JoVE Logo

Oturum Aç

Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.

Bu Makalede

  • Özet
  • Özet
  • Giriş
  • Protokol
  • Sonuçlar
  • Tartışmalar
  • Açıklamalar
  • Teşekkürler
  • Malzemeler
  • Referanslar
  • Yeniden Basımlar ve İzinler

Özet

The catheter of a telemetry device is implanted into the abdominal aorta in order to continuously collect beat-by-beat hemodynamic data from animals pre and post-high thoracic spinal cord transection. A novel JAVA software was employed to analyze hemodynamic parameters as well as frequency and intensity of spontaneous episodes of autonomic dysreflexia.

Özet

Spinal cord injury (SCI) is a debilitating neurological condition characterized by somatic and autonomic dysfunctions. In particular, SCI above the mid-thoracic level can lead to a potentially life-threatening hypertensive condition called autonomic dysreflexia (AD) that is often triggered by noxious or non-noxious somatic or visceral stimuli below the level of injury. One of the most common triggers of AD is the distension of pelvic viscera, such as during bladder and bowel distension or evacuation. This protocol presents a novel pattern recognition algorithm developed for a JAVA platform software to study the fluctuations of cardiovascular parameters as well as the number, severity and duration of spontaneously occurring AD events. The software is able to apply a pattern recognition algorithm on hemodynamic data such as systolic blood pressure (SBP) and heart rate (HR) extracted from telemetry recordings of conscious and unrestrained animals before and after thoracic (T3) complete transection. With this software, hemodynamic parameters and episodes of AD are able to be detected and analyzed with minimal experimenter bias.

Giriş

Otonom disrefleksi (AD) servikal veya yüksek göğüs segmentlerinde akut veya kronik spinal kord yaralanması (SKY) sonrası bireylerde hayatı tehdit eden acil bir durumdur ve genellikle kalıcı hipertansiyon ve bradikardi 1 atakları ile karakterizedir. AD esas genellikle sempatik aktivite ve vasküler tonus 1-4 kontrol spinal sempatik preganglionik nöronlara Supraspinal merkezlerden girdi sağlamak spinal yollar inen bozulması neden olur. AD bölüm 300 mmHg kadar sistolik kan basıncında ani bir artış (SKB) ile karakterize olan nöbetler, kafa içi kanama, miyokard enfarktüsü ve hatta ölüme 5-8 yol açabilir tedavi edilmediği takdirde. Zararlı ve zararlı olmayan uyaranların çeşitli bağırsak ve mesane distansiyonu, spazmlar, bası yarasının, mesane kateterizasyonu veya iyatrojenik prosedürler 9-12 dahil olmak üzere AD tetikleyici olarak hareket ederler.

resp AD zamansal gelişimiSCI için onse hem insan 9 ve hayvan modellerinde 13,14 araştırılmıştır. Tipik olarak bu çalışmalar (örn ürodinami, insanlarda veya hayvanlarda kolorektal şişkinlik penis vibrostimulations) MS zamansal gelişimini belirlemek için bir "neden AD 'yöntemi kullandık. Böyle bir yaklaşım, AD zamansal gelişimi doğru belirlenmesi önleyebilir izole edilmiş zaman noktalarında tekrar değerlendirme için ihtiyaç ile sınırlıdır. İnsanlarda 24 saatlik kan basıncı izleme kullanımı, seri kan basıncı ölçümleri önceden belirlenmiş aralıklarla yapılmasına olanak tanır. Bu teknik son zamanlarda kronik SKY olan hastalarda spontan meydana gelen AD izlemek için istihdam edilmiştir. Hayvan modellerinde, solid-state basınç dönüştürücüler giderek kronik beat-by-dövmek arteriyel kan basıncı izlemek için kullanılmaktadır. Son zamanlarda, Rabchesvky ve ark. (2012), ortalama kan basıncı bir saniye ortalamaları çıkarılan bir algoritma geliştirdi (MAP) birBir hareketli ortalama eşik 15 karşılaştırılır d. Spontan AD etkinlik 10 mmHg ya da 10 bpm veya daha büyük bir sıcak damla ile eş zamanlı olarak eşiğin üstünde daha MAP tepe göre karakterize edilmiştir.

