Araştırma, özveri ve çabaları pek çok kişi, Tarım ve Tarım-Gıda Kanada Araştırma Merkezi, Lethbridge, Alberta, Kanada olmadan tamamlanmış olamazdı. Bu bağlamda, biz teşekkür ederiz: pre-ve post-operatif hayvanların bakım, cerrahi hazırlık ve anestezi, numunelerin analizi, ve video görüntüleme konusunda yardım Tara Shelton; Randy Wilde ve pre-ve post-operatif bakımı için Estela Kosta; Jenny Gusse numune analizi için; trokar görüntü için Byron Lee ve koyun yetiştiriciliği için Brian Egland. Ayrıca Brent Selinger (Biyolojik Bilimler Bölümü, Lethbridge Üniversitesi) video donanımları ve tavsiye, hem de diğer yardım (yani yönetici üretim) sağlamak için teşekkür eder, ve Müfredat Re-Geliştirme Merkezi, videografisi uzmanlık Lethbridge Üniversitesi. Bu çalışmada, Gelişmiş Gıda ve Malzeme Ağı (GDI), Kanada Alberta Beef Sanayi Geliştirme ve Destekleme Fonu (GDI) ve Tarım ve Tarım-Gıda Kanada (GDI ve JPK) hibe kısmen desteklenmiştir.

