Разработка алгоритма Выполнение комплексного изучения Автономного дисрефлексия у животных с высоким повреждением спинного мозга Использование телеметрического устройства

Резюме

The catheter of a telemetry device is implanted into the abdominal aorta in order to continuously collect beat-by-beat hemodynamic data from animals pre and post-high thoracic spinal cord transection. A novel JAVA software was employed to analyze hemodynamic parameters as well as frequency and intensity of spontaneous episodes of autonomic dysreflexia.

Аннотация

Spinal cord injury (SCI) is a debilitating neurological condition characterized by somatic and autonomic dysfunctions. In particular, SCI above the mid-thoracic level can lead to a potentially life-threatening hypertensive condition called autonomic dysreflexia (AD) that is often triggered by noxious or non-noxious somatic or visceral stimuli below the level of injury. One of the most common triggers of AD is the distension of pelvic viscera, such as during bladder and bowel distension or evacuation. This protocol presents a novel pattern recognition algorithm developed for a JAVA platform software to study the fluctuations of cardiovascular parameters as well as the number, severity and duration of spontaneously occurring AD events. The software is able to apply a pattern recognition algorithm on hemodynamic data such as systolic blood pressure (SBP) and heart rate (HR) extracted from telemetry recordings of conscious and unrestrained animals before and after thoracic (T3) complete transection. With this software, hemodynamic parameters and episodes of AD are able to be detected and analyzed with minimal experimenter bias.

Введение

Вегетативные дисрефлексия (AD) является опасным для жизни аварийной у людей после острой или хронической травмы спинного мозга (SCI) в шейном или высоких грудных сегментов и, как правило , характеризуется эпизодами стойкой гипертензии и брадикардии ^1. AD главным образом вызвана нарушением нисходящих спинномозговых путей , которые , как правило , обеспечивают ввод от супраспинальных центров спинного симпатических преганглионарных нейронов , которые контролируют активность симпатической и сосудистого тонуса ^1-4. Эпизоды AD характеризуются всплеском систолического артериального давления (САД) до 300 мм ртутного столба , и если его не лечить , может привести к судорогам, внутричерепного кровоизлияния, инфаркт миокарда, и даже смерти ^5-8. Разнообразие вредных и безвредные раздражители выступать в качестве триггера АД, в том числе кишечника и мочевого пузыря , вздутие, спазмы, пролежней, катетеризация мочевого пузыря или ятрогенных процедур ^9-12.

Временное развитие AD в соотвonse к ТСМ было исследовано в обоих человека ⁹ и животных моделях ^13,14. Как правило , эти исследования использовали метод 'индуцируется AD' (т.е. уродинамика, на половом члене vibrostimulations в организме человека или колоректального вздутие у животных) для определения временного развития AD. Такой подход ограничен необходимостью повторных оценок в отдельных временных точках, которые могут препятствовать точное определение временного развития AD. Использование 24-часового мониторинга артериального давления в организме человека позволяет проводить измерения кровяного давления серийный быть сделаны в заранее определенные промежутки времени. Этот метод был недавно использован для мониторинга спонтанно возникающих АД у пациентов с хронической ТСМ. В моделях животных, твердотельные датчики давления все чаще используются для хронически контролировать потрепанный побочные бить артериального давления. В последнее время , Rabchesvky и др. (2012), разработал алгоритм, который извлекается одна секунда средние значения среднего артериального давления (MAP)d сравнивается с порогом средней скользящей ^15. Спонтанные события AD характеризовались на основе пиков MAP, которые 10 мм ртутного столба или более выше порога одновременно с падением HR 10 ударов в минуту или больше.

Вот роман программного обеспечения JAVA, который имеет встроенный алгоритм обнаружения AD представлен. Этот алгоритм работает путем обнаружения заранее определенных закономерностей в артериального давления (АД) и частоты сердечных сокращений (ЧСС), которые свидетельствуют о спонтанно произошедшем событии AD. Пользователь может вручную настроить все входные переменные для программного обеспечения таким образом, что "алгоритм обнаружения" можно легко настроить с учетом конкретных параметров, представляющих интерес. Программное обеспечение также может делиться на две части АВР и HR в данную эпоху , такие , что суточное Ритмичность гемодинамических параметров могут быть проанализированы ^16. В настоящей рукописи, приводится подробное описание дано хирургической техники, которая используется для имплантировать устройства телеметрии и провести операцию SCI. бывшийamples также предоставляются в отношении возможностей постобработки программного обеспечения обнаружения AD и как сердечно-сосудистой системы изменяется пост-SCI. Для сравнительных целей, методология и результаты, полученные методом индуцированной AD, известной как колоректальный растяжению (ККО) также показано на рисунке.