İşte AD Algılama Algoritması yerleşik bir roman JAVA yazılım sunulmuştur. Bu algoritma arteriyel kan basıncı (AKB) ve kendiliğinden meydana gelen AD olay göstergesidir kalp hızı (KH) önceden belirlenmiş desenler tespit ederek çalışır. Kullanıcı el 'algılama algoritması' kolayca ilgi belirli parametrelere özelleştirilebilir böyle bir yazılım tüm giriş değişkenleri ayarlamak mümkün değildir. Yazılım aynı zamanda hemodinamik parametrelerin günlük ritmisite 16 analiz edilebilir şekilde belirli bir çağ haline ABP ve İK dichotomize yapabiliyor. Mevcut yazıda, ayrıntılı bir açıklama telemetri cihazları implante ve SCI ameliyatı yapmak için kullanılan cerrahi tekniğin verilir. eskiamples da AD Algılama yazılım sonrası işleme yetenekleri açısından nasıl kardiyovasküler fonksiyon sağlanır sonrası omurilik değiştirilir. Karşılaştırma amaçları doğrultusunda, yöntem ve sonuç kolorektal distansiyon olarak bilinen bağlı AD için bir yöntem elde edilen (CRD), aynı zamanda açıklanmaktadır.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Protokol

Erkek Wistar (HSD: WI Wistar) sıçanlannın 7 hafta ve 300-350 g ağırlığındaki, bu deneyde kullanıldı. Tüm fareler, 12 saat aydınlık / karanlık döngüsünde tutulur ve standart laboratuar fare yiyeceği ve su ad libitum aldı. Tüm deney prosedürleri British Columbia Üniversitesi tarafından Bakımına rehber ve Kullanım Deney Hayvanlarının Hayvan Bakımı Kanada Konseyi tarafından kurulmuş ve verilen etik onayı ile uymuştur. Cerrahi ve hayvan bakımı laboratuvarımızda standart prosedürler 17 (vd. 2010 Ramsey) göre gerçekleştirilmiştir.

