Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Method Article
Bir yüksek yağlı, yüksek-Sükroz diyet kullanarak tavşan metabolik sendrom (MetS) diyet kaynaklı deneysel bir model geliştirmek için yöntemleri açıklanmaktadır. Hayvanlar Merkezi obezite, hafif hipertansiyon, ön şeker hastalığı ve dislipidemi, böylece insan MetS ana bileşenleri üreyen geliştirilmiştir. Bu kronik model bilgi temel mekanizmaları hastalık progresyon edinimi sağlayacaktır.
Son yıllarda obezite ve metabolik sendrom (MetS) halk sağlığı ve klinik pratikte, onların artan yaygınlık sedanter yaşam ve sağlıksız beslenme alışkanlıkları yükselişi nedeniyle verilen için büyüyen bir sorun haline gelmiştir. Hayvan modelleri sayesinde temel araştırma MetS gibi patolojik süreçler altta yatan mekanizmaları araştırabilirsiniz. Burada, diyet kaynaklı MetS ve onun değerlendirme bir deneysel tavşan modeli geliştirmek için kullanılan yöntemleri açıklar. Calıştıkları bir süre sonra hayvanlar için 28 hafta yüksek yağlı (% 10 hidrojene Hindistan cevizi yağı ve % 5 domuz yağı), yüksek-sukroz (suda % 15 Sükroz) diyet beslenir. Bu dönemde, MetS farklı bileşenleri değerlendirmek için çeşitli deneysel prosedürler gerçekleştirilmiştir: morfolojik ve tansiyon ölçümleri, glikoz tolerans belirlenmesi ve birkaç plazma işaretleri analizi. Deneysel dönemi, geliştirilen hayvanlar Merkezi obezite, hafif hipertansiyon, ön şeker hastalığı ve dislipidemi düşük HDL, yüksek LDL ve trigliserid (TG) düzeyleri bir artış ile sonunda, böylece insan MetS ana bileşenleri çoğaltılması. Hastalığı, hastaların risk tanımlaması veya bile yeni test izin preklinik ve klinik işaretleri tespiti ilerleme temel mekanizmaları anlamak için yeni bakış açıları bu kronik modeli verir tedavi Bu karmaşık patoloji tedavisi için yaklaşımlar.
Obezite ve metabolik sendrom (MetS) halk sağlığı ve klinik pratikte, onların artan yaygınlık sedanter yaşam ve sağlıksız beslenme alışkanlıkları1yükselişi nedeniyle verilen için büyüyen bir sorun haline gelmiştir. MetS birçok tanımı vardır ama bunların çoğu abdominal obezite, düşük HDL ve yüksek LDL kolesterol, yüksek trigliserid, glukoz intoleransı ve hipertansiyon2 gibi kardiyovasküler ve metabolik değişiklikler kümesi olarak tarif ,3,4. Tanı bu beş kriterleri üçünü mevcut olmasını gerektirir.
Hayvan modelleri sayesinde temel araştırma MetS gibi patolojik süreçler altta yatan mekanizmaları incelemek mümkün olmuştur. Birkaç hayvan modeli kullandık ama seçim modeli insan patoloji (şekil 1) ana klinik belirtileri üretir çok önemli önem taşımaktadır. Bu amaçla, insanlar, çoğunlukla köpek ve domuz, benzer kabul hayvan modelleri (bkz: Verkest5 ve Zhang & Lerman6 bir daha gözden geçirme için) geliştirilmiştir. Ancak, ateroskleroz veya hiperglisemi diyet yoluyla köpeklerde geliştirilmesi şüpheli5verilen bu köpek modelleri MetS, tüm bileşenleri gösterme. Domuz modelleri en anatomik ve fizyolojik benzerlik insanlarla sunmak ve böylece elucidating MetS yatan mekanizmaları için önemli akıllı güç teklif, ama onların bakım ve deneysel prosedürler karmaşıklığı yapmak belgili tanımlık kullanma Bu modeli çok emek yoğun ve pahalı6.
Öte yandan, kemirgen modelleri (fare ve sıçan), diyet kaynaklı spontan ve transgenik, kapsamlı bir şekilde kullanıldığını literatürde obezite, hipertansiyon ve MetS ve patolojik sonuçları farklı organ ve sistemleri (bkz: Wong incelenmesi için vd. 7 bir daha gözden geçirme için). Bu modellerin kullanımı köpek veya domuz daha uygun olsa da, onlar önemli sakıncaları var. Gerçekten de, diğerleri gibi hipertansiyon, hiperglisemi ve Hiperinsülinemi7ise bağlı olarak gerginliği, MetS, bazı bileşenleri hayvanlar geliştirmek. Ayrıca, MetS, obezite, genetik olarak değiştirilmiş bazı suşları, ana bileşenlerden biri sadece diyet ile ilişkili faktörlere bağlı değildir, bazı hayvanların normal veya bile indirimli gıda alımı8ile obez olma gösterilmiştir tercih ederim. Son olarak, fare ve sıçanların doğal bir eksikliği Kolesteril ester transfer proteini (İngilizce) göstermek ve HDL kolesterol nakliyesinin onları ateroskleroz gelişimi için nispeten dayanıklı kılan büyük aracı olarak kullanın. Bu insanlar, kim İngilizce hızlı ve onların kolesterol başta olmak üzere LDL9taşıma ile lipid metabolizması önemli bir farktır.
