BT İsviçre Ulusal Bilim Vakfı (SCORE hibe 3.232.230-126.233) tarafından desteklenmiştir. Çalışma Artères Vakfı, Astellas Vakfı Avrupa ve Boninchi Vakfı tarafından desteklenmiştir.

1. Donör Operasyonu <ol><li> 200 ağırlığındaki erkek sıçanlarda ± koni maske izofluran ile 20 gram uyuştur (indüksiyonu için% 3, operasyon sırasında% 2, 1 l / dk hava akımı, FiO2% 70). </li><li> Büyük bir ortanca ve enine laparotomi gerçekleştirin ve her iki tarafta epigastrik damarların dağlamak. </li><li> Orak şeklinde bağ kesin ve suprehepatic vena kava sol diyafragma ven ayırın. Son olarak, iki 7-0 ipek bitişik harfler arasındaki diyafragma ven bölün. </li><li> Sol üçgen ve gastro-hepatik bağ kesilir. </li><li> 7-0 Ligatürleri (pıhtılaşma geçerli bir alternatiftir) arasındaki hepato-özofageal ligament ve arter bölün. </li><li> Sol renal ven aşağı infrahepatic vena kava kesin. Çevre dokulardan sağ renal ven ayırın ve sırasıyla, onun proksimal ve distal ucunda, bir 10-0 ve 7-0 bağ arasına bölün. </li><li> 7-0 ligatur arasında doğru sürrenal ven Bölnazik traksiyon altında kesim tarafından posterior ligamentler gelen es ve ücretsiz karaciğer. </li><li> Gastrosplenic ven izole etmek ve sırasıyla, onun proksimal ve distal ucunda, bir 10-0 ve 7-0 bağ arasına bölün. </li><li> 7-0 bağları arasındaki proper hepatik arter bölün. </li><li> Duodenostenoz-pankreatik ven yalıtmak ve 10-0 ve proksimal ve distal ucunda 7-0 dikilen, sırasıyla arasındaki bölünmüş. </li><li> Hepatik hilusu 1 cm mesafede küçük bir kesi uygulayarak koledok içine 22G, 3,5 mm stent takın. Bir 7-0 bağ ile pozisyonda stent sabitleyin. </li><li> Penisin dorsal ven yoluyla, normal serum fizyolojik 1 ml içine seyreltilmiş heparin 10 UI, enjekte edilir. </li><li> Bir 21G iğne ile vena porta (mümkün olduğunca hilusu itibaren) kanüle ve hafifçe soğuk ringer laktat (ya da diğer koruma çözümleri) 20 ml ile karaciğer yıkayın. Aynı zamanda, uygun bir outfl izin vermek için böbrek damarları aşağıda vena kesilmişow. Karaciğer soğuk perfüzyon bir ve iki dakika sürmelidir. </li><li> Duodenostenoz pankreas venin vena porta kesin. </li><li> Stent etrafında dikilen distale kanalı safra kesin. </li><li> Infrahepatic vena kava kesi tamamlayın. </li><li> Diyaframa suprahepatik vena kava yağsız kesin ve karaciğer çıkarın. </li><li> Soğuk Zil laktat dolu ve bir buz pad üzerinde havzası yatıyordu bir leğene karaciğer yerleştirin. </li></ol> 2. Greft Hazırlanması <ol><li> Onun manşet içine vena porta takıp intima maruz kenarında gemi tersyüz etmek. Bir 7-0 bağ ile Manşeti, dışa dönük segmenti sabitleyin. </li><li> Infrahepatic vena kava üzerine aynı işlemi tekrarlayın. </li><li> Infrahepatic vena kava proksimal parçası üzerinde bir mikro-kelepçe (4-6 mm uzunluğunda) yerleştirin. Bu işlem portal reperfüzyon sonrası kan kaybını önler. </li><li> Karaciğer devirmek ve iki prolen sütürler 8-0 eklemekdışarıdan içeriye suprahepatik vena, zıt yan kenarlarına. </li><li> 0-4 de buzdolabında greft (zil laktat çözeltisi içine daldırılmış) Mağaza ° C </li></ol> 3. Alıcı Operasyonu <ol><li> 200 ağırlığındaki erkek sıçanlarda ± koni maske izofluran ile 20 gram uyuştur (indüksiyonu için% 3, operasyon sırasında% 2, 1 l / dk hava akımı, FiO2% 70) ve sıcak bir pad üzerinde tutun. Not olarak, alıcı ve donör ağırlıkları (± 40 gram) uyumlu olmalıdır. </li><li> Subkutan serum fizyolojik 10 ml ve laparotomi öncesi piperasilin / tazobaktam intramüsküler 0,03 g enjekte edilir. </li><li> Orta hat xipho-kasık laparotomi gerçekleştirin. </li><li> Iyi karaciğer açığa çıkarmak için bir oto-statik forseps ile kılıç şeklinde süreci tersine. </li><li> Anterior ligamentler kesin ve iki 7-0 bağları arasında sol diyafragma ven bölün. </li><li> 7-0 Ligatürleri (coagulatio arasındaki hepato-özofageal ligament ve arter Böln) geçerli bir alternatiftir. Video (donör işlemi ile aynıdır) gösterilmemiştir. </li><li> Sağ renal ven infrahepatic vena kava aşağı ayırın. </li><li> 7-0 bitişik harfler ve nazik traksiyon altında kesim tarafından posterior ligamentler ücretsiz karaciğer ((donör operasyonu ile aynı) video gösterilmemiştir) arasında sağ sürrenal ven bölün. </li><li> Tıpkı bölümü aşağıda koledok etrafında 7-0 ligatür, yerleştirin. Aşağıda milimetre başka bir bağ birini koyun ve arasında kesti. </li><li> Hilusu de hepatik arter izole edin ve 7-0 birleşik harfler arasına bölün. </li><li> Yavaşça sağ ve sol portal dalları ayırın. Ortak hepatik arter veya mide-splenik ven zarar vermemeye dikkat edin. </li><li> Kranialine sağ renal ven vena kava çevresinde kaval halka yerleştirin. Sonra dört kardinal 9-0 dikişler koyarak halka damar duvarına sabitleyin. </li><li> Vena porta üzerinde portal halka ile aynı işlemi tekrarlayın. </li&gt; <li> Penisin dorsal ven yoluyla, normal serum fizyolojik 1 ml içine seyreltilmiş heparin 10 UI, enjekte edilir. </li><li> % 0.25 üzerinde anestezi ve% 100 FiO2 ayarlayın. </li><li> Sadece sağ renal venin infrahepatic vena kava Kelepçe, sonra sadece mide-splenik ven yukarıda vena porta kelepçe. Son olarak vena kava diyaframın en az 2 mm içerdiğinden emin olmak suprahepatik kelepçe. </li><li> Parankime suprahepatik vena kava yakın kesin. </li><li> Sol ve sağ portal dalları kesin ve arasında septum bölün. </li><li> Önceden yerleştirilmiş dikişler herhangi kesilirken değil dikkat, parankime infrahepatic vena kava yakın kesin. Karaciğer çıkarın ve karın boşluğuna greft yerleştirin. </li><li> Greft suprahepatik vena kava ve alıcı arasında bir uç-uca anastomoz gerçekleştirin. Soldan sağa arka duvar çalışan dikiş ile başlayın, sonra sağdan le ön duvar devamft biter sıkma önce iç lümen cömert bir kızarma sağlamak amacıyla sonuna kadar ön dikiş gevşek tutun. </li><li> Portal halka koluna approximator ve kaudal şube takın, sonra yuvaya konumunu bulma portalı manşet ile, approximator ve kranial şube yarık içine greft vena porta takın. </li><li> Serum fizyolojik ile alıcının vena porta yıkama sırasında approximator kapatın ve manşet kabına eklemelerine olanak tanır. Bir 7-0 çevresel kravat ile manşet etrafında alıcının vena porta sabitleyin. </li><li> Approximator çıkarın. Amacıyla suprahepatik vena kava ve vena porta üzerine kelepçesini açın: portal akış şimdi yeniden tesis edilir. </li><li> Ekstra ince makas ile 9-0 harfleri keserek portalı halka çıkarın. </li><li> Kaval halka koluna approximator ve kaudal şube takın, sonra kranial ve yarık içine greft infrahepatic vena kava eklemek<html> yuvaya konumunu bulma kaval manşet ile approximator dalı. </li><li> Serum fizyolojik ile alıcının infrahepatic vena kava yıkama sırasında approximator kapatın ve manşet kabına eklemelerine olanak tanır. Bir 7-0 çevresel kravat ile manşet etrafında alıcının vena kava sabitleyin. </li><li> Approximator çıkarın. Amacıyla greft ve alıcının infrahepatic vena kava üzerine microclamps açın: venöz akım şimdi yeniden tesis edilir. </li><li> Alıcının koledok kısmi bir kesi yapın, başına doğru hafif bir traksiyon uygulamak ve daha önce greft safra yerleştirilen stent serbest tarafına yerleştirin. Bir çevresel 7-0 beraberlik ile stent sabitleyin. </li><li> 5-0 dikişlerle katmanları tarafından hayvan kapatın. Uyanış ücretsiz su ve yiyecek ver. </li><li> Yerel kurumsal protokollere göre analjezi yönetin. 24 saat &#39;lik bir minimum süresi tavsiye edilir. </li></ol>dikkat Of _content &quot;&gt;: deneysel tasarım (arter sıçan karaciğer transplantasyonu sonrası uzun dönem yaşam için gerekli değildir) tarafından gerektiğinde uçtan uca hepatik arter anastomoz yapılabilir. 4. Temsilcisi Sonuçlar Açıklanan teknik başarıyla yaklaşık 10 eğitim ameliyatlarından sonra ekibimiz tarafından hakim olabilir. Bu kısa bir eğitim döneminden sonra arka arkaya 36 Lewis-to-Lewis ve Koyu Agouti-to-Lewis nakli% 100 uzun süreli (&gt; 21 gün) yaşama, (singeneik karaciğer greft alıcıların sayısı 12 aşkın süredir ayakta tutuldu izin şimdi ay). Ve medyan alanin transaminaz (ALT) - 84 U / L (92.7 51.7): 172.5 U / L (127,5-240,2) Post-singeneik nakli gün 1 karaciğer fonksiyon testlerinde ortalama aspartat transaminaz (AST) gösterdi. Ortalama anhepatic faz (vena porta gelen re-perfüzyon greft sıkma), 14 ± suprahepatik vena kava anastomozu olmanın en uzun adım ile 2 dk, (s çalışanuture) süresi 9 ± 2 dk. Hızlı bağlayıcı sistemi vena porta üzerine 1.55 mm çaplı manşet ve vena kava üzerine 2.40 mm çaplı manşetleri (200 ± 20 g ağırlığında alıcı) konumlandırma izin verdi. Buna karşılık, biz Kamada tekniği kullanılarak dikim çalışırken, sırasıyla 1.40 mm ve 2.16 mm (zorlanma ve kilo eşleşen sıçan) geçemez. Şekil 7 &#39;de gösterildiği gibi, hızlı-bağlayıcı halkaları daha yakın arası fizyolojik hemodinamik sonuçlar ile sonuçlanır asgari kalınlığı ve uzunluğu erimesi, sağlayan, germe optimum üzerine alıcının damarlarının tutmak için tasarlanmıştır. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig1.jpg" alt="Şekil 1" /> Şekil 1. Yüzüklerin önlemler. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig2.jpg" alt="Şekil 2" /> Şekil 2. Microclamps önlemler. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig3.jpg" alt="Şekil 3" /> Şekil 3. Hızlı bağlayıcı kiti. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig4.jpg" alt="Şekil 4" /> Şekil 4. Hızlı bağlayıcı silahlı. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig5.jpg" alt="Şekil 5," /> Şekil 5. Hızlı bağlayıcı kapattı. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig6.jpg" alt="Şekil 6" /> Şekil 6. SHVC kelepçe. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig7.jpg" alt="Şekil 7" /> Şekil 7. Klasik vs hızlı bağlayıcı destekli kaf-anastomoz hemodinami. <img src="/files/ftp_upload/4143/4143fig8.jpg" alt="Şekil 8" /> Şekil 8. Donör ve alıcının cilt hazırlığı ve kesi.

<ol>
	<li>Starzl, T. E., Marchioro, T. L., Porter, K. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experimental+and+clinical+observation+after+homotransplantation+of+the+whole+liver.">Experimental and clinical observation after homotransplantation of the whole liver.</a> Revue internationale d'hepatologie. 15, 1447 (1965).</li><li>Starzl, T. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Evolution+of+liver+transplantation.">Evolution of liver transplantation.</a> Hepatology. 2, 614S-636S (1982).</li><li>Kamada, N., Calne, R. Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.+Technique+using+cuff+for+portal+vein+anastomosis+and+biliary+drainage.">Orthotopic liver transplantation in the rat. Technique using cuff for portal vein anastomosis and biliary drainage.</a> Transplantation. 28, 47 (1979).</li><li>Kashfi, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+review+of+various+techniques+of+orthotopic+liver+transplantation+in+the+rat.">A review of various techniques of orthotopic liver transplantation in the rat.</a> Transplantation proceedings. 37, 185-188 (2005).</li><li>Hori, T. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Comprehensive+and+innovative+techniques+for+liver+transplantation+in+rats:+A+surgical+guide.">Comprehensive and innovative techniques for liver transplantation in rats: A surgical guide.</a> World Journal of Gastroenterology: WJG. 16, 3120 (2010).</li><li>Oldani, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+novel+technique+for+rat+liver+transplantation+using+Quick+Linker+system:+a+preliminary+result.">A novel technique for rat liver transplantation using Quick Linker system: a preliminary result.</a> Journal of Surgical Research. 149, 303-309 (2008).</li><li>Nosaka, T., Bowers, J. L., Cay, O., Clouse, M. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Biliary+complications+after+orthotopic+liver+transplantation+in+rats.">Biliary complications after orthotopic liver transplantation in rats.</a> Surg. Today. 29, 963-965 (1999).</li><li>Li, G. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=High+incidence+of+biliary+complications+in+rat+liver+transplantation:+can+we+avoid+it.">High incidence of biliary complications in rat liver transplantation: can we avoid it.</a> World J. Gastroenterol. 17, 3140-3144 (2011).</li><li>Peng, Y., Gong, J. P., Yan, L. N., Li, S. B., Li, X. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Improved+two-cuff+technique+for+orthotopic+liver+transplantation+in+rat.">Improved two-cuff technique for orthotopic liver transplantation in rat.</a> Hepatobiliary Pancreat. Dis. Int. 3, 33-37 (2004).</li><li>Urata, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Decreased+survival+in+rat+liver+transplantation+with+extended+cold+preservation:+role+of+portal+vein+clamping+time.">Decreased survival in rat liver transplantation with extended cold preservation: role of portal vein clamping time.</a> Hepatology. 28, 366-373 (1998).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Mevcut sıçan karaciğer nakli modeli, kolayca kurulabilir. Bizim deneyimlerimize göre, birkaç anahtar nokta ölüm riskini (≤% 20) en aza indirmeye yardımcı. Reperfüzyon ilk üç saat içinde meydana gelen erken ölümlerin, sıkma uzun bir portal bir sonucu olarak, çoğunlukla bir barsak infarktüsü nedeniyle vardır. Bu nedenle 15 dakika ideal sınırı (20 dakika yine de kabul edilebilir) içinde anhepatic faz tutmak için tavsiye edilir. Merkezi hava embolisi de ani ölüm nedeni olabilir ve önceden anastomoz tüm damarları temizlemek için zorunludur. Günde bir ve üç arasında meydana gelen ölümler genellikle karaciğer yetmezliği veya vena kava trombozu nedeniyle vardır. Bir nedenle donör olarak eksplantasyonu (biz yaklaşık 60 saniye üzerinden 20 ml ile yıkayın) önce kızarma saldırgan greft önlemek ve uygun bir soğuk muhafaza (0-4 ° C ringer laktat solüsyonu içine tam daldırma) sağlamalıdır. Tromboz riskiintima manipülasyonu en aza indirilmesi ve bütünlüğünü koruyarak azaltılabilir. Biz ameliyat sonrası antikoagülan kullanımını önermiyoruz. Günde dört ve dokuz arasındaki ölümler çoğunlukla bakteriyel kolanjit 7 ile ilgilidir. Deneyimlerimizi, laparotomi koledok enfeksiyon riskini en aza indirmek için yeterli önce verilen piperasilin / tazobaktam (0.03 g) tek bir doz geçerli. Ölüm günü 10 sonrası görülen nadir bir olaydır. Ancak, arteriyel akışı olmaması nedeniyle, bazı safra kanalı sorunları cholastasis 8 ile görülebilir. Araştırmacının ihtiyaçlarına bağlı olarak bir arterialization 9 düşünülebilir. Not olarak, 24 saate kadar soğuk iskemi süresinin kabul edilebilir 10 olarak kabul edilebilir. Hızlı bağlayıcı sistem ilk üç manşet anastomozlar (çok kısa anhepatic faz) ile karaciğer nakli gerçekleştirmek için tasarlanmıştır. Bununla birlikte, üç-manşon technique suprahepatik vena kava (SHVC) manşet için çok küçük kaliperler kullanımını gerektirir ve yaygın bağlı karaciğer çıkış problemleri 11-14 riskini kabul edilmemiştir. Bu nedenle, on dakikadan daha kısa sıcak iskemi süresini gereken yalnızca bir hızlı-linker destekli üç manşet tekniği tercih etmektedirler. Çalışmaların çoğunda Ancak, implantasyon evreleri kadar 15-18 dakika iki manşet tekniği ve daha fizyolojik SHVC drenaj kullanımına izin veren, kabul edilebilir. Bu video kağıdı gösterildiği gibi, biz sadece rutin implantasyon ikinci bölümünde hızlı bağlayıcı sistemi kullanın. Bazı ekstra cerrahi süresi hızlı bağlayıcı kolları konuma yerleştirmek için gerekli olsa da, prosedürün bu kısmının minimum risk ile ilişkilidir ve daha kolay manşet insertisyonları kritik anhepatic aşaması sayesinde bir kısaltılması için izin verir. Hızlı-bağlayıcı sisteminin diğer avantajlar daha iyi bir graft-alıcı damar hizalama ve daha iyi bir sonuç daha geniş hemodinamik manşetleri kullanımı ile karşılaştırıldığındaDaha önce tarif teknikler (Kamada ve arkadaşları tarafından tarif biri dahil olmak üzere). 6 (Şekil 7).

<table border="1"><tbody><tr><td> Aracı / Reaktif </td><td> Şirket </td><td> Katalog n. </td><td> Yorum </td></tr><tr><td> Portal manşet </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> veya <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">demircileri-medical.com</a> </td><td> Bobin 01-96-1729 800/100/420 </td><td> Çap: 1.55mm Duvar: 0.30mm Uzunluk: 3.5 mm </td></tr><tr><td> Infrahepatic v kava manşet </td><td> <a href="http://altecweb.com" target="_blank">altecweb.com</a> veya <a href="http://smiths-medical.com" target="_blank">demircileri-medical.com</a> </td><td> Bobin 01-96-1733 800/100/540 </td><td> Çap: 2.40mm Duvar: 0.30mm <br/&gt; Uzunluk: 3.5 mm </td></tr><tr><td> Koledok stent </td><td> ortak 22G venflon </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 7-0 ipek kravat </td><td> <a href="http://georgetiemann.com" target="_blank">georgetiemann.com</a> </td><td> 160-1226-7 / 0 </td><td></td></tr><tr><td> 10-0 prolen </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 9-0 prolen </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> 8-0 prolen </td><td> <a href="http://ethicon.com" target="_blank">ethicon.com</a> </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Düz mikro forseps </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">s-ve-t</a>. Net </td><td> FRC-15RM-8 </td><td></td></tr><tr><td> Eğimli mikro forseps </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">s-ve-t.net</a> </td><td> TMS-15-RM 8- </td><td></td></tr><tr><td> Diseksiyon iğne tutucu </td><td> <a href="http://s-and-t.net" target="_blank">s-ve-t.net</a> </td><td> B-15-8,2 </td><td></td></tr><tr><td> Anastomoz iğne tutucu </td><td> <a href="http://rumex.net" target="_blank">rumex.net</a> </td><td> 8-021T </td><td></td></tr><tr><td> Mikro kelepçeler </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18055-03 </td><td> 6 x 1mm </td></tr><tr><td> Mikro kelepçeler aplikatör </td><td> <a href="http://finescience.com" target="_blank">finescience.com</a> </td><td> 18057-14 </td><td></td></tr&gt; <tr><td> Suprahepatik v kava kelepçe </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> 13.349.14 </td><td></td></tr><tr><td> Hızlı bağlayıcı halkalar </td><td> <a href="http://dltchiropody.co.uk" target="_blank">dltchiropody.co.uk</a> </td><td> PAR 10 </td><td> modifiye bisturi ağızları </td></tr><tr><td> Hızlı Linker approximator </td><td> <a href="http://pharmap.ch" target="_blank">pharmap.ch</a> </td><td> UD-04-275 </td><td> modifiye Kocher en forsepsle </td></tr></tbody></table>

orthotopic liver transplantation in rats

Karaciğer nakli alanında Klinik ilerleme çoğunlukla hayvan modelleri 1,2 ile desteklenmiştir. Kamada ve ark. 3 tarafından 1979 yılında ilk ortotopik sıçan karaciğer nakli yayımlanmasından bu yana, bu model, çeşitli önerilen alternatif teknikler 4 rağmen altın standart olarak kalmıştır. Yine de, onun geniş kullanımı, dik bir öğrenme eğrisi 5 ile sınırlıdır. Bu video yazıda, Kamada iki-manşet tekniğinin basit ve kolay tesis revizyonu göstermektedir. Suprahepatik vena kava anastomozu bir dikiş ile elle yapılır ve vena porta ve infrahepatic vena kava anastomozları hızlı-linker manşet sistemi 6 kullanılarak yapılmaktadır. Hızlı bağlayıcı kiti İmalat ayrı bir video kağıt gösterilmiştir.

Watch this Scientific Journal Video about Orthotopic Liver Transplantation in Rats at JoVE.com

Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Biz sıçan kadavradan karaciğer nakli için klasik iki manşet tekniğinin kolay bir tesis revizyonu sunuyoruz.

Sıçanlarda Ortotopik Karaciğer Nakli

Clinical progress in the field of liver transplantation has been largely supported by animal models1,2. Since the publication of the first orthotopic rat ...

Research

JoVE Journal

Medicine

29.7K Görüntüleme.  University of Geneva Hospitals. Biz sıçan kadavradan karaciğer nakli için klasik iki manşet tekniğinin kolay bir tesis revizyonu sunuyoruz.

Video: Orthotopic Liver Transplantation in Rats

Development of Obliterative Bronchiolitis in a Murine Model of Orthotopic Lung Transplantation

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and standardized not only for the study of allo-rejection but also between syngeneic strains for examining mechanisms of ischemia-reperfusion injury after lung transplantation. Although the application of the rat and other large animal model 2 contributed significantly to the elucidation of these studies, the scope of those investigations is limited by the scarcity of knockout and transgenic rats. Due to no effective therapies for obliterative bronchiolitis, the leading cause of death in lung transplant patients, there has been an intensive search for pre-clinical models that replicate obliterative bronchiolitis. The tracheal allograft model is the most widely used and may reproduce some of the histopathologic features of obliterative bronchiolitis 3. However, the lack of an intact vasculature with no connection to the recipient's conducting airways, and incomplete pathologic features of obliterative bronchiolitis limit the utility of this model 4. Unlike transplantation of other solid organs, vascularized mouse lung transplants have only recently been reported by Okazaki and colleagues for the first time in 2007 5. Applying the basic principles of the rat lung transplant, our lab initiated the obliterative bronchiolitis model using minor histoincompatible antigen murine orthotopic single-left lung transplants which allows the further study of obliterative bronchiolitis immunopathogenesis6.

Obliterative bronchiolitis is the key impediment to the long-term survival of lung transplant recipients and the lack of a robust preclinical model precludes examining obliterative bronchiolitis immunopathogenesis. Unlike other solid organ transplants, vascularized mouse lung transplantation has only recently been developed. Here we show our independently developed obliterative bronchiolitis model after murine orthotopic single-lung transplantation.

Ortotopik Akciğer Transplantasyonu bir Mürin Modelinde Obliteratif Bronşiolit Gelişimi

Orthotopic lung transplantation in rats was first reported by Asimacopoulos and colleagues in 1971 1. Currently, this method is well accepted and ...

Tıp

Orthotopic Small Bowel Transplantation in Rats

Small bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with short gut syndrome and failure of parenteral nutrition (irreversible intestinal failure). In specialized centers improved operative and managing strategies have led to excellent short- and intermediate term patient and graft survival while providing high quality of life 1,3. Unlike in the more common transplantation of other solid organs (i.e. heart, liver) many underlying mechanisms of graft function and immunologic alterations induced by intestinal transplantation are not entirely known6,7. Episodes of acute rejection, sepsis and chronic graft failure are the main obstacles still contributing to less favorable long term outcome and hindering a more widespread employment of the procedure despite a growing number of patients on home parenteral nutrition who would potentially benefit from such a transplant. The small intestine contains a large number of passenger leucocytes commonly referred to as part of the gut associated lymphoid system (GALT) this being part of the reason for the high immunogenity of the intestinal graft. The presence and close proximity of many commensals and pathogens in the gut explains the severity of sepsis episodes once graft mucosal integrity is compromised (for example by rejection). To advance the field of intestinal- and multiorgan transplantation more data generated from reliable and feasible animal models is needed. The model provided herein combines both reliability and feasibility once established in a standardized manner and can provide valuable insight in the underlying complex molecular, cellular and functional mechanisms that are triggered by intestinal transplantation. We have successfully used and refined the described procedure over more than 5 years in our laboratory 8-11. The JoVE video-based format is especially useful to demonstrate the complex procedure and avoid initial pitfalls for groups planning to establish an orthotopic rodent model investigating intestinal transplantation.

Small bowel transplantation has become an accepted treatment option for patients with irreversible intestinal failure. Our experimental model of orthotopic small bowel transplantation in rats serves as a reliable tool to address underlying immunologic and inflammatory processes that complicate intestinal transplantation.

Sıçanlarda Ortotopik Küçük Bağırsak Nakli

Small  bowel transplantation has become an accepted clinical option for patients with  short gut syndrome and failure of parenteral nutrition ...

Orthotopic Aortic Transplantation in Mice for the Study of Vascular Disease

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. This is largely true, but there are a number of important principles that can reduce the difficulty of these procedures and enhance reproducibility. Orthotopic aortic transplantation is an excellent procedure in which to learn these principles because it involves only two end-to-end anastomoses, but requires good suturing technique and handling of the vessels for consistent success. This procedure begins with the procurement of a length of abdominal aorta from a donor animal, followed by division of the native aorta in the recipient. The procured aorta is then placed between the divided ends of the recipient aorta and sutured into place using end-to-end anastomoses. To accomplish this objective successfully requires a high degree of concentration, good tools, a steady hand, and an appreciation of how easily the vasculature of a mouse can be damaged, resulting in thrombosis. Learning these important principles is what occupies most of the beginner's time when learning microsurgery in small rodents. Throughout this protocol, we refer to these important points. This model can be used to study vascular disease in a variety of different experimental systems1-8. In the context shown here, it is most often used for the study of post-transplant vascular disease, a common long-term complication of solid organ transplantation in which intimal hyperplasia occurs within the allograft. The primary advantage of the model is that it facilitates quantitative morphometric analyses and the transplanted vessel lies contiguous to the endogenous vessel, which can serve as an additional control9. The technique shown here is most often used for mice weighing 18-25 grams. We have accumulated most of our experience using the C57BL/6J, BALB/cJ, and C3H/HeJ strains.

We describe a technique in which a section of the abdominal aorta from a mouse is transplanted orthotopically to just below the renal arteries in an allogeneic or syngeneic recipient. This technique can be useful in studies in which transplantation of large arteries of uniform size is deemed advantageous.

Damar Hastalığı Çalışmaları Farelerde Ortotopik Aort Nakli

Vascular procedures involving anastomoses in the mouse are generally thought to be difficult and highly dependent on the skill of the individual surgeon. ...

Surgical Procedures for a Rat Model of Partial Orthotopic Liver Transplantation with Hepatic Arterial Reconstruction

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as studies on graft preservation and ischemia-reperfusion injury 1,2, immunological responses 3,4, hemodynamics 5,6, and small-for-size syndrome 7. The rat OLT is among the most difficult animal models in experimental surgery and demands advanced microsurgical skills that take a long time to learn. Consequently, the use of this model has been limited. Since the reliability and reproducibility of results are key components of the experiments in which such complex animal models are used, it is essential for surgeons who are involved in rat OLT to be trained in well-standardized and sophisticated procedures for this model.
While various techniques and modifications of OLT in rats have been reported 8 since the first model was described by Lee et al. 9 in 1973, the elimination of the hepatic arterial reconstruction 10 and the introduction of the cuff anastomosis technique by Kamada et al. 11 were a major advancement in this model, because they simplified the reconstruction procedures to a great degree. In the model by Kamada et al., the hepatic rearterialization was also eliminated. Since rats could survive without hepatic arterial flow after liver transplantation, there was considerable controversy over the value of hepatic arterialization. However, the physiological superiority of the arterialized model has been increasingly acknowledged, especially in terms of preserving the bile duct system 8,12 and the liver integrity 8,13,14.
In this article, we present detailed surgical procedures for a rat model of OLT with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft after ex vivo liver resection. The reconstruction procedures for each vessel and the bile duct are performed by the following methods: a 7-0 polypropylene continuous suture for the supra- and infrahepatic vena cava; a cuff technique for the portal vein; and a stent technique for the hepatic artery and the bile duct.

Orthotopic liver transplantation in rats is an indispensable experimental model for biomedical research. Here we present our surgical procedures for orthotopic rat liver transplantation with hepatic arterial reconstruction using a 50% partial graft.

Hepatik Arter İmar Kısmi Ortotopik Karaciğer Nakli Bir Rat Modeli Cerrahi İşlemleri

Orthotopic liver transplantation (OLT) in rats using a whole or partial graft is an indispensable experimental model for transplantation research, such as ...

Technique of Porcine Liver Procurement and Orthotopic Transplantation using an Active Porto-Caval Shunt

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation waiting list die without receiving an organ transplant or are delisted due to disease progression. Even after a successful transplantation, rejection and side effects of immunosuppression remain major concerns for graft survival and patient morbidity. 
Experimental animal research has been essential to the success of liver transplantation and still plays a pivotal role in the development of clinical transplantation practice. In particular, the porcine orthotopic liver transplantation model (OLTx) is optimal for clinically oriented research for its close resemblance to human size, anatomy, and physiology. 
Decompression of intestinal congestion during the anhepatic phase of porcine OLTx is important to guarantee reliable animal survival. The use of an active porto-caval-jugular shunt achieves excellent intestinal decompression. The system can be used for short-term as well as long-term survival experiments. The following protocol contains all technical information for a stable and reproducible liver transplantation model in pigs including post-operative animal care.

Experimental animal research plays a pivotal role in the development of clinical transplantation practice. The porcine orthotopic liver transplantation model (OLTx) closely resembles human conditions and is frequently used in clinically oriented research. The following protocol contains all information for a reliable porcine OLTx model using an active porto-caval-jugular shunt.

Active Porto-Caval Shunt kullanarak Domuz Karaciğer Tedarik ve Ortotopik Nakli Tekniği

The success of liver transplantation has resulted in a dramatic organ shortage. Each year, a considerable number of patients on the liver transplantation ...

Orthotopic Hind Limb Transplantation in the Mouse

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and translational research in the field of transplantation medicine. A vast array of reagents is available exclusively in this setting, including mono- and polyclonal antibodies for both diagnostic and interventional applications. In addition, a vast number of genotyped, inbred, transgenic, and knock out strains allow detailed investigation of the individual contributions of humoral and cellular components to the complex interplay of an immune response and make the mouse the gold standard for immunological research. 
Vascularized Composite Allotransplantation (VCA) delineates a novel field of transplantation using allografts to replace "like with like" in patients suffering traumatic or congenital tissue loss. This surgical methodological protocol shows the use of a non-suture cuff technique for super-microvascular anastomosis in an orthotopic mouse hind limb transplantation model. The model specifically allows for comparison between established paradigms in solid organ transplantation with a novel form of transplants consisting of various different tissue components. Uniquely, this model allows for the transplantation of a viable vascularized bone marrow compartment and niche that have the potential to exert a beneficial effect on the balance of immune acceptance and rejection. This technique provides a tool to investigate alloantigen recognition and allograft rejection and acceptance, as well as enables the pursuit of functional nerve regeneration studies to further advance this novel field of transplantation.

This novel model for orthotopic hind limb transplantation in the mouse, applying a non-suture cuff technique for super-microvascular anastomosis, provides a powerful tool for in&#160;vivo mechanistic immunological research related to vascularized composite allotransplantation (VCA).

Fare Ortotopik Hind Ekstremite nakli

In vivo animal model systems, and in particular mouse models, have evolved into powerful and versatile scientific tools indispensable to basic and ...

A Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation Using a Novel Magnetic Anastomosis Technique for Suprahepatic Vena Cava Reconstruction

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep learning curve. The introduction of the cuff technique for anastomosis of the portal vein (PV) and infrahepatic vena cava (IHVC) has significantly simplified the transplant procedure in rats. However, due to the short anterior wall of the recipients' suprahepatic vena cava (SHVC), the cuff technique is very difficult to use for the reconstruction of the SHVC. Most researchers in this field still use the hand-suture technique for SHVC reconstruction, which makes it the bottleneck step in rat orthotopic liver transplantation. The magnetic anastomosis technique (i.e., magnamosis) is a method of connecting two vessels using the attractive force between two magnets. Our recent study has shown that the magnetic anastomosis technique is superior to the hand-suture technique for SHVC reconstruction in rats. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using the novel magnetic anastomosis technique. In this model, the reconstruction of the PV and IHVC was performed by the standard cuff technique, while the reconstruction of the bile duct (BD) was performed by a stent technique. The hepatic re-arterialization was not performed. The magnetic anastomosis technique made SHVC reconstruction much easier and significantly shortened the anphepatic phase. After a reasonable learning curve, even researchers without advanced microsurgical skills can produce reliable and reproducible results using this rat model of OLT.