Animals 1. Hazırlık: Cerrahi İşlemleri

  1. Telemetri Cihazı implantasyonu
    Not: Protokol hayata geçirildi üreticinin özellikleri ve cihazın implantasyonu ile önceki deneyimlerine göre: 16
    1. 3 gün enrofloxacin hayvanlara ön-muamele, günde bir kez (10 mg / kg, s.c.) Ameliyat öncesi.
    2. Ameliyat öncesi kafes 9-13 saat katı gıdalar çıkarın. Yumuşak diyet beslenme yemek yerine bu süre boyunca temin edilebilir.
    3. indüksiyon odasında izofluran% 4 bir indüksiyon dozu ve Bain devresi kullanılarak yaklaşık% 1.5 izofluran (1-1.5 L / dk oksijen ile birlikte) bir idame dozu kullanarak hayvanları uyuşturan. hayvanlar anestezi cerrahi düzlemindeki olup olmadığını değerlendirmek için ayak tutam refleks ve kornea refleksleri kullanın. Solunum ya da (mukus zarlarını soluk, yani çok yavaş solunum hızı ve nefes nefese) anestezi derinliği çok yüksek ise değerlendirmek için izlenmesi gerekir, yani hayvan belirten hızlı, sığ solunuma anestezi cerrahi düzleminde olmayabilir (çok düşük ). Tekrarlayın cerrahi sırasında anestezi yaklaşık her 5 dk cerrahi düzleminin izleme ve ayarlama izofluran gerekli doz.
      Not: Tüm ameliyatlar aseptik teknik kullanılarak yapılmaktadır: özellikle cerrahlar giymekcerrahi scrubs, kapak, maske ve steril eldiven. Açık eldiven kullanılması prosedürü, gözlenen steril tekniği kullanarak açıldığında cerrahi aletler içeren cerrahi paketi otoklava ve hayvan cerrahisi başlamadan önce bol dökümlü edilir. Cerrahi aletler ucu sterilize (beş ameliyatlar için) ameliyatları arasında sıcak boncuk vardır. Cerrahi süngerler ve gazlı bez kullanmadan önce otoklavlanırlar. Ameliyat sırasında, hayvanlar 37 ° C 'de muhafaza edilen bir su devir daim battaniye üzerinde tutulmaktadır.
    4. Ameliyattan hemen önce, buprenorfini (sc 0.02 mg / kg) yönetmek. modlu analjezi sağlamak için ameliyat öncesinde, bundan başka, ketoprofen (sc 5 mg / kg) yönetmek. Yerel bir çizgi bloğu sağlamak için ameliyattan hemen önce (sc 5 mg / kg) bupivakain yönetme. karın tıraş üzerine, en az 1 dakika boyunca povidon iyodin, ardından klorheksidin ve% 70 etanol bezlerden (üç kez), sırayla değişen uygulanır ve% 70 etanol (silin yeni açılmış alkol ile her zaman) ile çıkarın. cilt Swabbinginsizyon hattının merkezinde başlayan ve dışa çizerek konsantrik şekilde yapılır (böylece "geri / ileri" hareketlerle alan kontamine değil). steril gazlı bezlerden kullanın ve her uygulama arasında atın. Bu işlem, hayvan cerrahi öncesi üç kez tekrarlanır. kısaltıldı ve cerrahi temizlendi iken, izofluran yaklaşık% 1.5 idame dozu altında Bain olmayan, yeniden soluk devresine bağlı bir burun konisi üzerinde hayvanlar tutmak. anestezi cerrahi planı hayvan korumak için gerekli olarak izofluran seviyesini ayarlayın.
    5. kas ve periton bağırsakları açığa kesen bir 5 cm uzunluğunda orta hat karın kesi yapmak.
    6. bağırsakları geri çekin, (bu arka karın duvarı inen aorta gösterecektir) Ringer çözeltisi 2-3 ml ile nemlendirilmiş steril cerrahi gazlı bez ile bağırsak kapak ve sıklıkta gerekli prosedürü ile doku kuruma önlemek için ek Zil sesleri ile nemli tutmak .
    7. aort etrafında incelemek ve iris spatulae kullanan inferior vena kava dan aorta ayrı künt.
    8. Renal arter hemen distalinde aortun dış adventisyal tabakası rostral ve kaudal uçları etrafında yer Ligatürleri (8-0 monofilaman sütürler).
    9. Ligatürleri kısaca tıkayıp kan akışını kaldırın ve ucunda 90 ° 25 gauge iğne bent ile iliak bifurkasyon 1-2 mm anterior düzeyinde aort delinme.
    10. 20 Ölçer kavisli iğne kullanarak aort içine telemetri cihazının kateterin ucu kılavuz. ucu renal arterlerin hemen distalinde olduğundan emin olmak için rostrally Advance
      1. doku yapıştırıcı küçük bir miktar kullanarak sabitleyin. bitişik harfler çıkarın ve kateter veya doku yapıştırıcı nedeniyle kan akımı tıkanma olduğundan emin olunuz.
    11. 4-0 ipek sütür ile karın duvarına telemetri cihazının gövdesini sabitleyin. musc kapatmak için 4-0 Vikril ve 4-0 Prolen sütür kullanınsırasıyla le ve cilt.
  2. Telemetri İmplantasyon Sonrası Cerrahi Bakım
    Not: İlk 14 gün boyunca ameliyat sonrası hayvanlar kez ayrıntılı bir izleme değerlendirmesine bir günde ek olarak, en az günde 3 kez kontrol edilmelidir. (Hunching, piloerection dahil olmak üzere vücut ağırlığı, fiziksel görünüm, davranış / faaliyet, dışkılama, deri (ağrı gibi gözler, burun ve ön pençeleri çevresinde görülen artış porfirin üretimi ve yüz face işaretleri olarak işaretler temelinde değerlendirilir): 7 kategoride hayvanları değerlendirmek , kesi şifa ve seroma), hidrasyon ve nefes.
    1. meyve, tahıl çeşitleri, yumuşak diyet beslenme yemek yerine hayvanları beslemek ve telemetri cihazı implantasyonu sonrası 6 gün, su libitum sağlar. Hayvanlar operatif ilk gün sonrası için tevkif düzenli katı kemirgen yemi olmalıdır. ameliyat sonrası ve görünüm üzerine ilk olarak 3 gün boyunca ısıtıldı Laktatlı Ringers çözeltisi hayvanlara enjekte (5 mi) deri altındandehidratasyon belirtileri. Hayvanların değerlendirilmesi üzerine gerektiği gibi Ringer solüsyonu (5 ml) yönetme (cilt çadır, soluk kulakları / mukus membranlar belirtileri) sabah ve akşam kontrolleri sırasında.
