Bu içeriği görüntülemek için JoVE aboneliği gereklidir. Oturum açın veya ücretsiz deneme sürümünü başlatın.
Burada, sağ ventrikül yetmezliği mekanizmasını incelemek için yararlı bir yaklaşım sağlıyoruz. Pulmoner arter daralması için daha uygun ve verimli bir yaklaşım, inhouse yapılan cerrahi aletler kullanılarak kurulmuştur. Buna ek olarak, ekokardiyografi ve kateterizasyon ile bu yaklaşımın kalitesini değerlendirmek için yöntemler sağlanmaktadır.
Sağ ventrikül yetmezliği (RVF) mekanizması, RVF 'nin benzersizliği, yüksek morbidite, yüksek mortalite ve refrakter doğası nedeniyle açıklama gerektirir. RVF ilerlemesini taklit eden önceki sıçan modelleri tanımlanmıştır. Fareler ile karşılaştırıldığında, fareler daha erişilebilir, ekonomik ve yaygın hayvan deneylerinde kullanılır. Biz sağ ventrikül (RV) hipertrofisini teşvik etmek için farelerde pulmoner gövde bantlama oluşan bir pulmoner arter daralma (PAC) yaklaşımı geliştirdik. Aort ve pulmoner gövde daha kolay ayrılması için izin veren özel bir cerrahi mandal iğne tasarlanmıştır. Bizim deneyler, bu fabrikasyon mandallı iğne kullanımı arteriorrhexis riskini azalttı ve% 90 için cerrahi başarı oranı geliştirildi. Biz RV hipertrofisi farklı dereceleri neden olabilir nicel daralma, tam olarak oluşturmak için farklı dolgu iğne çapları kullandık. Non-invaziv trantortik ekokardiyografi ile ölçülen PA 'nın kan akımı hızını değerlendirerek daralma derecesini ölçtük. RV fonksiyonu, ameliyattan 8 hafta sonra sağ kalp kateterizasyonu ile tam olarak değerlendirildi. Cerrahi aletler, ustalaşmakta kolay olan basit bir süreç kullanarak ortak malzemelerden oluşmuştur. Bu nedenle, burada açıklanan PAC yaklaşımı laboratuarda yapılan enstrümanları kullanarak taklit etmek kolaydır ve diğer laboratuvarlarda yaygın olarak kullanılabilir. Bu çalışmada, diğer modellerden daha yüksek bir başarı oranı ve% 97,8 oranında 8 haftalık ameliyat sonrası hayatta kalma oranı olan değiştirilmiş bir PAC yaklaşımı sunulur. Bu PAC yaklaşımı RVF mekanizması incelemek için yararlı bir teknik sağlar ve RVF daha fazla anlayış sağlayacaktır.
RV fonksiyon bozukluğu (RVD), burada tanımlanan bir anormal RV yapısı veya fonksiyon kanıtı olarak, kötü klinik sonuçlar ile ilişkilidir. RV fonksiyonunun son aşaması olarak RVF, aşamalı RVD1' den kaynaklanan kalp yetmezliği belirtileri ve semptomları olan bir klinik sendromdur. Yapı ve fizyolojik fonksiyon farklılıkları ile sol ventrikül (LV) yetmezliği ve RVF farklı patofizyolojik mekanizmalara sahiptir. RVF 'deki birkaç bağımsız patofizyolojik mekanizma, β2-adrenergik reseptör sinyalizasyon2, enflamasyon3, enine tübül remodeling ve CA2 + Handling disfonksiyon 4 ' ün aşırı ifadesi de dahil olmak üzere bildirilmiştir. .
