Bu çalışma NSF hibe IOS 1121692 tarafından ve Washington&#39;un Araştırma Vakfı Üniversitesi tarafından desteklenmiştir.

1. Uçucu Follection <ol><li> Bu örnekte, M. uçucu numuneleri kullanmak lewisii çiçek - California&#39;ya bir dağ kır çiçeği yerli. Uçucu Riffell ve arkadaşlarına göre dinamik emme yöntemler kullanılarak elde edilmektedir. 14. Kısaca, bu yöntem çiçekler teflon torba içine alınır bir kapalı döngü yakalama sistemi kullanır. Inert bir vakum pompası kullanılarak, çiçekler etrafında hava Porapak Q matris ile dolu bir Pasteur pipeti oluşan bir &quot;tuzak&quot; aracılığıyla emilir. Pompadan gelen dönüş hava aktifleştirilmiş odun kömürü ile filtre edilir. Önceden belirlenmiş bir süre sonra, olgu 24 saat içinde, Porapak Q matris konsantre ekstreye toplamak için, bir polar olmayan bir çözücü, tipik olarak heksan ile elüt edilmiştir. Özüt daha sonra -80 ° C&#39;de analize kadar saklanır. Eğer gerekirse, numuneler azot gazı akışı altında analiz öncesi konsantre edilebilir. Örnek zaten iyi karakterize edilmediği sürece, bir aracılığıyla bir kısım çalıştırınGaz kromatografisi-kütle spektrometresi (GC-MS) Örnek kullanmadan önce, uçucu bileşenleri tanımlamak için. </li></ol> 2. Elektrofizyolojik Hazırlık <ol><li> 1.000 ul pipet sonundan itibaren yaklaşık 1 cm kesin. Pipet tabanına bir bombus arısı (Bombus impatiens) yerleştirin ve sadece baş ortaya çıkıncaya kadar hafifçe ucunun tersi sonuna doğru itin. </li><li> Dişçilik mumları eritin ve güvenlik için bileşik gözleri üzerine ve balmumu yapışır arının kafasını tamamen hareketsiz hale getirmek için emin, maruz başının etrafında kalıp. Arı anteni üzerine herhangi bir balmumu elde etmek için değil emin olun. </li><li> Kafası güvenli sonra, bir jilet-kesici veya manikür kesmek için neşter uygun büyüklükte kullanarak baş kapsülü içine bir kare, pencere gibi kesi yapmak. Bıçak kesici kullanarak, hemen bileşik gözler için anten ve bitişik birinin arkasında, başının kapsül sırt tarafında başlar. Kesmekbir bileşik gözü, kontralateral bileşik göz için düz bir çizgi. Tersi bileşik göz için düz bir çizgi kestikten sonra, onun göğüs yakın baş kapsülü eğrileri ve bitene kadar dorsal bir kesi yaparak başlar. Bu noktada, baş kapsül karşı ucuna doğru kesme başlar. Son olarak, bir kez bir çizgi ucunu kesmek olmuştur, ilk kesi başlangıç ​​pozisyonuna geri hattı kesti. Bu, elektrot ekleme zarar vereceği gibi, anten bitişik kütikül kaldırmak için önemlidir. </li><li> Manikür kesilir sonra, o arı beyni açığa ve daha da önemlisi, anten lobları olmalıdır arı manikür, çıkarmak için forseps bir çift kullanın. Hemen beyin kurutulmuş haline gelmez, böylece böcek tuzlu su ile beyin superfusing başlar. Beynin maruz sonra, dikkatlice hemen anten lobları Yukarıdaki perinöral kılıfı kaldırmak için çok ince forseps bir çift kullanın. Çok dikkatli olun değilforseps ile ponksiyon arı beyni. </li></ol> 3. Çok kanallı kayıt ile Gaz Kromatografi <ol><li> Arı &quot;hazırlık&quot; - onun beyin maruz bir tüp içinde sabit - Şimdi elektrofizyolojik kayıt için hazırdır. Bir hava tabloda bulunan bir manyetik taban sabitlenmiş bir kelepçe içinde arı, yerleştirin. </li><li> IV torba, akış kontrol ve salin sürekli beyin superfuses böylece tüp (böcek tuzlu su ile doldurulur) düzenleyin. </li><li> Arı gözüne, tungsten telden yapılmış mikromanipülatör, insertareference elektrot, kullanma. </li><li> Ayrı bir mikromanipülatör kullanarak, bu tür bir sarmal tetrode tel, silikon ya da çok-kanallı elektrodu (NeuroNexus Technologies) gibi, çok-kanallı elektrot eklemek arı anten lobları içine. Bu, elektrot bu tür TDT sistemin Z-veriyolu bioamp işlemci TDT sistemin S-3 Z serisi gibi bir ön-yükselticiye bağlanmıştır. Gaz Chro çıktısıkorumalı bir BNC kablo ile matogram adlı dedektör hem nöral ve GC sinyali senkronize böyle amplifikatör ve veri toplama sistemi ile arabirim olabilir. </li><li> Stabilize nöral kayıtları için yaklaşık 30-60 dakika bekleyin. Spontan aktivite ve kayıt kanallardaki birim dalga şekli tutarlı hale gelince, arı uyarmak ve koku kayıt kanallarının yanıtı gözlemlemek için bir koku şırınga kullanın. </li><li> Tarafından nöronların ekstrasellüler kramponları kaydedin otomatik eşikleme ayrı kayıt kanallarında sinyal 3,5-5 sigma tarafından kayıt kanalları. Manuel eşikleme elektriksel gürültü kirliliğini önlemek için bazı kanallar için gerekli olabilir. Nöronların aksiyon potansiyelleri kayıt kanalında ani voltaj yükselmelerine olarak görünecektir. Kanalın gerilim eşiği aştığında, sistem böylece Takin, eşik geçiş öncesi ve sonrası birkaç milisaniye tamponlar ve kaydederga dalga anlık görüntü veya başak. </li><li> Hemen hava tablonun yanındaki GC olduğunu. GC içine çiçek özü enjekte etmeden önce, GC koşmak sıcaklık rampa yöntemi doğru olduğundan emin olun. Buradaki örnekte, 10 ° C / dak &#39;lık bir hızla sıcaklık artış takip 4 dakika için 50 başlayarak bir sıcaklık yöntem ° C kullanır. 220 ° ilave bir 6 dakika GC tutun hangi zaman C,. Biz taşıyıcı gaz olarak helyum ile DB-5 GC sütunu (J &amp; W Scientific, Folsom, CA, USA) kullanın. Giriş 200 ° C&#39;ye ayarlanmış bir sıcaklık, splitless olduğunu Alev iyonizasyon dedektörü sıcaklığı 230 ° C&#39;ye ayarlanır </li><li> GC sütuna adsorbe uçucular serbest bırakmak için GC ısıtmalı enjeksiyon portu içine çiçek headspace özü örnek enjekte. Sütun atık Alev İyonizasyon Detektörü (FID) ve bir bardak &quot;Y&quot; konnektör (J &amp; W Scientific) kullanılarak arı anten arasındaki 01:01 bölünür. Rec BaşlayanEğer GC bir örnek enjekte olarak elektrottan ording. </li><li> GC çalışma bittikten sonra, 5 ila 15 dakika için hazırlık dinlendirin. Bundan sonra, GC başka bir örnek enjekte edilir ya da tek bir uçucu bileşik veya bileşikler karışımı kullanılarak hazırlama uyarır. Hazırlık uyarıcı son bahsedilen yöntem, bir sabit hava akımı hava darbeleri bileşikleri tevdi edilmiş olan filtre kağıdı üzerinde bir parça içeren bir cam şırınga aracılığıyla yönlendirilir. Koku uyarıcı yazılım tarafından kontrol edilen bir solenoid valf ile aktive vasıtasıyla darbeli edildi. </li><li> Birim faaliyet aniden durur veya değişiklik varsa, tuzlu damla kontrol edin ve 15 dakika hazırlık dinlendirin. Spontan aktivite önceki seviyesi yeniden kazanmak değilse mevcut ise o zaman hazırlık atılır ve bir başka arı kullanılmalıdır. </li><li> Deneyden sonra, hala doku içinde sonda ile, 20 dakika için% 5 formalin ile beyin düzeltmek. Daha sonra, tüketim beyinve 4 saat boyunca% 2 glutaraldehit yerleştirin ve daha sonra kademeli bir etanol dehidratasyon serisi yapmak ve metil salisilat ile beyin temizleyin. Doku, elektrotlar doku konfokal mikroskopi ile pek belirgin olmalıdır delinmiş AL bölgesindeki yerlerin tespiti ve takas sonucu. </li></ol> 4. Veri Analizi <ol><li> Çözümle Kaydedilen nöral birimleri ayırmak ve tanımlamak için deneme sonra veri toplanmıştır. Böyle tepe veya vadi genlik, pik yarı genişliği, vb gibi başak şekiller, ya da azaltılmış tedbirler dayalı ayrı bir dalga, ya da &quot;ani&quot;, (temel bileşenler) 17 için tipik yazılım programları (Çevrimdışı Sıralayıcısı MClust ve SClust) kullanın , 18 (Şekil 2). Üç boyutlu uzayda ayrılmış (PC1-PC3) ve birbirlerinden istatistiksel olarak farklı olduğunu sivri türüne kümeleri kullanın (çok değişkenli ANOVA, p &lt;0.05) (Şekil 2) daha fazla analiz için. Bakıntetrode kayıt ve başak-sıralama yöntemlerin tam açıklaması için alıntıyı # s 17-19. </li><li> Zaman damgası her kümede ani ve raster araziler ve atış hızı yanıtları (Şekil 2, 3A) oluşturmak için MATLAB veya Neuroexplorer (Nex Teknolojileri, Winston-Salem, NC) kullanılarak analiz için bu verileri dışa aktarın. </li><li> Eş zamanlı olarak kaydedilir GC verileri kullanılarak uçucu alıkonma zamanları belirleyin. O zaman noktalarında ünite, incelemek için, kromatogram dan tepe tepe tarafından belirlenen uçucu tutma süreleri, kullanın. </li><li> GC vadede aracılığıyla bireysel ünite cevapları incelemek için, 100 msn aralıklarla başak sayısı, bin ve uçucular salınımlı bir retansiyon zamanı referans ile hızı yanıtları ateşleme zaman ders incelemek. 100 msn aralıklarla başak binning GC bir elüt odorant için nöronal cevabının zaman-kurs hakkında yeterli ayrıntı veya sinyali sağlar. </li><li> EXA içinFarklı salgılayan uçucular için nüfus yanıtları mayın, önce, 3 sn örnekleme penceresi üzerinden 1.5 sn bireysel birimlerin ateşleme hızı yanıtları entegre ve 1,5 saniye sonra, bir retansiyon zamanı uçucu (Şekil 3). Bu süre GC uçucu bir salınımlı süreleri tipik bir örneğidir. Ve (sütunlar) GC atık için topluluk yanıtı temsil eden her satırında bir etkinlik matrisi olarak düzenlenmesi (; Biz göre renk kodlama onları (mavi düşük bir yanıttır kırmızı bir yüksek atış hızı yanıtı) birimlerinin hızı yanıtları ateş göster Şekil 3). </li></ol>

<ol>
	<li>Hildebrand, J. G., Shepherd, G. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mechanisms+of+olfactory:+converging+evidence+for+common+principles+across+phyla.">Mechanisms of olfactory: converging evidence for common principles across phyla.</a> Annual Review of Neuroscience. 20, 595-631 (1997).</li><li>Reisenman, C. E., Riffell, J. A., Bernays, E. A., Hildebrand, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antagonistic+effects+of+floral+scent+in+an+insect-plant+interaction.">Antagonistic effects of floral scent in an insect-plant interaction.</a> Proceedings of the Royal Society B: Biological Sciences. 277, 2371-2379 (2010).</li><li>Reisenman, C. E., Riffell, J. A., Hildebrand, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> International Symposium on Olfaction and Taste. 1170, 462-467 (2009).</li><li>Alarc&#243;n, R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Congruence+between+visitation+and+pollen-transport+networks+in+a+California+plant-pollinator+community.">Congruence between visitation and pollen-transport networks in a California plant-pollinator community.</a> Oikos. 119, 35-44 (2010).</li><li>Alarc&#243;n, R., Waser, N. M., Ollerton, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Year-to-year+variation+in+the+topology+of+a+plant-pollinator+interaction+network.">Year-to-year variation in the topology of a plant-pollinator interaction network.</a> Oikos. 117, 1796-1807 (2008).</li><li>Riffell, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+consequences+of+innate+preferences+and+olfactory+learning+in+hawkmoth-flower+interactions.">Behavioral consequences of innate preferences and olfactory learning in hawkmoth-flower interactions.</a> P. Natl. Acad. Sci. U.S.A. 105, 3404-3409 (2008).</li><li>De Moraes, C. M., Lewis, W. J., Pare, P. W., Alborn, H. T., Tumlinson, J. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herbivore-infested+plants+selectively+attract+parasitoids.">Herbivore-infested plants selectively attract parasitoids.</a> Nature. 393, 570 (1998).</li><li>Carey, A. F., Wang, G., Su, C. -. Y., Zwiebel, L. J., Carlson, J. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Odorant+reception+in+the+malaria+mosquito+Anopheles+gambiae.">Odorant reception in the malaria mosquito Anopheles gambiae.</a> Nature. 464, 66-71 (2010).</li><li>Turner, S. L., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ultra-prolonged+activation+of+CO2-sensing+neurons+disorients+mosquitoes.">Ultra-prolonged activation of CO2-sensing neurons disorients mosquitoes.</a> Nature. 474, 87-91 (2011).</li><li>Pellegrino, M., Nakagawa, T., Vosshall, L. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Single+sensillum+recordings+in+the+insects+Drosophila+melanogaster+and+Anopheles+gambiae.">Single sensillum recordings in the insects Drosophila melanogaster and Anopheles gambiae.</a> J Vis Exp. (36), e1725 (2010).</li><li>Syed, Z., Leal, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Electrophysiological+measurements+from+a+moth+olfactory+system.">Electrophysiological measurements from a moth olfactory system.</a> J. Vis. Exp. (49), e2489 (2011).</li><li>Roelofs, W. L., Comeau, A., Hill, A., Milicevic, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Sex+attractant+of+the+codling+moth:+characterization+with+electroantennogram+technique.">Sex attractant of the codling moth: characterization with electroantennogram technique.</a> Science. 174, 297-299 (1971).</li><li>Riffell, J. A., Lei, H., Christensen, T. A., Hildebrand, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Characterization+and+coding+of+behaviorally+significant+odor+mixtures.">Characterization and coding of behaviorally significant odor mixtures.</a> Current Biology. 19, 335-340 .</li><li>Riffell, J. A., Lei, H., Hildebrand, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+correlates+of+behavior+in+the+moth+Manduca+sexta+in+response+to+complex+odors.">Neural correlates of behavior in the moth Manduca sexta in response to complex odors.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences of the U.S.A. 106, 19219-19226 (2009).</li><li>Raguso, R. A., Pellmyr, O. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Dynamic+headspace+analysis+of+floral+volatiles:+a+comparison+of+methods.">Dynamic headspace analysis of floral volatiles: a comparison of methods.</a> Oikos. 81, 238-254 (1998).</li><li>Rodriguez-Saona, C. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Herbivore-induced+blueberry+volatiles+and+intra-plant+signaling.">Herbivore-induced blueberry volatiles and intra-plant signaling.</a> J Vis Exp. , e3440 (2011).</li><li>Nguyen, D. P., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Micro-drive+array+for+chronic+in+vivo+recording:+tetrode+assembly.">Micro-drive array for chronic in vivo recording: tetrode assembly.</a> J Vis Exp. , e1098 (2009).</li><li>Schjetnan, A. G. P., Luczak, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Recording+large-scale+neuronal+ensembles+with+silicon+probes+in+the+anesthetized+rat.">Recording large-scale neuronal ensembles with silicon probes in the anesthetized rat.</a> J Vis Exp. , e3282 (2011).</li><li>Deisig, N., Giurfa, M., Lachnit, H., Sandoz, J. -. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Neural+representation+of+olfactory+mixtures+in+the+honeybee+antennal+lobe.">Neural representation of olfactory mixtures in the honeybee antennal lobe.</a> European Journal of Neuroscience. 24, 1161-1174 (2006).</li><li>St&#246;kl, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+deceptive+pollination+system+targeting+drosophilids+through+olfactory+mimicry+of+yeast.">A deceptive pollination system targeting drosophilids through olfactory mimicry of yeast.</a> Current Biology. 20, 1846-1852 (2010).</li><li>Schneider, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Elektrophysiologische+untersuchungen+von+chemo-+und+mechanorezeptoren+der+antenne+des+seidenspinners+Bombyx+mori+L.">Elektrophysiologische untersuchungen von chemo- und mechanorezeptoren der antenne des seidenspinners Bombyx mori L.</a> Journal of Comparative Physiology A: Neuroethology, Sensory, Neural, and Behavioral Physiology. 40, 8-41 (1957).</li><li>Arn, H., St&#228;dler, E., Rauscher, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+electroantennographic+detector:+a+selective+and+senstitive+tool+in+the+gas+chromatographic+analysis+of+insect+pheromones.">The electroantennographic detector: a selective and senstitive tool in the gas chromatographic analysis of insect pheromones.</a> Zeitschrift f&#252;r Naturforschung. 30c, 722-725 (1975).</li><li>Schneider, D., Boeckh, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rezeptorpotential+und+nervenimpulse+einzelner+olfaktorischer+sensillen+der+insektenantenne.">Rezeptorpotential und nervenimpulse einzelner olfaktorischer sensillen der insektenantenne.</a> Journal of Comparative Physiology A: Neuroethology, Sensory, Neural, and Behavioral Physiology. 45, 405-412 (1962).</li><li>Blight, M. M., Pickett, J. A., Wadhams, L. J., Woodcock, C. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Antennal+perception+of+oilseed+rape+Brassica+napus+(Brassicaceae)+volatiles+by+the+cabbage+seed+weevil+Ceutorhynchus+assimilis+(Coleoptera,+Curculionidae).">Antennal perception of oilseed rape Brassica napus (Brassicaceae) volatiles by the cabbage seed weevil Ceutorhynchus assimilis (Coleoptera, Curculionidae).</a> Journal of Chemical Ecology. 21, 1649-1664 (1995).</li><li>Lin, D. Y., Shea, S. D., Katz, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Representation+of+natural+stimuli+in+the+rodent+main+olfactory+bulb.">Representation of natural stimuli in the rodent main olfactory bulb.</a> Neuron. 50, 937-949 (2006).</li><li>Lei, H., Reisenman, C. E., Wilson, C. H., Gabbur, P., Hildebrand, J. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Spiking+patterns+and+their+functional+implications+in+the+antennal+lobe+of+the+tobacco+hornworm+Manduca+sexta.">Spiking patterns and their functional implications in the antennal lobe of the tobacco hornworm Manduca sexta.</a> PLoS ONE. 6, e23382 (2011).</li><li>Syed, Z., Leal, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Acute+olfactory+response+of+Culex+mosquitoes+to+a+human-+and+bird-derived+attractant.">Acute olfactory response of Culex mosquitoes to a human- and bird-derived attractant.</a> Proceedings of the National Academy of Sciences. 106, 18803-18808 (2009).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Böcek koku-aracılı davranışları üreme, ana-yer seçimi ve uygun gıda kaynaklarının belirlenmesi dahil olmak üzere birçok farklı süreçler, sürücü. Bu süreçlerin çalışma kaynak yanı sıra, davranışları aracılık eden, bu bileşiklerin teşhis etme yeteneği yayılan uçucu maddeler belirlemek için yeteneğini gerektirir. Konularda karmaşık kokular birlikte, tek tek bileşenlerin 6,7,13,19,20 farklı algılanan bir tek koku oluşturmak tek tek bileşiklerin yüz on oluşmaktadır o...

<table border="1"><tbody><tr><td> Öğenin ismi </td><td> Şirket </td><td> Katalog Numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td> Porapak Tip Q 80-100 örgü </td><td> Waters </td><td> WAT027060 </td><td></td></tr><tr><td> Reynolds Fırın Çanta </td><td> Reynolds </td><td></td><td></td></tr><tr><td> GC </td><td> Agilent </td><td> 7820A </td><td></td></tr><tr><td> GC sütunu </td><td> J &amp; W Scientific, Folsom, CA, USA </td><td> DB-5 (30 m, 0.25 mm, 0.25 mikron) </td><td></td></tr><tr><td> Analitik helyum taşıyıcı gaz </td><td> Praxair </td><td> HE K </td><td> 1 cc / dk </td></tr><tr><td> 16 kanallı silikon elektrot </td><td> NeuroNexus Technologies </td><td> a4x4-3mm50-177 </td><td></td></tr><tr><td> İnce tel NiCr, 0.012 mm çapında) </td><td> Sandvik Kanthal HP Reid </td><td> PX000004 </td><td> Özel tetrodes ve stereotrodes yapmak için </td></tr><tr><td> Pre-amplifikatör </td><td> Tucker-Davis Sistemi </td><td> PZ-2 </td><td></td></tr><tr><td> Amplifikatör </td><td> Tucker-Davis Sistemi </td><td> RZ-2 </td><td></td></tr><tr><td> Veri toplama sistemi - OpenEx suite </td><td> Tucker-Davis Sistemi </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Çevrimiçi başak-sıralama yazılımı - SpikePac </td><td> Tucker-Davis Sistemi </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Çevrimdışı başak-sıralama yazılımı - Mclust Spike-sorting araç </td><td> David Redish, Nörobilim, Üniversite BölümüMinnesota </td><td> Az Bedava indir <a href="http://redishlab.neuroscience.umn.edu/MClust/MClust.html" target="_blank">http://redishlab.neuroscience.umn.edu/MClust/MClust.html</a> </td><td> MATLAB toolbox </td></tr></tbody></table>

identification of olfactory volatiles using gas chromatography-multi-unit recordings (gcmr) in the insect antennal lobe

Tüm organizmalar çevreleriyle kendi davranışsal ve fizyolojik yanıtı belirlemek uyarıcılardır dolu bir dünya yaşamaktadır. Koklama yanıt, ve aralarında, karmaşık koku uyaranlara ayrımcılık onların koku sistemleri kullanmak böcekler, özellikle önemlidir. Bu kokular gibi üreme ve yaşam alanı seçimi 1-3 gibi süreçlerin aracılık davranışları ortaya çıkarmak. Ayrıca, tozlanma 4-6, gıda bitkileri 7 otyeme, ve hastalık 8,9 iletim dahil olmak üzere, tarım ve insan sağlığı açısından son derece önemli olan böcekler aracılık davranışları ile kimyasal algılama. Koku sinyalleri ve böcek davranışları rollerinin tanımlanması ekolojik süreçleri ve insan gıda kaynakları ve refahı hem de anlamak için bu nedenle önemlidir. Bugüne kadar, böcek davranış sürücü Uçucu maddelerin tanımlanması zor ve yorucu sık sık olmuştur. Güncel tekniklergaz kromatografisi-çiftli electroantennogram kayıt (GC-EAG), ve gaz tek sensillum kayıtları (GC-SSR) 10-12 kromatografisi-birleştiğinde. Bu teknikler, biyoaktif bileşiklerin saptanmasında önemli olduğu kanıtlanmıştır. 13,14; Biz anten lobdaki nöronların (böcek birincil koku merkezi AL) gelen çok kanallı elektrofizyolojik kayıtlar (&#39;GCMR&#39; olarak adlandırılır) bağlanmıştır gaz kromatografi kullanan bir yöntem geliştirdik. Bu state-of-the-art tekniği bize koku bilgilerin böcek beyinde nasıl temsil edildiğini soruşturma için izin verir. Olfaktör işleme bu düzeyde kokulara sinir tepkiler AL nöronlarca anten reseptör nöronları yakınsama derecesi duyarlı nedeniyle çünkü Ayrıca, AL kayıtları doğal kokuları verimli ve yüksek hassasiyet ile aktif bileşenlerin tespiti sağlayacaktır. Burada GCMR açıklamak ve onun kullanımıyla ilgili bir örnek vermek. Birkaç genel adımlar invol vardırBiyolojik olarak aktif böcek ve uçucular tepki tespit fraksiyonel. Uçucu ilk faiz kaynaklardan toplanan (bu örnekte biz cinsinin Mimulus (Phyrmaceae) çiçek kullanın) ve standart GC-MS teknikleri 14-16 kullanılarak gerektiğinde karakterize gerekir. Böcekler bir kayıt elektrot sinir kayıt başlar anten lob ve multi-kanal içine yerleştirilir, bunun ardından, en az diseksiyon kullanılarak çalışma için hazırlanmıştır. Nöral verilerin post-processing ardından özellikle koku böcek sinir sistemi tarafından ciddi nöral yanıtların neden olduğu görülmektedir. Burada mevcut örnek, tozlaşma çalışmalar için belirli olsa da, GCMR çalışma organizmalar ve uçucu kaynaklardan geniş bir şekilde genişletilebilir. Örneğin, bu yöntem, koku maddesi vektör böcek ve bitki haşere kovucu çekme ya da tanımlanmasında kullanılabilir. Ayrıca, aynı zamanda, GCMR po olarak yararlı böceklere için cezbedici belirlemek için kullanılabilirllinators. Tekniği yanı olmayan böcek konulara genişletilebilir.

M. kullanılarak GCMR tahlilinde lewisii çiçek kokusu, biz GC özü 3 ul enjekte. GC ile akıtılarak Uçucu toplam sayısı genellikle 60-70 uçucu olduğunu. M. kokusu lewisii ağırlıklı altı karbonlu, örneğin 2-heksanol gibi uçucu maddeler, ve tepe boşluğunun, &lt;% 1 ihtiva seskuiterpenoidler oluşan koku geri kalanı ile, β-mirsen (asiklik) ve α-pinen de dahil olmak üzere, monoterpenoids oluşur. GCMR anten lob nöronla...

Watch this Scientific Journal Video about Identification of Olfactory Volatiles using Gas Chromatography-Multi-unit Recordings GCMR in the Insect Antennal Lobe at JoVE.com

Identification of Olfactory Volatiles using Gas Chromatography-Multi-unit Recordings GCMR in the Insect Antennal Lobe

Olfaktör ipuçları böcekler birçok farklı davranışlar arabuluculuk, bileşikler ve uçucu yüzlerce onlarca oluşan genellikle kompleks karışımlarıdır. Böcek anten lob çok kanallı bir kayıt ile gaz kromatografisi kullanarak, biyolojik olarak aktif bileşiklerin belirlenmesi için bir yöntem açıklanmaktadır.

Böcek antennal Lob Gaz Kromatografisi-Multi-ünite Recordings (GCMR) kullanarak Olfaktör Uçuculuk tanımlanması

All  organisms inhabit a world full of sensory stimuli that determine their  behavioral and physiological response to their environment. Olfaction is ...

identification-olfactory-volatiles-using-gas-chromatography-multi

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Identification of Olfactory Volatiles using Gas Chromatography-Multi-unit Recordings (GCMR) in the Insect Antennal Lobe

14.2K Görüntüleme.  University of Washington. Olfaktör ipuçları böcekler birçok farklı davranışlar arabuluculuk, bileşikler ve uçucu yüzlerce onlarca oluşan genellikle kompleks karışımlarıdır. Böcek anten lob çok kanallı bir kayıt ile gaz kromatografisi kullanarak, biyolojik olarak aktif bileşiklerin belirlenmesi için bir yöntem açıklanmaktadır.

Video: Identification of Olfactory Volatiles using Gas Chromatography-Multi-unit Recordings GCMR in the Insect Antennal Lobe

Analyzing Responses of Mouse Olfactory Sensory Neurons Using the Air-phase Electroolfactogram Recording

Animals depend on olfaction for many critical behaviors, such as finding food sources, avoiding predators, and identifying conspecifics for mating and other social interactions. The electroolfactogram (EOG) recording is an informative, easy to conduct, and reliable method to assay olfactory function at the level of the olfactory epithelium. Since the 1956 description of the EOG by Ottoson in frogs1, the EOG recording has been applied in many vertebrates including salamanders, rabbits, rats, mice, and humans (reviewed by Scott and Scott-Johnson, 2002, ref. 2). The recent advances in genetic modification in mice have rekindled interest in recording the EOG for physiological characterization of olfactory function in knock-out and knock-in mice. EOG recordings have been successfully applied to demonstrate the central role of olfactory signal transduction components3-8, and more recently to characterize the contribution of certain regulatory mechanisms to OSN responses9-12.
Odorant detection occurs at the surface of the olfactory epithelium on the cilia of OSNs, where a signal transduction cascade leads to opening of ion channels, generating a current that flows into the cilia and depolarizes the membrane13. The EOG is the negative potential recorded extracellularly at the surface of the olfactory epithelium upon odorant stimulation, resulting from a summation of the potential changes caused by individual responsive OSNs in the recording field2. Comparison of the amplitude and kinetics of the EOG thus provide valuable information about how genetic modification and other experimental manipulations influence the molecular signaling underlying the OSN response to odor. 
Here we describe an air-phase EOG recording on a preparation of mouse olfactory turbinates. Briefly, after sacrificing the mouse, the olfactory turbinates are exposed by bisecting the head along the midline and removing the septum. The turbinate preparation is then placed in the recording setup, and a recording electrode is placed at the surface of the olfactory epithelium on one of the medial turbinates. A reference electrode is electrically connected to the tissue through a buffer solution. A continuous stream of humidified air is blown over the surface of the epithelium to keep it moist. The vapor of odorant solutions is puffed into the stream of humidified air to stimulate the epithelium. Responses are recorded and digitized for further analysis.

The electroolfactogram (EOG) recording is an informative, easy-to-conduct, and reliable way of assessing olfactory function at the level of the olfactory epithelium. This protocol describes a recording setup, mouse tissue preparation, data collection, and basic data analysis.

Hava-faz Electroolfactogram Kayıt Fare Koku Duyu Nöronlar analizi Yanıtları

Animals depend on olfaction for many critical behaviors, such as finding food sources, avoiding predators, and identifying conspecifics for mating and ...

Nörobilim

Calcium Imaging of Odor-evoked Responses in the Drosophila Antennal Lobe

The antennal lobe is the primary olfactory center in the insect brain and represents the anatomical and functional equivalent of the vertebrate olfactory bulb1-5. Olfactory information in the external world is transmitted to the antennal lobe by olfactory sensory neurons (OSNs), which segregate to distinct regions of neuropil called glomeruli according to the specific olfactory receptor they express. Here, OSN axons synapse with both local interneurons (LNs), whose processes can innervate many different glomeruli, and projection neurons (PNs), which convey olfactory information to higher olfactory brain regions.
Optical imaging of the activity of OSNs, LNs and PNs in the antennal lobe - traditionally using synthetic calcium indicators (e.g. calcium green, FURA-2) or voltage-sensitive dyes (e.g. RH414) - has long been an important technique to understand how olfactory stimuli are represented as spatial and temporal patterns of glomerular activity in many species of insects6-10. Development of genetically-encoded neural activity reporters, such as the fluorescent calcium indicators G-CaMP11,12 and Cameleon13, the bioluminescent calcium indicator GFP-aequorin14,15, or a reporter of synaptic transmission, synapto-pHluorin16 has made the olfactory system of the fruitfly, Drosophila melanogaster, particularly accessible to neurophysiological imaging, complementing its comprehensively-described molecular, electrophysiological and neuroanatomical properties2,4,17. These reporters can be selectively expressed via binary transcriptional control systems (e.g. GAL4/UAS18, LexA/LexAop19,20, Q system21) in defined populations of neurons within the olfactory circuitry to dissect with high spatial and temporal resolution how odor-evoked neural activity is represented, modulated and transformed22-24.
Here we describe the preparation and analysis methods to measure odor-evoked responses in the Drosophila antennal lobe using G-CaMP25-27. The animal preparation is minimally invasive and can be adapted to imaging using wide-field fluorescence, confocal and two-photon microscopes.

Calcium Imaging of Odor-evoked Responses in the Drosophila Antennal Lobe

We describe an established technique to measure and analyze odor-evoked calcium responses in the antennal lobe of living Drosophila melanogaster.

Koku-uyarılmış Cevaplarının Kalsiyum Görüntüleme Drosophila Antennal Lob

The antennal lobe is the primary olfactory center in the insect brain and represents the anatomical and functional equivalent of the vertebrate olfactory ...

Dual Electrophysiological Recordings of Synaptically-evoked Astroglial and Neuronal Responses in Acute Hippocampal Slices

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs through activation of their ion channels and neurotransmitter receptors, and process information in part through activity-dependent release of gliotransmitters. Furthermore, astrocytes constitute the main uptake system for glutamate, contribute to potassium spatial buffering, as well as to GABA clearance. These cells therefore constantly monitor synaptic activity, and are thereby sensitive indicators for alterations in synaptically-released glutamate, GABA and extracellular potassium levels. Additionally, alterations in astroglial uptake activity or buffering capacity can have severe effects on neuronal functions, and might be overlooked when characterizing physiopathological situations or knockout mice. Dual recording of neuronal and astroglial activities is therefore an important method to study alterations in synaptic strength associated to concomitant changes in astroglial uptake and buffering capacities. Here we describe how to prepare hippocampal slices, how to identify stratum radiatum astrocytes, and how to record simultaneously neuronal and astroglial electrophysiological responses. Furthermore, we describe how to isolate pharmacologically the synaptically-evoked astroglial currents.

The preparation of acute brain slices from isolated hippocampi, as well as the simultaneous electrophysiological recordings of astrocytes and neurons in stratum radiatum during stimulation of schaffer collaterals is described. The pharmacological isolation of astroglial potassium and glutamate transporter currents is demonstrated.

Akut Hipokampal Dilimler içinde Synaptically-uyarılmış astroglial ve Nöronal Cevaplarının İkili Elektrofizyolojik Kayıtlar

Astrocytes form together with neurons tripartite synapses, where they integrate and modulate neuronal activity. Indeed, astrocytes sense neuronal inputs ...

Multi-unit Recording Methods to Characterize Neural Activity in the Locust (Schistocerca Americana) Olfactory Circuits

Detection and interpretation of olfactory cues are critical for the survival of many organisms. Remarkably, species across phyla have strikingly similar olfactory systems suggesting that the biological approach to chemical sensing has been optimized over evolutionary time1. In the insect olfactory system, odorants are transduced by olfactory receptor neurons (ORN) in the antenna, which convert chemical stimuli into trains of action potentials. Sensory input from the ORNs is then relayed to the antennal lobe (AL; a structure analogous to the vertebrate olfactory bulb). In the AL, neural representations for odors take the form of spatiotemporal firing patterns distributed across ensembles of principal neurons (PNs; also referred to as projection neurons)2,3. The AL output is subsequently processed by Kenyon cells (KCs) in the downstream mushroom body (MB), a structure associated with olfactory memory and learning4,5. Here, we present electrophysiological recording techniques to monitor odor-evoked neural responses in these olfactory circuits.
First, we present a single sensillum recording method to study odor-evoked responses at the level of populations of ORNs6,7. We discuss the use of saline filled sharpened glass pipettes as electrodes to extracellularly monitor ORN responses. Next, we present a method to extracellularly monitor PN responses using a commercial 16-channel electrode3. A similar approach using a custom-made 8-channel twisted wire tetrode is demonstrated for Kenyon cell recordings8. We provide details of our experimental setup and present representative recording traces for each of these techniques.

Multi-unit Recording Methods to Characterize Neural Activity in the Locust Schistocerca Americana Olfactory Circuits

We demonstrate variations of the extracellular multi-unit recording technique to characterize odor-evoked responses in the first three stages of the invertebrate olfactory pathway. These techniques can easily be adapted to examine ensemble activity in other neural systems as well.

Locust Sinir Aktivitesi Karakterize Multi-ünite Kayıt Yöntemleri (<em&gt; Schistocerca Americana</em&gt;) Olfaktör Devreler

Detection and interpretation of olfactory cues are critical for the survival  of many organisms. Remarkably, species across phyla have strikingly similar ...

Using Insect Electroantennogram Sensors on Autonomous Robots for Olfactory Searches

Robots designed to track chemical leaks in hazardous industrial facilities1 or explosive traces in landmine fields2 face the same problem as insects foraging for food or searching for mates3: the olfactory search is constrained by the physics of turbulent transport4. The concentration landscape of wind borne odors is discontinuous and consists of sporadically located patches. A pre-requisite to olfactory search is that intermittent odor patches are detected. Because of its high speed and sensitivity5-6, the olfactory organ of insects provides a unique opportunity for detection. Insect antennae have been used in the past to detect not only sex pheromones7 but also chemicals that are relevant to humans, e.g., volatile compounds emanating from cancer cells8 or toxic and illicit substances9-11. We describe here a protocol for using insect antennae on autonomous robots and present a proof of concept for tracking odor plumes to their source. The global response of olfactory neurons is recorded in situ in the form of electroantennograms (EAGs). Our experimental design, based on a whole insect preparation, allows stable recordings within a working day. In comparison, EAGs on excised antennae have a lifetime of 2 hr. A custom hardware/software interface was developed between the EAG electrodes and a robot. The measurement system resolves individual odor patches up to 10 Hz, which exceeds the time scale of artificial chemical sensors12. The efficiency of EAG sensors for olfactory searches is further demonstrated in driving the robot toward a source of pheromone. By using identical olfactory stimuli and sensors as in real animals, our robotic platform provides a direct means for testing biological hypotheses about olfactory coding and search strategies13. It may also prove beneficial for detecting other odorants of interests by combining EAGs from different insect species in a bioelectronic nose configuration14 or using nanostructured gas sensors that mimic insect antennae15.

We describe a protocol for using insect antennae in the form of electroantennograms (EAGs) on autonomous robots. Our experimental design allows stable recordings within a day and resolves individual odor patches up to 10 Hz. The efficiency of EAG sensors for olfactory searches is demonstrated in driving a robot toward an odor source.

Koku Aramalar için Otonom Robotlar Böcek elektroantenogram Sensörleri kullanarak

Robots designed to track chemical leaks in hazardous industrial facilities1 or explosive traces in landmine fields2 face the same problem as insects ...

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

The mouse accessory olfactory system (AOS) is a specialized sensory pathway for detecting nonvolatile social odors, pheromones, and kairomones. The first neural circuit in the AOS pathway, called the accessory olfactory bulb (AOB), plays an important role in establishing sex-typical behaviors such as territorial aggression and mating. This small (&#60;1 mm3) circuit possesses the capacity to distinguish unique behavioral states, such as sex, strain, and stress from chemosensory cues in the secretions and excretions of conspecifics. While the compact organization of this system presents unique opportunities for recording from large portions of the circuit simultaneously, investigation of sensory processing in the AOB remains challenging, largely due to its experimentally disadvantageous location in the brain. Here, we demonstrate a multi-stage dissection that removes the intact AOB inside a single hemisphere of the anterior mouse skull, leaving connections to both the peripheral vomeronasal sensory neurons (VSNs) and local neuronal circuitry intact. The procedure exposes the AOB surface to direct visual inspection, facilitating electrophysiological and optical recordings from AOB circuit elements in the absence of anesthetics. Upon inserting a thin cannula into the vomeronasal organ (VNO), which houses the VSNs, one can directly expose the periphery to social odors and pheromones while recording downstream activity in the AOB. This procedure enables controlled inquiries into AOS information processing, which can shed light on mechanisms linking pheromone exposure to changes in behavior.

Ex Vivo Preparations of the Intact Vomeronasal Organ and Accessory Olfactory Bulb

The mouse accessory olfactory bulb (AOB) has been difficult to study in the context of sensory coding. Here, we demonstrate a dissection that produces an ex vivo preparation in which AOB neurons remain functionally connected to their peripheral inputs, facilitating research into information processing of mouse pheromones and kairomones.

Bozulmamış Vomeronasal Organ ve Aksesuar Koku Ampul Ex Vivo Hazırlıklar

The mouse accessory olfactory system (AOS) is a specialized sensory pathway for detecting nonvolatile social odors, pheromones, and kairomones. The first ...

Determination of Photoreceptor Cell Spectral Sensitivity in an Insect Model from In Vivo Intracellular Recordings

Intracellular recording is a powerful technique used to determine how a single cell may respond to a given stimulus. In vision research, intracellular recording has historically been a common technique used to study sensitivities of individual photoreceptor cells to different light stimuli that is still being used today. However, there remains a dearth of detailed methodology in the literature for researchers wishing to replicate intracellular recording experiments in the eye. Here we present the insect as a model for examining eye physiology more generally. Insect photoreceptor cells are located near the surface of the eye and are therefore easy to reach, and many of the mechanisms involved in vision are conserved across animal phyla. We describe the basic procedure for in vivo intracellular recording of photoreceptor cells in the eye of a butterfly, with the goal of making this technique more accessible to researchers with little prior experience in electrophysiology. We introduce the basic equipment needed, how to prepare a live butterfly for recording, how to insert a glass microelectrode into a single cell, and finally the recording procedure itself. We also explain the basic analysis of raw response data for determining spectral sensitivity of individual cell types. Although our protocol focuses on determining spectral sensitivity, other stimuli (e.g., polarized light) and variations of the method are applicable to this setup.

Determination of Photoreceptor Cell Spectral Sensitivity in an Insect Model from In Vivo Intracellular Recordings

The electrophysiological technique of intracellular recording is demonstrated and used to determine spectral sensitivities of single photoreceptor cells in the compound eye of a butterfly.

bir Böcek Modeli fotoreseptör hücre spektral Duyarlılık Belirlenmesi<em&gt; İn Vivo</em&gt; Hücre içi Kayıtlar

Intracellular recording is a powerful technique used to determine how a single cell may respond to a given stimulus. In vision research, intracellular ...

Insect-controlled Robot: A Mobile Robot Platform to Evaluate the Odor-tracking Capability of an Insect

Robotic odor source localization has been a challenging area and one to which biological knowledge has been expected to contribute, as finding odor sources is an essential task for organism survival. Insects are well-studied organisms with regard to odor tracking, and their behavioral strategies have been applied to mobile robots for evaluation. This "bottom-up" approach is a fundamental way to develop biomimetic robots; however, the biological analyses and the modeling of behavioral mechanisms are still ongoing. Therefore, it is still unknown how such a biological system actually works as the controller of a robotic platform. To answer this question, we have developed an insect-controlled robot in which a male adult silkmoth (Bombyx mori) drives a robot car in response to odor stimuli; this can be regarded as a prototype of a future insect-mimetic robot. In the cockpit of the robot, a tethered silkmoth walked on an air-supported ball and an optical sensor measured the ball rotations. These rotations were translated into the movement of the two-wheeled robot. The advantage of this "hybrid" approach is that experimenters can manipulate any parameter of the robot, which enables the evaluation of the odor-tracking capability of insects and provides useful suggestions for robotic odor-tracking. Furthermore, these manipulations are non-invasive ways to alter the sensory-motor relationship of a pilot insect and will be a useful technique for understanding adaptive behaviors.

The capability to localize an odor source is necessary for insect survival and is expected to be applicable to artificial odor-tracking. The insect-controlled robot is driven by an actual silkmoth and enables us to evaluate the odor-tracking capability of insects through a robotic platform.

Böcek kontrollü Robot: Bir Mobil Robot Platformu bir Böcek Koku izleme Yeteneği değerlendirin

Robotic odor source localization has been a challenging area and one to which biological knowledge has been expected to contribute, as finding odor ...

Quadruple Immunostaining of the Olfactory Bulb for Visualization of Olfactory Sensory Axon Molecular Identity Codes

The mouse olfactory system is often used to study mechanisms of neural circuit formation&#12288;because of its simple anatomical structure. An Olfactory Sensory Neuron (OSN) is a bipolar cell with a single dendrite and a single unbranched axon. An OSN expresses only one Olfactory Receptor (OR) gene, OSNs expressing a given type of OR converge their axons to a few sets of invariant glomeruli in the Olfactory Bulb (OB). A remarkable feature of OSN projection is that the expressed ORs play instructive roles in axonal projection. ORs regulate the expression of multiple axon-sorting molecules and generate the combinatorial molecular code of axon-sorting molecules at the OSN axon termini. Thus, to understand the molecular mechanisms of OR-specific axon guidance mechanisms, it is vital to characterize their expression profiles at the OSN axon termini within the same glomerulus. The aim of this article was to introduce methods for collecting as many glomeruli as possible on a single OB section and for performing immunostaining using multiple antibodies. This would allow the comparison and analysis of the expression patterns of axon-sorting molecules without staining variation between OB sections.

Olfactory sensory neurons express a wide variety of axon-sorting molecules to establish proper neural circuitry. This protocol describes an immunohistochemical staining method to visualize combinatorial expressions of axon-sorting molecules at the axon termini of olfactory sensory neurons.

Koku Meşfatının Olfaktör Duyusal Akson Moleküler Kimlik Kodlarının Görselleştirilmesi İçin Dörtlü İmmün Sulanması

The mouse olfactory system is often used to study mechanisms of neural circuit formation&#12288;because of its simple anatomical structure. An Olfactory ...

Investigating Object Representations in the Macaque Dorsal Visual Stream Using Single-unit Recordings

Previous studies have shown that neurons in parieto-frontal areas of the macaque brain can be highly selective for real-world objects, disparity-defined curved surfaces, and images of real-world objects (with and without disparity) in a similar manner as described in the ventral visual stream. In addition, parieto-frontal areas are believed to convert visual object information into appropriate motor outputs, such as the pre-shaping of the hand during grasping. To better characterize object selectivity in the cortical network involved in visuomotor transformations, we provide a battery of tests intended to analyze the visual object selectivity of neurons in parieto-frontal regions.

A detailed protocol to analyze object selectivity of parieto-frontal neurons involved in visuomotor transformations is presented.

Tek-unit kayıtları kullanarak nesne temsilcilikleri makak Dorsal Visual akışı soruşturma

Previous studies have shown that neurons in parieto-frontal areas of the macaque brain can be highly selective for real-world objects, disparity-defined ...