Bu proje için finansman NINDS hibe NS045647 gelen arra fonları tarafından sağlanmıştır.

1. Malzemeler Eğitim ve Test Gerekli <ol><li> Haznesi Test. Bir hayvan ve iki koku bardak sığabilecek büyüklükte herhangi bir konteyner. Laboratuvarımız koku kapları (Şekil 1) yer açmak için kaldırılmıştır zemin barları ile modifiye edimsel odaları (Med Associates Inc) kullanılmıştır. </li><li> Koku bardak ve bardak tutucu. Bardaklar yeterince geniş ve kazma ve onları (Şekil 2) stabilize etmek için bazı mekanizmalar / tutucu sağlamak için derin. </li><li> Kokulu kumları. Bizim test protokolü sıçanlarda yanıtı önyargı (kakao, fesleğen, kimyon, kahve) 4 göstermek değil daha önce kurulmuş kokular kullanılır. Her kokulu kum 110 g kokusuz, temiz oyun &quot;kum kutusu&quot; kum 1 g odorant oranında karıştırılmış ve 6 aya kadar için hava geçirmez kaplarda saklanabilir. </li><li> Güçlendiricidir. Biz bir pekiştireç olarak meyve döngü tahıl parçaları kullanılmıştır. Biz tra öncesinde 3 ila 5 gün (kafeslerine yerleştirilmesi yoluyla) güçlendiricidir hayvanların teşhir tavsiyeneophobic yanıtları üstesinden gelmek için ining. </li><li> Izlemek veya Sayacı durdur. </li></ol> 2. Eğitim öncesinde işleme Hayvan <ol><li> Elleçleme. Hayvanlar yerleştirilir ve sürekli eğitim / test boyunca odaları kaldırıldı edileceği gibi, insan temas ile onları tanımak için önce eğitim hayvanlar üç ila beş gün işleme öneririz. </li><li> Motivasyonu. Bu görevi yerine getirmek için hayvanlar üzerinde teşvik etmek için, besin yoksunluğu bir seviyede gereklidir. Gıda kısıtlama eğitim ve test hem önce en az üç gün başlanmalıdır ve hayvanlar serbest besleme ağırlığının% 90 oranında muhafaza edilebilir. Genellikle günde chow 15-20 g miktarları yeterli, ancak gıda kısıtlayan iken hayvan ağırlıkları her gün kontrol edilmelidir. </li></ol> 3. Eğitim Dig Kum kazmak için bir hayvan eğitim zaman, dört günlük bir süre boyunca sekiz seans bir ortalama olarak gerçekleştirilebilir. Dig tra sırasındaining, odası mekanizması / tutucu içine iki koku bardak yerleştirerek ve odasına kokusunu fincan kurulum yerleştirerek kurulmalıdır. Genel prosedür tamamen almak için kum kazma güçlendiricidir tüketen hayvan şekillendirme amacı ile aşağıda detaylandırılmıştır. <ol><li> Oturum 1 - kamara habitüasyon ve dergi eğitim. Tamamen pekiştireç (hiçbir kum) ile koku kapları doldurun. Hayvan serbestçe güçlendiricidir tüketmek için izin 30 dakika boyunca aparat içine hayvan yerleştirin. </li><li> Oturum 2 - kum habitüasyon. Tamamen güçlendiricidir ile koku bardak doldurma ve artık fincan yarısından doldurma, her bir kap içine kokusuz kum küçük bir miktar dökün. Hayvan serbestçe güçlendiricidir tüketmek için izin 30 dakika boyunca aparat içine hayvan yerleştirin. </li><li> Oturum 3 - yüzey kazma. Maruz kalan birden çok takviye bırakarak, güçlendiricidir ve kokusuz kum daha da karışım ile koku bardak doldurun. Için cihaz içine hayvan yerleştirinHayvan serbestçe güçlendiricidir tüketmek için izin 30 dk. Maruz takviye tüketen işleminde, hayvan kum yüzeyinin altında ilave takviye maddelerini ortaya çıkarmak gerekir. Hayvan kum her güçlendiricidir çıkarmak için elinden forepaws kullanarak ağzını kullanarak kaydırmak gerekir. </li><li> Oturum 4 - kazma. 1-2 takviye malzemelerinin maruz bırakarak, 3 parça kokusuz kum ile 1 kısım güçlendiricidir oluşan bir karışım ile koku bardak doldurun. Hayvan serbestçe güçlendiricidir tüketmek için izin 30 dakika için oda içine hayvan yerleştirin. Hayvan ek takviye ortaya çıkarmak ve kum bunları kaldırmak için onun forepaws ile kazmak başlamalıdır. Zaman 10 dk süre sonra pekiştireç ortaya başlarlar Hayvanlar (hayvan öğrenir kadar araştırmacı bir defada bir güçlendiricidir ortaya çıkarmak gerekir) yardım edilmelidir. </li><li> Oturum 5 - tam kazma. Maruz bırakarak herhangi bir takviye maddelerini, 3 parça kokusuz kum ile 1 kısım güçlendiricidir oluşan bir karışım ile koku bardak doldurun. Plahayvan serbestçe güçlendiricidir tüketmek için izin 30 dakika boyunca aparat içine ce hayvan. Gerektiğinde Hayvanlar yardımcı olabiliriz. Bazı hayvanların davranışları kazma göstermek için bu oturumda birden çok örneğini gerekebilir. </li><li> Oturum 6 - deneme yapısı habitüasyon. Her koku fincan kum derin, orta ve sığ pozisyonlarda Sıra üç reinforcers. Her üç gerektiğinde yardımcı, her fincan alınana kadar odasına hayvan yerleştirin. Bir kez her alındıktan sonra, 15-30 saniye için bir tutma cihazına dahil hayvan yerleştirin ve bu aşamada tarif edildiği gibi koku bardak sıfırlayın. Sonra odasına geri hayvan koyun ve hayvan toplam dört çalışma tamamlanana kadar işlemi tekrarlayın. Hayvan tutma aparatı konuyor HABITUATED olmak ve odasına konulduğunda hemen kazma başlamalıdır. Hayvan da tam kazma davranışı göstermek ve koku fincan altındaki güçlendiricidir çağırmalıdır. </li><li>Oturum 7 - Tek reinforcers. Her fincan kum derinliği yarım tek bir güçlendiricidir yerleştirin. Odasına hayvan yerleştirin ve her iki takviye almak ve sonra da 30 saniye tutarak cihazın içine yerleştirmek için izin verir. Toplam dört denemeleri için bu işlemi tekrarlayın. Hayvan hızlı kazmak ve araştırmacıdan minimal yardım gerekebilir başlamalıdır. </li><li> Oturum 8 - mock ayrımcılık testi. Oturum 7&#39;de tarif edildiği gibi kap doldurun. Iki takviye almak için hayvan 30 saniye ver. Hem alındıktan veya 30 sn geçtikten tutan aparat içine hayvan yerleştirin. Test aşamasında kullanılacak deneme sayısı için tekrarlayın. Hayvanlar odasına geri yerleştirildiğinde hızlı kazmak için öğrenmek gerekir. </li><li> Ek oturumları. İlk ayrım testi bağlı, deneyci verilen kokuları ile hayvan tanımak için ek oturumlar yapmak isteyebilirsiniz. Sıçanlar başlangıçta neophobia sergilemek ve tercih eğiliminde olacaktırtanıdık kokular önceden takviye 10 ile ilişkilidir. </li></ol> 4. Ayrımcılık Test <ol><li> Araştırmacı hangi kokusu güçlendiricidir ile baited (doğru ayrımcılık) ve hangi olmaz olacak gibi, bir koku eşleştirme seçmelisiniz. Böyle öncesinde sakatlığı öntest edip ayrımcılık ve iptalleri, gün ve çalışmaların sayısını ve sayısı gibi ek kararlar, büyük ölçüde deneysel soru (Aşağıda ek notlara bakınız) esas alınacaktır. </li><li> Sıçanlar test edilmiş ve veriler araştırmacı tarafından elle kaydedilebilir. Araştırmacı her deneme için kayıt olmalıdır: Doğru veya yanlış bir seçim, kazma başlatmak için gecikme ve hangi bir sıçan kez dışarı üzerine denemeler. <ol class="lalpha"><li> Uygulanan çalışmaların sayısı (Aşağıda ek notlara bakınız) araştırmacı takdirine olmalıdır. </li><li> Davanın uzunluğu (Aşağıda ek notlara bakınız) araştırmacı takdirine olmalıdır. </li><li> Researcher arka arkaya üçten fazla denemeler belirli bir tarafında olduğunu ihtar ile, deneme yapısı (koku bardak sol-sağ konum) rastgele olmalıdır. Bu yan önyargı azaltmaya yardımcı olacaktır. </li></ol></li><li> Her bir deneme başlatmak için, her bir kap, arka, eşit uzaklıkta bakan odasına hayvan yerleştirin. Yakın bir fincan için bir hayvan Yerleştirme bir önyargı geliştirme şansını artırabilir. </li><li> Hayvan doğru ayrımcılık varsa, onu almak ve tüketmek güçlendiricidir, ve daha sonra 30 saniye boyunca tutarak aparatı çıkarmak için izin verir. Zaman aşımı ya da yanlış seçerse, &quot;düzeltir&quot; önce, kendisini hemen kaldırın ve 30 saniye boyunca tutarak aparatı içine yerleştirin. </li><li> Çalışmaların seçilen numarası için bu işlemi tekrarlayın. </li><li> Bir hayvan, önceden belirlenmiş bir kritere (üç ardışık gün boyunca günde yani&gt;% 80 doğruluk) sahibi olduktan sonra, hayvan ayrımcılık / ters sonraki geçmek ve yukarıdaki işlemi tekrar edebilirsiniz. </li></ol&gt; 5. Ek Notlar <ol><li> Laboratuvarımızda test eğitim ve test çalışmaları iyi doyma önlemek için bir meyve döngü tahıl parçasının bir buçuk kullanarak bulundu. </li><li> Eğitim süresince, bazı hayvanlar diğerlerinden daha fazla yardıma ihtiyacı olabilir. Biz davranışı kazma ulaşmak için ne gerekiyorsa yapmanızı öneririz. Ancak, bir kez test başlar, biz bir sıçan kazma davranışı müdahale ve iyileştirme girişimi asla. </li><li> Çalışmaların toplam sayısı değişen farklı laboratuvarlar için yeterli olabilir. Laboratuvarımızda Testi 6, 8 kullanmış ve 12 seans, günde 1 seans, başına denemeler ve 8 deneme kurulumu için bir tercih bulduk. </li><li> Davanın uzunluğu değişen (örneğin, bir stres paradigma altında hayvanların artmış deneme kez veya daha az toplam çalışma gerekebilir) bazı deney düzeneğinde gerekli olabilir. </li><li> Önceden ayarlanmış bir kriter, bir hayvan, bir ayrım hakim ne zaman tamamlandığını belirlemek için kullanılır. Laboratuvarımızda test bir accurac gerektirmiştir3 gün üst üste günde daha büyük% 80 y (5/6 denemeleri, 7/8 denemeleri veya 10/12 deneme). Bununla birlikte, daha yüksek bir kriter (% 85) da kullanılabilir. </li><li> Önceden ayarlanmış eşik / maksimumları, belirli bir koku harcanan maksimum gün sayısı için kullanılmalıdır. Bu büyük ölçüde araştırma sorusu tarafından dikte edilecektir. Örneğin, ölçüt vurmak değil TBI, sıçan ilerleyici doğası sonucu olarak, TBH ve laboratuar çalışmaları testi 12 gün sonra yeni bir ayrımcılık / iptali için taşınır. </li><li> Öntest veya sadece sontest büyük ölçüde deneysel yönüne göre belirlenir bir soru olup olmadığını karar vermek. Ön Test biri yaralanma türüne bağlı olarak ilgili olabilecek hayvan sonrası yaralanma bir bellek değerlendirme, gerçekleştirmek için olanak sağlar. Ancak, sonrası test gruplarından biri arasındaki ayrımlar üzerine alma hızı farklılıkları incelemek için olanak sağlar. Bizim laboratuvar vardır ve her ikisi de kullanmaya devam edecektir. </li></ol>