Deneysel işlemin: <ol><li> Tüm enstrümanlar otoklavlanırlar olmayan autoclaveable malzemeler en az 10 dakika soğuk sterilizasyon çözümü için Germex sterilize edilir. </li><li> Koyun acepromazine (0.05 mg / kg), Glikopirolat (0.005 mg / kg) ve butorfanol tartarat (0.2 mg / kg) IM öncesi ilaçlı, ve 15-20 dakika süreyle bırakılır. </li><li> Boyun traş ve cilt ameliyatla temizlendi. Juguler ven görüntülenmiştir sonra, 0.1 ml lidokain damar üzerine SC enjekte edilir, kateterin damar içine tanıtıldı ve hayvan kimlik etiketi çimento ve 2 &quot;hastane bant kullanarak cilt için güvenli. Ameliyat sırasında, hayvanların 10 ml verilir Plasmalyte 148 / kg / saat (yerçekimi akış). </li><li> Diazepam (0,2 mg / kg) IV uygulanır ve anestezi tiyopental sodyum (10 mg / kg) ile indüklenir. Lidokain endotrakeal sprey vokal kat uygulanır, koyun, ameliyat süresi (4 L / dak hızında% 100 O 2% 1.5-2.5) entübe ve izofluran sürdürülür . </li><li> Hayvan ameliyat sırasında vücut ısısını korumaya yardımcı olmak için ısıtmalı bir minder üzerinde sırt yatma yerleştirilir. Bir mide tüpü aşırı tympany önlemek için rumen eklenir. </li><li> Ventral karın traş ve cilt üç Prepodyne cerrahi scrubs ile ameliyat için hazırlanmıştır. Karın cerrahi sitenin bu uygun pozlama (kaudal karın umblikusun) tutulur sağlanması, daha sonra bol dökümlü. </li><li> 15-20 cm orta hat kesi göbek kaudal electroscapel kullanılarak yapılır ve ileoçekal kat karın sağ alt kadranda yer almaktadır. Daha sonra kaudal ileum ve çekum exteriorized. Prosedürü boyunca, bağırsak işleme minimize edilir ve bakım exteriorized bağırsak nemli tutulur sağlamak için alınan sıcak (37-39 ° C) steril fosfat tamponlu salin (PBS, pH 7.2). </li><li> 85 cm ileum bir segment (yani &#39;intestinal segment&#39;) ölçülür ve daha sonra segmentin her iki ucunda Doyen forseps (bağırsak kelepçeler) ve büyük Kelly forseps ile kenetli. Intestinal segment içinde, &#39;döngüler ve döngüler arasında&#39; aralar &#39;kurulacaktır. Doyen forseps (anastomoz) katıldı ileum tarafında yerleştirilir ve Kara forseps, ileum intestinal segment yan yerleştirilir. </li><li> Ileum her Doyen ve Kelly forsepsle arasında kesilir ve döngüler için belirlenen intestinal segment nazikçe ingesta kaldırmak için 60 ml sıcak PBS ile iki kez temizlendi. </li><li> Geniş spektrumlu antibiyotikler (sıcak PBS, 60 ml toplam hacmi, 200 mg enrofloxacin ve 250 mg metronidazol) bir kokteyl intestinal segment boyunca dağıtılan ve 30 dakika süreyle bırakılır. </li><li> Ileum (bağırsak segmenti hariç) proksimal ve distal uçları, sürekli ve fonksiyonel bir bağırsak formuna katıldı. Öncelikle, ileum, sırasıyla bağırsak mezenterik ve antimezenterik sınırları yerleştirilen iki kalış sütür hizalanmış. Daha sonra, basit sürekli dikiş deseni (2-0 vicryl), bağırsak birlikte katılmak için her iki tarafta bağırsak tamamlandı. </li><li> Sıcak PBS (3-5 ml), anastomoz kaçağı ve sütür yetmezliği kontrol etmek için enjekte edilir. Ardından, Kara forsepsle ucu bağırsak serozal yüzeyi karşı basıldığında, anastomoz site yakın ve anastomoz gelişmiş içe bağırsak lümeni geniş ve patent sağlamak. </li><li> Antibiyotik kokteyl intestinal segment çıkarılır. 2-0 vicryl kullanarak tersini dikiş deseni takip segmentin her iki ucunda basit sürekli dikiş deseni (2-0 vicryl emilebilir sütür) ile kapatılır. </li><li> 85 cm uzunluğunda bir barsak segmentinin üç 15 cm döngüler, döngüler arasında iki 15 cm uzunluğunda &#39;aralar&#39; ve bağırsak segmentinin Termini iki adet 5 cm uzun künt uç bölme (Şekil 1) bölünmüştür. . 2-0 ipek kullanılarak bağırsak etrafında bir ligatür koyarak döngüler oluşturulur. Bu, bağırsak canlılığı korumak, kan ve bağırsak sağlamak için gerekli olduğu gibi büyük mezenterik damarların Bu işlem sırasında bağlandı değildir dikkat çekicidir. Ayrıca, bitişik harfler kateterler güvenliğini sağlamak için kullanılan olacak gibi, uzun bırakılır. </li><li> Kateterler (yani silastik tüp) ayrı ayrı kalıcı bir kalem kullanarak tespit edilir. Kateter çevreleyen bir silikon topu (5 mm çap), bağırsak (Şekil 1) sürgülü kateter önlemeye yardımcı olmak için, kateter sonundan itibaren 4-5 cm yerleştirilir. Otoklav ile sterilizasyon sonra, olmayan bir antibiyotik merhem (Orbeseal) aseptik kateter sonunda (3-5 mm) içine yerleştirilir, bu kateter patent kalmasını sağlar (yani döngü içinde dökülmüfl mukoza ile takılı olmaz). </li><li> Küçük bir kesi her üç döngüler kraniyal yönü yerleştirilir. Her delik bir kateter uygulayıcıya (yani &#39;gemi dilatör&#39;) ile büyütülür ve kaudal kateter 6-8 cm segmentine eklenirdöngü, Silikon topu kadar lümen (Şekil 1) geçer. </li><li> Bağırsak duvarı kateter etrafında bir kese dikişi (2-0 vicryl) ile güvence altına alınmıştır. Kateter döngünün kraniyal tarif ligatür ipek kateter bağlama bağırsak güvence altına alınmıştır. </li><li> Ampisilin (5 ml, 100 mg / ml sıcak PBS), her bir döngü ve aralık içine enjekte edilir ve bağırsak karın boşluğuna geri yerleştirilir. Sefazolin (8 ml, 100 mg / ml sıcak PBS), karın kesiden periton boşluğuna enjekte edilir. </li><li> Tek bir küçük bıçak insizyon orta hat kesi bitişik karın duvarı üzerinden yapılan ve kateterler, bu site aracılığıyla exteriorized. </li><li> Konumu ve kateter gerginlik, peritoneal kavite içinde ayarlanır. Karın kasları, basit ayrı dikişler (sütür Katgüt # 3) ile kapatılır, ve cilt kesintiye uğramış bir yatay yatak desen (emilmeyen dikiş Supramid # 1) ile kapatılır. </li><li> Kavisli bir çukur paslanmaz çelik boru (7 mm ID; 10 mm OD, 65 cm uzunluğunda), sadece boyun kaudal bir çıkış sitesine deri altında ve omuzları arasında tünelli, karın kesi yakın cilt altına yerleştirilir. Kateter tüp içine yerleştirilir ve tüp uzunluğu en az% 50 için ileriye doğru itilir. Sonra kateter açığa, kateter ile tüp çıkış yerinde deriden çekilir. </li><li> Kateter gerginlik bıçak kesi yerinde ayarlanır ve cilt Supramid # 1 ile kapatılır. </li><li> Bireysel kateter tespit ve Supramid # 1 cilt sütüre bir bandaj &quot;kese&quot; içine yerleştirilmiştir. Kese sonraki hasar kateterler korur. </li><li> Post-operatif, koyun bir başlangıç ​​dozu flunixin (SID) ile sohbet enjekte edilir, 2.2 mg / kg, 3 gün boyunca 1.1 mg / kg sid idame dozu izledi. Koyun da, sırasıyla 3 ve 5 gün boyunca Hemostam (3 ml) ve enrofloxacin (2,5 mg / kg) sid ile IM enjekte edilir. Hayvanlar, bu akış (145 ml / saat) vücut pozisyonu ne olursa olsun, devam sağlamak için peristaltik bir pompa ile sürekli uygulandığında% 5 dekstroz çözeltisi ile intravenöz Plasmalyte 148 korunur. Bu ad libitum içmek için izin verilir, ancak normal rumen ve bağırsak fonksiyonları restore kadar besleme sınırlıdır. Gıda alımı, su tüketimi, vücut ısısı, dışkı ve idrar, bağırsak sesler, karın bölgesinde rahatsızlık, tavır ve kan şekeri konsantrasyonları geçişini yakından takip edilmektedir (bid); gerektiğinde intravenöz sıvı glukoz konsantrasyonları, kan glukoz konsantrasyonlarını korumak için ayarlanabilir normal sınırlarda. Kan kimyası ve hematoloji (yani albumin, alkalen fosfataz, alanin aminotransferaz, amilaz, kalsiyum, kolesterol, kreatinin, glikoz, inorganik fosfat, total bilirubin, total protein, üre, globulin, sodyum, potasyum, klor, kısmi basıncı oksijen, pH, parsiyel basınçlı karbondioksit, bikarbonat ve toplam karbon dioksit, kırmızı ve beyaz kan hücre sayımı, hematokrit, hemoglobin, lökosit sayımı ve trombosit sayısı), ameliyat öncesi ve hemen sonrasında takip ve her geçen gün daha sonra. Bir kere normal bağırsak fonksiyonu, başlar, intravenöz sıvı tedavisi sonlandırılır ve hayvanlar çayırlarda aktarılır (yani 5-7 gün ameliyat sonrası). Hayvanlar ve böylece stres ve kateter torbalar (örneğin bir penmate çiğneme) zarar sürdürme şansını azaltır bireysel kalemler (diğer hayvanlar görüş alanı içinde), korunur. </li><li> Tedaviler bireysel döngüler içine enjekte etmek için, tedavinin 5 ml, 18 gauge, künt uçlu iğne ile donatılmış steril bir şırınga ile kateter içine enjekte edilir. Döngünün içine tedavinin tüm birikimi sağlamak için, kateter 3 ml PBS ile enjekte edilir. </li></ol> Kritik noktalar: Bu cerrahi prosedürün başarısı için hayati öneme prosedürler şunları içerir: (1) bağırsak anastomoz kurmadan önce kendi üzerine bükülmüş olduğunu doğrulayarak, (2) anastomoz bütünlüğü ve açıklığı sağlamak, (3) yeterli kateter güvence döngü döngü kraniyal sonuna tasvir ligatür duvar, ancak eki kateter açıklık etkilemez sağlanması; (4) en aza indirilmesi ve bağırsak işleme exteriorized bağırsak nemli tutulmasını sağlamak; uygun kateter sağlanması (5) gerginlik; (6), kateter bütünlüğü, kas ve deri dikilmesi sırasında etkilenen olmadığını sağlanması; (7) (yani, post-operatif ileus dönemde) koyun post-cerrahi tarafından tıkınıyordur önlenmesi rumen impaksiyon ve değer düşüklüğü neden olabilir rumen fonksiyonu; hayvanlar ameliyat sonrası ilk 3-5 gün için yeterli intravenöz sıvı tedavisi almalarını sağlamak ve (8), kan glukoz konsantrasyonlarının dikkatle izlenmeli ve intravenöz sıvı glukoz konsantrasyonları adjusTed hipoglisemi önlemek için gerekirse. <img src="/files/ftp_upload/1301/1301fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1&#39;de şematik kateterize ileal döngüler. Not üç 15 cm uzun döngüler &#39;kateterize, döngüler, ve iki adet 5 cm uzunluğunda terminal segmentleri arasında kurulan iki adet 15 cm uzunluğunda olmayan kateterize&#39; aralar &#39;, 85 cm uzunluğundaki&#39; bağırsak segmenti içinde kurulan &#39;koyun ileum.

