4-well dish	Nunc	144444
60 mm Petri dish	Nunc	FA9150270
90 mm Petri dish	Nunc	FA9150360
Human Serum Albumin 100 mg/ml in Normal Saline (5%)	Origio	3001
Mineral oil for embryo culture	Origio	4008
One Well Dish	Oosafe	OOPW-CW05
Quinn’s Advantage Fertilization medium SAGE	Origio	1020
Quinn’s Advantage medium with HEPES	Origio	1024
Sterile glass pasteur pipettes
Oocyte denudation
Equipment
CO2 O2 Incubator	Sanyo
Flexipet adjustable handle set	Cook	G18674
Incubator	Thermo Scientific
Laminar Flow Hood	Cooper Surgical
Stereomicroscope	Nikon
Consumables
4-well dish	Nunc	144444
CSCM (Continuos single culture) medium	Fujifilm irvine Scientific	90165
Human Albumin 100 mg/mL in Normal Saline (5%)	Origio	3001
Hyaluronidase	Fujifilm Irvine Scientific	90101
IVF culture 60 mm petri dish	Nunc	FA9150270
Mineral oil for embryo culture	Origio	4008
One Well Dish	Oosafe	OOPW-CW05
Quinn’s Advantage medium with HEPES	Origio	1024
Serum Substitute Supplement	Fujifilm irvine Scientific	99193
Sterile glass pasteur pipettes
Stripping pipette tips (140 μm)	Cook	K-FPIP-1140-10BS-5
Stripping pipette tips (170 μm)	Cook	K-FPIP-1170-10BS-5
Oocyte vitrification
35 mm Petri dish	NUNC	150255
60 mm Petri dish	NUNC	150270
90 mm Petri dish	NUNC	150360
Container for Cooling rack	Kitazato
Cryodevice/cryotop	Kitazato	81111
Electronic timer
Flexipet	COOK	K- 1000
Gilson Pipetman	Gilson	F123601
Lab Printer LabXpert	Brady	XSL-86-461
Tips 20-200 µL	Thermo Scientific	2160G
Tips 2-20 µL	Thermo Scientific	2139-HR
Visotubes	Cryo Bio System	20
Vitrification Freeze Kit	Fujifilm Irvine Scientific	90133-SO
Vitrification Thaw kit	Fujifilm Irvine Scientific	90137-SO