    2. operasyon sonrası 3 gün boyunca, günde bir kez, enrofloksasin (10 mg / kg, sc) ve ketoprofen (5 mg / kg, sc) uygulayınız. Ameliyat sonrası 3 gün boyunca sabah ve akşam (yani, her 12 saat) boyunca buprenorfin (0.02 mg / kg, sc) uygulayınız. ağrı / distres belirtileri saptanması durumunda buprenorfin bir orta gün dozunda (0.02 mg / kg, sc) tatbik edilebilir.
  3. Omurilik Komple transeksiyonu
    Not: Hayvanlar T3 tam transeksiyonu ameliyattan önce en az 14 gün süreyle telemetri implantasyon ameliyatı kurtarmak için izin verin.
    1. SCI ameliyattan önce üç gün boyunca profilaktik enrofloxacin (10 mg / kg, sc) ile ön tedavi hayvanlar.
    2. Daha önce tarif edildiği gibi 4,% izofluran bir uyarma dozu altında hayvanların anestezi uygulayın. Bundan başka,ketamin hidroklorür (70 mg / kg, ip) ile deksmedetomidin hidroklorür (0.5 mg / kg, ip) ile hayvanların enjekte edilir.
      Not: kordon transeksiyon sonra tam transeksiyonu ameliyatları için, izofluran neden damar genişlemesi oldukça sık hemostaz ile ilgili sorunlar sunuyor. Bu sorun, ketamin / deksmedetomidin kokteyli ile önlenebilir. Hayvanlar 20-25 dakika boyunca anestezi ve spinal kord transeksiyonu cerrahi sonrası atipamezol (1 mg / kg, sc) kullanılarak ters çevrilmelidir.
    3. Ön işlevsel deri altından buprenorfin (0.02 mg / kg) ve ketoprofen (5 mg / kg) tatbik. Yerel bir çizgi bloğu sağlamak için ameliyattan hemen önce (sc 5 mg / kg) bupivakain yönetme. Karın tıraş (üç kez) klorheksidin ve% 70 etanol fırçaları alternatif üzerine, povidon iyodin, ardından en az 1 dakika için uygulanmalıdır, ve% 70 etanol (silin yeni açılmış alkol ile her zaman) ile çıkarıldı. Fırçalar başlayan konsantrik şekilde yapılacak olaninsizyon hattının merkezinde ve ( "geri / ileri" hareketlerle alan kontamine etmeyecek şekilde) dışa çizerek. steril gazlı bez kullanın ve her uygulama arasında atın. hayvan cerrahisi başlamadan önce sürecini üç kez tekrarlayın. kısaltıldı ve cerrahi temizlendi iken, izofluran yaklaşık% 1.5 idame dozu altında bir burun konisi üzerine hayvanları tutmak (anestezi cerrahi uçağı korumak için gerekli olarak ayarlanmıştır). Ameliyat hayvanların süresi boyunca 37 ° C'de muhafaza su sirkülasyon battaniye tutulur.
    4. C8-T3 omurga örten yüzeyel kas içinde dorsal orta hat kesi, uzunluğu 2 cm, emin olun.
    5. Dura katmanı ortaya çıkarmak için teşrih künt.
    6. microscissors veya 25 uçlu bir iğne ucu ile dura tabakasını delip.
    7. T2-T3 intervertebral boşluğunda dura açın ve microscissors kullanarak bir tamamen kesilmesini gerçekleştirin. Vertebral Arterie patlama ama yanal olarak yeterli Microscissors açs ve damarlar. hızlı hareket omurilik transect ve hayvan arka bacaklarda abartılı bir seğirme arayın. Rostral ve kaudal omurilik kütükleri görsel ayrılması yoluyla tamamen kesilmesini onaylayın.
    8. onaydan sonra, Hemostaz sağlamak için kütükleri arasındaki gelfoam yerleştirin. kanamayı durdurmak ve omurilik kütükleri ayırmak için yeterli gelfoam uygulayın.
    9. Kullanım 4-0 Vicryl ve 4-0 Prolen sütür sırasıyla kas ve cilt kapatmak için. SCI Ameliyattan sonra hayvanlar (30 ° C de 5 ml, sc) önceden ısıtılmış Laktatlı Ringer çözeltisi vermek ve sıcaklık kontrollü bir ortamda kurtarmak için izin verir.
  4. Omurilik Kesisi Sonrası Cerrahi Bakım
    Not: İlk 14 gün boyunca ameliyat sonrası hayvanların günde bir kez detaylı bir izleme değerlendirmesine ek olarak, günde 3 kez kontrol edilmelidir. 14 gün sonra, detaylı bir izleme değerlendirmesi her gün tekrar edilebilir. 7 katego hayvanların değerlendirilmesiRies: vücut ağırlığı, fiziksel görünüş (hunching, piloerection, kesi iyileşmesi ve seroma dahil), davranış / faaliyet, dışkılama, deri (ağrı gibi porfirin ve yüz face olarak işaretler temelinde değerlendirilir), hidrasyon ve nefes. İlk 5-7 gün bladders kontrol ve günde en az 3 kez ifade edilmelidir.
    1. meyve, tahıl çeşitleri, beslenme yumuşak diyet yemek yerine hayvanları beslemek ve omurilik transeksiyonu ameliyat sonrası 8-14 gün boyunca, su libitum sağlar. Dehidrasyon semptomlarının ameliyat sonrası ilk 3 gün için ve buna uygun olarak ısıtılmış Ringer çözeltisi (5 mi), deri altından hayvanları enjekte edilir. kontroller sırasında hayvanların değerlendirilmesi üzerine gerektiğinde Ringer çözeltisi (5 mi) uygulayınız.
      omurilik kesisi sonra, sıçanlar arka bacaklarda felç sergiler ve fleksiyon ve bu yaralanma modelinde korunur ön ayakları, bir uzantısını kullanarak ambulate Not:. Sıçanlar gövde ve kuyruk destek görmemektedir. kolaylaştırmak içinKafeste onların hareket, bir lastik ızgara rulo yulaf yatak altına konulmalıdır. Bu fareler forepaws ile ızgara kavramak ve yiyecek ve su erişmek için kafes içinde kolayca hareket etmesine olanak sağlar. yatak günlük değiştirilmelidir. omurilik kesisi sonrası 7. günde, yulaf yatak orijinal ahşap yonga yatak ile değiştirilmesi gerekir. haddelenmiş yulaf yatak onlar yatak yemek hangi pika gelişebilir sıçanlar verilen buprenorfin beri kullanılan ve bu özofagus gömük neden olabilir. Yulaf yulaf ezmesi ile özofagus emici impaksiyon gözlenmemiştir vardır.
    2. operasyon sonrası 3 gün boyunca günde bir kez enrofloksasin (10 mg / kg, sc) ve ketoprofen (5 mg / kg, sc) uygulayınız. Ameliyat sonrası 3 gün boyunca sabah ve akşam (yani, her 12 saat) boyunca buprenorfin (0.02 mg / kg, sc) uygulayınız. ağrı / distres belirtileri saptanması durumunda buprenorfin bir orta gün dozda tatbik edilebilir.

