Bireysel Çok Fonksiyonlu Hücrelerin Eşzamanlı ve Ardışık Sitokin Sekresyonunu Çözmek için Mikroakışkan Yaklaşım

Bu projede, tek hücre çözünürlüğünde hücresel işlevlerin doğrudan, nicel ve derin analizine izin veren yeni analitik stratejiler geliştirmeye ve uygulamaya odaklanıyoruz. Ve böylece, saf tek bir veri noktası ölçümünün ötesine geçerek, konaktaki ve dokudaki karmaşık tepkilerden gelen bu çok işlevliliği daha iyi anlamayı ve kullanmayı amaçlıyoruz. Bu işlevlerin kapsamlı bir şekilde anlaşılmasını sağlamak karmaşık, zordur ve disiplinler arası yaklaşımlar gerektirir.

Ve bu bağlamdaki bir zorluk, tahlil geliştirmenin dinamik aralığının, numuneler, preparatlar ve dokular arasında büyük ölçüde değişebilen salgılanan bir proteinin miktarını ve dinamiklerini yakalamak için uygun olmasını sağlamaktır. İmmün yanıtın düzenlenmesindeki bozulma, hafif ateşe ve potansiyel olarak yaşamı tehdit eden komplikasyonlara yol açan çeşitli bozukluklara neden olabilir. Geleneksel son nokta ölçümlerinin ötesine geçerek, daha fazla bilgi edinmek için bağışıklık hücrelerinin düzensizliğini ve aktivasyonunu dinamik olarak tek hücre düzeyinde doğrudan ölçmeyi önerdik.

Bu nedenle sitokin genellikle belirli bir zaman noktasında süpernatantta bir konsantrasyon veya aktive edilmiş hücrelerin konsantrasyonu olarak tespit edilir. Her bir hücrenin salgılanmasını ölçmek için doğrudan toplu ölçüm, son nokta ölçümleri olarak eşzamanlı ve ikincil sekresyon arasında ayrım yapmayan hücresel heterojenliği maskeleme. Yanıtın dinamik yönünü gözden kaçırmak: Hücresel tam işlevsellik, bir bağışıklık hücresinin aynı anda birden fazla sitokin salgılama yeteneğini ifade eder.

Bu, örneğin tehditlere karşı tepkilerinde ince ayar yapmalarına ve bu çoklu işlevselliği dinamik olarak ölçmelerine olanak tanır, yani zaman içinde bir bağışıklık tepkisinin farklı nüansları hakkında fazla bilgi verebilir.