Diğer taraftan, laboratuvar tavşan daha büyük hayvan ve kemirgen deneysel modeller arasında bir ara sahne temsil eder. Böylece, tavşan personel ve bakım, deneysel yordamlarda daha büyük hayvan modeller daha kolay ele alınması gereken en az gereksinimleri ile iletişim kurallarının farklı türleri kolayca gönderilebilir. Ayrıca, bu yüksek yağlı diyet ile beslenen tavşan obez insanlar8,10,11benzer hemodinamik ve neurohumoral değişiklikler var bildirilmiştir. Dikkat, lipid metabolizması, ilgili, tavşan bol İngilizce plazmada olup onların lipoprotein profili LDL-zengin12, da insanlara benzer ile. Ayrıca, otobur diyet yağ13için çok hassas göz önüne alındığında da olmaları, tavşan oldukça hızlı hiperlipidemi geliştirmek.
Şekil 1: karşılaştırma MetS hayvan modellerin. Bkz: Verkest5, Zhang ve Lerman6ve Wong vd. gözden geçirme için 7 . "" bir avantaj gösterir ve "
" bir dezavantaj gösterir. *tartışmalı, üzerinde çalışma, aynı derecede sivri uçlu *dışarı Carroll ve ark. tarafından bağlıdır 8, genetiği değiştirilmiş bazı suşları gıda alımı bağımsız olarak obez olma. HARİÇ: Kolesteril ester transfer proteini. GTT: glikoz tolerans testi. Bu rakam daha büyük bir versiyonunu görüntülemek için buraya tıklayınız.
Patolojik farklı organ ve sistemleri MetS tarafından üretilen remodeling altında yatan temel mekanizmaları aydınlatmak için ve bu karmaşık patoloji, ana bileşenleri üretir deneysel bir model seçimi anlamak için insan MetS esastır. Tavşan insan fizyolojisi ve kronik iletişim kuralları ve ölçüleri kullanmak uygun fiyatta ile benzerlik verilen birçok avantaj sağlar. Bu satırda, yüksek yağlı ve yüksek-Sükroz diyet kullanarak kaç tavşan diyet kaynaklı model olmuştur14,15,16,17,18,19 (Tablo 1), kullanılan ve bir MetS farklı bileşenlerin karakterizasyonu bir fenotip organ remodeling ile ilgili zaman büyük önem taşıyor. Böylece, bu makalenin temel amacı kendi patofizyolojisi çalışma sağlar diyet kaynaklı MetS tavşanların ve organ remodeling etkisi bir model geliştirmek için yöntemleri tarif etmektir.
Çalışma | Diyet | Süresi | Cins | MetS bileşenleri | |||
OB | HT | HG | DL | ||||
Yin vd (2002)14 | · % 10 yağ | 24 hafta | · Erkek NZW | ![]() | - | ![]() | ![]() |
· % 37 sükroz | · 2 kg | ||||||
Zhao vd (2007)15 | · % 10 yağ | 36 hafta | · Erkek JW | ![]() | ![]() | ![]() | ![]() |
· % 30 sükroz | · 16 hafta | ||||||
Helfestein vd (2011)16 | · % 10 yağ | 24 hafta | · Erkek NZW | ![]() | - | ![]() | ![]() |
· % 40 sükroz | · 12 hafta | ||||||
· 0,5-0,1 kolesterol | |||||||
Ning ve ark. (2015)17 | · % 10 yağ | 8-16 hafta | · Erkek WHHL | ![]() | - | ![]() | ![]() |
· % 30 fruktoz * | · 12 hafta | ||||||
Liu ve ark. (2016)18 | · % 10 yağ | 48 hafta | · Erkek NZW | ![]() | - | ![]() | ![]() |
· % 30 sükroz | · 12 hafta | ||||||
Aryalar Mutis et al. (2017)19 | · % 15 yağ | 28 hafta | · Erkek NZW | ![]() | ![]() | ![]() | ![]() |
Tablo 1: MetS diyet kaynaklı yüksek yağlı, yüksek-Sükroz diyet kullanarak modelleri tavşan. Sembolü ""olmaması, gösterir"
" varlığı, ve "-" değil değerlendirilir. * sınırlı. WHHL, Watanabe kalıtsal hiperlipidemic tavşan. JW, Japon beyaz tavşan. OB, obezite. HT, hipertansiyon. HG, hiperglisemi. DL, dislipidemi.