протокол

Самцах линии Вистар (HSD: WI Вистар) крыс в возрасте 7 недель и весом 300-350 г были использованы в этом эксперименте. Все крысы поддерживали на 12-часовом цикле свет / темнота и получали стандартную Chow лабораторных крыс и воду в неограниченном количестве. Все экспериментальные процедуры соответствовали с Руководством по уходу и использованию экспериментальных животных, установленным Канадским советом по уходу за животными и предоставивший официальное утверждение по этике Университета Британской Колумбии. Хирургическое и животных уход проводились в соответствии со стандартными процедурами , в нашей лаборатории (Ramsey и др. 2010) ^17.

1. Подготовка животных: Хирургические процедуры

1. Имплантация телеметрического устройства
   Примечание: Протокол был реализован в соответствии с техническими требованиями изготовителя и наш предыдущий опыт имплантации устройства: ¹⁶
   1. Предварительная обработка животных с энрофлоксацину, один раз в день в течение 3-х дней (10 мг / кг, с.c.) до операции.
   2. Удалить твердую пищу из клетки 9-13 ч до операции. Мягкая диета пищевой заменитель пищи может быть предоставлена ​​в течение этого периода.
   3. Анестезировать животных с использованием индукционной дозы 4% изофлуран в индукционной камере и поддерживающую дозу приблизительно 1,5% изофлуран (с 1-1,5 л / мин кислорода) с использованием схемы Bain. Используйте носок щепотку рефлекс и рефлексы роговицы, чтобы оценить, является ли животные в хирургической плоскости анестезии. Дыхательный необходимо контролировать , чтобы оценить , если глубина анестезии слишком высока (то есть, очень медленный темп дыхания и задыхаясь, бледные слизистые оболочки) или слишком низким (т.е. быстрые, мелкие дыханий , указывающие на животное не может быть при хирургической плоскости анестезии ). Повторите контроль хирургической плоскости анестезии примерно каждые 5 мин во время операции и корректировать дозу изофлуран по мере необходимости.
      Примечание: Все операции выполняются с использованием асептической техники: в частности, хирурги носятхирургические скрабы, шапка, маска, и стерильные перчатки. наблюдается Открытая процедура перчатками, автоклавированы хирургический пакет, содержащий хирургических инструментов открыт с использованием стерильной техники и животное драпированные перед началом операции. Хирургические инструменты наконечник стерилизуют в горячих бусин между хирургических операций (до пяти операций). Хирургические губок и марли автоклавируют перед использованием. Во время операции, животные содержатся на безводной циркуляционный одеяле, поддерживаемой при 37 ° С.
   4. Администрирование бупренорфин (0,02 мг / кг, подкожно) непосредственно перед операцией. Кроме того, управлять кетопрофен (5 мг / кг, подкожно) до хирургического вмешательства для обеспечения мультимодальных обезболивание. Администрирование бупивакаина (5 мг / кг, подкожно) непосредственно перед операцией, чтобы обеспечить блок местной линии. После бритья живота, применяют чередуя тампоны хлоргексидина и 70% этанола (по три раза), а затем повидон-йод в течение не менее 1 мин, и удалить с помощью 70% этанола (каждый раз с вновь открытого спиртом). Свабирование коживыполнен в концентрической моды, начиная с центра линии разреза и кружась наружу (чтобы не загрязнять площадь под "Спинка / далее" движений). Используйте стерильные марлевые тампоны и отбрасывать между каждым приложением. Этот процесс повторяется три раза, прежде чем начать операцию животных. В то время как обрезано и хирургическим вымыты, держать животных на носовом обтекателе, подключенного к не передыханию схеме Bain при приблизительно 1,5% поддерживающей дозы изофлюрана. Отрегулируйте изофлуран уровня по мере необходимости для поддержания животных при хирургической анестезии плана.
   5. Сделайте длинный 5 см по средней линии живота разрез прорезая мышцы и брюшину подвергая кишечник.
   6. Отвод кишечники (это подвергнет нисходящей аорты на задней брюшной стенки), покрывают кишку стерильной хирургической марли, смоченную 2-3 мл раствора Рингера и держать влажные с дополнительными Ringers так часто, как необходимо, чтобы предотвратить высыхание ткани через процедуру ,
