Domuzlarda Minimal İnvaziv Bir Aort Darlığı Modeli

Özet

Bu protokol, domuzlarda asendan aort bandı için minimal invaziv bir cerrahi prosedürü tanımlar.

Özet

Kalp yetmezliğinin büyük hayvan modelleri, büyüklükleri ve insanlarla fizyolojik benzerlikleri nedeniyle yeni terapötik müdahalelerin geliştirilmesinde önemli bir rol oynamaktadır. Çabalar, aşırı basınca bağlı kalp yetmezliği modeli oluşturmaya ve hala supra-koroner iken ve insanlarda aort darlığının mükemmel bir taklidi değilken, insan durumuna çok benzeyen bir aort bandı oluşturmaya adanmıştır.

Bu çalışmanın amacı, perkütan olarak tanıtılan yüksek kaliteli basınç sensörleri ile hassas bir şekilde kalibre edilmiş bir aort bandı yerleştirerek sol ventrikül basıncının aşırı yüklenmesini indüklemek için minimal invaziv bir yaklaşım göstermektir. Bu yöntem, cerrahi prosedürün (3R) iyileştirilmesini temsil eder, bu da homojen trans-stenotik gradyanlar ve grup içi değişkenliğin azalması ile sonuçlanır. Ek olarak, hayvanların hızlı ve sorunsuz bir şekilde iyileşmesini sağlayarak minimum ölüm oranlarına yol açar. Çalışma boyunca, transtorasik ekokardiyografi ve basınç-hacim döngü analizi kullanılarak hayvanlar ameliyattan sonra 2 aya kadar takip edildi. Ancak istenirse daha uzun takip süreleri elde edilebilir. Bu büyük hayvan modeli, özellikle hipertrofiyi ve sol ventrikül basıncı aşırı yüklenmesi ile ilişkili yapısal ve fonksiyonel değişiklikleri hedefleyen yeni ilaçları test etmek için değerli olduğunu kanıtlamaktadır.

Giriş

Kalp yetmezliği (KY), dünya çapında milyonlarca insanı etkileyen, önemli sosyal ve ekonomik etkilere neden olan, yaşamı tehdit eden bir hastalıktır¹. Önemli etiyolojilerinden biri aort kapak hastalığı veya aort darlığıdır (AS). Aort darlığı ileri yaşta daha sık görülür ve Amerika Birleşik Devletleri'nde en sık görülen ikinci kapak lezyonudur. AS'ye bağlı mortalite, Avrupa'da, özellikle de yakın zamanda girişimsel prosedürlere erişimi olmayan ülkelerde de artmıştır². HF'nin karmaşıklığı ve terapötik yeniliklerin azlığı göz önüne alındığında, insan durumunu kopyalayabilen ve yeni müdahalelerin test edilmesini kolaylaştırabilen güvenilir hayvan modellerine acil bir ihtiyaç vardır³. Kemirgen modelleri büyük hayvan modellerinden daha fazla olsa da, ikincisi, büyüklükleri ve fizyolojik benzerlikleri nedeniyle çeşitli avantajlar sunarak ilaç dozlarının ve insan kullanımına yönelik tıbbi cihazların test edilmesine olanak tanır.

Bu yöntemin amacı, biyomedikal araştırmalarda kullanılan çoğu büyük hayvan türüne uygulanabilen, tekrarlanabilir bir yükselen aort bandı (AAB) modeli oluşturmaktır. Bu çalışmada, prosedür, 3R ilkelerine (değiştirme, azaltma ve iyileştirme⁴) bağlı kalarak minimal invaziv bir yaklaşım kullanılarak domuzlarda gösterilmiştir. Bu yaklaşım, doğru bir basınç gradyanının oluşturulmasını sağlayarak yüksek tekrarlanabilirlik sağlar (potansiyel olarak gerekli hayvan sayısını azaltır). Ek olarak, küçük cerrahi kesi (2-3 cm) cerrahi hakareti en aza indirerek sternotomi ve daha büyük torakotomiler⁵ (iyileştirme) gibi daha agresif yaklaşımlara kıyasla hayvan refahını iyileştirir. Ayrıca, literatürdeki ayrıntılı açıklamalarla birlikte yöntemin bir video gösteriminin sağlanması, yalnızca eğitim amacıyla kullanılan hayvanlara olan ihtiyacı potansiyel olarak azaltabilir (değiştirme), hayvan kullanımını daha da azaltabilir. Bu model, farklı büyüme oranlarına sahip farklı domuz suşları/ırkları için uyarlanabilir ve sürekli aşırı basınç yüklenmesine neden olarak 1 veya 2 aylık takipten sonra önemli hipertrofiye yol açar.

