Cette recherche a été effectuée à la Keck School of Medicine, University of California, Etats-Unis, et l&#39;University College London, Royaume-Uni. KL est financé par l&#39;Institut national de la Santé subvention de 5 U19 CA148112-02. BG a été financé par une subvention de projet de la charité appel Eve oncologie gynécologique (Royaume-Uni). Certains de ces travaux entrepris à UCLH / UCL a été en partie le financement du ministère de la Santé INDH recherche biomédicale système de financement du Centre.

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	<li>Jelovac, D., Armstrong, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recent+progress+in+the+diagnosis+and+treatment+of+ovarian+cancer.">Recent progress in the diagnosis and treatment of ovarian cancer.</a> CA Cancer J. Clin. , (2011).</li><li>Office for National Statistics. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> Cancer Statistics registrations: registrations of cancer diagnosed in 2008. , (2011).</li><li>K&#246;bel, M., Kalloger, S. E., Santos, J. 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R., Yasmeen, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ovarian+cancer:+can+we+make+the+clinical+diagnosis+earlier.">Ovarian cancer: can we make the clinical diagnosis earlier.</a> Cancer. 104, 1398-1407 (2005).</li><li>Aviv, A., Hunt, S. C., Lin, J., Cao, X., Kimura, M., Blackburn, E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Impartial+comparative+analysis+of+measurement+of+leukocyte+telomere+length/DNA+content+by+Southern+blots+and+qPCR.">Impartial comparative analysis of measurement of leukocyte telomere length/DNA content by Southern blots and qPCR.</a> Nucleic Acids Res. 39, e134 (2011).</li><li>Kim, N. 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M., Filali-Mouhim, A., Alam-Fahmy, M., Tonin, P. N., Provencher, D. M., Mes-Masson, A. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+description+of+a+3D+in+vitro+model+for+the+study+of+epithelial+ovarian+cancer+(EOC.">Molecular description of a 3D in vitro model for the study of epithelial ovarian cancer (EOC.</a> Mol. Carcinog. 46, 872-885 (2007).</li><li>Shield, K., Ackland, M. L., Ahmed, N., Rice, G. 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Clin. Oncol. 26, 5284-5293 (2008).</li><li>Kurman, R. J., Shih, I. e. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Molecular+pathogenesis+and+extraovarian+origin+of+epithelial+ovarian+cancer--shifting+the+paradigm.">Molecular pathogenesis and extraovarian origin of epithelial ovarian cancer--shifting the paradigm.</a> Hum. Pathol. 42, 918-931 (2011).</li></ol>

Aucun conflit d&#39;intérêt déclaré.

La biologie du stade précoce de cancer ovarien épithélial (COE) est mal comprise. Peut-être l&#39;un des principaux obstacles dans ce domaine depuis de nombreuses années a été le manque de compréhension des origines tissulaires spécifiques de la maladie, et de l&#39;importance du rôle du microenvironnement dans le développement des COE. Au cours des dernières années, est devenu clair que des COE est une maladie hétérogène avec de multiples sous-types distincts histophathological, probablement avec diffé...

<table border="1"><tbody><tr><td> Réactif </td><td> Fournisseur </td><td> Numéro de catalogue </td></tr><tr><td> PolyHEMA, adapté pour la culture cellulaire </td><td> Sigma Aldrich </td><td> P3932 </td></tr><tr><td> Moléculaire éthanol de qualité biologie </td><td> Sigma Aldrich </td><td> E7023 </td></tr><tr><td> Eau stérile pour culture cellulaire </td><td> VWR </td><td> 12001-356 </td></tr><tr><td> MCDB105 </td><td> Sigma Aldrich </td><td> M6395 </td></tr><tr><td> Milieu 199 </td><td> Sigma Aldrich </td><td> M2154 </td></tr><tr><td> Hyclone sérum fœtal bovin </td><td> Thermo Scientific </td><td> SH30088.03 </td></tr><tr> &lt;td&gt; gentamicine </td><td> Sigma Aldrich </td><td> G1397 </td></tr><tr><td> L&#39;amphotéricine B </td><td> Sigma Aldrich </td><td> A2942 </td></tr><tr><td> pBABE-hygro-hTERT </td><td> Addgene </td><td> 1773 </td></tr><tr><td> PBS </td><td> VWR </td><td> 12001-766 </td></tr><tr><td> 0,25% de trypsine-EDTA </td><td> Invitrogen </td><td> 25200-072 </td></tr><tr><td> Cellule filtre (40 ou 70 microns) </td><td> VWR </td><td> 21008-949 21008-952 </td></tr><tr><td> Anti-anticorps protéine de surface des fibroblastes, clone 1B10 </td><td> Sigma </td><td> F4771 </td></tr><tr><td> Anti-pan-cytokératine anticorps (C11) </td><td> Santa Cruz </td><td> sc-8018 </td></tr><tr><td> Polybrène (hexadiméthrine bromure) </td><td> Sigma </td><td> 107689 </td></tr><tr><td> TeloTAGGG télomérase PCR ELISA PLUS </td><td> Roche </td><td> 12013789001 </td></tr><tr><td> TeloTAGGG Assay longueur des télomères </td><td> Roche </td><td> 12209136001 </td></tr></tbody></table> Réactifs Tableau 1. Et du matériel visés dans la présente étude.

heterotypic three-dimensional in vitro modeling of stromal-epithelial interactions during ovarian cancer initiation and progression

Cancers épithéliaux de l&#39;ovaire (COU) sont la principale cause de décès par cancer gynécologique dans les sociétés occidentales. Malgré les progrès dans les traitements chirurgicaux et l&#39;amélioration des chimiothérapies à base de platine, il ya eu peu d&#39;amélioration dans les taux de survie des COE pendant plus de quatre décennies 1,2. Bien que les tumeurs de stade I ont des taux de survie à 5 ans&gt; 85%, les taux de survie pour le stade III / IV maladies sont &lt;40%. Ainsi, les taux élevés de mortalité pour COE pourrait être considérablement diminué si les tumeurs ont été détectées au plus tôt, plus traitables les étapes 3-5. À l&#39;heure actuelle, la base génétique moléculaire et biologique de stade de développement précoce de la maladie est mal comprise. Plus précisément, on sait peu au sujet du rôle du microenvironnement tumoral lors de l&#39;initiation, mais les facteurs de risque connus pour la COU (par exemple l&#39;âge et la parité) suggèrent que le microenvironnement joue un rôle clé dans la genèse précoce de la COU. Nous avons donc développé des modèles tridimensionnels hétérotypiquesà la fois de l&#39;ovaire normal et du début des cancers de l&#39;ovaire stade. Pour l&#39;ovaire normal, nous co-cultivées surface épithéliale ovarienne normale (IOSE) et des fibroblastes du stroma normale (INOF) cellules, immortalisé par transduction retrovrial de la sous-unité catalytique de la télomérase humaine holoenzyme (hTERT) pour prolonger la durée de vie de ces cellules en culture. Pour modéliser les premières étapes de la transformation cellulaire épithélial de l&#39;ovaire, la surexpression de l&#39;oncogène dans les cellules CMYC IOSE, nouveau co-cultivées avec des cellules INOF. Ces modèles hétérotypiques ont servi à étudier les effets du vieillissement et de la sénescence sur la transformation et l&#39;invasion des cellules épithéliales. Ici, nous décrivons les étapes méthodologiques dans le développement de ces modèles en trois dimensions; ces méthodologies ne sont pas spécifiques au développement de l&#39;ovaire normal et les tissus du cancer de l&#39;ovaire, et pourrait être utilisée pour étudier les autres types de tissus où les interactions cellules stromales et épithéliales sont un élément fondamental aspect de l&#39;entretien des tissus et didéveloppement malad.

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Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

Nous décrivons les méthodes pour établir<em&gt; In vitro</em&gt; Hétérotypiques modèles tridimensionnels comprenant des fibroblastes et la surface de l&#39;ovaire ou de l&#39;ovaire normale des cellules ovariennes cancéreuses épithéliales. Nous discutons de l&#39;utilisation de ces modèles pour l&#39;étude du stroma-épithéliales interactions qui se produisent au cours du développement du cancer de l&#39;ovaire.

Hétérotypique tridimensionnelle<em&gt; In Vitro</em&gt; Modélisation des interactions stroma-épithéliales lors de l&#39;initiation et la progression du cancer des ovaires

Epithelial ovarian cancers (EOCs) are the leading cause of death from gynecological malignancy in Western societies. Despite advances in surgical ...

heterotypic-three-dimensional-vitro-modeling-stromal-epithelial

Research

JoVE Journal

Medicine

Heterotypic Three-dimensional In Vitro Modeling of Stromal-Epithelial Interactions During Ovarian Cancer Initiation and Progression

15.0K vues.  University of Southern California. Nous décrivons les méthodes pour établir In vitro Hétérotypiques modèles tridimensionnels comprenant des fibroblastes et la surface de l'ovaire ou de l'ovaire normale des cellules ovariennes cancéreuses épithéliales. Nous discutons de l'utilisation de ces modèles pour l'étude du stroma-épithéliales interactions qui se produisent au cours du développement du cancer de l'ovaire.