2. TelemetriHemodinamik Parametrelerin İzleme

  1. öncesi ve sonrası SCI, beat-by-beat arteriyel kan basıncı (AKB) ve çekirdek vücut sıcaklığının her gün 24 saat boyunca toplayın. telemetri cihazı kullanılarak 24 saat bloklar halinde 1.000 Hz arteriyel kan basıncı ve çekirdek vücut ısısını Örnek.
  2. dönüştürücünün kablosuz şarj için hayvan kafesinin altında ve dönüştürücüler dijital telemetre sinyallerinin alınması için bir SmartPad yerleştirin.
    Not: Çıkış gerilimi, daha sonra, her bir kanal veri akışını düzenleyen bir bilgisayara bağlı bir Konfigürasyon aktarılır. Voltaj, sürekli kan basıncı ve sıcaklığı kayıtları dönüştürülür. Böyle LabChart olarak veri toplama yazılımı kullanılarak örneklenmiş veri görselleştirme.
  3. hemen izlenmesi öncesinde ve izleme 10 dakika sonra hayvan izleme sırasında toplanan telemetri verilerini yanı sıra 10 dk atın.

Spontan Incid 3. DeğerlendirilmesiOtonom disrefleksi bulunmamıştır (AD)

Not: Spontan AD olayların sıklığı, şiddeti ve süresi, kendi roman AD Tespiti JAVA platform yazılımı (Şekil 4) için geliştirilmiş bir algoritma kullanılarak değerlendirildi. Bir roman algoritma otomatik olarak önce ve SCI Şekil 2'de belirtilen parametreleri kullanarak sonra 24 saat SKB ve İK telemetri kayıtlarına göre kendiliğinden AD olaylarını tespit etmek için geliştirilmiştir.