Mevcut yöntemler, hayvan boyutu değişkenliğini göz ardı ederek sabit stenoz⁶ kullanır veya yüksek kaliteli basınç sensörlerinden daha az güvenilir olan ve sinyal sönümlemesine^{duyarlı olan sıvı} dolu basınç okumalarını⁷ kullanarak gradyanı hesaplar 8. Başka bir yaklaşım, darlığın distalinde tek bir basınç ölçümü kullanır⁵. Bununla birlikte, perkütan olarak iletilen yüksek kaliteli basınç sensörleri kullanılarak eşzamanlı proksimal ve distal basınç sinyalleri aracılığıyla stenozun kalibre edilmesi, protokolün önemli bir optimizasyonunu temsil eder ve bu da grup homojenliğinin artmasıyla sonuçlanır. Bu yöntemi görsel olarak göstererek, diğer araştırmacılar onu önemli engeller olmadan çoğaltabilmeli ve 3R ilkelerinin uygulanmasını teşvik ederken bu modelin kullanılabilirliğini artırmalıdır.

Protokol

Hayvan deneyleri, Porto Üniversitesi, Kardiyovasküler Araştırma ve Geliştirme Merkezi'ndeki (UnIC, Porto, Portekiz) Deneysel Cerrahi laboratuvarında gerçekleştirildi. Kurumsal hayvan etik kurulu, Ulusal Hayvan Sağlığı Otoritesi (Direcção-Geral de Alimentação e Veterinária, DGAV, Ref: 2021-07-30 011706 0421/000/000/2021) uyarınca çalışmayı onayladı. Deneyciler ya lisanslıydı (FELASA eşdeğeri Laboratuvar Hayvanları Bilimleri yetkisi) ya da kardiyotorasik cerrahlar veya anestezistlerdi. Bu çalışmada kullanılan hayvanlar, Landrace x Pietrain geçmişine sahip erkeklerdi ve DGAV (PTAH03) tarafından lisanslanmış bir yetiştiriciden satın alındı. Hayvanların başlangıç ağırlığı 20-25 kg olup, maksimum 2 aylık takibe izin vermiştir (70-80 kg, Şekil 1). Altyapılarımızın kaldıramadığı önemli hayvan büyümesi nedeniyle daha uzun takip süreleri tehlikeye giriyor.

1. Anestezi ve yaşamsal belirti izleme

1. Seçilen hayvanı gece boyunca su ad libitum ile oruç tutun.
2. Bilinçli hayvanı tartın (hayvan ölçeğinde yürümesine izin verin) veya varış ağırlığına ve beklenen büyüme hızına dayalı bir tahmin kullanın.
3. Bir uzatma hattına (100 cm) bağlı 20 mL'lik bir Luer kilit şırıngasında ketamin (15 mg / kg), midazolam (0.5 mg / kg) ve azaperon (4 mg / kg) kokteyli hazırlayın ve ardından 21 G'lik bir iğne hazırlayın (bkz. Enjeksiyon tüpünün ölü hacmini hesaba katmak için yeterli anesteziye sahip olduğunuzdan emin olun.
4. Domuzu sakin ve güvenli bir ortamda (mümkünse genellikle boş bir hayvan bakım odası) izole edin ve hayvanı boyun veya arka bacak kasına intramüsküler enjeksiyon yoluyla uyuşturun (kurumsal protokolü izleyerek). Hayvanın sessiz ve karanlık bir yerde olduğundan emin olun ve 10-15 dakika sürmesi gereken yaslanma özelliğini kaybederken kendine zarar vermemesini sağlayın.
   NOT: Uzatma ipinin kullanılması, hayvanı dizginleme ihtiyacını ortadan kaldırır.
5. Hayvan yaslandıktan sonra, anestezi uygulanmış hayvanı bir sedyeye yerleştirin ve hayvanı ameliyathaneye taşıyın (bilinçli tartım bir seçenek değilse, bu noktada hayvanın ağırlığını ölçün).
6. Kanüle edilecek kulağa bağlı olarak hayvanı sağ veya sol lateral dekübite yerleştirin. Kulağı dairesel hareketlerle klorheksidin ve alkolle birkaç kez temizleyin. Ardından, 20 G'lik bir intravenöz kateter kullanarak marjinal kulak damarını kanüle edin ve dokunmamış yapıştırıcı kullanarak sabitleyin (bkz. IV kateterini, salinle önceden yıkanmış 3 portlu bir vana manifolduna bağlayın.
   NOT: Alternatif olarak, standart bir IV infüzyon hattı (damlama hattı) ile karşılaştırıldığında, bir infüzyon pompası akış hızının (2 mL/kg/s) hassas bir şekilde ayarlanmasını sağlar.
7. Kontralateral kulağa bir transdermal fentanil yaması (50 μg/s) (Malzeme Tablosuna bakınız) yerleştirin.
8. Hayvanı radyosaydam bir ameliyat masasına, sırt yaslanmasında, ısınma yatağının üzerine yerleştirin ve yerine sabitleyin (pençeleri ameliyat masasına sabitleyen kayışlar).
9. 3 portlu vana manifolduna bir propofol perfüzyon hattı bağlayın. Anestezi idamı, bir şırınga perfüzyon pompasına monte edilmiş 50 mL'lik bir şırınga aracılığıyla 10-20 mg/kg/saat hızında uygulanan propofol ile sağlanacaktır (bkz. Malzeme Tablosu).
10. Apneyi indüklemek ve entübasyona izin vermek için bir bolus propofol (4 mg / kg) ve fentanil (10 μg / kg) ( Malzeme Tablosuna bakınız) uygulayın.
    NOT: Hayvan bu andan itibaren apnede olacaktır ve mekanik ventilasyon sağlanmalıdır. Devam etmeden önce, oksijen kaynağının mevcut olduğundan ve ventilatörün ( Malzeme Tablosuna bakın) kalibre edildiğinden ve ventilasyona hazır olduğundan emin olun.
11. Reaktivite kaybını sağladıktan sonra ve bir kullanıcı domuzun ağzını açık tutarken aynı anda dili dışarı doğru çekerken, epiglotu tanımlamak ve nazikçe harekete geçirmek için 4 numaralı Miller bıçağına sahip bir laringoskop kullanın (Malzeme Tablosuna bakınız), ses tellerinin bir görüntüsünü elde edin. Ya endotrakeal tüpü doğrudan tanıtın ya da önce bir buji ve endotrakeal tüpü ilerletin. Bazı atravmatik bağırsak forsepsleri, yumuşak damağı harekete geçirmeye ve epiglote erişmeye yardımcı olabilir.