RVF RV hacmi veya basınç aşırı yüklenmesine neden olabilir. Önceki hayvan modelleri kullanılan SU5416 (vasküler endotel büyüme faktörü reseptörünün güçlü ve seçici inhibitörü) hipoksi ile kombine (suhx)5,6 veya monocrotaline7 pulmoner hipertansiyon neden, hangi pulmoner vasküler hastalığa ikincil RVF sonuçları2. Bu çalışmalar yürüten araştırmacılar RVF patolojik ilerlemesi yerine damar odaklı. Dahası, monokrotalin, kardiyogenik hastalığı tam olarak temsil etmeyen ekstra kardiyak etkilere sahiptir. Diğer modeller, hacim aşırı yüklemesini ve RVF8' i teşvik etmek için arteriovenöz Şantları kullandı. Ancak, bu cerrahi yapmak zordur ve fare için uygunsuz, kim RVF üretimi için uzun indüksiyon dönemleri gerektirir.
Bantlama klipleri kullanan Rat Pac modelleri de var9,10. Fareler ile karşılaştırıldığında, fareler kalp hastalıkları hayvan modelleri gibi birçok avantajı vardır, daha kolay üreme gibi, daha yaygın kullanımı, düşük maliyetler, ve gen modifikasyon erişim11. Ancak, bantlama kliplerinin çapları genellikle 0,5 mm 'den 1,0 mm 'ye kadar değişir ve bu da fareler9için çok büyüktür. Buna ek olarak, bantlama klibi üretmek, taklit etmek ve diğer laboratuvarlarda popülerleştirmek zordur.
Biz bir protokol kullanarak değiştirilmiş üreme RVF fare modeli bildirilen çalışmalar dayalı geliştirmek için, hangi Pac Fallot ve Noonan sendromu veya diğer pulmoner arter hipertansif hastalıklar Fallot taklit kullanan,12,13, 14,15,16,17,18,19. Bu PAC yaklaşımı, bir mandallı ve dolgu iğnesi kullanarak farelerin akciğer gövdesine bağlanarak, daralma derecesini kontrol altına almak için oluşturulur. Mandal iğne bir 90 ° eğri enjeksiyon şırıngadan yapılmış bir örgülü ipek sütür ile şırınga geçti. İğne, ustalaşmış kolay bir süreç kullanarak ortak malzemelerden yapılmıştır. Dolgu iğne ölçer iğne 120 ° eğri. Fareler ağırlığı (20-35 g) bağlı olarak farklı çaplar (0.6-0.8 mm) ile dolgu iğneler kullanılır. Ayrıca, ekokardiyografi ve sağ kalp kateterizasyonu ile RVF modelinin stabilitesi ve kalitesini belirlemek için bir değerlendirme kriteri oluşturacağız. Biz diğer deneylerde yaygın kullanımı nedeniyle model hayvan olarak fareler kullanın. Laboratuarda yapılan iğneler, çoğaltmak kolaydır ve diğer laboratuvarlarda yaygın olarak kullanılabilir. Bu çalışma, araştırmacılar için RVF mekanizmasını araştırmak için iyi bir yaklaşım sağlar.
Tüm prosedürler, ABD Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından yayınlanan laboratuar hayvanlarının bakımı ve kullanımı kılavuzu 'na (1996 yılında revize edilen NıH Yayın No. 85-23) uygun olan hayvan araştırmaları için kurumsal yönergelere uygun olarak yapılmıştır. C57BL/6 erkek fareler (8-10 hafta eski, tartım 20-25 g) Güney Tıp Üniversitesi hayvan Merkezi tarafından sağlandı. Gelmeden sonra, fareler yeterli gıda ve su ile bir 12/12 h koyu/ışık döngüsü altında yer aldı.
1. cerrahi enstrümanların hazırlanması ve iğneler imalatı
2. ameliyat hazırlığı
3. cerrahi
4. ameliyattan sonra RV fonksiyonunun ekokardiyografi değerlendirmesi
Not: ameliyattan 3 gün sonra ekokardiyografik değişiklikler tespit edilebilir.
5. RV fonksiyonunu değerlendirmek için sağ kalp kateterizasyonu
Not: sağ kalp kateterizasyonu, 1,0 F kateter ve izleme sistemi kullanılarak RV fonksiyonunu değerlendirmek için ameliyattan 8 hafta sonra gerçekleştirildi.