   7. Блант рассекают вокруг аорты и отделяют аорту от нижней полой вены с использованием РОГ spatulae.
   8. Место лигатуры (8-0 монофиламентных нитей) вокруг ростральными и каудального концов самой дальней от центра адвентиции слоя аорты, расположенной по периферии почечной артерии.
   9. Поднимите лигатур кратко загораживает кровоток и проткнуть аорту на уровне 1-2 мм до передней подвздошной бифуркацией с иглой согнуты 25 калибра под углом 90 ° на конце.
   10. Руководство кончик катетера устройства телеметрического в аорту с использованием 20-го калибра изогнутой иглы. Advance ростральным, чтобы убедиться, что кончик чуть дистальнее почечных артерий
       1. Исправить это с помощью небольшого количества клея ткани. Удалить лигатуры и обеспечить не закупорка кровотока вследствие катетера или ткани клеем.
   11. Закрепить корпус устройства телеметрического в брюшную стенку с использованием 4-0 шелковыми швами. Используйте 4-0 викрил и 4-0 PROLENE наложения швов, чтобы закрыть MuSCле и кожи, соответственно.
2. Телеметрия Имплантация Послеоперационный уход
   Примечание: В течение первых 14 дней после хирургии животных должны быть проверены по крайней мере, 3 раза в день, в дополнение к детальной оценки мониторинга один раз в день. Оценка животных в 7 категориях: вес тела, физический облик (боль оценивается по признаков, таких как увеличение производства порфирина видели вокруг глаз, носа и передние лапы, и лицевые признаки гримасу), поведение / активности, дефекации, кожи (в том числе скрючившись, пилоэрекции , надрез исцеление и серому), гидратация и дыхание.
   1. Кормить животных с фруктами, ассортимент круп, мягкой диеты пищевой заменитель еды, и обеспечивают воду в неограниченном количестве, в течение 6 дней после имплантации телеметрического устройства. Животные должны иметь регулярный твердый корм для грызунов, удерживаемого в первый день после операции. Вводят животных с подогреваемой раствором Lactated Рингера (5 мл) подкожно в течение первых 3-х дней после операции и по внешнему видусимптомов обезвоживания. Администрирование раствора Рингера (5 мл) по мере необходимости при оценке животных (признаки палатки кожи, бледных ушей / слизистых оболочек) во время утренних и вечерних проверок.
   2. Администрирование энрофлоксацин (10 мг / кг, подкожно) и кетопрофен (5 мг / кг, подкожно) один раз в день, в течение 3-х дней после операции. Администрирование бупренорфин (0,02 мг / кг, подкожно) во время утром и вечером (т.е. каждые 12 ч) в течение следующих 3 -х дней после операции. Середине дня доза бупренорфина (0,02 мг / кг, подкожно), могут быть введены, если признаки боли / дистресс отмечены.
3. Полная перерезка спинного мозга
   Примечание: Разрешить животных для восстановления после операции имплантации телеметрической в ​​течение по крайней мере за 14 дней до Т3 полная перерезка хирургии.
   1. Предварительная обработка животных с профилактической энрофлоксацину (10 мг / кг, подкожно) в течение трех дней до SCI хирургии.
   2. Анестезировать животных под индукционной дозе 4% изофлуран, как описано ранее. В дальнейшем,вводят животным с кетамина гидрохлорид (70 мг / кг, внутрибрюшинно) и гидрохлорид дексмедетомидина (0,5 мг / кг, внутрибрюшинно).
      Примечание: Для получения полных операций рассечения, вазодилатацию, вызванное изофлюрана довольно часто вызывает проблемы с гемостаза раз шнур перерезана. Эта проблема может быть предотвращено с помощью кетамина / Дексмедетомидин коктейль. Животные должны быть под наркозом в течение 20-25 мин, и обратить вспять с помощью Атипамезол (1 мг / кг, подкожно) после спинного мозга хирургии рассечение.
   3. Перед операцией вводить подкожно бупренорфин (0,02 мг / кг) и кетопрофена (5 мг / кг). Администрирование бупивакаина (5 мг / кг, подкожно) непосредственно перед операцией, чтобы обеспечить блок местной линии. После бритья живота, чередуя щетки хлоргексидина и 70% этанола (по три раза), а затем повидон-йод следует применять в течение по крайней мере 1 мин, и удаляют с 70% -ным этанолом (каждый раз с вновь открытого спиртом). Кисти должны быть сделаны в концентрической моды началав центре линии разреза и кружась наружу (чтобы не загрязнять площадь на "Назад / далее" движений). Используйте стерильную марлю и отбрасывать между каждым приложением. Повторите этот процесс три раза перед началом операции на животных. В то время как обрезано и хирургическим вымыты, держать животных на носовом обтекателе под примерно 1,5% поддерживающей дозы изофлуран (корректируются по мере необходимости для поддержания хирургической анестезии плоскости). В течение всего периода после операции животных держат на воде циркулирующие одеяло, поддерживаемую при 37 ° С.
