Bu araştırma Tıp Keck School, California, USA Üniversitesi ve University College London, İngiltere yapıldı. KL Sağlık hibe 5 U19 CA148112-02 Ulusal Enstitüsü tarafından finanse edilmektedir. BG Eve Temyiz jinekolojik onkoloji sadaka (İngiltere) bir proje hibe ile finanse edildi. UCLH / UCL&#39;de yürütülen çalışmaların bir kısmı kısmen Sağlık NIHR Biyomedikal Araştırma Merkezi finansman planının Bölümü fon oldu.

<ol>
	<li>Jelovac, D., Armstrong, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+progress+in+the+diagnosis+and+treatment+of+ovarian+cancer.">Recent progress in the diagnosis and treatment of ovarian cancer.</a> CA Cancer J. Clin. , (2011).</li><li>Office for National Statistics. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cancer Statistics registrations: registrations of cancer diagnosed in 2008. , (2011).</li><li>K&#246;bel, M., Kalloger, S. E., Santos, J. L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Tumor+type+and+substage+predict+survival+in+stage+I+and+II+ovarian+carcinoma:+insights+and+implications.">Tumor type and substage predict survival in stage I and II ovarian carcinoma: insights and implications.</a> Gynecol. Oncol. 116, 50-56 (2010).</li><li>K&#246;bel, M., Kalloger, S. E., Boyd, N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+carcinoma+subtypes+are+different+diseases:+implications+for+biomarker+studies.">Ovarian carcinoma subtypes are different diseases: implications for biomarker studies.</a> PLoS Med. 5, e232 (2008).</li><li>Smith, L. H., Morris, C. R., Yasmeen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+cancer:+can+we+make+the+clinical+diagnosis+earlier.">Ovarian cancer: can we make the clinical diagnosis earlier.</a> Cancer. 104, 1398-1407 (2005).</li><li>Aviv, A., Hunt, S. C., Lin, J., Cao, X., Kimura, M., Blackburn, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impartial+comparative+analysis+of+measurement+of+leukocyte+telomere+length/DNA+content+by+Southern+blots+and+qPCR.">Impartial comparative analysis of measurement of leukocyte telomere length/DNA content by Southern blots and qPCR.</a> Nucleic Acids Res. 39, e134 (2011).</li><li>Kim, N. W., Wu, F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Advances+in+quantification+and+characterization+of+telomerase+activity+by+the+telomeric+repeat+amplification+protocol+(TRAP.">Advances in quantification and characterization of telomerase activity by the telomeric repeat amplification protocol (TRAP.</a> Nucleic Acids Res. 25, 2595-2597 (1997).</li><li>Lawrenson, K., Grun, B., Benjamin, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Senescent+fibroblasts+promote+neoplastic+transformation+of+partially+transformed+ovarian+epithelial+cells+in+a+three-dimensional+model+of+early+stage+ovarian+cancer.">Senescent fibroblasts promote neoplastic transformation of partially transformed ovarian epithelial cells in a three-dimensional model of early stage ovarian cancer.</a> Neoplasia. 12, 317-325 (2010).</li><li>Lawrenson, K., Benjamin, E., Turmaine, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=In+vitro+three-dimensional+modelling+of+human+ovarian+surface+epithelial+cells.">In vitro three-dimensional modelling of human ovarian surface epithelial cells.</a> Cell Prolif. 42, 385-393 (2009).</li><li>Lawrenson, K., Sproul, D., Grun, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Modelling+genetic+and+clinical+heterogeneity+in+epithelial+ovarian+cancers.">Modelling genetic and clinical heterogeneity in epithelial ovarian cancers.</a> Carcinogenesis. 32, 1540-1549 (2011).</li><li>Grun, B., Benjamin, E., Sinclair, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Three-dimensional+in+vitro+cell+biology+models+of+ovarian+and+endometrial+cancer.">Three-dimensional in vitro cell biology models of ovarian and endometrial cancer.</a> Cell Prolif. 42, 219-228 (2009).</li><li>Zietarska, M., Maugard, C. M., Filali-Mouhim, A., Alam-Fahmy, M., Tonin, P. N., Provencher, D. M., Mes-Masson, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+description+of+a+3D+in+vitro+model+for+the+study+of+epithelial+ovarian+cancer+(EOC.">Molecular description of a 3D in vitro model for the study of epithelial ovarian cancer (EOC.</a> Mol. Carcinog. 46, 872-885 (2007).</li><li>Shield, K., Ackland, M. L., Ahmed, N., Rice, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Multicellular+spheroids+in+ovarian+cancer+metastases:+Biology+and+pathology.">Multicellular spheroids in ovarian cancer metastases: Biology and pathology.</a> Gynecol Oncol. 113, 143-148 (2009).</li><li>Dafou, D., Grun, B., Sinclair, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Microcell-mediated+chromosome+transfer+identifies+EPB41L3+as+a+functional+suppressor+of+epithelial+ovarian+cancers.">Microcell-mediated chromosome transfer identifies EPB41L3 as a functional suppressor of epithelial ovarian cancers.</a> Neoplasia. 12, 579-589 (2010).</li><li>Levanon, K., Crum, C., Drapkin, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=New+insights+into+the+pathogenesis+of+serous+ovarian+cancer+and+its+clinical+impact.">New insights into the pathogenesis of serous ovarian cancer and its clinical impact.</a> J. Clin. Oncol. 26, 5284-5293 (2008).</li><li>Kurman, R. J., Shih, I. e. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+pathogenesis+and+extraovarian+origin+of+epithelial+ovarian+cancer--shifting+the+paradigm.">Molecular pathogenesis and extraovarian origin of epithelial ovarian cancer--shifting the paradigm.</a> Hum. Pathol. 42, 918-931 (2011).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Erken evre epitelyal over kanseri (EOC) biyolojisi tam anlaşılamamıştır. Belki de uzun yıllar bu alanda başlıca engellerden biri doku spesifik hastalığın kökeni ve EOC geliştirme mikroçevresinin rolünün önemi ve anlayış eksikliği olmuştur. Son birkaç yılda, EOC muhtemelen farklı alt tipi için farklı hücresel kökeni ile birden çok farklı histophathological alttiplere ile heterojen bir hastalık olduğu açıktır haline gelmiştir. Örneğin, mevcut veri yüksek dereceli seröz EOCs fallop t...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reaktif </td><td> Satıcı </td><td> Katalog Numarası </td></tr><tr><td> Hücre kültürü için uygun PolyHEMA, </td><td> Sigma Aldrich </td><td> P3932 </td></tr><tr><td> Moleküler biyoloji notu etanol </td><td> Sigma Aldrich </td><td> E7023 </td></tr><tr><td> Hücre kültürü için steril su </td><td> VWR </td><td> 12001-356 </td></tr><tr><td> MCDB105 </td><td> Sigma Aldrich </td><td> M6395 </td></tr><tr><td> Orta 199 </td><td> Sigma Aldrich </td><td> M2154 </td></tr><tr><td> Hyclone fetal bovin serumu </td><td> Thermo Scientific </td><td> SH30088.03 </td></tr><tr> &lt;td&gt; Gentamisin </td><td> Sigma Aldrich </td><td> G1397 </td></tr><tr><td> Amfoterisin B </td><td> Sigma Aldrich </td><td> A2942 </td></tr><tr><td> pBABE-rutubet hTERT </td><td> Addgene </td><td> 1773 </td></tr><tr><td> PBS </td><td> VWR </td><td> 12001-766 </td></tr><tr><td> % 0.25 tripsin-EDTA </td><td> Invitrogen </td><td> 25200-072 </td></tr><tr><td> Hücre süzgeç (40 veya 70 mikron) </td><td> VWR </td><td> 21008-949 21008-952 </td></tr><tr><td> Anti-fibroblast yüzey protein antikor, klon 1B10 </td><td> Sigma </td><td> F4771 </td></tr><tr><td> Anti-pan-sitokeratin antikor (C11) </td><td> Santa Cruz </td><td> sc-8018 </td></tr><tr><td> Polybrene (hexadimethrine bromür) </td><td> Sigma </td><td> 107689 </td></tr><tr><td> TeloTAGGG Telomeraz PCR ELISA PLUS </td><td> Roche </td><td> 12013789001 </td></tr><tr><td> Telomer uzunluğu Assay TeloTAGGG </td><td> Roche </td><td> 12209136001 </td></tr></tbody></table> Tablo 1. Reaktifler ve Ekipmanları Bu çalışmada anılacaktır.

heterotypic three-dimensional in vitro modeling of stromal-epithelial interactions during ovarian cancer initiation and progression

Epitelyal over kanserleri (EOCs) Batı toplumlarında jinekolojik malignite ölüm önde gelen nedenidir. Cerrahi tedaviler ve geliştirilmiş platin bazlı kemoterapi ilerlemelere rağmen, fazla dört yıl 1,2 için EOC sağkalım oranları çok az bir gelişme olmuştur. Sahnelemeye Iken Ben tümörleri 5-yıllık sağkalım oranları&gt;% 85, evre III / IV hastalığı için sağkalım oranları &lt;% 40 vardır. Tümörler daha erken, daha tedavi edilebilir, aşamaları 3-5 tespit edildi Böylece, EOC için mortalite yüksek sıklığında önemli derecede azalma olabilir. Şu anda, erken evre hastalık gelişimi moleküler genetik ve biyolojik temeli tam anlaşılamamıştır. Daha spesifik olarak, küçük bir tümör başlangıcı sırasında mikroçevresinin rolü hakkında bilinir fakat EOCs (örneğin yaş ve parite) için bilinen risk faktörleri mikroçevresindeki EOCs erken oluşumunda önemli bir rol oynadığını düşündürmektedir. Bu nedenle, üç-boyutlu heterotipik modelleri geliştirilmiştirNormal yumurtalık hem de ve erken evre over kanserlerinin. Normal over için, eş-kültürlü, normal over yüzey epitel (kaybetmek) ve kültür bu hücrelerin ömrünü uzatmak için insan telomeraz holoenzyme (hTERT) ve katalitik alt birimi retrovrial transdüksiyon tarafından ölümsüzleştirdi Normal stromal fibroblast (INOF) hücreleri. Over epitel hücre transformasyonu, kaybetmek hücrelerde CMYC onkogen ekspresyonu, yine INOF hücreleri ile birlikte kültüre en erken aşamalarında modellemek için. Bu heterotipik modeller epitel hücrelerinin dönüşümü ve işgali üzerine yaşlanma ve yaşlanma etkilerini araştırmak için kullanıldı. İşte bu üç boyutlu model geliştirme metodolojik adımları açıklamak; Bu metodolojiler, normal yumurtalık ve yumurtalık kanseri dokuların gelişimi özgü değildir ve stromal ve epitelyal hücre etkileşimleri temel nerede diğer doku türleri incelemek için kullanılan olabilir doku bakım ve di yönüolgunun hastalığı gelişme.

Watch this Scientific Journal Video about Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression at JoVE.com

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

Biz kurulması için metodolojiler tarif<em&gt; In vitro</em&gt; Over fibroblastlar ve normal over yüzey ya da yumurtalık kanseri epitel hücrelerinde oluşan heterotipik üç boyutlu modelleri. Biz over kanseri gelişimi sırasında meydana stromal-epitelyal etkileşimleri çalışmak için bu modellerin kullanımını tartışmak.

Üç boyutlu heterotipik<em&gt; In Vitro</emYumurtalık Kanseri Başlatma ve İlerleme sırasında Stromal-Epitel Etkileşimleri&gt; Modelleme

Epithelial ovarian cancers (EOCs) are the leading cause of death from gynecological malignancy in Western societies. Despite advances in surgical ...

heterotypic-three-dimensional-vitro-modeling-stromal-epithelial

Research

JoVE Journal

Medicine

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

15.0K Görüntüleme.  University of Southern California. Biz kurulması için metodolojiler tarif In vitro Over fibroblastlar ve normal over yüzey ya da yumurtalık kanseri epitel hücrelerinde oluşan heterotipik üç boyutlu modelleri. Biz over kanseri gelişimi sırasında meydana stromal-epitelyal etkileşimleri çalışmak için bu modellerin kullanımını tartışmak.