<ol>
	<li>Vidal, J. E., McClane, B. A., Saputo, J., Parker, J., Uzal, F. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effects+of+Clostridium+perfringens+beta-toxin+on+the+rabbit+small+intestine+and+colon.">Effects of Clostridium perfringens beta-toxin on the rabbit small intestine and colon.</a> Infect. Immun. 76, 4396-4404 (2008).</li><li>Santos, R. L., Zhang, S., Tsolis, R. M., Baumler, A. J., Adams, L. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Morphologic+and+molecular+characterization+of+Salmonella+typhimurium+infection+in+neonatal+calves.">Morphologic and molecular characterization of Salmonella typhimurium infection in neonatal calves.</a> Vet. Pathol. 39, 200-215 (2002).</li><li>Uzzau, S., Leori, G. S., Petruzzi, V., Watson, P. R., Schianchi, G., Bacciu, D., Mazzarello, V., Wallis, T. S., Rubino, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Salmonella+enterica+serovar-host+specificity+does+not+correlate+with+the+magnitude+of+intestinal+invasion+in+sheep.">Salmonella enterica serovar-host specificity does not correlate with the magnitude of intestinal invasion in sheep.</a> Infect. Immun. 69, 3092-3099 (2001).</li><li>Gerdts, V., Uwiera, R. R. E., Mutwiri, G. K., Wilson, D. J., Bowersock, T., Kindane, A., Babiuk, L. A., Griebel, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multiple+intestinal+'loops'+provide+an+in+vivo+model+to+analyse+multiple+mucosal+immune+responses.">Multiple intestinal 'loops' provide an in vivo model to analyse multiple mucosal immune responses.</a> J. Immunol. Methods. 256, 19-33 (2001).</li><li>Greibel, P. J., Davis, W. C., Reynolds, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+analysis+of+the+growth+and+differentiation+of+b+cells+isolated+from+follicles+from+ileal+Peyer's+patch+of+sheep.">An analysis of the growth and differentiation of b cells isolated from follicles from ileal Peyer's patch of sheep.</a> Immunology. 75, 601-607 (1992).</li><li>Motyka, G., Greibel, P. J., Reynolds, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Agents+that+activate+protein+kinase+C+resue+sheep+ileal+Peyer's+patch+B+cells+from+apoptosis.">Agents that activate protein kinase C resue sheep ileal Peyer's patch B cells from apoptosis.</a> Eur. J. Immunol. 23, 1314-1321 (1993).</li></ol>

Deney hayvanları üzerinde tüm işlemler Kurumsal Hayvan Bakım Komitesi tarafından onaylanmış (Hayvan Kullanım Protokolü # 0609) ve Hayvan Bakım Kanada Konseyi tarafından belirlenen kurallar takip edildi. Biz ifşa etmek için bir şey var.

Bu prosedürde, kateterler koyun ileum bünyesinde kurulan bağırsak döngüler başarıyla kurmayı başardık. Sıkı bir post-operatif bakım bağlı kalarak, hayvanlar prosedür hızla iyileşti ve ameliyattan sonra normal aktiviteye 5-7 gün devam etti. Biz döngüler içinde kateterleri kurulması bağırsak mukoza veya immün fonksiyonları (veriler gösterilmemiştir) etkilemez ve hayvanların ameliyattan sonra en az 8 hafta yaşayabilir belirlenir. Bu prosedür, bize bir kez hayvanlar ameliyat kurtarıldı, uz...

<table border="1"><tr><td> Kategori / Ürün Numarası </td><td> Şirket </td><td> Katalog </td></tr><tr><td colspan="3"> Cerrah kaynakları </td></tr><tr><td> Cerrah eldivenleri </td><td> WDDC a </td><td> 103091 </td></tr><tr><td> Cerrahi maske </td><td> WDDC </td><td> MAX53013 </td></tr><tr><td> Ameliyat önlüğü </td><td> CDMV b </td><td> 3365 </td></tr><tr><td> OB Önlük </td><td> WDDC </td><td> 900062 </td></tr><tr><td> Cerrahi kap </td><td> WDDC </td><td> 903271 </td></tr><tr><td> EZ Ovalama Fırçası </td><td> WDDC </td><td> BDC377479 </td></tr><tr><td colspan="3"> Anestezi ve ilaç </td></tr><tr><td> Anestezik makine </td><td> Boyle </td><td> </td></tr><tr><td> Sodasorb </td><td> WDDC </td><td> 108638 </td></tr><tr><td> Larengoskop </td><td> WDDC </td><td> </td></tr><tr><td> Laringoskop bıçak (Miller blade # 4) </td><td> WDDC </td><td> 902667 </td></tr><tr><td> Endotrakeal tüp (7,0 - 8,5 mm) </td><td> WDDC </td><td> </td></tr><tr><td> Lidokain endotrakeal sprey </td><td> WDDC </td><td> 103364 </td></tr><tr><td> Acepromazine </td><td> WDDC </td><td> AUS01020 </td></tr><tr><td> Glikopirolat </td><td> WDDC </td><td> SAB2880 </td></tr><tr><td> Butorfanol tartarat </td><td> WDDC </td><td> AYE304541 </td></tr><tr><td> Diazepam </td><td> WDDC </td><td> sab790 </td></tr><tr><td> Tiyopental sodyum </td><td> WDDC </td><td> 103508 </td></tr><tr><td> Epinefrin hidroklorür </td><td> WDDC </td><td> 103856 </td></tr><tr><td> Doxapram </td><td> Strathcona Eczacılık </td><td> </td></tr><tr><td> İsofluranın </td><td> WDDC </td><td> 100339 </td></tr><tr><td> Hemostam </td><td> WDDC </td><td> 103857 </td></tr><tr><td> Flunixin </td><td> WDDC </td><td> sch140100 </td></tr><tr><td> Enrofloxacin </td><td> WDDC </td><td> hll0049 </td></tr><tr><td> Metronidazol </td><td> WDDC </td><td> 101653 </td></tr><tr><td> Ampisilin </td><td> WDDC </td><td> NOV67185-6 </td></tr><tr><td> Sefazolin </td><td> WDDC </td><td> nov69397 </td></tr><tr><td colspan="3"> Cerrahi ekipman ve malzemeleri </td></tr><tr><td> Electroscapel </td><td> Macan </td><td> MV8 </td></tr><tr><td> Isıtma mat </td><td> Kane </td><td> PHMD-48 </td></tr><tr><td> Mide tüpü (Nalgene tüp 5 / 16 &quot;ID) </td><td> Fisher Scientific </td><td> </td></tr><tr><td> İğne sürücü </td><td> WDDC </td><td> 108338 </td></tr><tr><td> Addison kahverengi forsepsle </td><td> WDDC </td><td> 911075 </td></tr><tr><td> Sıçan diş forsepsle </td><td> CDMV </td><td> 5275 </td></tr><tr><td> Kara forsepsle </td><td> WDDC </td><td> 901133 </td></tr><tr><td> Sivrisinek hemostat </td><td> WDDC </td><td> 108471 </td></tr><tr><td> Carmalt forsepsle </td><td> WDDC </td><td> 901225 </td></tr><tr><td> Neşter kolu </td><td> WDDC </td><td> 900285 </td></tr><tr><td> Neşter bıçağı # 22 </td><td> WDDC </td><td> 900511 </td></tr><tr><td> Metzenbaum makas </td><td> WDDC </td><td> 901166 </td></tr><tr><td> Keskin keskin bir makas </td><td> WDDC </td><td> 108264 </td></tr><tr><td> Havlu kelepçe </td><td> WDDC </td><td> 901213 </td></tr><tr><td> Allis doku forsepsle </td><td> WDDC </td><td> 901201 </td></tr><tr><td> Doyen Kullanıcı forsepsle </td><td> WDDC </td><td> 904226 </td></tr><tr><td> Paslanmaz çelik kazan </td><td> WDDC </td><td> 903601 </td></tr><tr><td> Paslanmaz çelik trokar (eğri) </td><td> Yerel tedarikçi </td><td> </td></tr><tr><td> Kateter introduser </td><td> WDDC </td><td> 11440 </td></tr><tr><td> Cerrahi havlu </td><td> CDMV </td><td> 7972 </td></tr><tr><td> Tek kullanımlık asmak </td><td> WDDC </td><td> 900035 </td></tr><tr><td> Steri asmak </td><td> CDMV </td><td> 2323 </td></tr><tr><td> Örtü (40 x 40 cm) </td><td> CDMV </td><td> 8358 </td></tr><tr><td> Cerrahi örtü (7 &quot;x 11&quot; açılış) </td><td> CDMV </td><td> 2694 </td></tr><tr><td> Vicryl (2-0) </td><td> WDDC </td><td> JJMJ333H </td></tr><tr><td> İpek 2-0 </td><td> WDDC </td><td> 105248 </td></tr><tr><td> # 3 Katgüt </td><td> WDDC </td><td> CSL547-2070 </td></tr><tr><td> Supramid # 1 </td><td> WDDC </td><td> CSL547-3040 </td></tr><tr><td> İğneler (kesim ve sivil kesim) </td><td> WDDC </td><td> </td></tr><tr><td colspan="3"> Sonda </td></tr><tr><td> Silastik tüp (0.040 &quot;kimliği, 0.085&quot; OD) </td><td> Fisher Scientific </td><td> 11-189-15D </td></tr><tr><td> Orbeseal merhem </td><td> WDDC </td><td> 106344 </td></tr><tr><td> Temizle silikon (732 çok amaçlı mastik) </td><td> Yerel tedarikçi </td><td> </td></tr><tr><td> Künt sonunda iğne </td><td> WDDC </td><td> 905035 </td></tr><tr><td> Marker (kalıcı endüstriyel) </td><td> Yerel tedarikçi </td><td> </td></tr><tr><td> Kateter çantası (Elastoplast 7.5 cm inşa) </td><td> WDDC </td><td> 104094 </td></tr><tr><td colspan="3"> Bandajlar </td></tr><tr><td> Hastanesi bant (2 &quot;) </td><td> WDDC </td><td> 103842 </td></tr><tr><td> Hastanesi bandı (1 &quot;) </td><td> WDDC </td><td> VLMRENF20 </td></tr><tr><td> Tül sünger 4x4 </td><td> WDDC </td><td> 107551 </td></tr><tr><td> Tül sarılmak </td><td> WDDC </td><td> 107633 </td></tr><tr><td> Elastoplast 7.5cm </td><td> WDDC </td><td> 104094 </td></tr><tr><td> Elastoplast rippable bandaj </td><td> WDDC </td><td> 104093 </td></tr><tr><td colspan="3"> NeEDLES ve şırıngalar </td></tr><tr><td> Şırınga (60 ml) </td><td> WDDC </td><td> 104004 </td></tr><tr><td> Şırınga (10 ml) </td><td> WDDC </td><td> bdc301604 </td></tr><tr><td> 25G İğne </td><td> WDDC </td><td> BDC305122 </td></tr><tr><td> 20G İğne </td><td> WDDC </td><td> BDC305175 </td></tr><tr><td> 18G İğne </td><td> WDDC </td><td> 903353 </td></tr><tr><td colspan="3"> Damar içi </td></tr><tr><td> Intracath IV kateter (16G 8 &quot;) </td><td> WDDC </td><td> bdc3831621 </td></tr><tr><td> IV uygulama seti (10 damla) </td><td> WDDC </td><td> 101797 </td></tr><tr><td> % 0.9 NaCl çözeltisi </td><td> WDDC </td><td> BAXJB1322P </td></tr><tr><td> Plasmalyte 148 çözüm </td><td> WDDC </td><td> BAXJB2534 </td></tr><tr><td> Dekstroz </td><td> WDDC </td><td> MCT60190 </td></tr><tr><td> Peristaltik pompa </td><td> Cole Parmer </td><td> 7524-10 </td></tr><tr><td> Hayvan kimlik etiketi çimento </td><td> Yerel tedarikçi </td><td> </td></tr><tr><td colspan="3"> Sanatizers / dezenfektanlar </td></tr><tr><td> Germex çözümü </td><td> WDDC </td><td> mtc60270 </td></tr><tr><td> Izopropil alkol </td><td> WDDC </td><td> 104590 </td></tr><tr><td> Stanhexidine temizleyici </td><td> WDDC </td><td> 109248 </td></tr><tr><td> Prepodyne çözüm </td><td> WDDC </td><td> 105710 </td></tr><tr><td> Prepodyne fırçalayın </td><td> WDDC </td><td> 105711 </td></tr></table> Batılı bir İlaç Dağıtım Merkezi LTD, Edmonton, AB. b Veteriner İlaç Dağıtım Merkezi A.Ş., St. Hyacinthe QE .

catheterization of intestinal loops in ruminants

Bağırsak, sadece besinin emilmesini yer almaktadır karmaşık bir yapıya değil, aynı zamanda bireysel ve dış dünya arasında bir bariyer gibi davranır. Gibi bağırsak immunosurveillance ve enterik patojenlere karşı koruma önemli bir rol oynar. Bağırsak fizyolojisi ve immünoloji incelenmesi deneysel bir model olarak yaygın bağırsak döngüler &#39;kullanmaktadır. Bu döngü modellerin çoğunluğu bağırsak kısa süreli (&lt;24 saat) (1-3) çalışma kurtarma olmayan cerrahi işlemler. Biz daha önce, özellikle uzun vadeli (&lt;6 ay), aşılar, adjuvanlar ve virüsler (4) koyun aşağıdaki maruz bağırsak immünolojik değişiklikleri ölçmek için bir kurtarma bağırsak döngü modeli yarattı. Bu prosedür, belirli bir &#39;loop&#39; yerelleştirilmiş tedaviler, bağırsak bize bu alanda örnek izin. Bu yöntemin önemli bir dezavantajı fırsat tedavileri (yani cerrahi zamanda) yönetmek için tek bir pencerede. Ayrıca, bağırsak mukozası ve luminal içeriği hem de örnekleri sadece projenin bitiminde alınacak. Yukarıdaki modele Diğer göze çarpan sınırlamalar cerrahi manipülasyon ve gerekli post-operatif tedbirler (örneğin antibiyotik ve analjezikler idaresi) doğrudan etkileyebilir tedavi kendisi ve / veya bağışıklık işlevini değiştirebilir, böylece karıştırıcı sonuçlar olabilir. Bu nedenle, uzun vadeli döngüler içine kateter takarak bağırsak döngü modeli değiştirilmiş. Koyun prosedürü tamamen iyileşir ve exteriorized kateterler etkilenmez. Özellikle, döngüler içinde kateterleri kurulması, bize, ameliyat sırasında uygulanan ilaçların cerrahi ve temizleme kurtarma ve post-operatif dönemde, uzun bir aralık içinde birden fazla tedavi tanıtmak için olanak sağlar.

Watch this Scientific Journal Video about Catheterization of Intestinal Loops in Ruminants at JoVE.com

Catheterization of Intestinal Loops in Ruminants

Biz koyun ileum içinde &#39;bağırsak döngüler&#39; catheterizing için yeni bir cerrahi yöntem açıklanmaktadır. Hayvanlar cerrahiden sonra iyileşti ve antibiyotik ve analjezikler temizlendiğini, çoklu tedaviler kateterler yoluyla döngüler doğrudan yatırılır.

Ruminantlarda Bağırsak Döngüler kateterizasyonu

The intestine is a complex structure that is involved not only in absorption of nutrients, but also acts as a barrier between the individual and the ...

catheterization-of-intestinal-loops-in-ruminants

Research

JoVE Journal

Biology

13.6K Görüntüleme.  University of Alberta. Biz koyun ileum içinde 'bağırsak döngüler' catheterizing için yeni bir cerrahi yöntem açıklanmaktadır. Hayvanlar cerrahiden sonra iyileşti ve antibiyotik ve analjezikler temizlendiğini, çoklu tedaviler kateterler yoluyla döngüler doğrudan yatırılır.

Video: Catheterization of Intestinal Loops in Ruminants

Investigating Intestinal Inflammation in DSS-induced Model of IBD

Inflammatory bowel disease (IBD) encompasses a range of intestinal pathologies, the most common of which are ulcerative colitis (UC) and Crohn's Disease (CD). Both UC and CD, when present in the colon, generate a similar symptom profile which can include diarrhea, rectal bleeding, abdominal pain, and weight loss.1 Although the pathogenesis of IBD remains unknown, it is described as a multifactorial disease that involves both genetic and environmental components.2
There are numerous and variable animal models of colonic inflammation that resemble several features of IBD. Animal models of colitis range from those arising spontaneously in susceptible strains of certain species to those requiring administration of specific concentrations of colitis-inducing chemicals, such as dextran sulphate sodium (DSS). Chemical-induced models of gut inflammation are the most commonly used and best described models of IBD. Administration of DSS in drinking water produces acute or chronic colitis depending on the administration protocol.3 Animals given DSS exhibit weight loss and signs of loose stool or diarrhea, sometimes with evidence of rectal bleeding.4,5 Here, we describe the methods by which colitis development and the resulting inflammatory response can be characterized following administration of DSS. These methods include histological analysis of hematoxylin/eosin stained colon sections, measurement of pro-inflammatory cytokines, and determination of myeloperoxidase (MPO) activity, which can be used as a surrogate marker of inflammation.6
The extent of the inflammatory response in disease state can be assessed by the presence of clinical symptoms or by alteration in histology in mucosal tissue. Colonic histological damage is assessed by using a scoring system that considers loss of crypt architecture, inflammatory cell infiltration, muscle thickening, goblet cell depletion, and crypt abscess.7 Quantitatively, levels of pro-inflammatory cytokines with acute inflammatory properties, such as interleukin (IL)-1&beta;, IL-6 and tumour necrosis factor (TNF)-&alpha;,can be determined using conventional ELISA methods. In addition, MPO activity can be measured using a colorimetric assay and used as an index of inflammation.8
In experimental colitis, disease severity is often correlated with an increase in MPO activity and higher levels of pro-inflammatory cytokines. Colitis severity and inflammation-associated damage can be assessed by examining stool consistency and bleeding, in addition to assessing the histopathological state of the intestine using hematoxylin/eosin stained colonic tissue sections. Colonic tissue fragments can be used to determine MPO activity and cytokine production. Taken together, these measures can be used to evaluate the intestinal inflammatory response in animal models of experimental colitis.

Experimental models of inflammatory bowel disease have allowed us to examine the complex innate and adaptive immune responses associated with pathogenesis. Using histological scoring, quantification of pro-inflammatory cytokines and myeloperoxidase activity, one can begin to assess these responses seen in inflammatory bowel disease.

İBH DSS-kaynaklı Modeli Bağırsak Enflamasyon incelenmesi

Inflammatory bowel disease (IBD) encompasses a range of intestinal pathologies, the most common of which are ulcerative colitis (UC) and Crohn's Disease ...

Biyoloji

A Video Protocol of Retroviral Infection in Primary Intestinal Organoid Culture

Lgr5-positive stem cells can be supplemented with the essential growth factors Egf, Noggin, and R-Spondin, which allows us to culture ever-expanding primary 3D epithelial structures in vitro. Both the architecture and physiological properties of these &#39;mini-guts&#39;, also called organoids, closely resemble their in vivo counterparts. This makes them an attractive model system for the small intestinal epithelium. Using retroviral transduction, functional genetics can now be performed by conditional gene overexpression or knockdown. This video demonstrates the procedure of organoid culture, the generation of retroviruses, and the retroviral transduction of organoids to assist phenotypic analysis of the small intestinal epithelium in vitro. This novel organotypic model system in combination with retroviral mediated gene expression provides a valuable tool for rapid analysis of gene function in vitro without the need of costly and time-consuming generation for transgenic animals.

This protocol explains primary Lgr5-positve organoid culture and the subsequent performance of retroviral transduction. This enables Cre-inducible overexpression or knockdown of the delivered transgene and allows functional studies to be carried out in the novel in vitro organotypic model system.

İlköğretim Bağırsak organoid Kültür Retrovirütik Enfeksiyon Bir Video Protokolü

Lgr5-positive stem cells can be supplemented with the essential growth factors Egf, Noggin, and R-Spondin, which allows us to culture ever-expanding ...

Real Time Analysis of Metabolic Profile in Ex Vivo Mouse Intestinal Crypt Organoid Cultures

The small intestinal mucosa exhibits a repetitive architecture organized into two fundamental structures: villi, projecting into the intestinal lumen and composed of mature enterocytes, goblet cells and enteroendocrine cells; and crypts, residing proximal to the submucosa and the muscularis, harboring adult stem and progenitor cells and mature Paneth cells, as well as stromal and immune cells of the crypt microenvironment. Until the last few years, in vitro studies of small intestine was limited to cell lines derived from either benign or malignant tumors, and did not represent the physiology of normal intestinal epithelia and the influence of the microenvironment in which they reside. Here, we demonstrate a method adapted from Sato et al. (2009) for culturing primary mouse intestinal crypt organoids derived from C57BL/6 mice. In addition, we present the use of crypt organoid cultures to assay the crypt metabolic profile in real time by measurement of basal oxygen consumption, glycolytic rate, ATP production and respiratory capacity. Organoids maintain properties defined by their source and retain aspects of their metabolic adaptation reflected by oxygen consumption and extracellular acidification rates. Real time metabolic studies in this crypt organoid culture system are a powerful tool to study crypt organoid energy metabolism, and how it can be modulated by nutritional and pharmacological factors.

Real Time Analysis of Metabolic Profile in Ex Vivo Mouse Intestinal Crypt Organoid Cultures

Small intestinal crypt organoids cultured ex vivo provide a tissue culture system that recapitulates growth of crypts dependent on stem cells and their niche. We established a method to assay the metabolic profile in real time in primary mouse crypt organoids. We found organoids maintain physiological properties defined by their source.

Metabolik Profil Gerçek Zamanlı Analizi<em&gt; Ex vivo</em&gt; Fare Bağırsak Crypt organoid Kültürleri

The small intestinal mucosa exhibits a repetitive architecture organized into two fundamental structures: villi, projecting into the intestinal lumen and ...

A Protocol for Lentiviral Transduction and Downstream Analysis of Intestinal Organoids

Intestinal crypt-villus structures termed organoids, can be kept in sustained culture three dimensionally when supplemented with the appropriate growth factors. Since organoids are highly similar to the original tissue in terms of homeostatic stem cell differentiation, cell polarity and presence of all terminally differentiated cell types known to the adult intestinal epithelium, they serve as an essential resource in experimental research on the epithelium. The possibility to express transgenes or interfering RNA using lentiviral or retroviral vectors in organoids has increased opportunities for functional analysis of the intestinal epithelium and intestinal stem cells, surpassing traditional mouse transgenics in speed and cost. In the current video protocol we show how to utilize transduction of small intestinal organoids with lentiviral vectors illustrated by use of doxycylin inducible transgenes, or IPTG inducible short hairpin RNA for overexpression or gene knockdown. Furthermore, considering organoid culture yields minute cell counts that may even be reduced by experimental treatment, we explain how to process organoids for downstream analysis aimed at quantitative RT-PCR, RNA-microarray and immunohistochemistry. Techniques that enable transgene expression and gene knock down in intestinal organoids contribute to the research potential that these intestinal epithelial structures hold, establishing organoid culture as a new standard in cell culture.

In this video protocol we give a step by step explanation of lentiviral transduction in organoids of primary intestinal epithelium and of processing and downstream analysis of these cultures by quantitative RT-PCR, RNA-microarray and immunohistochemistry.

Lentiviral İletim ve Bağırsak Organoids Mansabında Analizi için Protokol

Intestinal crypt-villus structures termed organoids, can be kept in sustained culture three dimensionally when supplemented with the appropriate growth ...

Measuring Pressure Volume Loops in the Mouse

Understanding the causes and progression of heart disease presents a significant challenge to the biomedical community. The genetic flexibility of the mouse provides great potential to explore cardiac function at the molecular level. The mouse&#39;s small size does present some challenges in regards to performing detailed cardiac phenotyping. Miniaturization and other advancements in technology have made many methods of cardiac assessment possible in the mouse. Of these, the simultaneous collection of pressure and volume data provides a detailed picture of cardiac function that is not available through any other modality. Here a detailed procedure for the collection of pressure-volume loop data is described. Included is a discussion of the principles underlying the measurements and the potential sources of error. Anesthetic management and surgical approaches are discussed in great detail as they are both critical to obtaining high quality hemodynamic measurements. The principles of hemodynamic protocol development and relevant aspects of data analysis are also addressed.

This manuscript describes a detailed protocol for the collection of pressure-volume data from the mouse.

Fare Basınç Hacim Döngüler Ölçme

Understanding the causes and progression of heart disease presents a significant challenge to the biomedical community. The genetic flexibility of the ...

In Vitro and In Vivo Approaches to Determine Intestinal Epithelial Cell Permeability

The intestinal barrier defends against pathogenic microorganism and microbial toxin. Its function is regulated by tight junction permeability and epithelial cell integrity, and disruption of the intestinal barrier function contributes to progression of gastrointestinal and systemic disease. Two simple methods are described here to measure the permeability of intestinal epithelium. In vitro, Caco-2BBe cells are plated in tissue culture wells as a monolayer and transepithelial electrical resistance (TER) can be measured by an epithelial (volt/ohm) meter. This method is convincing because of its user-friendly operation and repeatability. In vivo, mice are gavaged with 4 kDa fluorescein isothiocyanate (FITC)-dextran, and the FITC-dextran concentrations are measured in collected serum samples from mice to determine the epithelial permeability. Oral gavage provides an accurate dose, and therefore is the preferred method to measure the intestinal permeability in vivo. Taken together, these two methods can measure the permeability of the intestinal epithelium in vitro and in vivo, and hence be used to study the connection between diseases and barrier function.

In Vitro and In Vivo Approaches to Determine Intestinal Epithelial Cell Permeability

Two methods are presented here to determine intestinal barrier function. An epithelial meter (volt/ohm) is used for measurements of transepithelial electrical resistance of cultured epithelia directly in tissue culture wells. In mice, the FITC-dextran gavage method is used to determine the intestinal permeability in vivo.

Vitro ve In Vivo yaklaşımlar Bağırsak epitel hücre geçirgenliği belirlemek için

The intestinal barrier defends against pathogenic microorganism and microbial toxin. Its function is regulated by tight junction permeability and ...

A Mouse Model of Intestinal Partial Obstruction

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including tumorous growths. However, the cellular remodeling mechanisms involved in, and caused by, intestinal obstructions are poorly understood. Several animal models of intestinal obstructions have been developed, but the mouse model is the most cost/time effective. The mouse model uses the surgical implantation of an intestinal partial obstruction (PO) that has a high mortality rate if it is not performed correctly. In addition, mice receiving PO surgery fail to develop hypertrophy if an appropriate blockade is not used or not properly placed. Here, we describe a detailed protocol for PO surgery which produces reliable and reproducible intestinal obstructions with a very low mortality rate. This protocol utilizes a surgically placed silicone ring that surrounds the ileum which partially blocks digestive movement in the small intestine. The partial blockage makes the intestine become dilated due to the halt of digestive movement. The dilation of the intestine induces smooth muscle hypertrophy on the oral side of the ring that progressively develops over 2 weeks until it causes death. The surgical PO mouse model offers an in vivo model of hypertrophic intestinal tissue useful for studying pathological changes of intestinal cells including smooth muscle cells (SMC), interstitial cells of Cajal (ICC), PDGFR&#945;+, and neuronal cells during the development of intestinal obstruction.

Intestinal obstructions are a partial or complete blockage of the intestine that can cause severe abdominal pain, nausea, vomiting, and preventing the passage of stool. This procedure for creating intestinal partial obsructions in mice is reliable in studying the mechanisms underlying pathological cell growth and death in the intestine.

Bağırsak kısmi tıkanıklık bir fare modeli

Intestinal obstructions, that impede or block peristaltic movement, can be caused by abdominal adhesions and most gastrointestinal (GI) diseases including ...

Apoptosis Induction and Detection in a Primary Culture of Sea Cucumber Intestinal Cells

Primary cultured cells are used in a variety of scientific disciplines as exceptionally important tools for the functional evaluation of biological substances or characterization of specific biological activities. However, due to the lack of universally applicable cell culture media and protocols, well described cell culture methods for marine organisms are still limited. Meanwhile, the commonly occurring microbial contamination and polytropic properties of marine invertebrate cells further impede the establishment of an effective cell culture strategy for marine invertebrates. Here, we describe an easy-to-handle method for culturing intestinal cells from sea cucumber Apostichopus japonicus; additionally, we provide an example of in vitro apoptosis induction and detection in primary cultured intestinal cells. Moreover, this experiment provides details about the appropriate culture medium and cell collection method. The described protocol is compatible with a variety of widely available tissue samples from marine organisms including Echinodermata, Mollusca, and Crustacea, and it can provide sufficient cells for multiple in vitro experimental applications. This technique would enable researchers to efficiently manipulate primary cell cultures from marine invertebrates and to facilitate the functional evaluation of targeted biological materials on cells.

This protocol provides an easy-to-handle method to culture the intestinal cells from sea cucumber Apostichopus japonicus and is compatible with a variety of widely available tissue samples from marine organisms including Echinodermata, Mollusca, and Crustacea.

Deniz Hıyar Bağırsak Hücrelerinin Birincil Kültüründe Apoptosis İndüksiyon uyupve tayini

Primary cultured cells are used in a variety of scientific disciplines as exceptionally important tools for the functional evaluation of biological ...

3D Culturing of Organoids from the Intestinal Villi Epithelium Undergoing Dedifferentiation

Clonogenicity of organoids from the intestinal epithelium is attributed to the presence of stem cells therein. The mouse small intestinal epithelium is compartmentalized into crypts and villi: the stem and proliferating cells are confined to the crypts, whereas the villi epithelium contains only differentiated cells. Hence, the normal intestinal crypts, but not the villi, can give rise to organoids in 3D cultures. The procedure described here is applicable only to villus epithelium undergoing dedifferentiation leading to stemness. The method described uses the Smad4-loss-of-function:&#946;-catenin gain-of-function (Smad4KO:&#946;-cateninGOF) conditional mutant mouse. The mutation causes the intestinal villi to dedifferentiate and generate stem cells in the villi. Intestinal villi undergoing dedifferentiation are scraped off the intestine using glass slides, placed in a 70 &#181;m strainer and washed several times to filter out any loose cells or crypts prior to plating in BME-R1 matrix to determine their organoid-forming potential. Two main criteria were used to ensure that the resulting organoids were developed from the dedifferentiating villus compartment and not from the crypts: 1) microscopically evaluating&#160;the isolated villi to ensure absence of any tethered crypts, both before and after plating in the 3D matrix, and 2) monitoring the time course of organoid development from the villi. Organoid initiation from the villi occurs only two to five days after plating and appears irregularly shaped, whereas the crypt-derived organoids from the same intestinal epithelium are apparent within sixteen hours of plating and appear spherical. The limitation of the method, however, is that the number of organoids formed, and the time required for organoid initiation from the villi vary depending on the degree of dedifferentiation. Hence, depending upon the specificity of the mutation or the insult causing the dedifferentiation, the optimal stage at which villi can be harvested to assay their organoid forming potential, must be determined empirically.

The procedure describes isolation of the villi from the mouse intestinal epithelium undergoing dedifferentiation to determine their organoid forming potential.

Organoidlerin Bağırsak Villi Epitelinden 3D Kültasyonu Adanmışlık Geçiriyor

Clonogenicity of organoids from the intestinal epithelium is attributed to the presence of stem cells therein. The mouse small intestinal epithelium is ...

Generation of Murine Primary Colon Epithelial Monolayers from Intestinal Crypts

The intestinal epithelium is comprised of a single layer of cells that act as a barrier between the gut lumen and the interior of the body. Disruption in the continuity of this barrier can result in inflammatory disorders such as inflammatory bowel disease. One of the limitations in the study of intestinal epithelial biology has been the lack of primary cell culture models, which has obliged researchers to use model cell lines derived from carcinomas. The advent of three dimensional (3D) enteroids has given epithelial biologists a powerful tool to generate primary cell cultures, nevertheless, these structures are embedded in extracellular matrix and lack the maturity characteristic of differentiated intestinal epithelial cells. Several techniques to generate intestinal epithelial monolayers have been published, but most are derived from established 3D enteroids making the process laborious and expensive. Here we describe a protocol to generate primary epithelial colon monolayers directly from murine intestinal crypts. We also detail experimental approaches that can be used with this model such as the generation of confluent cultures on permeable filters, confluent monolayer for scratch wound healing studies and sparse and confluent monolayers for immunofluorescence analysis.

In this protocol, we describe how to generate murine primary epithelial colon monolayers directly from intestinal crypts. We provide experimental approaches to generate confluent monolayers on permeable filters, confluent monolayers for scratch wound healing and biochemical studies, and sparse and confluent monolayers for immunofluorescence analysis.

Bağırsak Mezarlarından Murine Primer Kolon Epitel Monolayerlerinin Üretimi

The intestinal epithelium is comprised of a single layer of cells that act as a barrier between the gut lumen and the interior of the body. Disruption in ...