  1. satın alma yazılımı kullanarak ilgi süresince ham telemetri verileri SKB ve İK değerleri ayıklamak.
    Not: Toplama yazılımı algılar ve sürekli AKB kayıtlarından SBP zirvelerinden değerini belirler. Kalp atım hızı komşu SBP zirveleri arasındaki süre mesafeyi belirleyerek ekstrapole edilir.
  2. interbeat A sütununda aralık, B sütununda SBP değerler, C sütununda MAP değerleri ve günün saatine ile telemetri kayıtları bir CSV dosyası yükleyin in, kolon D (Şekil 4A).
  3. Yazılımı (Şekil 4B-D) kullanılarak, ilgili fizyolojik İK aralığını belirlemek (yani, R aralığına R) 180 bpm ve 625 bpm arasında SKB kayıtları için. Nabız Asgari ve Nabız Maksimum panelleri altında yazılım üzerinde ilgili İK aralığını belirtin.
  4. 240 saniyelik bir hareketli ortalama pencereden SKB ve İK için bir eşik oluşturun. AD Süre Eşik panelinde analizi için hareketli ortalama eşik pencere uzunluğu gösterir.
  5. hareketli ortalama taban çizgisinin üstünde 20 mmHg bir SKB aktarılmamıştır eşik ayarlayın. Hareketli Ortalama Eşik transpozisyonu BP panelinde aktarılması değeri gösterir.
  6. aralık az sn 2'den ve daha fazla 10 saniyelik bir süre için zirve bir zirve ile transpoze eşiği aşan SBP tepe kümeleri izole edin. Interpik Aralığı BP ve du kullanarak pik aralığına zirveye belirtinTepe Küme Aralığı BP panelleri kullanarak rasyon aralığı.
  7. birbirinden 120 saniye içinde olan Grup SBP tepe kümeleri.
    Not: birbirlerine 120 saniye içinde bulunmaktadır Tespit edilen potansiyel AD olaylar tek bir olay olarak gruplandırılır. AD Süre Eşik panelinde ayrı AD olayları ayırt etmek ardışık SKB kümeler arasında izin verilen maksimum süreyi belirtin.
  8. SBP zirve kümelerinin grup 40 bpm ya da daha fazla HR bir damla tespit ederek olası bir spontan AD olayı ile ilişkili olmadığını onaylayın.
    1. Potansiyel olayın başlangıcından sonra İK değerlerinin ortalama% 10 (ortalama aralık paneli damla üst kalp hızı bu yüzdeyi belirtin). Potansiyel olayın ucundan kalp hızı değerlerinin ortalaması% 75 (alt bu yüzdesini belirtin kalp hızı, ortalama aralık paneli damla).
    2. Bir Correspon sağlamak amacıyla, yüksek kalp hızı eşiğinden daha düşük kalp hızı eşik çıkarma40 bpm veya daha büyük ding damla. Kalp hızı düşüşü kısıtlama panelini kullanarak kalp hızı düşüşü kısıtlama belirtin.
  9. Paneller doldurulduktan sonra, OK düğmesine basın. Tespit edilen AD olayların bir grafik sunumu SKB sivri ve ilgili İK verilerini (Şekil 4C-D) dahil olduğu, sunulmuştur. Bir çıkış excel dosyası da pressör yanıtı (mmHg), süre (sn), maksimum sistolik kan basıncı (mmHg), asgari HR (bpm) ve her saptanan AD olayın İK damla (bpm) ile oluşturulur.

4. Kolorektal Distansiyon Kasıtlı AD ortaya çıkarmak için

Not: kaynaklı AD şiddeti kolorektal distansiyon (CRD), 3,18,19 rutin bağırsak taklit eden klinik olarak anlamlı uyarıcı ile tespit edilebilir.

  1. Bir Fransız kateterin balonu (düz, 10 Fransız, 3 ml, 35 cm, lateks ücretsiz) hava 2 ml ile şişirilmesi ile sızıntı olmadığından emin olun.
  2. th dizginleyinbir havlu sararak ve yarım saat stabilize tansiyon ve kalp hızı izin e hayvan.
  3. kateter ucunun bir miktar gres yerleştirin. 2cm balon ortasında, kalıcı bir kalem ile kateter üzerinde bir işareti koyun. işareti açılışında sadece görünür oluncaya kadar kateter kolon içine anüs yoluyla eklenir. cerrahi bant ile kuyruk kateter sabitleyin. Yeniden yerinde onun evde kafes sarılı hayvan hayvan içinde implante transdüser eşleşen alıcı SmartPad yerleştirilir. Hayvanın BP 10 dakika normalleştirmek için izin verin.
  4. Kateter, ilişkili alıştırma periyodundan sonra (örneğin, 10 dakika) sonra, 10 saniye boyunca bir hava 2 ml balon demlenmeye stabilize tansiyon ve kalp hızı sağlar. 1 dakika için distansiyon koruyun. kateterin ucu rektum içinde kalır emin olun. Bu balon şişirmek üzerinde değil önemli olan (yani, 3 ml +) sırayla kolon rüptürü önlemek için.
    Not: distansiyon 1 dakikalık bir süre için ve# 160; pressör yanıt gelişimi ve AD bir uyarılmış bölüm ile ilişkili baroreseptör aracılı İK damla için uygun zaman sağlar. Buna ek olarak, bu 1 dakikalık süresi, aynı zamanda kalp-damar endeksleri normalleştirilmesi için yeterli bir süre sağlar.
  5. Tekrarlama distansiyon deneme başına 3 kez, çalışmalar arasındaki 10 dakika minimum aralıklarla günlük denemeler tekrarı. Değerlendirme işlemi tamamlandıktan sonra, hayvandan Foley kateteri çıkarın.
  6. 1 sn aralıklarla üzerinde ortalama beat-by-beat veri ve çoklu çalışmalarda üzerinde HR SKB maksimum artış ve maksimum azalma rapor.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Sonuçlar

telemetri kullanarak, arteryel kan basıncı 24 st için sürekli olarak 1000 Hz frekansta örneklenir. LabChart kullanılarak arteriyel kan basıncı (ABP) bir örnek bir kayıt Şekil 1B 'de gösterilmiştir. Örnek ABP inen aort içine yerleştirilmiş bir katı hal basınç sensörü ile izlenmiştir. Yeni JAVA platformu AD Algılama yazılımı ilgili SKB (mmHg) zirveleri (Şekil 1C) ayıklamak için yapabiliyor. Biz de bitişik SKB zirveleri (Şekil 1D) arası...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Tartışmalar

Protokol SCI-hayvanlar (Şekil 1B) ABP uzun vadeli ayrıntılı bir analiz için, bir telemetri cihazı ile kombine olacak yeni bir JAVA platformu AD Algılama yazılımı detaylı bir uygulamasını açıklamaktadır. Bu da gün süresince sporadik olarak ortaya spontan AD olaylarını tespit etmek için AKB desen karakterizasyonu için izin veren ilk yazılımdır. Bir iyi karakterize T3 SCI hayvan modeli spontan AD sıklığı, pressör tepkisi ve süresini tespit etmek için yazılımın fonksiyonel...

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Açıklamalar

The authors have nothing to disclose.

Teşekkürler

Kanada Sağlık Araştırma Enstitüsü ve Kalp ve BC ve Yukon İnme Vakfı tarafından finanse Bu araştırma. Biz hayvan bakımı teknik destek ve uzmanlık için Sayın Rayshad Gopaul Dr. Shelly McErlane kabul etmek istiyorum.

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Malzemeler

NameCompanyCatalog NumberComments
11 Male Wistar Rats -Hsd-WI (250-300g)Envigo (formerly Harlan Laboratories) 141
Lab Chart (PowerLab® Data Acquisition System)AD Instruments 
Pressure Telemeter Millar Inc.RP-TRM54P
ConfiguratorMillar Inc.TR190
SmartPadMillar Inc.TR180
Isoflurane (Aerrane)Baxter Corp.DIN: 02225875
Enrofloxacin (Baytril)Bayer HealthcareDIN: 02169428
5-0 Silk SuturesEthiconS182
4-0 Vicryl SubcuticularEthiconJ496G
Buprenorphine (Temgesic)Reckitt BenckiserDIN: 0281250
Bupivicaine Hydrochloride (Marcaine 0.5%)Hospira Healthcare Corp. DIN: 02305909
Ketoprofen (Anafen)MerialDIN: 02150999
Ketamine Hydrochloride (Vetalar)BionicheDIN: 01989529
Dexmedetomidine Hydrochloride (Domitor)PfizerDIN: 02333929
Lactated Ringer's Solution Braun Medical Inc.DIN: 01931636
Gelfoam #12Pharmacia & Upjohn Company03603-14-1
MicroscissorsFine Science Tools15003-008
Iris SpatulaeFine Science Tools10094-13
10 French 35 cm Foley CatheterColoplast AA6110
Dietgel® Clear H2O, Westbrook, ME76A
LabDiet Rodent Diet 5001Purina Mills (PMI®)5001
Chlorhexadine (Hibitane)Wyeth Animal Health, Guelph, OntarioDIN 00245097
Atipamezole Hydrochloride(Antisedan)Orion PharmaDIN: 02237744