Hayvan bakımı ve bu çalışmada kullanılan deneysel protokoller AB yönergesi 2010/63 bilimsel amaçlarla kullanılan hayvanların korunması uyulması ve kurumsal hayvan bakım ve kullanım Komitesi (2015/VSC/BEZELYE/00049) tarafından kabul edildi.
Not: Protokol 28 hafta için yüksek yağlı, yüksek-Sükroz diyet kronik İdaresi ve MetS ana bileşenleri değerlendirilmesi oluşur. Biz 11 yetişkin erkek Yeni Zelanda beyaz (NZW) tavşan ağırlığında 4.39 ± 0,14 (SD) kullanılan kg, 20-22 hafta deneysel protokol başında eski edildi. Nem (%50 ± 5) ile bir odada muhafaza ve sıcaklık kontrollü (20 ± 1,5 ° C) koşulları ile 12 saat ışık döngüsü. Kelime "yemek" ve "diyet" Protokolü adımda birbirlerinin yerine kullanılabilir.
1. diyet yönetimi
2. morfolojik değerlendirme
3. oruç Glycemia ve intravenöz glikoz tolerans testi (IVGTT)
Not: Bu gün (örneğin, 2-3 PM) işlemleri başlatmak için tavsiye edilir.
4. kan basıncı
5. plazma ölçümleri
Not: Bu gün (örneğin, 2-3 PM) işlemleri başlatmak için tavsiye edilir.
MetS olan çalışmada deneysel modelleri kullanımını tarafından kolaylaştırılabilir metabolik ve kardiyovasküler anormallikler bir küme temsil eder. Nitekim, patolojik remodeling MetS tarafından üretilen temel mekanizmaları aydınlatmak için uygun insan durumuna benzer ve araştırma için uygun olan deneysel bir model seçimi çok önemli önem taşımaktadır. Burada, in onun değerlendirme için bir diyet yüksek doymuş yağ ve sukroz ve detaylı karakterizasyonu kullana...
Uygun deneysel bir model kurulması MetS gelişimi çalışmaya daha tutarlı ve güvenilir bir yöntem sağlayabilir ve organ ve sistemleri remodeling altında yatan temel mekanizmaları anlamak gereklidir. Burada, biz diyet kaynaklı MetS ve bu model karakterize metabolik ve kardiyovasküler anormallikler bu küme ana bileşenleri değerlendirmek nasıl ilgili bir deneysel modeli geliştirmek için kullanılan yöntemleri tarif: Merkezi obezite, hipertansiyon, glikoz intoleransı ve dislipidemi düşük HDL, yüksek LD...
Yazarlar onlar rakip hiçbir mali çıkarları var bildirin.
Bu eser Generalitat Valenciana (GV2015-062), MZ için Universitat de València (UV-Inv-PRECOMP14-206372), Generalitat Valenciana (PROMETEOII/2014/037) ve Instituto de Salud Carlos III-FEDER fonlar (CIBERCV CB16/11/0486) FJC tarafından desteklenmiştir.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
Veterinary scale | SOEHNLE | 7858 | Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale |
Shovel for aluminum feed | COPELE | 10308 | Shovel for aluminum feed http://copele.com/es/herramientas/48-pala-para-pienso-de-aluminio.html |
Balance | PCE Ibérica | PCE-TB 15 | Balance http://www.pce-iberica.es/medidor-detalles-tecnicos/balanzas/balanza-compacta-pce-bdm.htm |
Strainer (20 cm diam.) | ZWILLING | 39643-020-0 | Strainer https://es.zwilling-shop.com/Menaje-del-hogar/Menaje-de-cocina/Menaje-especial/Accesorios/Colador-20-cm-ZWILLING-39643-020-0.html |
Bowl | ZWILLING | 40850-751-0 | Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale |
Funnel | BT Ingenieros | not available | Funnel http://www.bt-ingenieros.com/fluidos-y-combustibles/961-juego-de-4-embudos-de-plastico.html?gclid=EAIaIQobChMIuInui_y-1QIVASjTCh28Zwf-EAQYBSABEgK7xPD_BwE |
Introcan Certo 22G blue | B Braun | 4251318 | Peripheral intravenous catheter http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan- |
Propofol Lipuro 10 mg/ml vial 20 ml | B Braun | 3544761VET | General intravenous anesthetic http://www.bbraun-vetcare.es/producto/propofol-lipuro-1- |
FisioVet serum solution 500ml | B Braun | 472779 | Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale |
Askina Film Vet 1,25cm x 5m | B Braun | OCT13501 | Plastic Plaster http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet |
Askina Film Vet 2,50cm x 5m | B Braun | OCT13502 | Plastic Plaster http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-film-vet |