Bu çalışmada fareler rasgele PAC grubuna (n = 9) veya sham operasyon grubuna (n = 10) atanmıştır. Ameliyattan 1, 4 ve 8 hafta sonra ekokardiyografi yapıldı. Ameliyattan sekiz hafta sonra, son ekokardiyografi ve kateterizasyon değerlendirmelerini takiben, fareler ötenize edildi ve kalpleri morfolojik ve histolojik değerlendirme için hasat edildi.
Pulmoner gövde daralması RV hipertrofisi neden oldu ...
RV dolum basınçları patolojik artar septum bir sola vardiya sonucu, hangi LV geometrisi değiştirebilirsiniz21. Bu değişiklikler, azalma kardiyak çıkış ve LV ejeksiyon fraksiyonu (LVEF), hangi dolaşım sistemi hemodinamik bozukluk neden olabilir katkıda22. Bu nedenle, RVF mekanizmasını incelemek için verimli, istikrarlı ve ekonomik bir model değerlidir.
Biz bir mandallı ve dolgu iğne ev yapımı kullanarak PAC daha etkili ve so...
Yazarların ifşa etmesi gereken hiçbir şey yok.
Bu çalışma Çin Ulusal Doğal Bilim Vakfı (81570464, 81770271; Dr. Liao) ve Guangzhou bilimsel teknoloji belediye planlama projeleri (201804020083) (Dr Liao için) tarafından hibe tarafından desteklenmektedir.
Name | Company | Catalog Number | Comments |
ALC-V8S ventilator | SHANGHAI ALCOTT BIOTECH CO | ALC-V8S | Assist ventilation |
Animal Mini Ventilator | Haverd | Type 845 | Assist ventilation |
Animal ultrasound system VEVO2100 | Visual Sonic | VEVO2100 | Echocardiography |
Cold light illuminator | Olympus | ILD-2 | Light |
Heat pad- thermostatic surgical system (ALC-HTP-S1) | SHANGHAI ALCOTT BIOTECH CO | ALC-HTP-S1 | Heating |
Isoflurane | RWD life science | R510-22 | Inhalant anaesthesia |
Matrx VIP 3000 Isofurane Vaporizer | Midmark Corporation | VIP 3000 | Anesthetization |
Medical braided silk suture (6-0) | Shanghai Pudong Jinhuan Medical Supplies Co. | 6-0 | Ligation |
Medical nylon suture (5-0) | Ningbo Medical Needle Co. | 5-0 | Suture |
Millar Catheter (1.0 F) | AD instruments | 1.0F | For right heart catheterization |
Pentobarbital sodium salt | Merck | 25MG | Anesthetization |
PowerLab multi-Directional physiological Recording System | AD instruments | 4/35 | Record the result of right heart catheterization |
Precision electronic balance | Denver Instrument | TB-114 | Weighing sensor |
Self-made latch needle | Separate the aorta and pulmonary trunk | ||
Self-made padding needle | Constriction | ||
Self-made tracheal intubation | Tracheal intubation | ||
Small animal microsurgery equipment | Napox | MA-65 | Surgical instruments |
Transmission Gel | Guang Gong pai | 250ML | Echocardiography |
Veet hair removal cream | Reckitt Benchiser | RQ/B 33 Type 2 | Remove hair of mice |
Vertical automatic electrothermal pressure steam sterilizer | Hefei Huatai Medical Equipment Co. | LX-B50L | Auto clean the surgical instruments |
Vertical small animal surgery microscope | Yihua Optical Instrument | Y-HX-4A | For right heart catheterization |
Bu JoVE makalesinin metnini veya resimlerini yeniden kullanma izni talebi
Izin talebiThis article has been published
Video Coming Soon
JoVE Hakkında
Telif Hakkı © 2020 MyJove Corporation. Tüm hakları saklıdır