12. Endotrakeal tüp manşetini şişirin ve anestezi makinesine/ventilatöre bağlayın. Ventilasyon parametrelerini 8-10 mL/kg tidal hacim, dakikada 15-25 solunum hızı ve 5 cm H₂O PEEP (pozitif ekspirasyon sonu basıncı) olarak ayarlayın. Gelgit sonu CO_2'yi 35 ila 45 mmHg arasında tutmak için ventilasyon parametrelerini ayarlayın.
13. SpO₂ sensörünü dil veya kulak üzerine yerleştirin (en iyi sinyalin alındığı yer), özofagus sıcaklık probunu yerleştirin ve EKG elektrotlarını takın (bkz.
14. Kornea yaralanmasını önlemek için steril oftalmik kayganlaştırıcı merhem uygulayın.

2. Arteriyel kanülasyon

1. Palpebral refleks ve sabit kalp atış hızı ve kan basıncı olmadan uygun anestezi derinliğini sağladıktan sonra, kasık bölgesini dairesel hareketlerle klorheksidin ve alkolle iyice temizleyin ve dezenfekte edin. Hayvanı, femoral arter bölgesinde konumlandırılmış (daha önce palpasyon veya ultrason ile onaylanmış) delikli steril örtülerle örtün (bkz. Malzeme Tablosu). Antibiyotik profilaksisi olarak sefazolin (25 mg / kg) uygulayın.
2. Prosedür hayvan iyileşmesini (aort bantlama) içeriyorsa, bu noktadan itibaren aseptik tekniği kullanın.
   NOT: Bir terminal prosedürü ise katı bir aseptik teknik gerekli değildir (PV Döngü analizi). Bununla birlikte, hemodinamik ölçümleri etkileyebilecek enfeksiyonlardan kaçınmak için steril bir şekilde çalışmak avantajlıdır.
3. Delinme bölgesini tanımlayın ve bölgeye deri altı% 1 lidokain ile sızın.
4. Vasküler probu kullanarak ortak femoral arteri tanımlayın (Malzeme Tablosuna bakınız) ve ultrason işaretleyicisinin konumunu ve doğru derinliği onaylayın.
   NOT: Femoral arter ponksiyonu, belirli sistemlerde iki düzlemli bir modalite kullanılarak kısa eksen, uzun eksen veya her iki tekniğin bir kombinasyonu kullanılarak gerçekleştirilebilir. Bununla birlikte, ekibimiz daha sık kısa eksen yaklaşımını kullanmaktadır.
5. Introdüser kılıfını hazırlayın (Malzeme Tablosuna bakın) introdüseri ve dilatörü monte etmeden önce heparinize salin ile yıkayarak. Dilatörü çıkarırken kan kaybını önlemek için tanıtıcı yan portundaki 3 vananın hayvana doğru kapalı konumda olduğundan emin olun.
6. Ultrason kullanarak yörüngesini izlerken femoral artere bir arteriyel iğne (tercihen ekojenik bir iğne, Malzeme Tablosuna bakınız) ilerletin. İğne göbeğinden çıkan nabız atan arteriyel kan ile doğrulanabilen arteriyel lümene ulaşıldığında, J uçlu bir kılavuz teli artere ilerletin. Kılavuz telin doğru girişi ultrason ile teyit edilebilir.
7. İğneyi çıkarın, ek kanamayı önlemek için delinme bölgesine baskı uygulayın ve introdüser + dilatör (boyut 6 Fr, 10 cm uzunluk) tertibatını artere ilerletin. Dilatörü çıkarın ve yan portundan aspire ederek ve sırayla steril salinle yıkayarak tanıtıcının konumunu onaylayın.
8. Kan basıncının izlenmesi için femoral arter introdüserinin yan portuna bir arteriyel basınç hattı bağlayın. Basınç dönüştürücü yüksekliğinin sağ kulakçık seviyesinde olduğundan ve atmosfer basıncının sıfır olduğundan emin olun.
9. Sol ventrikül kateterizasyonuna kadar introdüstratörü steril bir örtü ile örtün.