Injekt siringe 10ml luer | B Braun | 4606108V | Injection-aspiration syringe of two single-use bodies http://www.bbraun-vetcare.es/producto/injekt- |
Seca 201 | seca | seca 201 | Ergonomic tape for measuring perimeters https://www.seca.com/es_es/productos/todos-los-productos/detalles-del-producto/seca201.html#referred |
Sterican 21Gx1" - 0,8x25mm verde | B Braun | 4657543 | Single Use Hypodermic Needle http://www.bbraun-vetcare.es/producto/agujas-hipodermicas-sterican- |
CONTOURNEXT-Meter | BAYER | 84413470 | Blood glucose analysis system http://www.contournextstore.com/en/contour-next-meter-2 |
CONTOUR NEXT test strips | BAYER | 83624788 | Blood glucose test strips http://www.contournextstore.com/en/contour-next-test-strips-100-ct-package |
MICROLET NEXT LANCING DEVICE | BAYER | 6702 | Lancing device http://www.contournextstore.com/en/new-microlet-next-lancing-device |
MICROLET 2 Colored Lancets | BAYER | 81264857 | Ultra-thin sterile lancet for capillary puncture http://www.contournextstore.com/en/microlet2-colored-lancets-100s |
Injekt 20ml luer siringe | B Braun | 4606205V | Scale https://www.soehnle-professional.com/en/productgroup/details/103/veterinary-scale |
Askina Mullkompressen 7,5x7,5cm - sterile | B Braun | 9031219N | Sterile gauze packets in envelopes http://www.bbraun-vetcare.es/producto/askina-mullkompressen-esteril |
Emla lidocaine/prilocaine | AstraZeneca | not available | Local anesthetics https://www.astrazeneca.es/areas-terapeuticas/neurociencias.html |
Introcan Certo 18G short | B Braun | 4251342 | Peripheral intravenous catheter http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan- |
Introcan Certo 20G | B Braun | 4251326 | Peripheral intravenous catheter http://www.bbraun-vetcare.es/producto/introcan- |
Blood Pressure Transducers-MA1 72-4497 | Harvard Apparatus | 724497 | Transducer for monitoring blood pressure http://www.harvardapparatus.com/physiology/physiological-measurements/transducers/pressure-transducers/research-grade-pressure-transducers.html |
PowerLab 2/26 | AD Instruments | ML826 | Amplifier https://www.adinstruments.com/products/powerlab |
LabChart ver. 6 | AD Instruments | not available | Acquisition software https://www.adinstruments.com/products/labchart |
Animal Bio Amp | AD Instruments | FE136 | Amplifier https://www.adinstruments.com/products/bio-amps#product-FE136 |
K2EDTA 7.2mg | BD | 367861 | Blood collection tubes http://catalog.bd.com/nexus-ecat/getProductDetail?productId=367861 |
Centrifuge | SciQuip | 2-16KL | Centrifuge http://www.sigma-centrifuges.co.uk/store/products/refrigerated-sigma-2-16k-centrifuge/ |
Eppendorf Reference 2, 100 – 1000 μL | Eppendorf | 4920000083 | Pipette https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Pipeteo-44563/Pipetas-44564/Eppendorf-Reference2-PF-42806.html |
Eppendorf Safe-Lock Tubes, 0.5 mL | Eppendorf | 30121023 | Tubes https://online-shop.eppendorf.es/ES-es/Puntas-tubos-y-placas-44512/Tubos-44515/Eppendorf-Safe-Lock-Tubes-PF-8863.html |
NZW rabbits (16-18 weeks old) | Granja San Bernardo | not available | New Zealand White rabbits http://www.granjasanbernardo.com/en/welcome/ |
Sucrose | Sigma | S0389-5KG | Sucrose for drinking solution http://www.sigmaaldrich.com/catalog/product/sigma/s0389?lang=es®ion=ES |
Rabbit maintenance control diet | Ssniff | V2333-000 | Control diet http://www.ssniff.com/ |
Rabbit high-fat diet | Ssniff | S9052-E020 | High-fat diet http://www.ssniff.com/ |
Rabbit rack and drinker | Sodispan | not available | Rack for rabbits https://www.sodispan.com/jaulas-y-racks/racks-conejo-y-cobaya/ |
Rabbit restrainer | Zoonlab | 3045601 | http://www.zoonlab.de/en/index.html |
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır