1. Hayvan Holding için Çerçeve ve Kelepçe Tasarım: Set up <ol><li> Hayvan tutmak için çerçeve ve kelepçe Infinite Horizon (IH) Spinal Kord Yaralanması Darbeli karşılamak için özel olarak tasarlanmış oldu. </li><li> Çerçevenin temel boyutları şunlardır (30.2 cm x 20.3 cm x 1.3 cm) IH cihazı (Şekil 1A) ile standart olarak gelir tablosu kılavuzu parantez içine sığdırmak için oyulmuş bir alüminyum platformdur. </li><li> Dört Flexaframe ayak destek plakaları (ON Fisher Scientific, Toronto) platformu ve sekiz Flexaframe destek çubukları (ON Fisher Scientific, Toronto, 30.5 cm) sekiz Flexaframe destek bağlayıcılar (Şekil 1B) kullanılarak monte edilir tutturulur. </li><li> Orta iki çubuk bağlanmış iki ek Flexaframe destek bağlantıları, ev yapılan özel kelepçe (Şekil 1B) için de geçerlidir. </li><li> Hayvanın spinal kord dikey göre döndürülür hangi açısı keepin tarafından oluşturulurg yerine yatay çubuğun bir ve diğer yatay çubuğun (Şekil 2) arasında değişen yüksekliği. </li><li> Kelepçe uzun 35.6 mm, yüksek 25.4 mm ve katı C4 ila C6 (Şekil 1C) için enine süreci altında tutun kapmak için tasarlanmış bir 7.6 mm çene ile. Kelepçe tasarımına ek ayrıntıları Choo ve arkadaşları tarafından daha önce tarif edilmiştir., 2009. </li></ol> 2. Cerrahi <ol><li> 300-350 gram ağırlığındaki erkek Sprague Dawley sıçanlar (Charles River Laboratories), oksijen (1 L / dak) (indüksiyon için% 4 ve bakım için% 2) izofluran ile anestezi uygulandı. </li><li> Hayvanların anestezi altında düzlemi sonra, hayvanlar bir stereotaksik çerçeve (Kopf, Tujunga, CA) içinde yer alır. </li><li> Lidokain cerrahi işlem 0.4 mL (20 mg / ml; Bimeda - MTC Hayvan Sağlığı A.Ş., Cambridge, Ontario, Kanada) esnasında kanama en aza indirmek için epinefrin ile dorsal yüzde cerrahi site çevresinde kas içine enjekte edilirl boyun bölgesinde. </li><li> Bir 4-5 cm dorsal orta hat kesi kafatası tabanında başlayan ve kaudal uzanan, steril bir bisturi (# 15) kullanılarak yapılır. </li><li> Steril Adson forseps açık açık omurga ve steril bir Alm retraktörü (Güzel Bilim Araçları, North Vancouver, BC) kas ayırın tutmak için eklenir ulaşmak için dorsal kas yoluyla incelemek için kullanılır. </li><li> # 15 bistüri, kullanma C4-C7 lamina overlaying kaslarının orta hatta başlangıç ​​ve yanal onları süpürme, kapalı kazınır. </li><li> Steril bir bisturi (# 15) ile birlikte bir kesi C6 C4 transvers süreçler altında kelepçe uyması için omurganın her iki tarafındaki enine süreçler bağlı kas yapılır. </li><li> Steril ince Friedman-Pearson Rongeur (Güzel Bilim Araçları, North Vancouver, BC) uçlu ile sol C5 lamina dikkatle dura ve spinal kord görselleştirmek için kaldırılır. </li><li> 1.5 mm&#39;lik bir çapa sahip bir çubuk silah altında kaydırıldığındaböylece biraz omurga yükselterek ve kelepçe takma kolaylaştırılması, hayvan desteklemek için. </li><li> C6 C4 lateral transvers süreçleri üzerine steril kelepçe çene takın ve vidalarını sıkın. </li><li> Alm retraktör çıkarın. </li></ol> 3. Spinal Kord Yaralanması <ol><li> Kelepçe hayvan üzerine monte edildikten sonra, hayvanlar IH çarpma taşınır. </li><li> Kelepçe yatay kapatma 22.5 ° lik bir açı (Şekil 2) de temin edilmiştir çerçevesinin üzerinde iki orta kolları metal tutucu içine sokulur. </li><li> Hayvan düz durduğundan kadar stabil yükseklik ayarı (VWR, Mississauga, ON) sağlayan makas jack yukarıya kaldırılır. </li><li> Kelepçe kelepçe üstüne küçük bir silindir seviyesi koyarak ve vidaları sıkarak yatay olduğundan emin olun. Tüm vidaları sıkı ve kurulum herhangi bir hareket olmadan sert olması önemlidir. </li><li> Prosedürün geri kalan bir MICR altında gerçekleştirilmektediroscope (Leica MZ8). </li><li> Indirin ve çarpma ucu merkezi C6 spinöz proses tepe üzerinde uçan kadar IH çarpma üzerine dikey ayar düğmesi ve iki yatay ayarlama düğmeleri kullanarak çarpma ucu (yuvarlatılmış kenarları ile çapı 15 mm) hedefliyoruz. </li><li> Çarpma ucu merkezli sonra, y-ekseni ayar düğmesi tek ve C5 merkezine çarpma ucu hareket ettirmek için sol ve x ekseni yatay ayar düğmesi lateral ucu hareket ettirmek için iki beşinci tur (1.4 mm) açın. </li><li> Bu çarpma ucu gri maddenin lateral yarısı hedefliyor doğrulamak için sadece dura yukarıda kadar ucu indirin. </li><li> Iki dura yukarıda ucu 4 mm yükseltmek için döner dikey ayar düğmesini çevirin. </li><li> Etki alanı bir pamuklu bir bez veya sopa ile kuru olduğundan emin olun. </li><li> Program 150 kdyn istenen kuvvet ayarlayın ve çarpma tetiklemek için &quot;Başlat Experiment&quot; tıklayın. </li><li> Yaralanma sonrası, yara laye kapatılmaktadır5-0 vicryl sütürlerle rs. Buprenorfin (0.03 mg / kg SC, Temgesic; Schering-Plough Corporation, Kenilworth, NJ) ve Salin (10 mL) önce subkutan ve cerrahi sonrası iki gün süreyle günde iki kez edilir. Hayvanlar yakından 2 hafta ve 6 hafta sonrası yaralanma için bir bir hafta boyunca günde iki kez izlenir. </li></ol> 4. Temsilcisi Sonuçlar 300-350 gr ağırlığında, Yirmi Dokuz erkek Sprague Dawley sıçan (Charles River Laboratuvarları) 150 kdyn bir kuvvet ayarında yaralandı. Çarpma ucu dikey 22.5 ° kapalı bir açıyla, orta hattın lateralinde 1.4 mm amaçlanmıştır. Ortalama gerçek gücü 155,55 oldu ± 0.73 kdyn. Ortalama yer değiştirme 1512,72 idi ± 27.86 um ve hızının 120,24 idi ± 0.52 mm / s (Şekil 3). Davranış Sonuç Ölçütleri Fonksiyonel kurtarma, test damat, yatay merdiveni testi, silindir yetiştirme testi kullanılarak değerlendirildiMontoya ve merdiven testi 1 değiştirilmiş. Hayvanlar sakatlanmadan önce eğitilmiş ve 2, 4 ve 6 hafta sonrası yaralanma değerlendirildi. Deney süresi boyunca sürdürülmesi önemli ön ayakları bozuklukları vardı. Yatay Merdiven testi. Yaralanma önce, hayvanları sadece 4,75 yapılan ±% 0.73 hatalar ipsilateral ön ayakları üzerinde düzensiz aralıklı yatay merdiveni karşısında geçme ederken. Zedelenmesini takiben, ön uzuvların hayvanlar hata yüzdesini belirgin artış göstermiştir. Ipsilateral ön ayaklardan yüzde hataları 26.97 ± 2,92,% 26.23 ± 2.84 ve% 22,06 ± 2.05% 2, yaralanma sonrası 4 ve 6 hafta idi (Şekil 4A). Önemlisi, bu test ön ayaklardan düşüklüğü 6 hafta devam edildi. Silindir Yetiştirme testi. Ipsilateral ön ayakları yüzdesi (sol + iki) arama sırasında kullanımı SKY sonrasında önemli ölçüde azalmıştır.Yaralanma öncesinde, hayvanlar ipsilateral ön ayaklardan 75.12 ±% 2.25 kullanılmıştır. Yaralanma sonrası hayvanların ipsilateral ön ayaklardan 8.59 ± 2 haftada% 1.80, 14.25 ± 2.65% 4 haftada ve 11.76 ± 6 hafta (Şekil 4B) az% 2,66 kullanılır. Montoya Merdiven testi Modifiye. Ipsilateral ön ayakları ile alınan pelet sayısı yaralanma sonrası önemli oranda azalmıştır. Yaralanması önce, hayvanların 84,85 toplanan ± gıda sevabın 2,88%. Bununla birlikte, 2, 4 ve 6 hafta post-yaralanması az, hayvanların sadece 30,91 alınan ± 4.03,% 28,94 ± 4.38 ve% 25,86 ± peletleri (Şekil 4C) ve% 3.09. Test Tımar. Yaralanma sonrası damat puanlarında dramatik düşüşler vardı. 2.00 ± 0.17, 4 hafta: 1.83 ± 0.17 ve 6. hafta: 1.79 ± 0.11 (figu SCI sonra ipsilateral damat puanları 2 hafta vardıyeniden 4D). Histolojik Çıktıları Beyaz madde ve Gri maddenin koruyucu. 150 kdyn bir kuvvet, 22.5 ° ve 1.4 mm lateral amacı açıda bir omurilik yaralanması bir örneği Şekil 5&#39;te sunulmuştur. Yaralanma ipsilateral tarafta gri ve beyaz cevher büyük hasarlar görmesine neden olmuştur. Kortikospinal ve rubrospinal yolları Hem yaralandı ve 29 hayvanların dışında 23 ipsilateral tarafta bulunan parankim hasarı vardı. Beyaz ve gri cevher hasar boyuna ölçüde rostrally 2400 ve kaudal 2400 (Şekil 6) idi. Beyaz ve gri cevherde koruyucu &quot;birikimli spread&quot; (2000 mikron rostral ve merkez üssü için kaudal) bir brüt tahmini sağlamak için bölümler eklerken, ipsilateral tarafta sadece bağışladı beyaz cevherde% 51.8 ve gri maddenin% 39,7 oldu Kalan karşı taraf (Şekil 6) ile karşılaştırılmıştır. &lt;img alt = &quot;Şekil 1&quot; src = &quot;/ files/ftp_upload/3313/3313fig1.jpg&quot; /&gt; Şekil 1.. Sonsuz Horizon omurilik yaralanması çarpma. A. Genel Sonsuz Horizon çarpma ve kurmak. B. Çerçeve kurdu. Servikal transvers işlemleri tutmak için kelepçe C. Yakın plan görüntü. Kelepçenin: D. Özelliği (inç birimi). Önerilen tolerans &lt;0.002 (Choo ve ark. 2009). <a href="http://www.jove.com/files/ftp_upload/3313/3313fig1large.jpg" target="_blank">büyük rakam görmek için buraya tıklayın</a> . <img alt="Şekil 2" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig2.jpg" /> Şekil 2. A. İllüstrasyon ve ilgili çerçeve 0 ° (nötr) veya B 22.5 omurilik dönüşü elde etmek için ° 1.4 mm lateral amacı ile kurulmuştur. <img alt="Şekil 3" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig3.jpg" /> Şekil 3. Sonsuz Horizon çarpma Temsilcisi kuvvet ve yerdeğiştirme grafikleri. Ok içarpma ucu 20 kdyn ve deplasman kayıt başlatılır noktaya ulaştığı zaman ndicates. Gerçek gücü kuvveti vs zaman eğrisinin pik okunur ve karşılık gelen yerdeğiştirme hesaplanır. Aşağıdaki grafikler, tipik bir 150 kdyn kontüzyon tasvir, A. Deplasman vs zaman grafiği, B. Kuvvet vs Zaman grafiği. Bu grafikler elde gerçek kuvvet kordonu 1.287 mikron olarak ölçülmüştür içine 152 kdyn ve çarpma deplasman olduğunu göstermektedir. <a href="/files/ftp_upload/3313/3313fig3large.jpg" target="_blank">büyük rakam görmek için buraya tıklayın</a> . <img alt="Şekil 4" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig4.jpg" /> Şekil 4. 150 kdyn gücü, 1.4 mm 22.5 ° ve amaç çarpma açılanma için davranış değerlendirmeleri orta hat. A. sol Yatay merdiven testi. B. Silindir yetiştirme testi. C. Modifiye Montoya merdiven testi. D. testi Tımar. Ipsilateral ön ayakları sonuçlandı önemli ve sustained bozukluklar kontralateral ön ayakları ile karşılaştırıldığında. <img alt="Şekil 5," src="/files/ftp_upload/3313/3313fig5.jpg" /> Şekil 5. Kaudal 1600 um ile rostral 1600 um yaralı omurilik Temsilcisi görüntüler. <img alt="Şekil 6" src="/files/ftp_upload/3313/3313fig6.jpg" /> 6 Şekil. Histolojik değerlendirmeler. A. Yüzde beyaz ve gri cevherde bağışladı. 2000 civarında hasar lokasyonunun mikron büyük ölçüde korunmuştur Matter. Hasar minarenin 2000 mikron içinde bağışladı B. Toplu beyaz ve gri cevherde. Ipsilateral tarafı önemli ölçüde daha az karşı tarafa göre beyaz ve gri cevherde bağışladı etmişti. <a href="/files/ftp_upload/3313/3313fig6large.jpg" target="_blank">büyük rakam görmek için buraya tıklayın</a> .

<ol>
	<li>Lee, J. H., Tigchelaar, S., Liu, J., Stammers, A. M., Streijger, F., Tetzlaff, W., Kwon, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Lack+of+neuroprotective+effects+of+simvastatin+and+minocycline+in+a+model+of+cervical+spinal+cord+injury.">Lack of neuroprotective effects of simvastatin and minocycline in a model of cervical spinal cord injury.</a> Exp. Neurol. 225, 219-230 (2010).</li><li>Kwon, B. K., Hillyer, J., Tetzlaff, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Translational+research+in+spinal+cord+injury:+a+survey+of+opinion+from+the+SCI+community.">Translational research in spinal cord injury: a survey of opinion from the SCI community.</a> J. Neurotrauma. 27, 21-33 (2010).</li><li>Gensel, J. C., Tovar, C. A., Hamers, F. P., Deibert, R. J., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+and+histological+characterization+of+unilateral+cervical+spinal+cord+contusion+injury+in+rats.">Behavioral and histological characterization of unilateral cervical spinal cord contusion injury in rats.</a> J. Neurotrauma. 23, 36-54 (2006).</li><li>Kwon, B. K., Borisoff, J. F., Tetzlaff, W. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+targets+for+therapeutic+intervention+after+spinal+cord+injury.">Molecular targets for therapeutic intervention after spinal cord injury.</a> Mol. Interv. 2, 244-258 (2002).</li><li>Allen, A. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surgery+of+experimental+lesions+of+spinal+cord+equivalent+to+crush+injury+of+fracture+dislocation.">Surgery of experimental lesions of spinal cord equivalent to crush injury of fracture dislocation.</a> J. Am. Med. Assoc. 57, 878-880 (1911).</li><li>Basso, D. M., Beattie, M. S., Bresnahan, J. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graded+histological+and+locomotor+outcomes+after+spinal+cord+contusion+using+the+NYU+weight-drop+device+versus+transection.">Graded histological and locomotor outcomes after spinal cord contusion using the NYU weight-drop device versus transection.</a> Exp Neurol. 139, 244-256 (1996).</li><li>Gruner, J. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+monitored+contusion+model+of+spinal+cord+injury+in+the+rat.">A monitored contusion model of spinal cord injury in the rat.</a> J. Neurotrauma. 9, 123-128 (1992).</li><li>Choo, A. M., Liu, J., Liu, Z., Dvorak, M., Tetzlaff, W., Oxland, T. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modeling+spinal+cord+contusion,+dislocation,+and+distraction:+characterization+of+vertebral+clamps,+injury+severities,+and+node+of+Ranvier+deformations.">Modeling spinal cord contusion, dislocation, and distraction: characterization of vertebral clamps, injury severities, and node of Ranvier deformations.</a> J. Neurosci. Methods. 181, 6-17 (2009).</li><li>Whishaw, I. Q., Piecharka, D. M., Drever, F. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complete+and+partial+lesions+of+the+pyramidal+tract+in+the+rat+affect+qualitative+measures+of+skilled+movements:+impairment+in+fixations+as+a+model+for+clumsy+behavior.">Complete and partial lesions of the pyramidal tract in the rat affect qualitative measures of skilled movements: impairment in fixations as a model for clumsy behavior.</a> Neural. Plast. 10, 77-92 (2003).</li><li>Jones, T. A., Schallert, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overgrowth+and+pruning+of+dendrites+in+adult+rats+recovering+from+neocortical+damage.">Overgrowth and pruning of dendrites in adult rats recovering from neocortical damage.</a> Brain Res. 581, 156-160 (1992).</li><li>Liu, Y., Kim, D., Himes, B. T., Chow, S. Y., Schallert, T., Murray, M., Tessler, A., Fischer, I. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Transplants+of+fibroblasts+genetically+modified+to+express+BDNF+promote+regeneration+of+adult+rat+rubrospinal+axons+and+recovery+of+forelimb+function.">Transplants of fibroblasts genetically modified to express BDNF promote regeneration of adult rat rubrospinal axons and recovery of forelimb function.</a> J. Neurosci. 19, 4370-4387 (1999).</li><li>Schallert, T., Fleming, S. M., Leasure, J. L., Tillerson, J. L., Bland, S. T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=CNS+plasticity+and+assessment+of+forelimb+sensorimotor+outcome+in+unilateral+rat+models+of+stroke,+cortical+ablation,+parkinsonism+and+spinal+cord+injury.">CNS plasticity and assessment of forelimb sensorimotor outcome in unilateral rat models of stroke, cortical ablation, parkinsonism and spinal cord injury.</a> Neuropharmacology. 39, 777-787 (2000).</li><li>Soblosky, J. S., Song, J. H., Dinh, D. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Graded+unilateral+cervical+spinal+cord+injury+in+the+rat:+evaluation+of+forelimb+recovery+and+histological+effects.">Graded unilateral cervical spinal cord injury in the rat: evaluation of forelimb recovery and histological effects.</a> Behav. Brain Res. 119, 1-13 (2001).</li><li>McKenna, J. E., Prusky, G. T., Whishaw, I. Q. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Cervical+motoneuron+topography+reflects+the+proximodistal+organization+of+muscles+and+movements+of+the+rat+forelimb:+a+retrograde+carbocyanine+dye+analysis.">Cervical motoneuron topography reflects the proximodistal organization of muscles and movements of the rat forelimb: a retrograde carbocyanine dye analysis.</a> J. Comp. Neurol. 419, 286-296 (2000).</li><li>Sandrow, H. R., Shumsky, J. S., Amin, A., Houle, J. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Aspiration+of+a+cervical+spinal+contusion+injury+in+preparation+for+delayed+peripheral+nerve+grafting+does+not+impair+forelimb+behavior+or+axon+regeneration.">Aspiration of a cervical spinal contusion injury in preparation for delayed peripheral nerve grafting does not impair forelimb behavior or axon regeneration.</a> Exp. Neurol. 210, 489-500 (2008).</li><li>Popovich, P. G., Lemeshow, S., Gensel, J. C., Tovar, C. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Independent+evaluation+of+the+effects+of+glibenclamide+on+reducing+progressive+hemorrhagic+necrosis+after+cervical+spinal+cord+injury.">Independent evaluation of the effects of glibenclamide on reducing progressive hemorrhagic necrosis after cervical spinal cord injury.</a> Exp. Neurol. 233, 615-622 (2012).</li><li>Dunham, K. A., Siriphorn, A., Chompoopong, S., Floyd, C. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+of+a+graded+cervical+hemicontusion+spinal+cord+injury+model+in+adult+male+rats.">Characterization of a graded cervical hemicontusion spinal cord injury model in adult male rats.</a> J. Neurotrauma. 27, 2091-2106 (2010).</li><li>Lee, J. H., Roy, J., Sohn, H. M., Cheong, M., Liu, J., Stammers, A. T., Tetzlaff, W., Kwon, B. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Magnesium+in+a+polyethylene+glycol+formulation+provides+neuroprotection+after+unilateral+cervical+spinal+cord+injury.">Magnesium in a polyethylene glycol formulation provides neuroprotection after unilateral cervical spinal cord injury.</a> Spine (Phila Pa 1976). 35, 2041-2048 (2010).</li><li>Alstermark, B., Isa, T., Lundberg, A., Pettersson, L. G., Tantisira, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+effect+of+low+pyramidal+lesions+on+forelimb+movements+in+the+cat.">The effect of low pyramidal lesions on forelimb movements in the cat.</a> Neurosci. Res. 7, 71-75 (1989).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Bu yazıda, 150 kdyn, dikey off 22.5 ° lik bir açı ve hattan 1.4 mm yanal amacı bir kuvvet Infinite Horizon (IH) çarpma kullanarak tek taraflı servikal kontüzyon modeli açıklamak. Bu ayarlar ile, bu önemli hasar rubrospinal, reticulospinal, vestibulospinal ve kortikospinal yolları beklenir bölgeler oluştu göründü büyük ölçüde ipsilateral tarafa içerdiği parankimal bozulma ile ipsilateral ön ayakları sürdürülen davranışsal açıkları üretebilmişlerdir çalıştırın. Bu modelin geliştir...

<table border="1"><tbody><tr><td> Ekipman Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Sonsuz Horizon Darbeli </td><td> Hassas Sistemleri ve Araçları </td><td> IH-0400 </td><td></td></tr><tr><td> Alüminyum sac </td><td> Metalsupermarlets.com </td><td> APT6061/500 </td><td></td></tr><tr><td> Flexaframe ayak destek plakaları </td><td> Fishers Bilimsel </td><td> 1466625Q </td><td></td></tr><tr><td> Flexaframe mesnet çubuklarının </td><td> Fishers Bilimsel </td><td> 1466610GQ </td><td></td></tr><tr><td> Flexaframe Destek Konnektörler </td><td> Fishers Bilimsel </td><td> 1466620Q </td><td></td></tr><tr><td> 1 Kelepçe </td><td> Özel yapılmış </td><td></td><td> Choo ve ark., 2009 </td></tr><tr><td> Metal sahipleri </td><td> Özel yapılmış </td><td></td><td> Yukarıda bak </td></tr><tr><td> Darbeli ucu </td><td> Özel yapılmış </td><td></td><td> Çap: 1.15 mm </td></tr><tr><td> Stereotaktik çerçeve </td><td> David Kopf Aletleri </td><td> Model 900 </td><td></td></tr><tr><td> Silindir Seviye </td><td> Yijia ARAÇLAR </td><td> YJ-SL0620 </td><td></td></tr><tr><td> Mikroskop </td><td> Leica </td><td></td><td> Model #: MZ8 </td></tr><tr><td> Laboratuvar makas jack </td><td> VWR </td><td> 12620-902 </td><td></td></tr></tbody></table>

a contusive model of unilateral cervical spinal cord injury using the infinite horizon impactor

Insan omurilik yaralanmalarının çoğunluğu servikal omurilikte meydana gelirken, laboratuvar araştırmalarının büyük çoğunluğu torasik spinal kord yaralı olduğu omurilik yaralanması (SKY) hayvan modellerinde çalışmaktadır. Çoğu insan kord hasarları omurilik şiddetle yerinden kemik veya yumuşak doku tarafından basıldı künt, non-penetran travma (örneğin motorlu taşıt kazası, spor yaralanmaları) sonucu meydana çünkü Ayrıca, SKY araştırmacıların çoğunluğunun görüşü vardır en önemli klinik yaralanma modelleri omurilik hızla contused kaldığı durumlar olduğunu. 1 Bu nedenle, insan çeviri yolda yeni tedavilerin klinik öncesi değerlendirilmesinde önemli bir adım içinde kontüzyon SKY modeli kendi etkinliğini bir değerlendirmesidir servikal spinal kord. Istihdam Burada, teknik özellikleri ve servikal SKY bir tek taraflı contusive modelinin çıkan anatomik ve davranışsal sonuçlar tanımladığınıSonsuz Horizon omurilik yaralanması çarpma. Sprague Dawley sıçan C5 bir sol taraflı tek taraflı laminektomi yapıldı. Yaralanma modeli, biyomekanik, fonksiyonel ve histolojik sonuçların tekrarlanabilirliği optimize etmek için, biz 150 kdyn bir darbe gücü, 22.5 ° (hayvanlar 22.5 ° dönerek) bir etkisi yörüngesini kullanarak omurilik contused ve etkili konuma kapalı 1.4 mm orta hattın. Fonksiyonel iyileşme 6 haftaya kadar test ve modifiye Montoya Kullanıcı merdiven testi damat, silindir yetiştirme testi, yatay merdiveni testi ile değerlendirildi, bundan sonra omurilik beyaz ve gri cevherde tutucu için histolojik olarak değerlendirildi. Burada sunulan yaralanması modelinde spinal kord, herhangi bir deneysel SKY modelinin önemli bir özelliği, tutarlı ve tekrarlanabilir biyomekanik güçler kazandırır. Spinal kord yanal yarısına kesikli histolojik hasara neden olur büyük ölçüde t yer aldığıYaralanma o ipsilateral tarafı. Yaralanma ve hayvanlar tarafından tolere, ancak önemli ve yaralanma sonrası hafta içinde sürekli olarak ön ayakları fonksiyonel açıklarının sonucu yok edilmektedir. Burada sunulan tek taraflı servikal yaralanması modelinde insan çeviri öncesinde potansiyel umut verici tedavilerin değerlendirmek isteyen araştırmacılar için bir kaynak olabilir.

Watch this Scientific Journal Video about A Contusive Model of Unilateral Cervical Spinal Cord Injury Using the Infinite Horizon Impactor at JoVE.com

A Contusive Model of Unilateral Cervical Spinal Cord Injury Using the Infinite Horizon Impactor

Sonsuz Horizon çarpma kullanarak servikal spinal kord yaralanması üretmek için güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde anlatılmıştır. Yöntemi özel bir dizayn çerçeve yararlanır ve omurgayı stabilize etmek için kelepçe. Standart bir prosedür yeterli ve sürekli yaralanmalarda biyomekanik yaralanma parametreleri sonucu.

Sonsuz Horizon Darbeli kullanarak tek taraflı Servikal Spinal Kord Yaralanması bir Contusive Modeli

While the majority of human spinal cord injuries occur in the cervical spinal cord, the vast majority of laboratory research employs animal models of ...

a-contusive-model-unilateral-cervical-spinal-cord-injury-using

Research

JoVE Journal

Medicine

19.3K Görüntüleme.  University of British Columbia. Sonsuz Horizon çarpma kullanarak servikal spinal kord yaralanması üretmek için güvenilir ve tekrarlanabilir bir şekilde anlatılmıştır. Yöntemi özel bir dizayn çerçeve yararlanır ve omurgayı stabilize etmek için kelepçe. Standart bir prosedür yeterli ve sürekli yaralanmalarda biyomekanik yaralanma parametreleri sonucu.

Video: A Contusive Model of Unilateral Cervical Spinal Cord Injury Using the Infinite Horizon Impactor

Acute and Chronic Tactile Sensory Testing after Spinal Cord Injury in Rats

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory testing in rat SCI models is needed. However, until recently, no single testing approach had been validated for SCI so that standardized methods have not been implemented across labs. Additionally, available testing methods could not be implemented acutely or when severe motor impairments existed, preventing studies of the development of SCI-induced allodynia3. Here we present two validated sensory testing methods using von Frey Hair (VFH) monofilaments which quantify changes in tactile sensory thresholds after SCI4-5. One test is the well-established Up-Down test which demonstrates high sensitivity and specificity across different SCI severities when tested chronically5. The other test is a newly-developed dorsal VFH test that can be applied acutely after SCI when allodynia develops, prior to motor recovery4-5. Each VFH monofilament applies a calibrated force when touched to the skin of the hind paw until it bends. In the up-down method, alternating VFHs of higher or lower forces are used on the plantar L5 dermatome to delineate flexor withdrawal thresholds. Successively higher forces are applied until withdrawal occurs then lower force VFHs are used until withdrawal ceases. The tactile threshold reflects the force required to elicit withdrawal in 50% of the stimuli. For the new test, each VFH is applied to the dorsal L5 dermatome of the paw while the rat is supported by the examiner. The VFH stimulation occurs in ascending order of force until at least 2 of 3 applications at a given force produces paw withdrawal. Tactile sensory threshold is the lowest force to elicit withdrawal 66% of the time. Acclimation, testing and scoring procedures are described. Aberrant trials that require a retest and typical trials are defined. Animal use was approved by Ohio State University Animal Care and Use Committee.

We describe two tactile sensory testing methods for acute or chronic periods of spinal cord injury in rats. These validated procedures can detect the development and maintenance of allodynia-like sensations.

Sıçanlarda Spinal Kord Yaralanma sonrası Akut ve Kronik Dokunsal Duyu Testi

Spinal cord injury (SCI) impairs sensory systems causing allodynia1-8. To identify cellular and molecular causes of allodynia, sensitive and valid sensory ...

Tıp

Controlled Cervical Laceration Injury in Mice

Use of genetically modified mice enhances our understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders such as a spinal cord injury (SCI). Freehand manual control used to produce a laceration model of SCI creates inconsistent injuries often associated with a crush or contusion component and, therefore, a novel technique was developed. Our model of cervical laceration SCI has resolved inherent difficulties with the freehand method by incorporating 1) cervical vertebral stabilization by vertebral facet fixation, 2) enhanced spinal cord exposure, and 3) creation of a reproducible laceration of the spinal cord using an oscillating blade with an accuracy of &plusmn;0.01 mm in depth without associated contusion. Compared to the standard methods of creating a SCI laceration such as freehand use of a scalpel or scissors, our method has produced a consistent lesion. This method is useful for studies on axonal regeneration of corticospinal, rubrospinal, and dorsal ascending tracts.

A novel technique to create a reproducible in vivo model of cervical spinal cord laceration injury in the mouse is described. This technique is based on spine stabilization by fixation of the cervical facets and laceration of the spinal cord using an oscillating blade with an accuracy of &plusmn;0.01 mm.

Farelerde Kontrollü Servikal yırtığı Sakatlık

Use of genetically modified mice enhances our  understanding of molecular mechanisms underlying several neurological disorders  such as a spinal cord ...

A Contusion Model of Severe Spinal Cord Injury in Rats

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is described to obtain a consistent model of severe SCI. Use of a stereotactic frame and computer controlled impactor allows for creation of reproducible injury. Hypothermia and urinary tract infection pose significant challenges in the post-operative period. Careful monitoring of animals with daily weight recording and bladder expression allows for early detection of post-operative complications. The functional results of this contusion model are equivalent to transection models. The contusion model can be utilized to evaluate the efficacy of both neuroprotective and neuroregenerative approaches.

A contusion model of severe spinal cord injury is described. Detailed pre-operative, operative and post-operative steps are described to obtain a consistent model.

Sıçanlarda Şiddetli Spinal Kord Yaralanması bir bere modeli

The translational potential of novel treatments should be investigated in severe spinal cord injury (SCI) contusion models. A detailed methodology is ...

A Novel Vertebral Stabilization Method for Producing  Contusive Spinal Cord Injury

Clinically-relevant animal cervical spinal cord injury (SCI) models are essential for developing and testing potential therapies; however, producing reliable cervical SCI is difficult due to lack of satisfactory methods of vertebral stabilization. The conventional method to stabilize the spine is to suspend the rostral and caudal cervical spine via clamps attached to cervical spinous processes. &#160;However, this method of stabilization fails to prevent tissue yielding during the contusion as the cervical spinal processes are too short to be effectively secured by the clamps (Figure 1). &#160;Here we introduce a new method to completely stabilize the cervical vertebra at the same level of the impact injury. &#160;This method effectively minimizes movement of the spinal column at the site of impact, which greatly improves the production of consistent SCIs. &#160;We provide visual description of the equipment (Figure 2-4), methods, and a step-by-step protocol for the stabilization of the cervical 5 vertebra (C5) of adult rats, to perform laminectomy (Figure 5) and produce a contusive SCI thereafter. &#160;Although we only demonstrate a cervical hemi-contusion using the NYU/MASCIS impactor device, this vertebral stabilization technique can be applied to other regions of the spinal cord, or be adapted to other SCI devices. &#160;Improving spinal cord exposure and fixation through vertebral stabilization may be valuable for producing consistent and reliable injuries to the spinal cord. &#160;This vertebral stabilization method can also be used for stereotactic injections of cells and tracers, and for imaging using two-photon microscopy in various neurobiological studies.

Vertebral stabilization is necessary for minimizing variability, and for producing consistent experimental spinal cord injuries.&#160; Using a customized stabilizing apparatus in conjunction with the NYU/MASCIS impactor device, we have demonstrated here the proper equipment and procedure for generating reproducible hemi-contusive cervical (C5) spinal cord injuries in adult rats.

Kontuzif omurilik hasarın üretmek için Yeni Bir Omurga Stabilizasyon Yöntemi

Clinically-relevant animal cervical spinal cord injury (SCI) models are essential for developing and testing potential therapies; however, producing ...

A Murine Model of Cervical Spinal Cord Injury to Study Post-lesional Respiratory Neuroplasticity

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed to improve/ameliorate the respiratory failure following high cervical spinal cord injury (SCI). Here we propose a murine pre-clinical model of high SCI at the cervical 2 (C2) metameric level to study diverse post-lesional respiratory neuroplasticity. The technique consists of a surgical partial injury at the C2 level, which will induce a hemiparalysis of the diaphragm due to a deafferentation of the phrenic motoneurons from the respiratory centers located in the brainstem. The contralateral side of the injury remains intact and allows the animal recovery. Unlike other SCIs which affect the locomotor function (at the thoracic and lumbar level), the respiratory function does not require animal motivation and the quantification of the deficit/recovery can be easily performed (diaphragm and phrenic nerve recordings, whole body ventilation). This pre-clinical C2 SCI model is a powerful, useful, and reliable pre-clinical model to study various respiratory and non-respiratory neuroplasticity events at different levels (molecular to physiology) and to test diverse putative therapeutic strategies which might improve the respiration in SCI patients.

Respiratory failure is the leading cause of death following a cervical spinal cord injury. Having a reproducible, quantifiable, and reliable pre-clinical animal model of respiratory failure induced by a partial cervical injury will help to understand the subsequent respiratory and non-respiratory neuroplasticity and allow testing putative repair strategies.

Post-lezyonlu Solunum nöroplastisite Eğitim için Servikal Spinal Kord Yaralanması bir fare modeli

A cervical spinal cord injury induces permanent paralysis, and often leads to respiratory distress. To date, no efficient therapeutics have been developed ...

Controlled Cortical Impact Model for Traumatic Brain Injury

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI). Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, social, and economical effects are staggering. Therefore, further research into the effects of TBI and effective treatments is necessary. The controlled cortical impact (CCI) model induces traumatic brain injuries ranging from mild to severe. This method uses a rigid impactor to deliver mechanical energy to an intact dura exposed following a craniectomy. Impact is made under precise parameters at a set velocity to achieve a pre-determined deformation depth. Although other TBI models, such as weight drop and fluid percussion, exist, CCI is more accurate, easier to control, and most importantly, produces traumatic brain injuries similar to those seen in humans. However, no TBI model is currently able to reproduce pathological changes identical to those seen in human patients. The CCI model allows investigation into the short-term and long-term effects of TBI, such as neuronal death, memory deficits, and cerebral edema, as well as potential therapeutic treatments for TBI.

Traumatic brain injuries (TBIs) remain a serious health problem. Using the controlled cortical impact surgery model, research on the effects of TBI and possible treatment methods may be performed.

Travmatik Beyin Hasarı için Kontrollü Kortikal Etki Modeli

Every year over a million Americans suffer a traumatic brain injury (TBI).  Combined with the incidence of TBIs worldwide, the physical, emotional, ...

A Radio-telemetric System to Monitor Cardiovascular Function in Rats with Spinal Cord Transection and Embryonic Neural Stem Cell Grafts

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter connected to a radio transmitter into the femoral artery of rats that underwent a T4 spinal cord transection with or without grafting of embryonic brainstem-derived neural stem cells expressing green fluorescent protein. Compared to other methods such as cannula insertion or tail-cuff, telemetry is advantageous to continuously monitor blood pressure and heart rate in freely moving animals. It is also capable of long term multiple data acquisitions. In spinal cord injured rats, basal cardiovascular data under unrestrained condition and autonomic dysreflexia in response to colorectal distension were successfully recorded. In addition, cardiovascular parameters before and after SCI can be compared in the same rat if a transmitter is implanted before a spinal cord transection. One limitation of the described telemetry procedure is that implantation in the femoral artery may influence the blood supply to the ipsilateral hindlimb.

We present a protocol for using a radio-telemetric system to record cardiovascular parameters in T4 spinal cord transected rats eight weeks after embryonic brainstem neural stem cell grafting into the lesion site. Telemetry is an advanced technique to accurately evaluate cardiovascular function in conscious freely moving spinal cord injured rats.

A Radyo-telemetrik Sistemi Omurilik transeksiyonu ve Embriyonik Nöral Hücre Greftler Kök Sıçanlarda Kardiyovasküler Fonksiyonu Monitör

High thoracic or cervical spinal cord injury (SCI) can lead to cardiovascular dysfunction. To monitor cardiovascular parameters, we implanted a catheter ...

Synergetic Use of Neural Precursor Cells and Self-assembling Peptides in Experimental Cervical Spinal Cord Injury

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. Clinically, more than 50% of SCI affect the cervical spine1. As a consequence of the primary injury, a cascade of secondary mechanisms including inflammation, apoptosis, and demyelination occur finally leading to tissue scarring and development of intramedullary cavities2,3. Both represent physical and chemical barriers to cell transplantation, integration, and regeneration. Therefore, shaping the inhibitory environment and bridging cavities to create a supportive milieu for cell transplantation and regeneration is a promising therapeutic target4. Here, a contusion/compression model of cervical SCI using an aneurysm clip is described. This model is more clinically relevant than other experimental models, since complete transection or ruptures of the cord are rare. Also in comparison to the weight drop model, which in particular damage the dorsum columns, circumferential compression of the spinal cord appears advantageous. Clip closing force and duration can be adjusted to achieve different injury severity. A ring spring facilitates precise calibration and constancy of clip force. Under physiological conditions, synthetic self-assembling peptides (SAP) self-assemble into nanofibers and thus, are appealing for application in SCI5. They can be injected directly into the lesion minimizing damage to the cord. SAPs are biocompatible structures erecting scaffolds to bridge intramedullary cavities and thus, equip the damaged cord for regenerative treatments. K2(QL)6K2 (QL6) is a novel SAP introduced by Dong et al.6 In comparison to other peptides, QL6 self-assembles into &#946;-sheets at neutral pH6.14 days after SCI, after the acute stage, SAPs are injected into the center of the lesion and neural precursor cells (NPC) are injected into adjacent dorsal columns. In order to support cell survival, transplantation is combined with continuous subdural administration of growth factors by osmotic micro pumps for 7 days.

Treating cervical spinal cord injury with both self-assembling peptides (SAP) and neural precursor cells (NPC), together with growth factors, is a promising approach to promote regeneration and recovery. A contusion/compression aneurysm clip rat model of cervical SCI and combined treatment involving SAP injection and NPC transplantation is established.

Deneysel Servikal Spinal Kord Yaralanmalarında Sinir Öncü Hücreler ve Öz-montaj Peptitler sinerjik Kullanımı

Spinal cord injuries (SCI) cause serious neurological impairment and psychological, economic, and social consequences for patients and their families. ...

Neural Stem Cell Transplantation in Experimental Contusive Model of Spinal Cord Injury

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can be used both to investigate the biological responses to injury and to test potential therapies. Contusion or compression injury delivered to the surgically exposed spinal cord are the most widely used models of the pathology. In this report the experimental contusion is performed by using the Infinite Horizon (IH) Impactor device, which allows the creation of a reproducible injury animal model through definition of specific injury parameters. Stem cell transplantation is commonly considered a potentially useful strategy for curing this debilitating condition. Numerous studies have evaluated the effects of transplanting a variety of stem cells. Here we demonstrate an adapted method for spinal cord injury followed by tail vein injection of cells in CD1 mice. In short, we provide procedures for: i) cell labeling with a vital tracer, ii) pre-operative care of mice, iii) execution of a contusive spinal cord injury, and iv) intravenous administration of post mortem neural precursors. This contusion model can be utilized to evaluate the efficacy and safety of stem cell transplantation in a regenerative medicine approach.

Spinal cord injury is a traumatic condition that causes severe morbidity and high mortality. In this work we describe in detail a contusion model of spinal cord injury in mice followed by a transplantation of neural stem cells.

Omurilik Yaralanması Deneysel Kontuzif Modelinde Sinir Kök Hücre Nakli

Spinal cord injury is a devastating clinical condition, characterized by a complex of neurological dysfunctions. Animal models of spinal cord injury can ...

Calibrated Forceps Model of Spinal Cord Compression Injury

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The calibrated forceps model of compression injury is a convenient, low cost, and very reproducible animal model for SCI. We used a pair of modified forceps in accordance with the method published by Plemel et al. (2008) to laterally compress the spinal cord to a distance of 0.35 mm. In this video, we will demonstrate a dorsal laminectomy to expose the spinal cord, followed by compression of the spinal cord with the modified forceps. In the video, we will also address issues related to the care of paraplegic laboratory animals. This injury model produces mice that exhibit impairment in sensation, as well as impaired hindlimb locomotor function. Furthermore, this method of injury produces consistent aberrations in the pathology of the SCI, as determined by immunohistochemical methods. After watching this video, viewers should be able to determine the necessary supplies and methods for producing SCI of various severities in the mouse for studies on SCI and/or treatments designed to mitigate impairment after injury.

Spinal cord injury models should be highly reproducible. We demonstrate that the calibrated forceps compression model of spinal cord injury is an easy to use surgical method for generating reproducible injuries to the murine spinal cord.

Omurilik Sıkıştırma Yaralanma Kalibre Forseps Modeli

Compression injuries of the murine spinal cord are valuable animal models for the study of spinal cord injury (SCI) and spinal regenerative therapy. The ...