   4. Сделать спинной срединный разрез, 2 см в длину, в поверхностной мышцы, покрывающей C8-T3 позвонки.
   5. Блант рассекать с целью выявления твердой мозговой слой.
   6. Пирс твердой мозговой слой с microscissors или с наконечником 25 иглы калибра.
   7. Откройте твердую мозговую оболочку в межпозвоночных щели T2-T3 и выполнить полное рассечение с помощью microscissors. Откройте microscissors, но не хватает в боковом направлении, чтобы взрыв позвоночный arteries и вены. В быстрое движение секут спинного мозга и поиск преувеличенной дергаться в животном задних конечностей. Подтвердите полное рассечение с помощью визуального разделения ростральной и каудальной спинного мозга пней.
   8. После подтверждения, поместите Gelfoam между пней для достижения гемостаза. Нанесите достаточное количество Gelfoam, чтобы остановить кровотечение и отделить пни спинного мозга.
   9. Используйте 4-0 Викрил и 4-0 Prolene швы, чтобы закрыть мышцы и кожу, соответственно. После того, как SCI хирургии, дают животным предварительно нагреты раствор Рингера с лактатом (5 мл, подкожно при 30 ° С) и дать им возможность восстанавливаться в среде с контролируемой температурой.
4. Спинной мозг Перерезка Послеоперационный уход
   Примечание: В течение первых 14 дней после хирургического вмешательства животные должны быть проверены 3 раза в день, в дополнение к детальной оценки мониторинга один раз в день. Через 14 дней после детальной оценки мониторинга может повторяться каждый день. Оценка животных в 7 categoРайса: масса тела, физическая внешность (боль оценивается по признаков, таких как порфирина и гримасой лица), поведение / активности, дефекации, кожи (в том числе скрючившись, пилоэрекции, надрез исцеления и серома), гидратация и дыхания. В течение первых 5-7 дней пузыри должны быть проверены и выражены по крайней мере, 3 раза в день.
   1. Кормить животных с фруктами, ассортимент круп, пищевой мягкой замены диеты еды, и обеспечивают воду в неограниченном количестве, в течение 8-14 дней после перерезки спинного мозга хирургии. Вводят животных с подогретым раствором лактата Рингера (5 мл) подкожно в течение первых 3 дней после операции и на симптомы обезвоживания. Администрирование раствор Рингера (5 мл) по мере необходимости при оценке животных во время проверок.
      Примечание: После перерезки спинного мозга крысы проявляют паралич задних конечностей, а также при помощи передвигаться сгибание и разгибание передних конечностей, сохранившаяся в этой модели травмы. Крысы не хватает туловища и хвоста поддержки. Для облегченияих движение в клетке, резиновая сетка должна быть помещена под овсяные хлопья постельные принадлежности. Это позволяет крысы, чтобы понять сетку с лапами, и легко перемещаться в клетке, чтобы получить доступ к пище и воде. Постельное белье следует менять ежедневно. На 7-й день после перерезки спинного мозга, овсяная постельные принадлежности должны быть заменены на их первоначально древесной щепы постельные принадлежности. Овсяные хлопья постельного белья используется с крыс, получавших бупренорфин может развиться пику, в котором они едят постельные принадлежности, и это может привести к пищеводу impactions. Овсяные хлопья являются не наблюдалось абсорбента сдавление пищевода с геркулеса.
   2. Администрирование энрофлоксацин (10 мг / кг, подкожно) и кетопрофен (5 мг / кг, подкожно) один раз в день в течение 3-х дней после операции. Администрирование бупренорфин (0,02 мг / кг, подкожно) во время утром и вечером (т.е. каждые 12 ч) в течение следующих 3 -х дней после операции. В середине дня доза бупренорфина могут быть введены, если признаки боли / бедствия отмечены.

2. ТелеметрияМониторинг гемодинамических параметров

1. Собирают потрепанный по-ритм артериального давления (АД) и температуры тела ежедневно в течение 24 ч, до и после ТСМ. Образец артериальное давление и температуру тела при 1000 Гц в течение 24 ч блоков с использованием устройства телеметрии.
2. Поместите Smartpad под животной клетки для беспроводной подзарядки преобразователя и для приема цифровых сигналов телеметрических от датчиков.
   Примечание: Выходное напряжение затем передается в конфигураторе, подключенный к компьютеру, который организует поток данных от каждого канала. Напряжение преобразуется в непрерывных артериального давления и температуры записи. Визуализируйте выборочные данные, использующие программное обеспечение для сбора данных, такие как LabChart.
3. Откажитесь телеметрические данные, собранные в ходе мониторинга животных, а также в течение 10 мин непосредственно до мониторинга и 10 мин после мониторинга.

3. Оценка Спонтанное Incidчия вегетативных дисрефлексия (AD)

Примечание: Частота, тяжесть и длительность спонтанных событий АД оценивали с использованием алгоритма , разработанного для нашего собственного романа AD Обнаружение JAVA платформы программного обеспечения (Рисунок 4). Новый алгоритм был разработан для автоматического обнаружения спонтанные события AD на основе 24 ч СБП и HR телеметрических записей до и после ТСМ с использованием параметров , указанных на рисунке 2.

1. Извлечение значений САД и HR из необработанных данных телеметрии в течение периода интереса с использованием программного обеспечения сбора.
   Примечание: Программное обеспечение сбора обнаруживает и определяет значение СБП пиков из непрерывных записей ABP. Частота сердечных сокращений экстраполируется путем определения расстояния длительности между соседними СБП пиков.
2. Загрузить файл CSV из телеметрических записей с interbeat интервалом в колонке А, СБП значения в столбце В, значений MAP в столбце С и времени суток яп столбце D (рис 4A).
3. Использование программного обеспечения (Рисунок 4B-D), укажите соответствующий физиологический диапазон HR (т.е. R в интервале R) для записи СБП от 180 ударов в минуту и 625 ударов в минуту. Укажите соответствующий диапазон HR на программное обеспечение под Heart Rate Минимальное и частота сердечных сокращений Максимальное количество панелей.
4. Создание порога для САД и ЧСС через окна скользящего среднего значения 240 сек. Укажите длину окна скользящего среднего порога для анализа в AD Продолжительность Threshold панели.
5. Установить транспонированное порог SBP на 20 мм рт.ст. выше скользящей средней линии. Укажите значение транспозиции в скользящее среднее значение порога панели Транспонирование BP.
6. Изолировать SBP пиковые кластеры, которые превышают пороговое значение транспонирования с пиком на пик интервал менее 2 сек, и в течение срока более чем на 10 сек. Укажите от пика до пика интервала с использованием Interpeak интервала BP и ДюРацион интервал с помощью панели Пиковая кластера Интервал BP.
7. пиковые кластеры группы СБП, которые находятся в пределах 120 секунд друг от друга.
   Примечание: Обнаружен потенциальные события AD, которые в течение 120 секунд друг от друга будут сгруппированы как одно событие. Укажите максимальную длительность , разрешенное между последовательными СБП кластеров , чтобы дифференцировать отдельные события AD в панели AD Длительность Порог.
8. Подтвердите, если группа СБП пиков кластеров связаны с потенциальным событием спонтанное AD путем обнаружения падения ЧСС 40 ударов в минуту или больше.
   1. Среднее 10% значений HR при наступлении потенциального события (указать этот процент в верхней частоты сердечных сокращений падение средней панели диапазона). В среднем 75% от значений частоты сердечных сокращений от конца потенциального события (указать этот процент в нижнем частота сердечных сокращений падение средней панели диапазона).
   2. Вычесть нижний порог частоты сердечных сокращений с более высокого порога сердечного ритма, с тем чтобы обеспечить корреспондентскихDing капли 40 ударов в минуту или больше. Укажите частоту сердечных сокращений ограничение падения с помощью сердечного ритма панель ограничения падения.
9. После того , как панели были заполнены, нажмите кнопку OK. Графическое представление обнаруженных событий AD представлены, которые включают в себя шипы в СБП и связанные с ними данные HR (Рисунок 4C-D). Выход Excel файл также генерируется с ответом прессорного (мм рт.ст.), длительность (с), не более систолическое артериальное давление (мм рт.ст.), минимальное HR (ударов в минуту) и падение HR (BPM) каждого обнаруженного события AD.