3. Yükselen aort bantlaması (hazırlık)

1. Hayvanın pozisyonunu hafif bir sağ lateral dekübite ayarlayın ve sol ön pençeyi kaldırın.
2. Kardiyak ultrason dönüştürücüsünü kullanarak çıkan aortun konumunu bulun (Malzeme Tablosuna bakınız) ve hayvanın göğsünü dairesel hareketlerle klorheksidin ve alkolle iyice dezenfekte etmeden önce insizyon bölgesini işaretleyin.
3. Hayvanı steril örtülerle örtün.
4. Yeterli analjezi sağlamak için bir fentanil bolus (10 μg / kg) uygulayın. Anestezi ve analjezi derinliğini doğrulamak için, ilk insizyonu yaptıktan sonra palpebral reflekslerin olmadığını ve kalp atış hızında veya kan basıncında herhangi bir değişiklik olup olmadığını gözlemleyin.
5. 3/4^inci interkostal boşluk seviyesinde 2-3 cm'lik bir cilt kesisi yapın ve interkostal boşluğa ulaşılana kadar alttaki fasya ve kas katmanlarını inceleyin.
6. Akciğere zarar vermemek için hayvan PEEP olmadan zorunlu ekspirasyon içindeyken künt makas kullanarak göğüs kafesine girin.
7. Ekartör bıçaklarının maksimum 3 cm'ye yerleştirilmesine izin vermek için kesiği artırın.
8. Kaburgaları geri çekin ve altta yatan yapıları görselleştirin. Kesi doğru yerde yapılırsa, pulmoner arter kolayca görülebilmelidir. Aort bunun arkasında olacaktır.
9. Minimal invaziv kalp cerrahisi forseps ve makas kullanarak perikardın açılması ve ıslak steril gazlı bez kullanarak sol kulakçık ve aort görünümünü kaplayan akciğer dokusunu geri çekin.
   NOT: Atriyal fibrilasyona yol açacağından sol kulakçıkları çok fazla manipüle etmekten kaçının. Bu meydana gelirse ve kendiliğinden düzelmezse, elektriksel kardiyoversiyon uygulayın.
10. Transvers perikardiyal sinüse ulaşılana kadar aortu pulmoner arterden dikkatlice ayırın. Bu, bantlama malzemesinin içinden geçeceği kanal olacaktır.
    NOT: Çıkan aortun bantlanması için hayvan büyüklüğüne ve takip süresine bağlı olarak çeşitli materyaller kullanılabilir. Sınırlı büyüme ve/veya kısa takip süresi olan hayvanlar için naylon kablo fermuarı kullanılabilir (daha ucuz seçenek), daha hızlı büyüyen hayvanlar ve/veya daha uzun takip süresi için titanyum klipslerle sabitlenmiş vasküler protez grefti kullanılabilir (daha pahalı seçenek), bant içselleştirmesinden kaçınır (aşağıdaki bölümlerde ayrıntılı olarak tartışılmıştır) (bkz.
11. Seçenek 1 (naylon kablo zip bağı):
    1. Naylon bandın ucuna sıkıca oturacak kadar küçük bir lümenle ~10 cm'lik bir steril plastik boru parçası kesin.
       NOT: Steril boru ve naylon bant daha önce etilen oksit sterilizasyonu veya formaldehite en az 24 saat daldırılarak sterilize edilmiştir.
    2. Aort ve pulmoner arter (proksimal) arasındaki boşluktan aort ve sağ atriyum arasındaki boşluğa (distal) doğru plastik boruyu (naylon bant için atravmatik bir kılavuz görevi gören) aort etrafında, önceden oluşturulan yoldan geçirmek için 90° kavisli forseps kullanın. Parmakla palpasyon, forsepsin doğru yoldan geçmesine yardımcı olabilir.
    3. Hemodinamik instabiliteye yol açabileceğinden pulmoner arter veya sağ kulakçıklara çok fazla baskı uygulamamaya dikkat edin. Uzun süreli sistemik hipotansiyondan kaçınmak için bu adım sırasında hayati belirtilere çok dikkat edin.
    4. Plastik kılavuz distal tarafta görüldüğünde, doku forseps ile kavrayın ve naylon bandı yanına getirerek dikkatlice aortun etrafına çekin. Naylon bandın iki ucunu aortu daraltmadan bağlayın.
12. Seçenek 2 (ePTFE greft)
    1. 5 mm 40 cm uzunluğunda bir greftin ~10 cm steril ePTFE greftini kesin.
    2. Grefti tutmak ve aortun etrafından geçirmek için 90° kavisli bir forseps kullanın. 3.11.2 ve 3.11.3 adımlarına bakın.
13. Aort kateterizasyonunu kolaylaştırmak için bantlama alanına bir radyoopak işaretleyici (bkz. Malzeme Tablosu) yerleştirin.
14. İnterkostal boşluğu ıslak gazlı bez ve steril örtülerle örtün.

4. Sol ventrikül (LV)/Aort kateterizasyonu

1. Heparin uygulayın (200 ^U.kg-1).
   NOT: Endovasküler prosedürler pıhtı oluşumu ve distal embolizasyon riski ile ilişkilidir, heparin uygulaması ise aorta cerrahi erişim sırasında aşırı kanamaya neden olur. Bu nedenle LV/aort kateterizasyonu, aorta ulaşıldıktan ve bantlama yerleştirildikten sonra yapılır.
2. 6 Fr MP1 kılavuz kateterine (Malzeme Tablosuna bakınız) bir çift hemostaz valf adaptörü veya yıldız şeklinde bir hemostaz valfi bağlayın ve heparinize salinle yıkayın. Kılavuz kateteri 260 cm 0.035 inç J-uçlu kılavuz tel ile önceden yükleyin. Bu düzeneği femoral arteriyel kılıftan geçirin.
   NOT: İki yüksek kaliteli basınç sensörünü (HFPS) standart bir çapraz kesimli hemostaz valfinden ilerletirken kanama riski olabilir. Alternatif bir yaklaşım, iki ayrı kılavuz kateter kullanmak olabilir, ancak bu, ikinci bir arteriyel erişim bölgesi gerektirecektir. Hem kanama sorununu hem de ek erişim bölgelerine olan ihtiyacı gidermek için, çift portlu bir hemostaz valfi veya yıldız şeklinde bir hemostaz valfi tercih edilebilir. Bu alternatifler kanama sorununu çözer ve ekstra erişim noktaları gereksinimini ortadan kaldırır. Kılavuz kateter arteriyel kılıftan ilerletildikten sonra, kılıfın yan portunun kan basıncı ölçümüne izin vermeyeceğine dikkat etmek önemlidir. Kan basıncını ölçmek için, arteryel hattı bunun yerine kılavuz kateterin hemostaz kapak adaptörünün yan portuna bağlamak gerekir.
3. Kılavuz teli ilerletin ve kateteri floroskopi kılavuzluğunda çıkan aorta yönlendirin. Aort kapağı tanımlandığında, kılavuz tel ile dikkatlice çaprazlayın ve kılavuz kateteri LV'ye sokun. Gerekirse, anatomik konumlandırmayı kolaylaştırmak için kontrast kullanın. AG konumlandırmasını doğrulamak için basınç izlerini kontrol edin.
4. Kılavuz kateteri LV'de bırakırken kılavuz teli çıkarın. Aspirasyondan sonra kateteri yıkayın ve kateterde hava kabarcığı olmadığından emin olun.
5. Önceden kalibre edilmiş bir HFPS'yi, çift hemostaz valfinin portlarından birinden LV'ye ilerletin. Kılavuz kateter ucundan ne zaman çıktığını bilmek için kateter gövdesine steril kalemle bir işaret yerleştirilebilir. Alternatif olarak, net bir ventriküler basınç sinyalinin doğrulanması, kılavuz kateterden çıkmanın bir işaretidir (HFPS kılavuz kateterin içindeyken sinyal paraziti gözlenir).
6. İkinci bir HFPS'yi çift hemostaz valfinin diğer portundan LV'ye ilerletin.
7. HFPS'lerden birini LV'de bırakırken kılavuz kateteri bantlama bölgesine yerleştirilen radyoopak işaretleyiciye distal olarak çıkan aorta geri çekin. Basınç izlerini kullanarak kateter pozisyonunu onaylayın.
   NOT: HFPS, basınç sensörünün dengelenmesini sağlamak için kullanımdan önce kayıt sistemine bağlanmalı ve en az 30 dakika steril tuzlu su içine yerleştirilmelidir. HFPS'yi kılavuz katetere yerleştirmeden önce, sensörü steril salin yüzeyine yerleştirerek basıncı sıfırladığınızdan emin olun.
8. Vasküler erişim bölgesini steril bir örtü ile örtün ve aortu daraltmak için toraksa doğru hareket edin.

5. Yükselen aort bandı (daralma)

1. HFPS'nin doğru şekilde yerleştirildiğinden emin olmak için naylon bandı (seçenek 1) veya ePTFE greftini (seçenek 2) hafifçe çekin - LV basıncı yükselmeli, bantlamanın distalindeki aort basıncı (radyoopak işaretleyici) artmamalıdır.
2. Kateter konumlandırması yanlışsa, daralma bölgesine proksimal ve distal basıncın net bir şekilde kaydedilmesini sağlamak için HFPS'nin konumunu ayarlayın.
3. Seçenek 1: Naylon bandı aortun etrafına oturana kadar kapatın.
   1. Basınçları yakından izlerken naylon bandı her seferinde bir tıklama ile kapatın. Her tıklamadan sonra, basınçların dengelenmesine izin verin.
   2. İstenilen basınç gradyanına ulaşılana kadar naylon bandı kademeli olarak kapatın. Hedef, sol ventrikül diyastol sonu basınçlarının 25 mmHg'yi geçmemesini sağlarken yaklaşık 100 mmHg'lik bir gradyandır.
      NOT: Elde edilen gradyan 100 mmHg'nin biraz altındaysa (yani 90-95 mmHg arasındaysa), naylon bandı daha fazla sıkmaktan kaçının. Bu durumda aşırı sıkmamak çok önemlidir. Bununla birlikte, naylon bant prosedür sırasında veya stabilizasyondan sonra yanlışlıkla aşırı sıkılırsa, naylon bandı kesmek için kemik kesiciler (Malzeme Tablosuna bakınız) kullanılabilir ve ardından uygun basınç gradyanını yeniden ayarlamak ve elde etmek için önceki prosedürleri (adım 3.11 ve adım 5.3) tekrarlayabilirsiniz.
   3. Çevredeki yapılara kazara zarar vermemek için naylon bant ucuna bir parça steril plastik boru yerleştirin.
4. Seçenek 2: ePTFE uçlarını yaklaşık olarak tahmin edin ve daralmanın göreceli konumunu tahmin etmek için basınçları izlerken 45° forseps kullanarak bandı daraltın.
   1. Forseps pozisyonuna bir titanyum hemoklips yerleştirin (ePTFE greftinin iki ucunun kenetlenmesi, üzerinde bir iz bırakacak ve hemoclip pozisyonunu yönlendirmeye hizmet edecektir).
   2. Basınç gradyanını kontrol edin. Gradyan optimal ise, bir öncekinin hemen üzerine ikinci bir hemoklips yerleştirerek önceki hemoklip pozisyonunu onaylayın (bu, daralmayı artırmaz, ancak klipsin herhangi bir distal kaymasını önler).
   3. Degrade yeterli değilse, önceki klipsin altına ek bir klips yerleştirin (aortu daha da daraltın). Gradyan en uygun olana kadar bunu yapın. Degrade çok büyükse, klibi çıkarmak için klip uygulayıcıyı kullanın ve daha distal olarak başka bir tane yerleştirin.
   4. Göğüste çok fazla greft materyali olmasını önlemek için ePTFE greftinin uçlarını kesin ve greftin distal hareketini önlemek için grefti 5.0 sütür kullanarak aortun proksimal tarafına dikin (bkz.
5. Basınçları stabilize etmek ve gradyanın optimal kalıp kalmadığını veya dekompansasyon ve akut arızanın oluşup oluşmayacağını belirlemek için bandı yerleştirdikten sonra 15 dakika bekleyin. Hipotansiyon spontan rezülasyon olmadan ortaya çıkarsa, LV'nin dekompanse olması çok muhtemeldir ve bantlama hafifletilmesi gerekir.
6. 3-0 PDS II sütür kullanarak perikardın kapatılması (bkz.
7. Bir göğüs dren yerleştirin ve bir cerrahi aspiratöre bağlayın. Atelektazi geçiren herhangi bir akciğeri işe almaya başlamak için PEEP'i 10 cmH₂O'ya yükseltin.
8. Göğüs duvarını 3-0 PDS II sütür kullanarak katmanlar halinde kapatın.
9. Göğüs drenini çıkarırken ve son kullanma tarihi sonunda ventilasyon durdurularak yüksek basınçla (manuel olarak 20-30 cmH₂O'ya ayarlanır) son kas dikişisini kapatın.
10. Normal ventilasyona devam edin ve cerrahi yarayı iyot-povidon ile yıkadıktan sonra intradermal desenli 3-0 PDS II sütür kullanarak cildi kapatın.
11. Mikro-kateterleri çıkarın ( Malzeme Tablosuna bakın) ve prosedür sırasında basınç kaymasını hesaba katmak için yüzey basıncını kontrol edin.
12. Kılavuz kateteri çıkarın.
13. Giriş kılıfını çıkarın ve arteriyotomiyi kapatmak için manuel kompresyon uygulayın. Erişim sitesine en az 10 dakika boyunca sıkıştırma uygulayın. Basıncı yavaşça kaldırarak ve kanama veya hematom oluşumunun olmadığını doğrulayarak hemostaz bölgesini değerlendirin.
14. Gerekirse emilebilir bir dikiş kullanarak delinme bölgesine bir dikiş yerleştirin.
    NOT: Gerekirse, şu anda hızlı bir transtorasik ekokardiyogram, kardiyak fonksiyonun iyi olup olmadığını belirlemeye yardımcı olabilir ve aort basıncı gradyanının tahmin edilmesine izin verebilir. Gerekli olmasa da (basınç gradyanı yüksek kaliteli basınç sensörleri ile ölçüldüğü için), modeli klinik verilerle karşılaştırmak için ekodan türetilmiş bir gradyan kullanılabilir. Ameliyat nedeniyle görüntü kalitesinden ödün verileceğini unutmayın.
15. Anesteziyi durdurun ve spontan ventilasyon tespit edildiğinde hayvanı ekstübe edin. Hayvanı ventilatörden ayırın ve endotrakeal tüpten uygun hava akışının hissedildiğinden ve periferik oksijenasyonun tehlikeye atılmadığından emin olun.
16. Ekstübe edin ve gerekirse bir Guedel yerleştirin.
17. Periferik ven kateterini çıkarın.
18. EKG/kalp atış hızı ve periferik oksijenasyonu izlerken hayvanı en az 15 dakika izleyin.
19. Kararlıysa, hayvanı ortam sıcaklığı artırılmış temiz bir geri kazanım ağılına götürün. Hayvan bilincini geri kazanana kadar kalp atış hızını ve doygunluğu sürekli olarak izlemek için taşınabilir bir yaşamsal belirti cihazı (Malzeme Tablosuna bakın) kullanın.
20. Hayvanları istenen süre boyunca takip edin ve kardiyak fonksiyonu belirlemek için transtorasik ekokardiyografi veya basınç-hacim döngü analizi yapın.

Sonuçlar

Modelin ilk gelişimi sırasında, ölüm oranı yaklaşık% 30 idi ve hayvanlar bantlama ve cerrahi komplikasyonlardan sonra akut kalp yetmezliğinden ölüyordu. Bununla birlikte, model kurulduktan sonra, cerrahi komplikasyonlar daha az görülür hale geldi ve mortalite oranı% 15 civarına düştü. Meydana gelen iki ölüm, diseksiyon sırasında aort rüptürüne bağlıydı.

Yüksek kaliteli basınç sensörlerinin kullanılması, yüksek kaliteli basınç sinyallerinin elde edilmesini ...

Tartışmalar

Son yıllarda, birkaç çalışma, sol ventrikül basıncı aşırı yüklenmesi ve kalp yetmezliği (^9'dan yükselen aorta^10'a inen) için bir model olarak cerrahi aort bantlamasını kullanmış ve araştırmacıların kendi özel ihtiyaçlarına göre uyarlanmış çeşitli fenotipler elde etmelerine olanak sağlamıştır. Bu tür modelleri kullanmak maliyetli ekipman ve uzmanlık bilgisi gerektirse de, sağladıkları bilgiler paha biçilmezdir. Domuz, büyüklüğü v...

