Questa ricerca è stata effettuata presso la Keck School of Medicine, University of California, Stati Uniti d&#39;America, e la University College di Londra, Regno Unito. KL è finanziato dal National Institute of Health sovvenzione 5 U19 CA148112-02. BG è stato finanziato da una borsa di studio del progetto dalla carità oncologia ginecologica Eve Appeal (Regno Unito). Parte di questo lavoro svolto in UCLH / UCL è stato in parte il finanziamento da parte del Dipartimento del regime di Salute di ricerca biomedica NIHR finanziamento Centre.

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	<li>Jelovac, D., Armstrong, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+progress+in+the+diagnosis+and+treatment+of+ovarian+cancer.">Recent progress in the diagnosis and treatment of ovarian cancer.</a> CA Cancer J. Clin. , (2011).</li><li>Office for National Statistics. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cancer Statistics registrations: registrations of cancer diagnosed in 2008. , (2011).</li><li>K&#246;bel, M., Kalloger, S. E., Santos, J. 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M., Filali-Mouhim, A., Alam-Fahmy, M., Tonin, P. N., Provencher, D. M., Mes-Masson, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+description+of+a+3D+in+vitro+model+for+the+study+of+epithelial+ovarian+cancer+(EOC.">Molecular description of a 3D in vitro model for the study of epithelial ovarian cancer (EOC.</a> Mol. Carcinog. 46, 872-885 (2007).</li><li>Shield, K., Ackland, M. L., Ahmed, N., Rice, G. 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Nessun conflitto di interessi dichiarati.

La biologia di stadio precoce del cancro ovarico epiteliale (EOC) è poco conosciuta. Forse uno dei principali ostacoli in questo campo per molti anni è stata la mancanza di comprensione delle origini tessuto specifiche che la malattia, e del significato del ruolo del microambiente nello sviluppo EOC. Nel corso degli ultimi anni, è diventato chiaro che EOC è una malattia eterogenea con più sottotipi distinti histophathological, probabilmente con differenti origini cellulari per diversi sottotipi. Ad esempio, i dati ...

<table border="1"><tbody><tr><td> Reagente </td><td> Fornitore </td><td> Numero di catalogo </td></tr><tr><td> PolyHEMA, adatto per coltura cellulare </td><td> Sigma Aldrich </td><td> P3932 </td></tr><tr><td> Biologia molecolare etanolo grado </td><td> Sigma Aldrich </td><td> E7023 </td></tr><tr><td> Acqua sterile per colture cellulari </td><td> VWR </td><td> 12001-356 </td></tr><tr><td> MCDB105 </td><td> Sigma Aldrich </td><td> M6395 </td></tr><tr><td> Medium 199 </td><td> Sigma Aldrich </td><td> M2154 </td></tr><tr><td> Hyclone siero fetale bovino </td><td> Thermo Scientific </td><td> SH30088.03 </td></tr><tr> &lt;td&gt; Gentamicina </td><td> Sigma Aldrich </td><td> G1397 </td></tr><tr><td> Amfotericina B </td><td> Sigma Aldrich </td><td> A2942 </td></tr><tr><td> pBABE-igro-hTERT </td><td> Addgene </td><td> 1773 </td></tr><tr><td> PBS </td><td> VWR </td><td> 12001-766 </td></tr><tr><td> 0,25% tripsina-EDTA </td><td> Invitrogen </td><td> 25200-072 </td></tr><tr><td> Cella filtro (40 o 70 micron) </td><td> VWR </td><td> 21008-949 21008-952 </td></tr><tr><td> Anti-fibroblasti proteina anticorpi di superficie, clone 1B10 </td><td> Sigma </td><td> F4771 </td></tr><tr><td> Anti-pan-citocheratina anticorpo (C11) </td><td> Santa Cruz </td><td> sc-8018 </td></tr><tr><td> Polibrene (hexadimethrine bromuro) </td><td> Sigma </td><td> 107689 </td></tr><tr><td> TeloTAGGG telomerasi PCR ELISA PLUS </td><td> Roche </td><td> 12013789001 </td></tr><tr><td> TeloTAGGG Assay Lunghezza dei telomeri </td><td> Roche </td><td> 12209136001 </td></tr></tbody></table> Reagenti Tabella 1. E apparecchiature di cui al presente studio.

heterotypic three-dimensional in vitro modeling of stromal-epithelial interactions during ovarian cancer initiation and progression

Tumori ovarici epiteliali (EOCS) sono la principale causa di morte per neoplasia ginecologica nelle società occidentali. Nonostante i progressi nei trattamenti chirurgici e il miglioramento delle chemioterapie a base di platino, si è registrato pochi miglioramenti nei tassi di sopravvivenza EOC per più di quattro decenni 1,2. Mentre stadio I tumori sono a 5 anni tasso di sopravvivenza&gt; 85%, i tassi di sopravvivenza per la fase III / IV della malattia sono &lt;40%. Pertanto, gli alti tassi di mortalità per tumore ovarico epiteliale potrebbe essere significativamente ridotta se i tumori sono stati rilevati in precedenza, più trattabili, fasi 3-5. Allo stato attuale, la base molecolare genetica e biologica della malattia in stadio precoce sviluppo è poco conosciuta. Più in particolare, si sa poco circa il ruolo del microambiente tumorale durante l&#39;inizio, ma i fattori di rischio noti per EOCS (ad esempio età e parità) suggeriscono che il microambiente svolge un ruolo chiave nella genesi precoce di EOCS. Abbiamo quindi sviluppato modelli eterotipiche tridimensionalisia dell&#39;ovaio normale e di tumori ovarici primi stadi. Per l&#39;ovaio normale, abbiamo co-coltura superficie epiteliale ovarico normale (Iose) e normale fibroblasti stromale (INOF) cellule, immortalata da trasduzione retrovrial della subunità catalitica della telomerasi holoenzyme umana (hTERT) per estendere la durata di vita di queste cellule in coltura. Per modellare le prime fasi di trasformazione cellulare ovarico epiteliale, sovraespressione del CMYC oncogene nelle cellule Iose, di nuovo co-coltura con cellule INOF. Questi modelli eterotipiche sono stati utilizzati per studiare gli effetti di invecchiamento e senescenza sulla trasformazione e l&#39;invasione delle cellule epiteliali. Qui descriviamo le fasi metodologiche in sviluppo di questi modello tridimensionale; queste metodologie non sono specifici per lo sviluppo di ovaio normale e tessuti di cancro ovarico, e potrebbe essere usato per studiare tipi di tessuto in cui le interazioni cellule stromali ed epiteliali sono un fondamentale aspetto del tessuto e di manutenzioneSease sviluppo.

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Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

Descriviamo metodologie per la creazione di<em&gt; In vitro</em&gt; Eterotipiche modelli tridimensionali comprendenti fibroblasti ovariche e di superficie ovarica normale o cellule di cancro ovarico epiteliale. Discutiamo l&#39;uso di questi modelli per studiare stroma-epiteliali interazioni che si verificano durante lo sviluppo del cancro ovarico.

Eterotipica tridimensionale<em&gt; In Vitro</emModellazione&gt; di stromale-epiteliali interazioni Durante iniziazione e la progressione del cancro ovarico

Epithelial ovarian cancers (EOCs) are the leading cause of death from gynecological malignancy in Western societies. Despite advances in surgical ...

heterotypic-three-dimensional-vitro-modeling-stromal-epithelial

Research

JoVE Journal

Medicine

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

15.0K Views.  University of Southern California. Descriviamo metodologie per la creazione di In vitro Eterotipiche modelli tridimensionali comprendenti fibroblasti ovariche e di superficie ovarica normale o cellule di cancro ovarico epiteliale. Discutiamo l'uso di questi modelli per studiare stroma-epiteliali interazioni che si verificano durante lo sviluppo del cancro ovarico.