The reconstruction of the suprahepatic vena cava (SHVC) remains a difficult step in rat orthotopic liver transplantation. In this article, we show a step-by-step protocol for SHVC reconstruction in rats using a novel magnetic anastomosis technique.

Orthotopic fare modeli bir roman manyetik anastomoz teknik Suprahepatic Vena kava imar için kullanılarak karaciğer nakli

The rat model of orthotopic liver transplantation (OLT) is essential for transplant research. It is a very sophisticated animal model and requires a steep ...

A Pre-Clinical Porcine Model of Orthotopic Heart Transplantation

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart failure. Multiple small-animal models of heart transplantation have been used to study the acute and long-term effects of novel therapies. However, few are tested and demonstrated success in clinical trials. It is of critical importance to evaluate new therapies in a clinically relevant large-animal model for efficient and reliable translation of basic studies&#39;&#160;findings. Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and previously used to investigate novel cardioprotective strategies. This procedure focuses on acute ischemia-reperfusion injury and is a reliable method to investigate novel interventions which have been tested and validated in smaller experimental models, such as the murine model. We demonstrate its usefulness in assessing cardiac performance during the early post-transplantation period and other potential possibilities enabled by the model.

Here, we describe a pre-clinical large-animal (porcine) model of orthotopic heart transplantation that has been firmly established and utilized to investigate novel cardioprotective strategies.

Ortootopik kalp transplantasyonunun klinik öncesi porcine modeli

Fifty-years following the first successful report, cardiac transplantation remains the gold-standard treatment for eligible patients with advanced heart ...

Reduced Complications after Arterial Reconnection in a Rat Model of Orthotopic Liver Transplantation

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation of human liver transplantation due to the absence of arterial reconnection. Described here is a modified transplantation procedure that includes the incorporation of hepatic artery (HA) reconnection, leading to a marked improvement in transplant outcomes. With a mean anhepatic time of 12 min and 14 s, HA reconnection results in improved perfusion of the transplanted liver and an increase in long-term recipient survival from 37.5% to 88.2%. This protocol includes the use of 3D-printed cuffs and holders to connect the portal vein and infrahepatic inferior vena cava. It can be implemented for studying multiple aspects of liver transplantation, from immune response and infection to technical aspects of the procedure. By incorporating a simple and practical method for arterial reconnection using a microvascular technique, this modified rat OLT protocol closely mimics aspects of human liver transplantation and will serve as a valuable and clinically relevant research model.

The goal of this study is to modify the rat orthotopic liver transplant model to better represent human liver transplantation and improve recipient survival. The presented method reestablishes hepatic arterial inflow by connecting the donor liver&#39;s common hepatic artery to the recipient liver&#39;s proper hepatic artery.

Ortotopik Karaciğer Transplantasyonunun Sıçan Modelinde Arteriyel Reconnection Sonrası Azaltılmış Komplikasyonlar

The rat orthotopic liver transplantation (OLT) model is a powerful tool to study acute and chronic rejection. However, it is not a complete representation ...

Left Lung Orthotopic Transplantation in a Juvenile Porcine Model for ESLP

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. However, lung transplantation is limited by a shortage of available donor organs. As such, there is high waitlist mortality. Ex situ lung perfusion (ESLP) has increased donor lung utilization rates in some centers by 15%-20%. ESLP has been applied as a method to assess and recondition marginal donor lungs and has demonstrated acceptable short- and long-term outcomes following transplantation of extended criteria donor (ECD) lungs. Large animal (in vivo) transplantation models are required to validate ongoing in vitro research findings. Anatomic and physiologic differences between humans and pigs pose significant technical and anesthetic challenges. An easily reproducible transplant model would permit the&#160;in vivo&#160;validation of current ESLP strategies and the preclinical evaluation of various interventions designed to improve donor lung function. This protocol describes a porcine model of orthotopic left lung allotransplantation. This includes anesthetic and surgical techniques, a customized surgical checklist, troubleshooting, modifications, and the benefits and limitations of the approach.

This protocol describes a juvenile porcine model of orthotopic left lung allotransplantation designed for use with ESLP research. Focus is made on anesthetic and surgical techniques, as well as critical steps and troubleshooting.

ESLP için Juvenil Domuz Modelinde Sol Akciğer Ortotopik Transplantasyonu

Lung transplantation is the gold-standard treatment for end-stage lung disease, with over 4,600 lung transplantations performed worldwide annually. ...

Methods Article

Sıçanlarda Ortotopik Karaciğer Nakli