Malzemeler

Name	Company	Catalog Number	Comments
3-0 PDS II suture	Ethicon	Z683G	Aorta banding
5-0 prolene	Ethicon	7472H	Aorta banding
ACUSON NX2 Ultrasound System	Siemens	(240)11284381	Vascular Access and Echocardiography
Arterial Extension 200 cm	PMH	303.0666	Anesthesia Maintenance
Atlan A300 Ventilator	Draeger	8621300	Ventilation
Bone cutters	Fehling	AMP 367.00	Aorta banding
Cefazolin 1000 mg	Labesfal	100063	Antibiotic
Chlorhexidine 4% Wash Solution	AGA	19110008	Cleaning
Doyen Intestinal Forceps	Aesculap	EA121R	Intubation
Echogenic Introducer Needle	Teleflex	AN-04318	Vascular Access
Endotracheal tube	Intersurgical	8040070	Intubation
ePTFE vascular graft (5 mm x 40 cm)	GORE-TEX	S0504	Aorta banding
Extension line 100 cm	PMH	303.0394	Anesthesia Induction
F.O. Laryngoscope	Luxamed	E1.317.012	Intubation
F.O. Miller Blade 4 204 x 17 mm	Luxamed	3	Intubation
Fenestrated Sterile Drape	Bastos Viegas	4882-256	Aseptic Technique
Fentanyl 0.5 mg/10 mL	B.Braun	5758883	Anesthesia / Analgesia
Guidewire 260 cm J-tip	B.Braun	J3 FC-FS 260-035	Left Ventricle catheterization
Infusomat Space Infusion Pump	B.Braun	24101800	Fluids / Drug administration
Intercostal retractor	Fehling Surgical	MRP-1	Thoracotomy
Introcan Certo IV Catheter 20G	B.Braun	4251326	Fluids / Drug administration
Isotonic Saline Solution 0.9%	B.Braun	5/44929/1/0918	Fluids / Drug administration
Ketamidor 100 mg/mL	Richter pharma	1121908AB	Anesthesia Induction
L10-5v Linear Transducer	Siemens	11284481	Vascular Access
Midazolam 15 mg/3 mL	Labesfal	PLB762-POR/2	Anesthesia Induction
Mikro-cath	Millar	63405(1)	Pressure recording
MP1 guide catheter 6 Fr	Cordis	67027000	Left Ventricle catheterization
Needle Holder	Fehling Surgical	ZYY-5	Aorta banding
Non-woven adhesive	Bastos Viegas	442-002	Fluids / Drug administration
P4-2 Phased Array Transducer	Siemens	11284467	Echocardiography
Perfusor Compact Syringe Perfusion Pump	B.Braun	8717030	Fluids / Drug administration
Pressure Signal Conditioner	ADinstruments	PCU-2000	Pressure recording
Propofol Lipuro 2%	B.Braun	357410	Anesthesia Maintenance
Radifocus Introducer II Standard Kit B - Introducer Sheath	Terumo	RS+B60K10MQ	Vascular Access
Radiopaque marker	Scanlan	1001-83	Aorta banding
Scissors	Fehling Surgical		Thoracotomy
Skinprep (Chlorhexidine 2% / 70% Isopropyl alcohol)	Vygon	SKPC015ES	Disinfection
Stopcock manifold (3 ports)	PMH	310.0489	Fluids / Drug administration
Straight forceps	Fehling Surgical	ZYY-1	Thoracotomy
Stresnil 40 mg/mL	ecuphar	572184.2	Anesthesia Induction
Syringe Luer Lock 20 cc	Omnifix B.Braun	4617207V	Anesthesia Induction
Syringe Luer Lock 50 cc	Omnifix B.Braun	4617509F	Anesthesia Maintenance
Transdermal fentanyl Patch 50 mcg/h	Mylan	5022153	Analgesia
Ultravist	Bayer	KT0B019	Angiography
Universal Hemostasis Valve Adapter	Merit Medical	UHVA08	Left Ventricle catheterization
Velcro Limb Immobilizer	PMH	SU-211	Animal stabilization
Venofix A, 21 G	B.Braun	4056337	Anesthesia Induction
Vista 120S Patient Monitor	Draeger	MS32997	Monitoring
Weck titanium clip	Teleflex	523760	Aorta banding
Weck titanium clip applier	Teleflex	523166	Aorta banding
Zhiem Vision	Iberdata	N/A	Fluoroscopy