4. Колоректальный Распирание Преднамеренно Выявите AD

Примечание: Серьезность индуцированной AD может быть определена через колоректального растяжению (CRD), клинически значимого стимула , который имитирует работу кишечника рутинной ^3,18,19.

1. Проверьте баллон французского катетера (прямые, 10 французский, 3 мл, 35 см, латекс) не протекает, раздувая его с 2 мл воздуха.
2. Сдерживать тысе животное, обернув в полотенце и позволить BP и HR стабилизироваться в течение получаса.
3. Поместите смазку на кончик катетера. Поместите метку на катетер с постоянным маркером, 2 см от середины баллона. Катетер вводится через задний проход в толстую кишку, пока метка не будет видна только на открытии. Безопасный катетер к хвосту с хирургической лентой. Повторное место обернутый животное в его родной клетке размещены на приемнике SmartPad, совпадающим с имплантированный датчик внутри животного. Разрешить ВР животного нормализовать в течение 10 мин.
4. После введения катетера и соответствующего периода акклиматизации (то есть, 10 мин), влить баллон с 2 мл воздуха в течение 10 сек, позволит BP и HR стабилизироваться. Поддерживать вздутие в течение 1 мин. Убедитесь, что кончик катетера остается внутри прямой кишки. Важно , чтобы не чрезмерно раздувают баллон (то есть, 3 мл +) для того , чтобы избежать разрыва толстой кишки.
   Примечание: вздутие в течение от 1 мин &# 160; дает возможность обеспечить соответствующее время для разработки прессорной реакции и барорецепторов опосредованной капли HR, связанного с индуцированным эпизод AD. Кроме того, в этот период 1 мин и обеспечивает достаточное время для нормализации сердечно-сосудистой системы показателей.
5. Повторите вздутие 3 раза в испытании, повторяя пробы ежедневно с минимальным интервалом 10 мин между испытаниями. После того, как оценка будет завершена, удалите катетер Фоли от животного.
6. Средняя ритм-по-битом данных через интервалом в 1 сек и сообщить максимальное увеличение САД и максимальное снижение ЧСС в течение нескольких испытаний.

Результаты

Используя телеметрию, артериальное давление оцифровывается с частотой 1000 Гц непрерывно в течение 24 часов. Показательным запись артериального давления (АВР) с использованием LabChart показан на рисунке 1В. Образец АБП контролировали с помощью твердого датчика давления, состояния,...

Обсуждение

Протокол описывает подробную реализацию новой платформы JAVA обнаружения AD программное обеспечение , которое будет сочетаться с телеметрическим устройством, для долгосрочного тщательного анализа АБП в SCI-животных (рис 1В). Это первое программное обеспечение, которое позволяет ...

Материалы

Name	Company	Catalog Number	Comments
11 Male Wistar Rats -Hsd-WI (250-300g)	Envigo (formerly Harlan Laboratories)	141
Lab Chart (PowerLab® Data Acquisition System)	AD Instruments
Pressure Telemeter	Millar Inc.	RP-TRM54P
Configurator	Millar Inc.	TR190
SmartPad	Millar Inc.	TR180
Isoflurane (Aerrane)	Baxter Corp.	DIN: 02225875
Enrofloxacin (Baytril)	Bayer Healthcare	DIN: 02169428
5-0 Silk Sutures	Ethicon	S182
4-0 Vicryl Subcuticular	Ethicon	J496G
Buprenorphine (Temgesic)	Reckitt Benckiser	DIN: 0281250
Bupivicaine Hydrochloride (Marcaine 0.5%)	Hospira Healthcare Corp.	DIN: 02305909
Ketoprofen (Anafen)	Merial	DIN: 02150999
Ketamine Hydrochloride (Vetalar)	Bioniche	DIN: 01989529
Dexmedetomidine Hydrochloride (Domitor)	Pfizer	DIN: 02333929
Lactated Ringer's Solution	Braun Medical Inc.	DIN: 01931636
Gelfoam #12	Pharmacia & Upjohn Company	03603-14-1
Microscissors	Fine Science Tools	15003-008
Iris Spatulae	Fine Science Tools	10094-13
10 French 35 cm Foley Catheter	Coloplast	AA6110
Dietgel®	Clear H2O, Westbrook, ME	76A
LabDiet Rodent Diet 5001	Purina Mills (PMI®)	5001
Chlorhexadine (Hibitane)	Wyeth Animal Health, Guelph, Ontario	DIN 00245097
Atipamezole Hydrochloride(Antisedan)	Orion Pharma	DIN: 02237744