<ol>
	<li>Birrell, J. M., Brown, V. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Medial+frontal+cortex+mediates+perceptual+attentional+set+shifting+in+the+rat.">Medial frontal cortex mediates perceptual attentional set shifting in the rat.</a> J. Neurosci. 20, 4320-4324 (2000).</li><li>Bunsey, M., Eichenbaum, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Conservation+of+hippocampal+memory+function+in+rats+and+humans.">Conservation of hippocampal memory function in rats and humans.</a> Nature. 379, 255-257 (1996).</li><li>Eichenbaum, H., Fagan, A., Cohen, N. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Normal+olfactory+discrimination+learning+set+and+facilitation+of+reversal+learning+after+medial-temporal+damage+in+rats:+Implications+for+an+account+of+preserved+learning+abilities+in+amnesia.">Normal olfactory discrimination learning set and facilitation of reversal learning after medial-temporal damage in rats: Implications for an account of preserved learning abilities in amnesia.</a> J. Neurosci. 6, 1876-1884 (1986).</li><li>Kaiser, D. H., Means, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Value+transfer+across+odor+stimuli+using+probability+of+reinforcement+in+the+rat.">Value transfer across odor stimuli using probability of reinforcement in the rat.</a> Behav. Processes. 73, 164-169 (2006).</li><li>Martens, K. M., Vonder Haar, C., Hutsell, B. A., Hoane, M. R. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Additional+options+for+behavioral+testing+in+rodent+models+of+traumatic+brain+injury:+A+simple+discrimination+task+used+as+a+novel+method+of+testing+decision-making+behavior.">Additional options for behavioral testing in rodent models of traumatic brain injury: A simple discrimination task used as a novel method of testing decision-making behavior.</a> J. Neurotrauma. , (2012).</li><li>Writing Group Members. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Executive+summary:+Heart+disease+and+stroke+statistics+-+2012+update.">Executive summary: Heart disease and stroke statistics - 2012 update.</a> Circulation. 125, 188-197 (2012).</li><li>Narayan, R. K., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Clinical+trials+in+head+injury.">Clinical trials in head injury.</a> J. Neurotrauma. 19, 503-557 (2002).</li><li>Fujimoto, S. T., Longhi, L., Saatman, K. E., McIntosh, T. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Motor+and+cognitive+function+evaluation+following+experimental+traumatic+brain+injury.">Motor and cognitive function evaluation following experimental traumatic brain injury.</a> Neurosci. Biobehav. Rev. 28, 365-378 (2004).</li><li>Mitchell, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Experiments+on+neophobia+in+wild+and+laboratory+rats:+A+reevaluation.">Experiments on neophobia in wild and laboratory rats: A reevaluation.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 90, 190-197 (1976).</li><li>Baum, W. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=On+two+types+of+deviation+from+the+matching+law:+Bias+and+undermatching.">On two types of deviation from the matching law: Bias and undermatching.</a> J. Exp. Anal. Behav. 22, 231-242 (1974).</li><li>Swets, J. A., Dawes, R. M., Monahan, J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Psychological+science+can+improve+diagnostic+decisions.">Psychological science can improve diagnostic decisions.</a> Psychological Science in the Public Interest. 1, 1-26 (2000).</li><li>Stuss, D. T., Murphy, K. J., Binns, M. A., Alexander, M. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Staying+on+the+job:+The+frontal+lobes+control+individual+performance+variability.">Staying on the job: The frontal lobes control individual performance variability.</a> Brain. 126, 2363-2380 (2003).</li><li>Burkett, E. E., Bunnell, B. N. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Septal+lesions+and+the+retention+of+DRL+performance+in+the+rat.">Septal lesions and the retention of DRL performance in the rat.</a> J. Comp. Physiol. Psychol. 62, 468-471 (1966).</li><li>Porter, M. C., Burk, J. A., Mair, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+comparison+of+the+effects+of+hippocampal+or+prefrontal+cortical+lesions+on+three+versions+of+delayed+non-matching-to-sample+based+on+positional+or+spatial+cues.">A comparison of the effects of hippocampal or prefrontal cortical lesions on three versions of delayed non-matching-to-sample based on positional or spatial cues.</a> Behav. Brain Res. 109, 69-81 (2000).</li><li>Walton, M. E., Bannerman, D. M., Alterescu, K., Rushworth, M. F. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Functional+specialization+within+medial+frontal+cortex+of+the+anterior+cingulate+for+evaluating+effort-related+decisions.">Functional specialization within medial frontal cortex of the anterior cingulate for evaluating effort-related decisions.</a> J. Neurosci. 23, 6475-6479 (2003).</li></ol>

Çıkar çatışması ilan etti.

Bu videoda, biz Dig görevi biraz tecrübe ile nispeten düşük maliyetli malzeme ve kullanılarak yapılabilir nasıl göstermiştir, test oldukça hızlı yapılmaktadır (~ 10 dk / hayvan). Edilebilir Görev kolayca TBI, inme ve diğer beyin yaralanmaları için mevcut test bataryaları dahil edilmesi için bu sağlar. Dig görevi önceki öğrenme, iptal, ve yeni satın almalar değerlendirmeler (örneğin, set vites) dahil biliş birkaç farklı yönlerini değerlendirmek olduğunu da sağlamdır. En önemlisi, Dig görev beyin hasarını takiben ön fonksiyon bozukluğunu etkili olduğu gösterilmiştir. Buna ek olarak, benzer bir kazı paradigma hipokampal hasar 4 takiben ölçüldü değer transferi incelemek için kullanılmıştır, ve böylece kolayca TBI izlenerek olabilir. Bu gibi görevleri birincil faydaları genellikle çoğu beyin hasarı damızlık test olandan biliş diğer formları değerlendirmek için yeteneği vardırler. Şu anda beyin hasarı sonrası frontal-aracılı biliş değerlendirmek için basit, hızla elde edilen görevleri eksikliği mevcuttur. Deneysel TBI alanında, biliş 9 tek değerlendirme olarak labirent üzerinde güçlü bir güven mevcuttur. Ayrımcılık ve seçim davranışının aşağıdaki beyin hasarı değerlendirilmesi gerekir cepheden aracılı bilişin önemli yönleri vardır. Bu davranışın deneysel analiz alanında birçok farklı paradigmalar (yanıt, çaba dayalı karar verme, vb oranı düşük gecikmeli eşleme-örnek, diferansiyel takviye) altında ele alınmıştır, ancak beyin hasarı çalışmalarında eksik 14-16. Beyin hasarının tedavisi için yeni terapötik geliştirilmesi duyusal, motor ve kognitif fonksiyonun çoklu modalitelerde doğrulama gerektirir. Bu gibi görevler tam terapötik tedavi altında bilişsel fonksiyon değerlendirmek için hayati hale gelebilir. Iken Dig görevi yenidenyaralanma sonrası beyin fonksiyonu değerlendirmek için doğru yönde atılmış bir adım sunar, sınırlamalar hala vardır. Bu, inşa yönetmek ve analiz etmek için basit olması amaçlanmıştır, ancak bu ölçebilirsiniz ne üst sınırı vardır anlamına gelmektedir. Şu anda, iki seçenek verilmiştir paradigma altında değerlendirilebilir hepsi vardır. Ayrıca, Dig görevin bir hayvanın karar verme yeteneğinizi etkileyebilir örneğin dürtüsellik gibi frontal disfonksiyon diğer yönleri, işlemek için yeterince duyarlı değildir. Dig görevi genç hayvanlarda beyin hasarı değerlendirmek bizim için başarılı olmak için gösterilmiş olsa da, hala daha da hassaslaştırmak ve onu geliştirmek için bir görev ile yapılabilecek pek çok şey vardır. Bunlar, bu uyarlanmıştır edimsel paradigmalar doğrudan karşılaştırarak yaralanma sonrası frontal disfonksiyon değerlendirmek diğer görevler ile bu görevi doğrudan bir karşılaştırma yapmadan ve additi keşfetmek, değerlendirmek özel popülasyonlar (yaş, cinsiyet, gerginlik) içerirGörev üretilen verileri analiz etmek ve karşılaştırmak Önal yollar. Bu görev, beyin hasarı sonrasında çeşitli şekillerde frontal işlev test ederek alanımızda bazı sorunları çözmek için tasarlanmıştır. Ancak, bir görev, bir beyin hasarı etkilenen tüm bilişsel süreçler ölçemezsiniz. Böylece, insanlar bu tür daha tam beyin yaralanmaları sonrası fonksiyonel bozukluklar değerlendirmek için bu protokolü açıklanan biri olarak görevleri üzerine geliştirmek ve geliştirmeye devam savunuyoruz. Bunu yaparken, biz birden fazla önlemler genelinde değerlendirilerek beyin hasarı için ilaç ve tedavi geliştirme etkinliğini artırabilir.

Travmatik beyin hasarı (TBI) ve inme sonucu beyin hasarı ve ölüm ABD&#39;de sakatlık önde gelen nedenlerinden biridir. Birlikte, ölüm veya sakatlığa 6-7 sonuçlanan yaklaşık 500.000 ile yaklaşık 2,5 milyon insidansı toplamda, bu bozuklukları sonucu. Toplum üzerindeki bu ağır bir otoyol rağmen, çok az sayıda tedaviler TBI veya inme ya tedavi etmek için geliştirilmiştir. Bir dereceye kadar, mevcut tedavi seçeneklerinin yetersizliği yeni ilaçlar ve tedaviler 8 yetersiz davranışsal değerlendirmeler isnat edilebilir. Özellikle, doğru ve hassas preklinik literatüründe beyin hasarı sonrasında çeşitli bilişsel bozukluklar üzerine tedavilerinin etkisini değerlendirmek için bir görev eksikliği var. Şu anda gerçekleştirilir bilişsel değerlendirmelerin çoğunluğu böyle Morris su labirenti 9 gibi bir labirent görev kullanarak uzaysal bellek değerlendirilmesi. Bunun için gereken süreyi de dahil olmak üzere test bu eksikliği için birden çok nedeni vardırtamamen bilişsel, edimsel görevleri kullanmak için pahalı ekipman ve uzmanlığı üzerine ağır güven ve bu değerlendirmeler yapılabilir hızını karakterize ve değerlendirmek. Bu amaçla, biliş aşağıdaki beyin hasarı değerlendirmek için, temel bir koku ayrımcılık görevi, Dig görev adapte var. Dig görevi TBI inme veya bilişsel işlev bozukluğu aşağıdaki beyin hasarı değerlendirmek için ucuz, hızlı ve etkili bir araç olarak tasarlanmıştır. Dig görevi öğrenme ve karar verme temel edimsel ilkelere dayanır. Sadece iki seçenek karar paradigma olduğu gibi, bu görev yapılabilir basit ayırımların birini temsil eder. Görevi ayarlarken yanı sıra için detayları aşağıda protokolde eğitim metodolojisi tarif edilecektir. Biz tek taraflı paryetal açıkları göre frontal-aracılı bilişsel değerlendirirken bu görevi güçlü olduğunu buldular, fakat bir modeli altında test edilmesi henüzhipokampal hasar 5. İdeal olarak, bu görevi bir yaralanma sonrası frontal açıklarının kurtarma bir tedavi veya tedavinin etkinliğini değerlendirmek için uygun olacaktır. Ancak, değişiklik ile bu görevi aynı zamanda dürtüsellik ve genelleştirilmiş eşleştirme gibi daha karmaşık karar verme davranışı keşfetmek için kullanılan olabileceğini mümkündür.

<table border="1"><tr><td> Malzeme Adı </td><td> Şirket </td><td> Katalog Numarası </td><td> Yorumlar </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> EKİPMAN </td></tr><tr><td> Edimsel Odası </td><td> Med Associates </td><td> ENV-008CT </td><td> Miktar: 1 Standart edimsel odası, harici aygıtları. </td></tr><tr><td> Pleksiglas </td><td> Yerel Hardware Store </td><td> N / A </td><td> Miktar: 1 yaprak odasına uyacak şekilde uygun büyüklük halinde kesin. </td></tr><tr><td> PVC Boru End Caps </td><td> Yerel Hardware Store </td><td> N / A </td><td> Tutar: 2 / koku fincan kurulum. </td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> REAKTİFLER</td></tr><tr><td> Kum </td><td> Yerel Hardware Store </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Çeşitli Baharatlar </td><td> Yerel Bakkal </td><td></td><td></td></tr><tr><td> Güçlendiricidir </td><td> Yerel Bakkal </td><td></td><td></td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td> * Ekipman kamara başına inşaat için listelenir. </td></tr></table>

the dig task: a simple scent discrimination reveals deficits following frontal brain damage

Kognitif bozukluk beyin hasarı sonrasında insanlarda özürlülüğün en sık nedeni olup, henüz beyin hasarının kemirgen modellerinde biliş değerlendirmek için kullanılan davranışsal görevleri eksiktir. Edimsel literatürden Borçlanma Laboratuvarımızda temel bir koku ayrımcılık paradigma 1-4 yararlanmanın frontal-yaralı sıçanlarda açıkları değerlendirmek amacıyla. Daha önce kısaca Dig görevi açıklanan ve frontal beyin hasarı ile sıçan görevi 5 içinde birden çok testler arasında ciddi eksiklikler olduğu gösterilmiştir. İşte biz bu görev için daha ayrıntılı bir protokol mevcut. Sıçanlar bir odasına yerleştirilir ve bir güçlendiricidir içerir biri iki kokulu kumlar arasında ayırımcılık yapmasına izin verilir. Sıçan ya doğru bir şekilde ayrımcılık sonra deneme yanlış ayrımcılık veya 30 saniye geçtiğinde, (doğru kokulu kum kazma olarak tanımlanır) biter. Doğru ayrımcılık Sıçanlar güçlendiricidir kurtarmak ve tüketmek için izin verilir. Sıçanlar bu diyanlış scriminate hemen odasından çıkarılır. Bu ters ve roman kokular çeşitli yoluyla devam edebilirsiniz. Birincil analiz, her koku eşleştirme (her koku için doğru kümülatif oran) için doğruluğu. Dig görevden genel bulgular tek taraflı paryetal hasar sıçanlara kıyasla bilateral frontal kortikal hasarı olan sıçanlarda açıkları değerlendirmek basit bir deneysel hazırlık olduğunu düşündürmektedir. Dig görev de kolayca varolan bilişsel test bataryası dahil edilebilir. Bu gibi daha fazla görevler kullanımı tedavisi için terapötik bir seçenek yol açabilir ön fonksiyonu şu zedelenmesi, daha kesin test yol açabilir. Tüm hayvan kullanımını Kurumsal Hayvan Bakım ve Kullanım Kurulu tarafından onaylanan protokoller çerçevesinde gerçekleştirilmiştir.

Doğru / Yanlış ve Gecikme: Kazı görev kaydedilebilir iki ana değişken vardır. Ancak, sigara tepkiler de kaydedildi ve motivasyon dikkate alındığında bunlar önemli olabilir olarak analiz edilebilir. Bunlar doğruluk (# doğru / toplam denemeler), yanıt önyargı 11 ve gecikme gibi analiz için tedbirler oluşturmak için de kullanılabilir. Bu önlemler, deney tasarımı (yukarıdaki ilave notlar bakınız) bağlı öğrenme, birkaç farklı türde, değerlendirmek için de kullanılabilir. Hayvanların ön testin bir araştırmacı öğrendim ayrımcılık için bellek değerlendirmenize olanak sağlar. Öğrenilen ayırımların kalmayan bir araştırmacı bir hayvan değişen kontenjan uyum ne kadar iyi görmek için izin verir. Roman ayırımların Öğrenme araştırmacılar farklı koku eşleşmeleri genelinde yanı sıra roman öğrenme kapasitesini değerlendirmek öğrenme karşılaştırmanızı sağlar. Çalışma dizaynı (yukarıdaki ilave notlar bakınız) bağlı olarak, bu önlemler olabilir,tekrarlayan ölçümler tasarımı analiz veya tek bir değişken içine çökmüş olabilir. Daha önce, ayrı ayrı 5 adet koku ayrımcılık analiz etmek için doğru kümülatif oran bir ölçü içine doğru çöktü. Bu doğru ayırımların sayısını toplayarak ve her ayrımcılık çalışmalarda toplam sayısına bölerek oluştu. Arası konular varyansları (ANOVA&#39;lar) analizi sonra her post-yaralanma koku ayrımcılık grup farklılıklarını incelemek için kullanılan tek yönlü bir dizi. Bununla birlikte, bu gibi daha fazla güç karışık etkileri gibi ileri modelleme teknikleri kullanılarak istatistiksel analiz için elde edilebilir. Bir diğer alternatif veri analizi için sinyal algılama teorisi kullanmaktır. Bu insan karar verme literatüründe popüler bir yaklaşım olduğunu ve araştırmacı, tek bir grafikte belirli bir konu gelen verilerin çoğu incelemek ve hızlı doğruluk derecesi, önyargı ve açıkları 12 değerlendirmenizi sağlar. Analitik yaklaşım Seçimi la olacakrgely bir öğrenme türleri arasında karşılaştırma isteyip istemediği, deneysel soru tarafından yönlendirilen, öğrenme tek tip değerlendirmek veya verileri bir karar verme yaklaşımı uygulanır. Bilateral frontal beyin hasarı takiben, bizim laboratuvar fareleri bu görevi öğrenme hemen hemen her türlü altında büyük açıkları muzdarip olduğunu bulmuştur. Frontal-yaralı hayvanlar önceden öğrenilen ayrımcılık yanı sıra zorluk bu kokuyu eşleştirme tersine öğrenme (Şekil 3) için bellekte bir açığı gösterdi. Frontal hayvanlar da zorluk (Şekil 3) romanı ayrımlar öğrenme vardı. Önceki araştırmalar 13 ile uyumlu olarak, frontal yaralı hayvanlarla (Şekil 3) içinde değişkenlik büyük bir artış olduğu belirlendi. Buna karşılık, bizim laboratuvar tek taraflı paryetal yaralanmalar, bu görevi tüm ayrımcılıklara boyunca hiçbir açıkları göstermiştir. Tek taraflı sıçanlarda içimde hiç açıkları gösterdiÖnceden öğrenilen ayrımcılık mory ve ayrıca (Şekil 4) çok hızlı ters ayrımcılık satın aldı. Onlar (Şekil 4) yanı sıra çok hızlı roman kokusu eşlendirme öğrendim. Buna ek olarak, tek taraflı yaralandı grup içindeki değişkenliği en sıçanlarda görevi en iyi şekilde performans ile, çok düşük oldu. <img alt="Şekil 1" src="/files/ftp_upload/50033/50033fig1.jpg" /> Şekil 1. Laboratuvarımızda test iki koku bardaklar için yer açmak için üst üste dört kat-barlar kaldırarak bu görev kullanılmak üzere adapte edilmiş standart edimsel odaları (Med Associates Inc) bir banka yapılmıştır. <img alt="Şekil 2," src="/files/ftp_upload/50033/50033fig2.jpg" /> Şekil 2. Kokusu c olarak PVC boru uç kapaklar (6 cm boyunda ve çapı 5.5 cm) kullanılmıştır laboratuvarımızda testinişler ve koku bardaklık olarak iki delinmiş dairesel delik (çapı 5,5 cm) ile Pleksiglas (10 x 22 cm) bir parçası. <img alt="Şekil 3" fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50033/50033fig3highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50033/50033fig3.jpg" /> Şekil 3. Bu grafik sham (mavi) vs iki farklı biçimlerde test çeşitli evreleri boyunca frontal-yaralı (kırmızı) sıçanlarda tipik performans gösterir. Panel A, veriler her bir grup içinde bireysel fareler için veri noktalarını temsil eden noktalar ile birlikte beyaz bir çubuk grafik olarak temsil edilir. Panel B, aynı verilerin bir çizgi grafiği de grafikle. Yaralanma öncesi ayrımcılık edinimi ile ilgili bir fark yoktu. Yaralı sıçan doğru 65% kümülatif yüzde gerçekleştirmek Ancak, yaralanma ve aynı ayrımcılık izleyerek, sham sıçan doğru 93% kümülatif yüzde gerçekleştirin. ayrımcılığın bir ters verildi, injsantimetreden sıçanlarda şansı performansının altına bırakın. Benzer şekilde, bir roman koku ayrımcılık frontal-yaralanan sıçanlara zorluk romanın eşleştirme öğrenme vardı ve şans performansının altında kaldı. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50033/50033fig3large.jpg" target="_blank">büyük bir rakam görmek için buraya tıklayın</a> . <img alt="Şekil 4," fo:content-width="5in" fo:src="/files/ftp_upload/50033/50033fig4highres.jpg" src="/files/ftp_upload/50033/50033fig4.jpg" /> Şekil 4. Bu grafikte iki farklı biçimlerde test çeşitli evreleri boyunca sham (mavi) vs taraflı parietally-yaralı sıçan (yeşil) tipik performans gösterir. Panel A, veriler her bir grup içinde bireysel fareler için veri noktalarını temsil eden noktalar ile birlikte beyaz bir çubuk grafik olarak temsil edilir. Panel B, aynı verilerin bir çizgi grafiği de grafikle. Ayrımcılıkların herhangi gruplar arasında hiçbir fark yoktur. Tek taraflı olarakjured sıçanlar yaralanmayı takiben plasebo seviyeleri biraz daha yüksek, bazı durumlarda, yapılan ya. <a href="https://www.jove.com/files/ftp_upload/50033/50033fig4large.jpg" target="_blank">büyük bir rakam görmek için buraya tıklayın</a> .

Watch this Scientific Journal Video about The Dig Task: A Simple Scent Discrimination Reveals Deficits Following Frontal Brain Damage at JoVE.com

The Dig Task: A Simple Scent Discrimination Reveals Deficits Following Frontal Brain Damage

Bu protokolde, koku ayrımcılık yeni bir uygulaması anlatılmıştır. Dig görev beyin hasarından cepheden-aracılı biliş değerlendirmek için kullanılan bir oldukça ucuz bir iştir.

Dig Görev: A Simple Scent Ayrımcılık Kesit Beyin Hasarı takiben Açıkları ortaya çıkarır

Cognitive impairment is the most frequent cause of disability in humans following brain damage, yet the behavioral tasks used to assess cognition in ...

the-dig-task-simple-scent-discrimination-reveals-deficits-following

Research

JoVE Journal

Neuroscience

13.5K Görüntüleme.  Southern Illinois University at Carbondale. Bu protokolde, koku ayrımcılık yeni bir uygulaması anlatılmıştır. Dig görev beyin hasarından cepheden-aracılı biliş değerlendirmek için kullanılan bir oldukça ucuz bir iştir.

Video: The Dig Task: A Simple Scent Discrimination Reveals Deficits Following Frontal Brain Damage

The Vermicelli and Capellini Handling Tests: Simple quantitative measures of dexterous forepaw function in rats and mice

Previous characterizations of rodent eating behavior have revealed that they use coordinated forepaw movements to manipulate food pieces. We have extended upon this work to develop a simple quantitative measure of forepaw dexterity that is sensitive to lateralized impairments and age-dependent changes. Rodents learn skillful forepaw and digit movements to manage thin pasta pieces, which they eagerly consume. We have previously described methods for quantifying vermicelli handling in rats and showed that the measures are very sensitive to forelimb impairments resulting from unilateral ischemic lesions, middle cerebral artery occlusions and unilateral striatal dopamine depletion [Allred, R.P., Adkins, D.L., Woodlee, M.T., Husbands, L.C., Maldonado M.A., Kane, J.R., Schallert, T. &amp; Jones, T.A. The Vermicelli Handling Test: a simple quantitative measure of dexterous forepaw function in rats. J. Neurosci. Methods 170, 229-244 (2008)]. Here we present a more detailed protocol for this test in rats and compare it with a newly developed version for mice, the Capellini Handling Test. Rats and mice are videotaped while handling short lengths of uncooked vermicelli or capellini pasta, respectively, with a camera positioned to optimize the view of paw movements. Slow motion video playback allows for the identification of forepaw adjustments, defined as any distinct removal and replacement of the paw, or of any number of digits, on the pasta piece after eating commences. Forepaw adjustments per piece are averaged over trials per each testing session. Repeated testing permits sensitive quantitative analysis of changes in forepaw dexterity over time. Protocols for pre-testing habituation and handling practice, as well as procedures for characterizing atypical handling patterns, are described. Because rats and mice perform the pasta handling tests slightly differently, species-specific differences in administration and scoring of these tests are highlighted. All animal use was in accordance with protocols approved by the University of Texas at Austin Animal Care and Use Committee.

The Vermicelli and Capellini Handling Tests of forepaw dexterity take advantage of the natural inclination of rodents to manipulate food items using skillful forepaw and digit movements. Animals are videotaped while handling short strands of uncooked dry pasta. Slow motion video playback allows for the quantification of forepaw adjustments.

Şehriye ve Capellini İşleme Testleri: sıçan ve fareler hünerli forepaw fonksiyonu Basit kantitatif tedbirler

Previous characterizations of rodent eating behavior have revealed that they use coordinated forepaw movements to manipulate food pieces. We have extended ...

Nörobilim

Chromatin Immunoprecipitation from Dorsal Root Ganglia Tissue following Axonal Injury

Axons in the central nervous system (CNS) do not regenerate while those in the peripheral nervous system (PNS) do regenerate 
to a limited extent after injury (Teng et al., 2006). It is recognized that transcriptional programs essential for neurite and axonal outgrowth are 
reactivated upon injury in the PNS (Makwana et al., 2005). However the tools available to analyze neuronal gene regulation in vivo are limited and 
often challenging.
The dorsal root ganglia (DRG) offer an excellent injury model system because both the CNS and PNS are innervated by a 
bifurcated axon originating from the same soma. The ganglia represent a discrete collection of cell bodies where all transcriptional events occur, 
and thus provide a clearly defined region of transcriptional activity that can be easily and reproducibly removed from the animal. Injury of nerve 
fibers in the PNS (e.g. sciatic nerve), where axonal regeneration does occur, should reveal a set of transcriptional programs that are distinct from 
those responding to a similar injury in the CNS, where regeneration does not take place (e.g. spinal cord). Sites for transcription factor binding, 
histone and DNA modification resulting from injury to either PNS or CNS can be characterized using chromatin immunoprecipitation (ChIP). 
Here, we describe a ChIP protocol using fixed mouse DRG tissue following axonal injury. This powerful combination provides a means for characterizing the pro-regeneration chromatin environment necessary for promoting axonal regeneration.

We present a method for chromatin immunoprecipitation from dorsal root ganglia tissue following axonal injury. The approach can be used to identify specific transcription factor binding sites and epigenetic modification of histone and DNA important for the regeneration of injured axons in both the peripheral and central nervous system.

Kromatin Aksonal Yaralanma Dorsal Kök Ganglia Doku Immunoprecipitation

Axons in the central nervous system (CNS) do not regenerate while those in the peripheral nervous system (PNS) do regenerate 
to a limited extent after ...

Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer&#39;s Disease Model Mice

The Morris Water Maze (MWM) was first established by neuroscientist Richard G. Morris in 1981 in order to test hippocampal-dependent learning, including acquisition of spatial memoryand long-term spatial memory 1. The MWM is a relatively simple procedure typically consisting of six day trials, the main advantage being the differentiation between the spatial (hidden-platform) and non-spatial (visible platform) conditions 2-4. In addition, the MWM testing environment reduces odor trail interference 5. This has led the task to be used extensively in the study of the neurobiology and neuropharmacology of spatial learning and memory. The MWM plays an important role in the validation of rodent models for neurocognitive disorders such as Alzheimer&#x2019;s Disease 6, 7. In this protocol we discussed the typical procedure of MWM for testing learning and memory and data analysis commonly used in Alzheimer&#x2019;s disease transgenic model mice.

Morris Water Maze Test for Learning and Memory Deficits in Alzheimer&#039;s Disease Model Mice

The Morris Water Maze is a behavioral task to test hippocampal-dependent learning and memory. It has been widely used in the study of neurobiology, neuropharmacology and neurocognitive disorders in rodent models.

Alzheimer Hastalığı Model Fareler Öğrenme ve Hafıza Açıkları Morris Su Labirent Testi

The Morris Water Maze (MWM) was first established by neuroscientist Richard G. Morris in 1981 in order to test hippocampal-dependent learning, including ...

Investigations on Alterations of Hippocampal Circuit Function Following Mild Traumatic Brain Injury

Traumatic Brain Injury (TBI) afflicts more than 1.7 million people in the United States each year and even mild TBI can lead to persistent neurological impairments 1. Two pervasive and disabling symptoms experienced by TBI survivors, memory deficits and a reduction in seizure threshold, are thought to be mediated by TBI-induced hippocampal dysfunction 2,3. In order to demonstrate how altered hippocampal circuit function adversely affects behavior after TBI in mice, we employ lateral fluid percussion injury, a commonly used animal model of TBI that recreates many features of human TBI including neuronal cell loss, gliosis, and ionic perturbation 4-6.
	Here we demonstrate a combinatorial method for investigating TBI-induced hippocampal dysfunction. Our approach incorporates multiple ex vivo physiological techniques together with animal behavior and biochemical analysis, in order to analyze post-TBI changes in the hippocampus. We begin with the experimental injury paradigm along with behavioral analysis to assess cognitive disability following TBI. Next, we feature three distinct ex vivo recording techniques: extracellular field potential recording, visualized whole-cell patch-clamping, and voltage sensitive dye recording. Finally, we demonstrate a method for regionally dissecting subregions of the hippocampus that can be useful for detailed analysis of neurochemical and metabolic alterations post-TBI.
	These methods have been used to examine the alterations in hippocampal circuitry following TBI and to probe the opposing changes in network circuit function that occur in the dentate gyrus and CA1 subregions of the hippocampus (see Figure 1). The ability to analyze the post-TBI changes in each subregion is essential to understanding the underlying mechanisms contributing to TBI-induced behavioral and cognitive deficits. 
	The multi-faceted system outlined here allows investigators to push past characterization of phenomenology induced by a disease state (in this case TBI) and determine the mechanisms responsible for the observed pathology associated with TBI.

A multi-faceted approach to investigating functional changes to hippocampal circuitry is explained. Electrophysiological techniques are described along with the injury protocol, behavioral testing and regional dissection method. The combination of these techniques can be applied in similar fashion for other brain regions and scientific questions.

Hafif Travmatik Beyin Hasarı takiben Hipokampal Devre İşlev değişimler üzerine araştırmalar

Traumatic Brain Injury (TBI) afflicts more than 1.7 million people in the United States each year and even mild TBI can lead to persistent neurological ...

A Simple Alternative to Stereotactic Injection for Brain Specific Knockdown of miRNA

MicroRNAs (miRNAs) are key regulators of gene expression. In the brain, vital processes like neurodevelopment and neuronal functions depend on the correct expression of microRNAs. Perturbation of microRNAs in the brain can be used to model neurodegenerative diseases by modulating neuronal cell death. Currently, stereotactic injection is used to deliver miRNA knockdown agents to specific location in the brain. Here, we discuss strategies to design antagomirs against miRNA with locked nucleotide modifications (LNA). Subsequently describe a method for brain specific delivery of antagomirs, uniformly across different regions of the brain. This method is simple and widely applicable since it overcomes the surgery, associated injury and limitation of local delivery in stereotactic injections. We prepared a complex of neurotropic, cell-penetrating peptide Rabies Virus Glycoprotein (RVG) with antagomir against miRNA-29 and injected through tail vein, to specifically deliver in the brain. The antagomir design incorporated features that allow specific targeting of the miRNA and formation of non-covalent complexes with the peptide. The knock-down of the miRNA in neuronal cells, resulted in apoptotic cell death and associated behavioural defects. Thus, the method can be used for acute models of neuro-degeneration through the perturbation of miRNAs.

MicroRNAs play crucial roles in the brain and are potential targets for modeling neuro-degeneration. However, perturbing miRNA levels is challenging due to the short length of miRNA and inaccessibility of the brain tissue. This video presents a method for antagomir design and brain specific delivery using a neuropeptide in mice.

MiRNA Beyin Özgül demonte için Stereotaktik Injection Basit Alternatif

MicroRNAs (miRNAs) are key regulators of gene expression.  In the brain, vital processes like neurodevelopment and neuronal functions depend on the ...

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We demonstrate a simple way to tap into the fly reward system, modify experiences related to natural reward, and use voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states. The approach serves as a relevant tool to study the neurons and genes that play a role in experience-mediated changes of internal state. The protocol is composed of two discrete parts: exposing the flies to rewarding and nonrewarding experiences, and assaying voluntary ethanol consumption as a measure of the motivation to obtain a drug reward. The two parts can be used independently to induce the modulation of experience as an initial step for further downstream assays or as an independent two-choice feeding assay, respectively. The protocol does not require a complicated setup and can therefore be applied in any laboratory with basic fly culture tools.

A Simple Way to Measure Alterations in Reward-seeking Behavior Using Drosophila melanogaster

We describe a protocol for inducing rewarding and nonrewarding experiences in fruit flies (Drosophila melanogaster) using voluntary ethanol consumption as a measure for changes in reward states.

Kullanımı Ödül arayan davranış değişiklikleri Tedbir Basit Yolu<em&gt; Drosophila melanogaster</em

We describe a protocol for measuring ethanol self-administration in fruit flies (Drosophila melanogaster) as a proxy for changes in reward states. We ...

High Resolution Quantitative Synaptic Proteome Profiling of Mouse Brain Regions After Auditory Discrimination Learning

The molecular synaptic mechanisms underlying auditory learning and memory remain largely unknown. Here, the workflow of a proteomic study on auditory discrimination learning in mice is described. In this learning paradigm, mice are trained in a shuttle box Go/NoGo-task to discriminate between rising and falling frequency-modulated tones in order to avoid a mild electric foot-shock. The protocol involves the enrichment of synaptosomes from four brain areas, namely the auditory cortex, frontal cortex, hippocampus, and striatum, at different stages of training. Synaptic protein expression patterns obtained from trained mice are compared to na&#239;ve controls using a proteomic approach. To achieve sufficient analytical depth, samples are fractionated in three different ways prior to mass spectrometry, namely 1D SDS-PAGE/in-gel digestion, in-solution digestion and phospho-peptide enrichment. 
High-resolution proteomic analysis on a mass spectrometer and label-free quantification are used to examine synaptic protein profiles in phospho-peptide-depleted and phospho-peptide-enriched fractions of synaptosomal protein samples. A commercial software package is utilized to reveal proteins and phospho-peptides with significantly regulated relative synaptic abundance levels (trained/na&#239;ve controls). Common and differential regulation modes for the synaptic proteome in the investigated brain regions of mice after training were observed. Subsequently, meta-analyses utilizing several databases are employed to identify underlying cellular functions and biological pathways.

The identification of molecules and pathways controlling synaptic plasticity and memory is still a major challenge in neuroscience. Here, a workflow is described addressing the relative quantification of synaptic proteins supposedly involved in the molecular reorganization of synapses during learning and memory consolidation in an auditory learning paradigm.

İşitsel Ayrımcılık Öğrenme sonra Fare Beyin Bölgeler Yüksek Çözünürlüklü Sayısal Synaptic Proteome Profil

The molecular synaptic mechanisms underlying auditory learning and memory remain largely unknown. Here, the workflow of a proteomic study on auditory ...

Recording Synaptic Plasticity in Acute Hippocampal Slices Maintained in a Small-volume Recycling-, Perfusion-, and Submersion-type Chamber System

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful analysis of synaptic transmission modulation when performing field potential or intracellular recordings. This manuscript describes methodological aspects that might be helpful in improving experimental conditions for the maintenance of acute brain slices and for recording field excitatory postsynaptic potentials in a commercially available submersion chamber with an outflow-carbogenation unit. The outflow-carbogenation helps to stabilize the oxygen level in experiments that rely on the recycling of a small buffer reservoir to enhance the cost-efficiency of drug experiments. In addition, the manuscript presents representative experiments that examine the effects of different carbogenation modes and stimulation paradigms on the activity-dependent synaptic plasticity of synaptic transmission.

This protocol describes the stabilization of the oxygen level in a small volume of recycled buffer and methodological aspects of recording activity-dependent synaptic plasticity in submerged acute hippocampal slices.

Sinaptik plastisite akut Hipokampal dilimleri bir küçük hacimli geri dönüşüm-, perfüzyon- ve batma-tipi oda sistemi içinde tutulan kayıt

Even though experiments on brain slices have been in use since 1951, problems remain that reduce the probability of achieving a stable and successful ...

Measurement &amp; Analysis of the Temporal Discrimination Threshold Applied to Cervical Dystonia

The temporal discrimination threshold (TDT) is the shortest time interval at which an observer can discriminate two sequential stimuli as being asynchronous (typically 30-50 ms). It has been shown to be abnormal (prolonged) in neurological disorders, including cervical dystonia, a phenotype of adult onset idiopathic isolated focal dystonia. The TDT is a quantitative measure of the ability to perceive rapid changes in the environment and is considered indicative of the behavior of the visual neurons in the superior colliculus, a key node in covert attentional orienting. This article sets out methods for measuring the TDT (including two hardware options and two modes of stimuli presentation). We also explore two approaches of data analysis and TDT calculation. The application of the assessment of temporal discrimination to the understanding of the pathogenesis of cervical dystonia and adult onset idiopathic isolated focal dystonia is also discussed.

Methods for the measurement and analysis of the temporal discrimination threshold are presented, and its application to the study of the pathogenesis of cervical dystonia are discussed.

Ölçme ve analiz için servikal distoni uygulanan zamansal ayrımcılık eşiği

The temporal discrimination threshold (TDT) is the shortest time interval at which an observer can discriminate two sequential stimuli as being ...

A Simple and Reproducible Method to Prepare Membrane Samples from Freshly Isolated Rat Brain Microvessels

The blood-brain barrier (BBB) is a dynamic barrier tissue that responds to various pathophysiological and pharmacological stimuli. Such changes resulting from these stimuli can greatly modulate drug delivery to the brain and, by extension, cause considerable challenges in the treatment of central nervous system (CNS) diseases. Many BBB changes that affect pharmacotherapy, involve proteins that are localized and expressed at the level of endothelial cells. Indeed, such knowledge on BBB physiology in health and disease has sparked considerable interest in the study of these membrane proteins. From a basic science research standpoint, this implies a requirement for a simple but robust and reproducible method for isolation of microvessels from brain tissue harvested from experimental animals. In order to prepare membrane samples from freshly isolated microvessels, it is essential that sample preparations be enriched in endothelial cells but limited in the presence of other cell types of the neurovascular unit (i.e., astrocytes, microglia, neurons, pericytes). An added benefit is the ability to prepare samples from individual animals in order to capture the true variability of protein expression in an experimental population. In this manuscript, details regarding a method that is utilized for isolation of rat brain microvessels and preparation of membrane samples are provided. Microvessel enrichment, from samples derived, is achieved by using four centrifugation steps where dextran is included in the sample buffer. This protocol can easily be adapted by other laboratories for their own specific applications. Samples generated from this protocol have been shown to yield robust experimental data from protein analysis experiments that can greatly aid the understanding of BBB responses to physiological, pathophysiological, and pharmacological stimuli.

Here, a method for isolation of rat brain microvessels and for the preparation of membrane samples is described. This protocol has the clear advantage of producing enriched microvessel samples with acceptable protein yield from individual animals. Samples can then be used for robust protein analyses at the brain microvascular endothelium.

Membran örnekleri taze izole sıçan beyin yüzdeki hazırlamak için basit ve tekrarlanabilir bir yöntem

The blood-brain barrier (BBB) is a dynamic barrier tissue that responds to various pathophysiological and pharmacological stimuli. Such changes resulting ...