Referanslar

  1. Krassioukov, A., Claydon, V. E. The clinical problems in cardiovascular control following spinal cord injury: an overview. Progress in brain research. 152, 223-229 (2006).
  2. Krassioukov, A. Autonomic function following cervical spinal cord injury. Respiratory physiology & neurobiology. 169, 157-164 (2009).
  3. Teasell, R. W., Arnold, J. M. O., Krassioukov, A., Delaney, G. A. Cardiovascular consequences of loss of supraspinal control of the sympathetic nervous system after spinal cord injury. Archives of physical medicine and rehabilitation. 81, 506-516 (2000).
  4. Alan, N., et al. Recurrent autonomic dysreflexia exacerbates vascular dysfunction after spinal cord injury. The Spine Journal. 10, 1108-1117 (2010).
  5. Eltorai, I., Kim, R., Vulpe, M., Kasravi, H., Ho, W. Fatal cerebral hemorrhage due to autonomic dysreflexia in a tetraplegic patient: case report and review. Spinal Cord. 30, 355-360 (1992).
  6. Pan, S. -L., et al. Intracerebral hemorrhage secondary to autonomic dysreflexia in a young person with incomplete C8 tetraplegia: A case report. Archives of physical medicine and rehabilitation. 86, 591-593 (2005).
  7. Ho, C., Krassioukov, A. Autonomic dysreflexia and myocardial ischemia. Spinal cord. 48, 714-715 (2010).
  8. Wan, D., Krassioukov, A. V. Life-threatening outcomes associated with autonomic dysreflexia: A clinical review. The journal of spinal cord medicine. 37, 2-10 (2014).
  9. Mathias, C. J., Frankel, H. Cardiovascular control in spinal man. Annual review of physiology. 50, 577-592 (1988).
  10. Hubli, M., Krassioukov, A. V. Ambulatory Blood Pressure Monitoring in Spinal Cord Injury: Clinical Practicability. Journal of neurotrauma. 31, 789-797 (2014).
  11. Liu, N., Fougere, R., Zhou, M., Nigro, M., Krassioukov, A. Autonomic dysreflexia severity during urodynamics and cystoscopy in individuals with spinal cord injury. Spinal cord. 51, 863-867 (2013).
  12. Phillips, A. A., Elliott, S. L., Zheng, M. M., Krassioukov, A. V. Selective alpha adrenergic antagonist reduces severity of transient hypertension during sexual stimulation after spinal cord injury. Journal of neurotrauma. , (2014).
  13. Maiorov, D. N., Fehlings, M. G., Weaver, L. C., Krassioukov, A. V. Relationship between severity of spinal cord injury and abnormalities in neurogenic cardiovascular control in conscious rats. Journal of neurotrauma. 15, 365-374 (1998).
  14. Maiorov, D. N., Weaver, L. C., Krassioukov, A. V. Relationship between sympathetic activity and arterial pressure in conscious spinal rats. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 41, H625(1997).
  15. Rabchevsky, A. G., et al. Effects of gabapentin on muscle spasticity and both induced as well as spontaneous autonomic dysreflexia after complete spinal cord injury. Frontiers in physiology. 3, (2012).
  16. Mayorov, D. N., Adams, M. A., Krassioukov, A. V. Telemetric blood pressure monitoring in conscious rats before and after compression injury of spinal cord. Journal of neurotrauma. 18, 727-736 (2001).
  17. Ramsey, J. B., et al. Care of rats with complete high-thoracic spinal cord injury. Journal of neurotrauma. 27, 1709-1722 (2010).
  18. Krassioukov, A. V., Furlan, J. C., Fehlings, M. G. Autonomic dysreflexia in acute spinal cord injury: an under-recognized clinical entity. Journal of neurotrauma. 20, 707-716 (2003).
  19. Krogh, K., Mosdal, C., Laurberg, S. Gastrointestinal and segmental colonic transit times in patients with acute and chronic spinal cord lesions. Spinal cord. 38, 615-621 (2000).
  20. Krassioukov, A. V., Johns, D. G., Schramm, L. P. Sensitivity of sympathetically correlated spinal interneurons, renal sympathetic nerve activity, and arterial pressure to somatic and visceral stimuli after chronic spinal injury. Journal of neurotrauma. 19, 1521-1529 (2002).
  21. Braga, V. A., Prabhakar, N. R. Refinement of telemetry for measuring blood pressure in conscious rats. Journal of the American Association for Laboratory Animal Science: JAALAS. 48, 268(2009).
  22. Whitesall, S. E., Hoff, J. B., Vollmer, A. P., D'Alecy, L. G. Comparison of simultaneous measurement of mouse systolic arterial blood pressure by radiotelemetry and tail-cuff methods. American Journal of Physiology-Heart and Circulatory Physiology. 286, H2408-H2415 (2004).

Access restricted. Please log in or start a trial to view this content.

Yeniden Basımlar ve İzinler

Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi

Izin talebi

Daha Fazla Makale Keşfet

T pSay 113Telemetrialgoritmaomurilik yaralanmassempatik sinir sistemiotonom disrefleksikardiyovask ler otonomik disfonksiyonkalp h zkan bas nc

This article has been published

Video Coming Soon

JoVE Logo

Gizlilik

Kullanım Şartları

İlkeler

Araştırma

Eğitim

JoVE Hakkında

Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır