This work is supported in part by American Heart Association Scientist Development Grant and NARSAD Young Investigator Award to Yingwei Mao.

NOT: hayvanlarla ilgili tüm protokoller Pennsylvania State Üniversitesi&#39;nden hayvan bakım yönergelerine uygun olarak takip edildi, IACUC # 44057 1. lentivirüs Üretimi Not: Transfeksiyondan bir önceki gün, LentiX-293 hücreleri,% 80 birleşme olmalıdır. <ol><li> Sadece transfeksiyondan önce DMEM ile hücrelerin durulayın ve oda sıcaklığında 5 dakika boyunca penisilin (100 lU / ml) ve streptomisin (100 ug / ml) içeren DMEM /% 10 FBS, 10 ml inkübe edilir. </li><li> 1 dakika boyunca 1 DMEM ilave edildi ve girdap: 3 oranında (PEI 3 ul DNA 1 ug:) DNA ve polietilenimin (PEI), 1 (1 mg / ml) ile seyreltilir. DNA hacmi DNA konsantrasyonuna bağlıdır ilave edildi. 10 dakika boyunca oda sıcaklığında inkübe edin. <ol><li> Örneğin, çanak başına PEI 60 ul vektör plasmidinin 10 ug, psPax2 14 plazmidinin 5 ug, veziküler stomatit virüsü (VSV), 5 ug oluşan bir DNA plazmidi 20 ug kullanın. </li></ol></li><li&gt; 1 dakika boyunca karıştırın tekrar DNA ve PEI çözüm karıştırın. 10 dakika boyunca oda sıcaklığında inkübe edin. </li><li> DMEM (100 mm tabak içinde 10 ml kültür ortamı için, yani, 1 ml) &#39;nin toplam kültür ortamının 1/10 hacim. Çanak içine damla DNA PEI karışımı damla 1 ml ekleyin ve kültür ortamı DNA ile iyi karıştırılmış olduğu için kadar etrafında çanak girdap. </li><li> Oda sıcaklığında 6 saat süreyle inkübe ve süpernatant kaldırmak. Kültür ortamının 5 ml. </li><li> Transfeksiyondan 48 saat sonra, 50 ml bir tüp içinde, 4 ° C&#39;de 5 dakika boyunca 627 x g&#39;de viral süpernatan ve spin toplar. Ultrasantrifüj işlemi tüp içine 0.45 um&#39;lik bir şırınga filtreden geçirilerek viral süpernatanın 30 ml filtre. </li><li> Tüpler dengelemek ve parafilm küçük bir parça ile tüpler kapsayacak şekilde steril su ekleyin. Spin tüpler 4 ° C&#39;de 120 dakika boyunca 11.249 x g&#39;de. Bir vakum ucu kullanarak sıvı çıkarın. </li><li> Soğuk PBS 100 ul tüp ekleyin. Yavaşça 4 ° CO / N tüp sallayın. </li><li> Virüs, pipet t yeniden askıyaO PBS ucu ile pelet dokunmamaya dikkat ederek, pelet 10 defadan fazla adım 1.8 ekledi. Bu tamamlanana kadar pelet yeniden süspansiyon haline edilmeyecektir. </li><li> -80 ° C sıvı nitrojen ve mağaza tüp, flaş-freeze başına 10-20 ul virüs kısım. </li></ol> 2. Stereotaktik Enjeksiyon Araçların 2.1) hazırlanması <ol><li> Ameliyat öncesi makas, künt uç forseps, bir iğne tutucu, neşter, pamuklu bir çift ve bir sterilizasyon göstergeli kapalı bir paket içinde bir bez ve otoklav yerleştirin. Ayrıca,% 10 povidon iyot,% 70 etil alkol, emilebilir sütürler, bir ısıtma yastığı, suni gözyaşı edinin cam boncuk sterilizatör, matkap, bir matkap ucu, 2 atılabilir şırınga, enjeksiyon şırınga, elektrikli tıraş makinesi, analjezik (ketoprofen), anestetik (avertin), eldiven ve enjeksiyon pompası ile stereotaktik aparatı. </li><li> 0.2-kullanılarak steril kaputu% 1.25 avertin taze çözüm o gün, filtre Yap# 181; steril şırınga filtresi m ve steril serum şişenin içine yerleştirin. Tert-amil alkol 5 ml 2,2,2-tribromoetil alkol 2.5 g karıştırın, daha sonra, 200 ml su içinde çözülür. 5. 15 altında pH&#39;ı tutun </li></ol> Fare 2.2) Hazırlanması <ol><li> Fare (375 mg / kg) &#39;nin ağırlığına göre avertin uygulayın. 15, bir karın içinden (İP) enjeksiyon yoluyla Avertin fare ile enjekte edilir, ve daha sonra tamamen anestezi kadar geri kafes içine yerleştirin. </li><li> IP enjeksiyonu (ketaprofen, 5 mg / kg), yer ve kurumasını önlemek için fare gözleri yapay gözyaşı yoluyla bir analjezik verin. </li><li> Fare onların ayak kısma tamamen uykuda olduğundan emin olun. Fare ayak tutam yanıt verirse, o zaman (50 ul dozlarda) daha anestetik verir. Elektrikli tıraş makinesi kullanarak fare kafasını tıraş. (Burnu üstüne, tipik kulakların hemen arkasından) ameliyat edilecek alanı ve çevredeki tıraş. </li><li> Fare i yerleştirinStereotaktik aparat nto. Anterior kelepçe üzerine ön dişler Mandal ve kelepçe düşürmek ve çene tamamen güvenli olduğunu böylece sıkın. </li><li> Tam kafa stabilize etmek kulak kanalına kulak çubukları yerleştirin. Iç kulak zarar verebilecek olan, çok kulak çubukları eklemek için dikkatli olun. Bitmiş kez fare vücut başının pozisyonunu bozmadan hafifçe taşınacak gerekir. </li><li> Prosedür boyunca farenin vücut ısısını düzenlemek için farenin altında bir ısıtma yastığı yerleştirin. </li><li> İyice cerrahi bölgeyi temizleyin. Bir pamuklu çubuk kullanarak, cerrahi sitenin ortasından başlayarak ve dışa doğru hareket, dairesel hareketlerle% 10 povidon iyot ovalayın. Ardından, aynı şekilde cerrahi sitede% 70 etil alkol ovmak bir pamuklu bir bez kullanın. İki kez tekrarlayın. </li></ol> 2.3) İlk Kesi <ol><li> Fare prepped sonra, steril ekipman çantayı açın. Değişim eldiven touchi öncealetleri ng. Steril bir bez çıkarıp bez üzerine aletleri yerleştirin. Herhangi bir enstrüman bir un-steril bir yüzey dokunursa, sterilize 15 saniye için cam boncuk sterilizatör kullanın. </li><li> Baskın olmayan el dominant el ve künt uçlu forseps neşter atın. Künt uç forseps yavaşça kavrama fare cilt kullanmak ve neşter kullanılarak bir kesi yapmak. Yaklaşık 1,5 cm (burun doğru) kulakların üstünde kesi başlayın ve kulakları altında yaklaşık 0.5 cm uzatmak. (Şekil 1) bregma maruz farenin kafasının ortasında aşağı dikey kesi uzatın. </li><li> Bregma görüntülenmiştir sonra, yavaşça kafatasının yüzeyini örten herhangi bir kan çıkarmak için steril pamuk ucu almak. Başın tarafa doğru cilt itmek için iki pamuk ipuçlarını kullanın. </li></ol> 2.4) Ekipman Kurulumu <ol><li> Herhangi bir Kan kafatasının yüzeyine kaldırılır ve açık bir şekilde görünür hale bregma sonra (con şırınga hazırlanması10 8 TU 1 ul / ml hacim) santrasyonu. Davlumbaz, virüs ile şırınga enjekte edilecek doldurun. Hiçbir kabarcıklar içinde olduğundan emin olun. Tam güvenli olduğundan emin olun, stereotaktik aparatı içinde şırınga yerleştirin. </li><li> Steril şırınga iğne ucu bregma kesiştiği ve interaural hattına ayarlanır böylece, doğru kafatasının yüzeyi üzerinde olduğu kadar yavaşça şırınga indirin. Sıfır olarak bu noktayı ayarlayın ve bu noktadan itibaren koordinatları belirler. </li><li> Ilgi beyin alanına bağlı olarak, stereotaktik koordinatlar değişir. Bir beyin atlası 4 kullanılarak bu koordinatları belirler. Koordinatlar belirlendikten sonra, bu koordinatları maç için şırınganın iğne taşımak. Koordinatları kullanarak dentat girus Hedef: = +/- 1 mm, A / P = -1,82 mm M / L. Delik delinmiş gereken yere görselleştirmek için kafatası üzerinde sağa iğne indirin. </li><li> Biraz şırıngayı kaldırın matkap almak ve matkap bi yerkafatasına yaklaşık 45 ° açıyla hedef matkap sitenin üstünde t hakkı. Sondaj başlayın ve kafatası yol verir kadar sondaj tutmak. Kafatası yol verdiğinde, direniş bir düşüş tespit edilebilir. Kortikal hasar görmesini önlemek amacıyla, beyne delmek için dikkatli olun. </li><li> Steril pamuk ucu alın ve delikten herhangi bir kan silin. </li><li> Ucu sağ beyin (değil kafatası) yüzeyinde oturur, böylece şırınga indiriniz. D / V beyin atlas koordinatlara göre, istenilen derinliğe Alt 0&#39;a şırınga (derinlik) koordinat ayarlayın. -1,79 Mm dentat girus, set D / V ulaşmak için. </li><li> 0.2 ul / dk&#39;lık bir hızda enjekte başlatın. Şırınga istenilen derinliğe daha düşük kayma olmadığından emin olmak için izleyin. Bu durum ortaya çıkarsa, yavaşça tekrar istenilen derinliğe şırınga yükseltmek. </li><li> Enjeksiyonu tamamlandıktan sonra, herhangi bir kalıntı virüs absorbe edildiğinden emin olmak için yaklaşık 2 dakika bekleyin. Yavaş yavaş şırınga yükseltmek ve herhangi li kaldırmak için bir pamuk ucu kullanınenjeksiyon yerinde sterlin. </li><li> Diğer yarımkürede için tekrarlayın. </li></ol> 2.5) Sütür <ol><li> Ambalajından ve kavrama iğne tutucular kullanılarak iğne steril dikiş ve iğne çıkarın. Uzak iğne tutucu iğne sivri kenarını Yüz. Baskın olmayan el künt uç forseps tutun ve fare üzerindeki kavrama cilt kullanabilirsiniz. Dominant elin ile başlayın. </li><li> Yavaşça deri yoluyla sütür itmek ve kesi diğer tarafında cilt kapmak için künt uçlu forseps kullanabilir. Yaklaşık 0.75 inç kalana kadar yoluyla sütür materyali çekin. </li><li> Iğne gidelim ve iğne tutucu bir anda etrafında dikiş sarmak için künt uçlu forseps kullanabilir, daha sonra, iğne tutucu ile 0.75 inç kalan dikiş kapmak ve aracılığıyla dikiş çekme iğne ve iğne tutucu, böylece Onlar aslında vardı ki o kafa karşısındaki tarafında sonunda. Bu bir düğüm oluşturmalıdır. </li><li> Bu adımı yineleyinÜç kez daha, başın yan alternatif iğne tutucu, her zaman biter. </li><li> Sütür kesin ve adımları tekrarlayın 2.5.1-2.5.3 kesi kapanana kadar. </li></ol> 2.6) Post-operatif Bakım <ol><li> Yavaşça fare kulak çubukları kaldırmak ve ön kelepçe onun çenesini kaldırın. </li><li> O uyanır ve kendi etrafında hareket edinceye kadar ısıtma yastığı fare tutun. Günlük fare izleyin ve tutmak ve bu, damat yeme ya da içme olarak değil ağrı belirtileri, göz dışarı. Gerekli görüldüğünde ek analjezik verin. </li></ol> 3. Açık Saha Testi 3.1) Kurma <ol><li> 50 cm yüksekliğinde duvarlarla, boyutları 50 cm x 50 cm boş bir kare, plastik arenada edinin (ama biraz daha büyük olabilir). Deney başlamadan önce,% 70 etil alkol ile arena temizleyin. Etil alkol tamamen arenaya fare yerleştirmeden önce kuru olduğundan emin olun. </li><li> Üzerinde arena yerleştirinZemin ve aydınlatma gölgeler ve parlamayı en aza indirmek için ayarlandığından emin olmak için deneyin. </li><li> Izleme yazılımı kullanıyorsanız, (fare net bir görünümü var yeterince uzakta tam kapsayacak şekilde bütün arenada, ama yeterince yakın), açık alan doğrudan havai açık alanda üzerinde yaklaşık 1,5 ft kamerayı yerleştirin. </li><li> Kutu (30 cm x 30 cm yaklaşık bir alan) merkezinde bir bölge oluşturun. 16, bir dilimini ayarlamak yan paneldeki bölge 1 sekmesine tıklayın. <ol><li> Üst panelinde bir şekil anahat seçin ve merkez bölgenin çevresini özetlemektedir. Bölge eklemek seçin ve merkez bölgesi iç tıklayınız. Program istemleri kullanarak (bu prosedür için &#39;merkezi&#39; olarak anılacaktır) bölge adlandırın. Davranışsal deney elle atılır ise, alanın alt bandı kullanılarak işaretlenmiş, 10 cm x 10 cm kareler ayrılmıştır emin olun. </li></ol></li><li> Yazılımı kurmak, böylece ayarlarının doğru ve fare kolayca visi olduğunuEkranda ble. Test arena (aydınlatma) ve fare rengi ile uyumlu olacak şekilde makine üzerinde algılama ayarları yaparak bu başarmak. NOT: ayarları doğru olduğunda, sistem herhangi bir gölge veya idrar / dışkı sadece fare izlemek ve olmamalıdır. Belirli yazılım ayarları arena aydınlatma ve fare rengine bağlıdır. </li></ol> 3.2) Acclimation ve Test <ol><li> Çevrelerine onları gelmesini amacıyla test öncesi davranışsal oda 1 saat içine deneysel fareler taşıyın. Iklimlendirme için kendi kafesine fareler bırakın. </li><li> Teybe kameraya davranışsal görev açın ve fare duvara bakacak şekilde arena orta önüne doğru fareyi yerleştirin. </li><li> 5 dakika boyunca zamanlayıcıyı ayarlayın ve uzak arenada adım. Mümkünse yanlışlıkla fare etkilemediği şekilde, odadan. </li><li> 5 dk kadar olduğunda, fare kaldırmak ve onların kafese koyun. </li><li> İyice bir sonraki fare geçmeden önce alanı temizlemek için% 70 etil alkol kullanın. Etil alkol tamamen kuruduktan emin olun. </li></ol> 3.3) Puanlama <ol><li> Dört pençeleri orta 30 cm x 30 cm içeride olduğunda alanın ortasında varlık olarak fareyi düşünün. </li><li> Fare merkezinde geçirdiği süreyi ölçmek. Alternatif olarak, bu kez (örneğin Noldus ethovison gibi) izleme yazılımı kullanarak belirler. <ol><li> Bunu yapmak için, analiz sekmesine gidin ve analiz profilleri altındaki &quot;hareketi&quot; üzerine tıklayın. Şu anda belirlenen kategoriler silin ve sonra konum sekmesi altında &quot;bölgesinde&quot; seçeneğini seçin. Merkez dilimini seçin. Sonra, sonuçlarını görüntülemek için (sonuç sekmesi altında) &quot;analiz çıkışını&quot; seçeneğini seçin. Her deneme görünmelidir zaman listeleyen bir tablo hareketsiz geçirdi. </li></ol></li><li> Aksi takdirde, elle OFT puan. açık alan ope altındaki ana hatları 25, 10 cm x 10 cm&#39;lik kareler olmalıdırn alan (as adım 3.1.3 belirtilen). Fare arena merkezi haline girişlerin sayısına ek olarak, merkezde geçirdiği süreyi ölçmek. 16 NOT: Merkez 30 cm x 30 cm alan açık alanda merkezi olarak kabul edilir. Bir fare dört pençeleri 30 x 30 cm alanı içinde ise merkez bölgesini yaşayan olarak kabul edilir. </li></ol> 4. Zorla Swim Testi NOT: davranışsal görevleri arasında beş gün en az bekleyin. 4.1) Kurma <ol><li> 2 L açık kova edinin ve 22 ° C su ile doldurun. Bir masanın üzerine kova yerleştirin ve aydınlatma gölgeler ve parlamayı en aza indirmek için ayarlandığından emin olmak için deneyin. </li><li> Izleme yazılımı kullanıyorsanız, doğrudan havai kepçenin kamerayı yerleştirin. </li><li> Yazılımı kurmak fare ekranda kolayca görülebilir şekilde. </li></ol> 4.2) Acclimation ve Test <ol><li> Davranışsal ro içine deneysel fareler TaşıTestten önce om 1 saat çevresi ile uyum sağlamaya. Iklimlendirme için kendi kafesine fareler bırakın. </li><li> Teybe kamera davranışsal görev açın. Yavaşça su kepçenin ortasında fare. Fareyi düşürmemeye dikkat edin. Yavaş yavaş fare düşürmek, ön ayakları ilk suya değecek şekilde. Daldırarak kendi kafasını önlemek için özen gösterin. </li><li> 6 dakika zamanlayıcı ayarlayın ve davranışsal alandan uzaklaşın. </li><li> 6 dakika kadar olduğunda, kova fareyi kaldırmak ve onların kafesine geri fare yerleştirmeden önce aşırı su silin. </li></ol> 4.3) Puanlama <ol><li> Yüzme vs yüzen zaman ölçmek için, (bu varsayılan ayar olmalı) Noldus tarafından önerilen izleme yazılımı kullanıyorsanız,% 11 oranında hareketsizliği ayarlayın. </li><li> Izleme sistemi kullanarak ölçmek için, analiz sekmesine gidin ve analiz profilleri altında hareket tıklayınız. Üzerine, şu anda ayarlanmış kategoriler silin ve sonra hareketlilik durumunu seçin(bireysel davranış altında) sol yan panel. % 11 hareketsizlik ayarlayın. </li><li> Sonuçlar sekmesinin altında, parça görselleştirme seçin. Sonuçları görmek için (sonuç sekmesi altında) analiz çıkışını seçin. Her deneme görünmelidir zaman listeleyen bir tablo hareketsiz geçirdi. </li><li> El puanlama, fare, fare hareketsiz geçirdiği zamanın yüzme veya tırmanma ve miktarı harcıyor zamanı ölçmek. Buna ek olarak, ilk kez hareketsiz ila gecikme ölçmek. Sonuçlar Bölüm Şekil 2&#39;ye bakınız. </li></ol>

<ol>
	<li>Schwenk, F., Baron, U., Rajewsky, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Cre-transgenic+mouse+strain+for+ubiquitous+deletion+of+loxP-flanked+gene+segments+including+deletion+in+germ+cells.">A Cre-transgenic mouse strain for ubiquitous deletion of loxP-flanked gene segments including deletion in germ cells.</a> Nucleic Acids Research. 23 (24), 5080-5081 (1995).</li><li>Hirrlinger, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Split-cre+complementation+indicates+coincident+activity+of+different+genes+in+vivo.">Split-cre complementation indicates coincident activity of different genes in vivo.</a> PLoS One. 4 (1), 1-10 (2009).</li><li>Fenno, L. E., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Targeting+cells+with+single+vectors+using+multiple-feature+Boolean+logic.">Targeting cells with single vectors using multiple-feature Boolean logic.</a> Nature Protocols. 11 (7), 763-772 (2014).</li><li>Paxinos, G., Franklin, K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> The mouse brain in sterotaxic coordinates. , (2001).</li><li>Gould, T. D., Dao, D. T., Kovacsics, C. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mood+and+anxiety+related+phenotypes+in+mice:+the+open+field+test.">Mood and anxiety related phenotypes in mice: the open field test.</a> Humana Press. 42, 1-20 (2009).</li><li>Denenberg, V. H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Open-field+behavior+in+the+rat:+W.0hat+does+it+mean.">Open-field behavior in the rat: W.0hat does it mean.</a> Annals of the New York Academy of Sciences. 159, 852-859 (1969).</li><li>Bogdanova, O. V., Kanekar, S., D&#8217;Anci, K. E., Renshaw, P. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Factors+influencing+behavior+in+the+forced+swim+test.">Factors influencing behavior in the forced swim test.</a> Physiology &amp; Behavior. 118, 227-239 (2013).</li><li>Porsolt, R. D., Anton, G., Blavet, N., Jalfre, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+despair+in+rats:+A+new+model+sensitive+to+antidepressant+treatments.">Behavioral despair in rats: A new model sensitive to antidepressant treatments.</a> European Journal of Pharmacology. 47 (4), 379-391 (1978).</li><li>Hunsberger, J., Dunman, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+for+depression-like+and+anxiety-like+behavior.">Animal models for depression-like and anxiety-like behavior.</a> Nature Protocol Exchange. , (2007).</li><li>Hommel, J. D., Sears, R. M., Georgescu, D., Simmons, D. L., DiLeone, R. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Local+gene+knockdown+in+the+brain+using+viral-mediated+RNA+interference.">Local gene knockdown in the brain using viral-mediated RNA interference.</a> Nature Medicine. 9 (12), 1539-1544 (2003).</li><li>Mao, Y., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Disrupted+in+schizophrenia+1+regulates+neuronal+progenitor+proliferation+via+modulation+of+GSK3beta/beta-catenin+signaling.">Disrupted in schizophrenia 1 regulates neuronal progenitor proliferation via modulation of GSK3beta/beta-catenin signaling.</a> Cell. 136 (6), 1017-1031 (2009).</li><li>Clark, M. S., Sexton, T. J., McClain, M., Root, D., Kohen, R., Neumai, J. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Overexpression+of+5-HT1B+receptor+in+dorsal+raphe+nucleus+using+herpes+simplex+virus+gene+transfer,+increases+anxiety+behavior+after+inescapable+stress.">Overexpression of 5-HT1B receptor in dorsal raphe nucleus using herpes simplex virus gene transfer, increases anxiety behavior after inescapable stress.</a> Journal of Neuroscience. 2 (11), 4550-4562 (2002).</li><li>Tasan, R. O., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+central+and+basolateral+amygdala+are+critical+sites+of+neuropeptide+Y/Y2+receptor-mediated+regulation+of+anxiety+and+depression.">The central and basolateral amygdala are critical sites of neuropeptide Y/Y2 receptor-mediated regulation of anxiety and depression.</a> Journal of Neuroscience. 30 (18), 6282-6290 (2010).</li><li>Salmon, P., Trono, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Production+and+titration+of+lentiviral+vectors.">Production and titration of lentiviral vectors.</a> Current Protoc Hum Gen. 12 (12.10), (2007).</li><li>Carter, D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Anesthetizing+mice.">Anesthetizing mice.</a> Methods Mol Biol. 18, 135-136 (1993).</li><li>Alachkar, A., Jiang, D., Harrison, M., Zhou, Y., Chen, G., Mao, Y. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+EJC+factor+RBM8a+regulates+anxiety+behaviors.">An EJC factor RBM8a regulates anxiety behaviors.</a> Current Molecular Medicine. 13 (6), 887-899 (2013).</li><li>Bernal, J., Baldwin, M., Gleason, T., Kuhlman, S., Moore, G., Talcott, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Guidelines+for+rodent+survival+surgery.">Guidelines for rodent survival surgery.</a> Journal of Investigative Surgery. 22, 445-451 (2009).</li><li>Wahlsten, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Getting+ready+for+testing.+Mouse+Behavioral+Testing:+How+to+use+mice+in+behavioral+neuroscience.">Getting ready for testing. Mouse Behavioral Testing: How to use mice in behavioral neuroscience.</a> Academic Press. , 133-141 (2011).</li><li>Kheirbek, M. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+control+of+learning+and+anxiety+along+the+dorso-ventral+axis+of+the+dentate+gyrus.">Differential control of learning and anxiety along the dorso-ventral axis of the dentate gyrus.</a> Neuron. 6 (77), 955-968 (2013).</li><li>Snyder, J. S., Soumier, A., Brewer, M., Pickel, J., Cameron, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Adult+hippocampal+neurogenesis+buffers+stress+responses+and+depressive+behaviors.">Adult hippocampal neurogenesis buffers stress responses and depressive behaviors.</a> Nature. 476 (7361), 458-461 (2011).</li><li>Sik-Lee, J., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Induction+of+neuronal+vascular+endothelial+growth+factor+expression+by+cAMP+in+the+dentate+gyrus+of+the+hippocampus+is+required+for+antidepressant-like+behaviors.">Induction of neuronal vascular endothelial growth factor expression by cAMP in the dentate gyrus of the hippocampus is required for antidepressant-like behaviors.</a> Journal of Neuroscience. 29 (26), 8493-8505 (2009).</li><li>Miller, D. G., Adam, M. A., Miller, A. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Gene+transfer+by+retrovirus+vectors+occurs+only+in+cells+that+are+actively+replicating+at+the+time+of+infection.">Gene transfer by retrovirus vectors occurs only in cells that are actively replicating at the time of infection.</a> Molecular and Cellular Biology. 10 (8), 4239-4242 (1990).</li><li>Rubinson, D. A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+lentivirus-based+system+to+functionally+silence+genes+in+primary+mammalian+cells,+stem+cells+and+transgenic+mice+by+RNA+interference.">A lentivirus-based system to functionally silence genes in primary mammalian cells, stem cells and transgenic mice by RNA interference.</a> Nature Genetics. 33, 401-406 (2003).</li></ol>

The authors have nothing to disclose.

Başarılı stereotaktik enjeksiyonları üç faktöre dayanır: iğne (uç, canlı fare tutmak (bregma kesiştiği ve interaural hat üzerinde iğne ucu) koordinatları için doğru sıfır noktası ayarlama ve sıfır noktasına doğru derinlik ayarı Sadece) beyin dokusu dış dokunmadan. farelerin canlılığı önemlidir. Cerrahi hayatta kalma fare düzgün anestezi ve yeterli analjezik aldığı olduğundan emin yaparak destekli edilebilir. Ağrı ameliyat sonrası zayıf kazanımı önemli bir nedeni olduğu bili...

Bu genetik olarak manipüle edilmesi kolaydır, çünkü fare yaygın nörobiyolojisinde kullanılmıştır. Gen nakavt teknikleri her genetik faktör fare davranışlarını nasıl şekillendirdiğini araştırmacılar araştırmak için izin verir. Ayrıca, CRE-loxP sistemi doku için değerli bir araç sağlar ve farklı dokular içindeki gen fonksiyonu çalışma için araştırmacılar sağlar farelerde tip spesifik gen nakavt, Celi. 1 Bununla birlikte, uygulamada, CRE promoterlerin ekspresyon modelleri kontrol edilmesi zor olan ve bugüne kadar birçok kurulan CRE sürücüleri bölgeye özgü ifadesini elde değil. 2,3 Seçenek olarak ise, stereotaktik enjeksiyon yetişkin fare spesifik beyin bölgeleri hedef alan bir yöntemdir. CDNA veya shRNA eksprese genetik mühendisliği virüsleri enjekte ederek, gen ekspresyonunun bölgeye özgü modülasyonu elde edilebilir. Her bir farenin beyni boyutu değişir, ancak spesifik beyin bölgelerinde yer stereotaktik Coordi kullanılarak belirlenebilirkalça fare beyin kafatası üzerinde simgesel ayarlayın. En sık kullanılan görülecek Bregma, lambda ve interaural çizgi vardır. Beyin atlas elde edilen koordinatları kullanarak, her bir beyin bölgesinden 4 tam konumu antero-posterior (A / P), medyal lateral (M / L) ile tespit edilebilir, ve dorsal-ventral (D / V) &#39;den eksenleri Bregma / interaural hat kavşak. Enjeksiyonlar floresan mikroskobu ile teyit edilebilir ve böylece Tipik farelerin beyinlerinde enjekte virüsler ya kırmızı ya da yeşil floresan protein (RFP veya GFP) ile etiketlenmiş. Farelerin Davranış değerlendirmeler psikiyatrik bozuklukların temel araştırma için özellikle gereklidir. Hastalarda psikiyatrik bozuklukların belirtileri genellikle anormal davranışları içerir. Bu insan davranışlarının bazıları evrimsel olarak korunmuş olan ve doğrudan taklit ve farede gözlenebilir. Örneğin, depresyon, davranışsal umutsuzluk ölçerek fare örnek alınabilir. Sık sık depresyon olan kişilerHiç yardımcı olacaktır yapmak bir şey sanki tr, sonunda intihara yol açabilir belirti hissediyorum. Kemirgenler, bu suyun bir havuzda yüzen karşı yüzme fare (vazgeçerek olarak görülüyor) süreyi ölçen Zorla Swim Testi (FST) kullanılarak modellenebilir. Bu paradigma, anti-depresanlar ile fenotip tahlisiye tarafından onaylanmıştır. Tedavi edilmeyen kontrollerle karşılaştırıldığında önemli ölçüde daha az zaman harcayacaksınız hareketsiz anti-depresanlar almış 7,8,9 Fare. Başka bir davranış testi, Açık Alan Testi (OFT) farelerde lokomosyon değerlendirmek için tasarlanmıştır ve ayrıca farelerde endişeli fenotip analiz etmek için de kullanılabilir. 5,6 Bu test de yakın zaman fareler daha güvenli hissediyorum önermesine dayanır Bir roman açık alanda duvara. Onlar meraklı hayvanlar vahşi tip fareler sonunda, yeni bir ortam araştıracaktır. Ancak, alanın merkezinde daha az zaman harcama fare geçirme girişimlerini aşmak mümkün olmayacaktır olarak, fare anksiyete gösterirl korku yeni bir ortama getirdiği. Açık alanın merkezinde kaldığı zaman miktarı ile belirlenir olarak fare anksiyete, birçok psikiyatrik bozukluklarda mevcut olduğu, insanlarda klinik anksiyete, karşılaştırılabilir. Davranış paradigmaları stereotaktik enjeksiyon kombinasyonu hedef beyin alanında, belirli bir genin ekspresyonunu değiştirmek için yeni bir yöntemdir. Fare davranışlar üzerinde modüle edilmiş gen ekspresyonu etkisi daha sonra tespit edilebilir. Tüm beyin nakavt aksine, bu yöntem, yalnızca spesifik beyin alanları hedef olarak özellikle yararlıdır. Buna ek olarak, stereotaktik enjeksiyon, tipik olarak, yetişkin vahşi tip fare gerçekleştirilir, bu nedenle, endojen gen ekspresyonu gelişim aşamalarında içinde muhafaza edilmiştir. Gen gelişim embriyonik veya postnatal aşamasında hayatta kalmak için gerekli ise bu yöntem şaşırtmak etkisini önlemek olacaktır. Bir büyük sınırlama deneysel fareler Throug gitmek gerekir olduğunuH farelerin kafatası sahip olduğu bir invaziv cerrahi, açılacak. Ayrıca, gen modülasyon derecesi virüsün titresi ve verimlilik ile belirlenir. Virüs özel aletler gerektirir stereotaktik koordinatları kullanarak doğru bölgeye enjekte edilmesi gerekmektedir. Doğru enjeksiyon yerinde doğrulanması sadece otopsi tamamlanabilir. Bu yöntem, daha önce çeşitli nörolojik hastalıklarda spesifik bir genin katılımını test etmek için kullanılmıştır. Örneğin, virüslerin aracılık ettiği bir RNAi (dopamin sentezlenebilir sağlar) Th genini hedef substantia nigra compacta&#39;da enjekte edildi ve lokomotor davranışını analizi yapılmıştır. Bir başka çalışmada 10 ile ilgili olarak, fare davranışını değerlendirmek için bir lentivirüs susturulması DISC1 stereotaktik enjeksiyon kullanılan şizofreniye. DISC1 demonte yenilik tepki olarak artan hareketin neden (paralellikler şizofrenide pozitif belirtiler) ve daha fazla hareketsizlikFST. 11 Benzer bir şekilde, ek bir çalışma, 5-HT1B aşın dışa vurum, OFT artmış büzülmesi için bu yöntemi kullanan bir anti-anksiyete fenotipi ile tutarlı neden olduğunu buldu. 12 Stereotaksik enjeksiyonlar CRE-loxP farelerde rekombinasyonu azaltmak için cre virüsü sağlayabilir . Bu yöntem, selektif amigdala Y2 reseptörü ve stria terminalisin yatak çekirdeği silmek için kullanılmıştır. Davranış analizi üzerine, bu fareler gen merkezi amigdala silindi bir anti-depresif fenotip bulundu, ancak bulundu gen bazolateral amigdala veya stria terminalisin yatak çekirdeğinde silinmiş hiçbir fenotip. 13 Böylece, bu tekniği Hayvan davranışları üzerinde genetik etkisini araştırmak için benzersiz bir araç sağlar.

<table border="0" cellpadding="0" cellspacing="0" width="608">
	<colgroup>
		<col />
		<col />
		<col />
		<col />
	</colgroup>
	<tbody>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Name of Material/ Equipment</td>
			<td style="width:107px;">Company</td>
			<td style="width:119px;">Catalog Number</td>
			<td style="width:167px;">Comments/Description</td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Stereotactic Apparatus item 51725</td>
			<td style="width:107px;">Stoelting co.</td>
			<td align="right" style="width:119px;">51725</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Quintessential stereotaxic pump&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Stoelting co.</td>
			<td align="right" style="width:119px;">53311</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Injection Styringe, 65 RN</td>
			<td style="width:107px;">Hamilton</td>
			<td style="width:119px;">7633-01</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">DMEM</td>
			<td style="width:107px;">Sigma-Aldrich</td>
			<td style="width:119px;">D5796</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">PEI&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Polysciences Inc.</td>
			<td align="right" style="width:119px;">23966</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Scissors</td>
			<td style="width:107px;">Fine Surgical Tools</td>
			<td style="width:119px;">14084-08</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Blunt end forceps</td>
			<td style="width:107px;">Fine Surgical Tools</td>
			<td style="width:119px;">11002-12</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Needle holder&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Fine Surgical Tools</td>
			<td style="width:119px;">12001-13</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="84">
			<td height="84" style="height:84px;width:216px;">Drill</td>
			<td style="width:107px;">Ram Products Inc</td>
			<td style="width:119px;">Microtorque control box, Tech2000 handpiece</td>
			<td>with pedal</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Glass bead sterilizer</td>
			<td style="width:107px;">Inotech&#160;</td>
			<td style="width:119px;">IS-400</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Absorbable sutures&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Unify</td>
			<td style="width:119px;">M-K518r19</td>
			<td>Absorbable, reverse cutting</td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cotton swabs</td>
			<td style="width:107px;">VWR</td>
			<td style="width:119px;">89031-270</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Heating pad</td>
			<td style="width:107px;">Gaymar</td>
			<td style="width:119px;">T-pump TP-500 PN11184-000</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Artificial tears</td>
			<td style="width:107px;">Rugby</td>
			<td style="width:119px;">NDC 0536-6550-91</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Disposable syringe</td>
			<td style="width:107px;">BD Syringe</td>
			<td align="right" style="width:119px;">309623</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Cloth</td>
			<td style="width:107px;"></td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Gloves&#160;</td>
			<td style="width:107px;">Ansell</td>
			<td style="width:119px;">Senseitouch #7823</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Avertin or other anesthetic</td>
			<td style="width:107px;">see recipe citation</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="42">
			<td height="42" style="height:42px;width:216px;">Ketoprofen or other analgesic</td>
			<td style="width:107px;">see veternarian&#160;</td>
			<td style="width:119px;"></td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tracking software</td>
			<td style="width:107px;">Noldus</td>
			<td style="width:119px;">Ethovision XT</td>
			<td></td>
		</tr>
		<tr height="21">
			<td height="21" style="height:21px;width:216px;">Tracking Camera</td>
			<td style="width:107px;">Noldus</td>
			<td style="width:119px;">Media Recorder</td>
			<td></td>
		</tr>
	</tbody>
</table>

applying stereotactic injection technique to study genetic effects on animal behaviors

Stereotaktik enjeksiyon farelerde hedeflenen beyin bölgelerine yüksek titre lentiviruses sunmak için yararlı bir tekniktir. Lentivirüsler aşırı ifade eden ya da beyin dokusuna önemli bir zarar vermeden, nispeten odaklanmış bölgede demonte gen ekspresyonu ya. İyileştikten sonra, enjekte edilen fare gibi Açık Alan Testi (OFT) ve Zorla Swim Testi (FST) gibi çeşitli davranışsal görevler üzerinde test edilebilir. OFT fare bir roman açık alanda merkezinde geçirdiği süreyi ölçerek farelerde hareketlilik ve endişeli fenotip değerlendirmek için tasarlanmıştır. Bir daha endişeli fare kontrollere göre yeni alanın ortasında önemli ölçüde daha az zaman harcayacaksınız. FST bir kova su içine yerleştirildiğinde fareler hareketsiz harcamak süreyi miktarının anti-depresif fenotip değerlendiriyor. Bir anti-depresif bir fenotipe sahip bir fare kontrol hayvanları ile karşılaştırıldığında önemli ölçüde daha az zaman hareketsiz geçirecek. Bu protokolün amacı, ster kullanmaktırdavranış testleri ile birlikte bir lentivirüs eotactic enjeksiyon hayvan davranışlarını modüle nasıl genetik faktörler değerlendirmek için.

<html> Doğru stereotaktik enjeksiyon doğru koordinatları ayarı dayanır. virüs enjekte etmek için kullanılan iğnenin ucu bregma kesiştiği ve interaural hat (Şekil 1) doğrudan ayarlanması gerekir. Bu iğne doğru yerleştirilmiş olup olmadığını belirlemek için bir stereomikroskopta kullanmak yararlı olur. Mikroskop ile bakıldığında virüsü enjekte edildi, bu bregma kesiştiği interaural hat üzerinde doğrudan toprak olacaktır, böylece iğne konumlandırılmalıdır. Bu şırı...

Watch this Scientific Journal Video about Applying Stereotactic Injection Technique to Study Genetic Effects on Animal Behaviors at JoVE.com

Applying Stereotactic Injection Technique to Study Genetic Effects on Animal Behaviors

Lentivirüsler cDNA&#39;larını ifade eden ya da shRNAs farelerde spesifik beyin bölgelerinde gen ifadesini modüle edebilen stereotaktik enjeksiyon. Burada, biz Açık Alan Testi (OFT) ve Zorla Swim Testi (FST) gibi davranışsal görevleri ile stereotaktik enjeksiyon birleştirmek için bir protokol mevcut.

Stereotaktik Enjeksiyon Tekniği uygulamak Hayvan Davranışları üzerinde Genetik Etkileri Eğitim için

Stereotactic injection is a useful technique to deliver high titer lentiviruses to targeted brain areas in mice. Lentiviruses can either overexpress or ...

applying-stereotactic-injection-technique-to-study-genetic-effects-on

Research

JoVE Journal

Behavior

14.0K Görüntüleme.  The Pennsylvania State University.  Lentivirüsler cDNA'larını ifade eden ya da shRNAs farelerde spesifik beyin bölgelerinde gen ifadesini modüle edebilen stereotaktik enjeksiyon. Burada, biz Açık Alan Testi (OFT) ve Zorla Swim Testi (FST) gibi davranışsal görevleri ile stereotaktik enjeksiyon birleştirmek için bir protokol mevcut. 

Video: Applying Stereotactic Injection Technique to Study Genetic Effects on Animal Behaviors

Stereotactic Injection of MicroRNA-expressing Lentiviruses to the Mouse Hippocampus CA1 Region and Assessment of the Behavioral Outcome

MicroRNAs (miRNAs) are small regulatory single-stranded RNA molecules around 22 nucleotides long that may each target numerous mRNA transcripts and dim an entire gene expression pathway by inducing destruction and/or inhibiting translation of these targets. Several miRNAs play key roles in maintaining neuronal structure and function and in higher-level brain functions, and methods are sought for manipulating their levels for exploring these functions. Here, we present a direct in vivo method for examining the cognitive consequences of enforced miRNAs excess in mice by stereotactic injection of miRNA-encoding virus particles. Specifically, the current protocol involves injection into the hippocampal CA1 region, which contributes to mammalian memory consolidation, learning, and stress responses, and offers a convenient injection site. The coordinates are measured according to the mouse bregma and virus perfusion is digitally controlled and kept very slow. After injection, the surgery wound is sealed and the animals recover. Lentiviruses encoding silencers of the corresponding mRNA targets serve to implicate the specific miRNA/target interaction responsible for the observed effect, with na&iuml;ve mice, mice injected with saline and mice injected with "empty" lentivirus vectors as controls. One month post-injection, the animals are examined in the Morris Water Maze (MWM) for assessing their navigation learning and memory abilities. The MWM is a round tank filled with colored water with a small platform submerged 1 cm below the water surface. Steady visual cues around the tank allow for spatial navigation (sound and the earth's magnetic field may also assist the animals in navigating). Video camera monitoring enables measuring the route of swim and the time to find and amount the platform. The mouse is first taught that mounting the hidden platform offers an escape from the enforced swimming; it is then tested for using this escape and finally, the platform is removed and probe tests examine if the mouse remembers its previous location. Repeated tests over several consecutive days highlight improved performance of tested mice at shorter latencies to find and mount the platform, and as more direct routes to reach the platform or its location. Failure to show such improvement represents impaired learning and memory and/or anxiety, which may then be tested specifically (e.g. in the elevated plus maze). This approach enables validation of specific miRNAs and target transcripts in the studied cognitive and/or stress-related processes.

MicroRNAs have significant roles in brain structure and function. Here we describe a method to enforce hippocampal miRNA over-expression using stereotactic injection of an engineered miRNA-expressing lentivirus. This approach can serve as a relatively rapid way to assess the in vivo effects of over-expressed miRNAs in specific brain regions.

Bir Stereotaktik Enjeksiyon MicroRNA-ifade Fare Hippocampus CA1 Bölgesi Lentiviruses ve Davranış Sonuç Değerlendirilmesi

MicroRNAs (miRNAs) are small regulatory single-stranded RNA molecules around 22 nucleotides long that may each target numerous mRNA transcripts and dim an ...

Davranış

A Within-subjects Experimental Protocol to Assess the Effects of Social Input on Infant EEG

Despite the importance of social interactions for infant brain development, little research has assessed functional neural activation while infants socially interact. Electroencephalography (EEG) power is an advantageous technique to assess infant functional neural activation. However, many studies record infant EEG only during one baseline condition. This protocol describes a paradigm that is designed to comprehensively assess infant EEG activity in both social and nonsocial contexts as well as tease apart how different types of social inputs differentially relate to infant EEG. The within-subjects paradigm includes four controlled conditions. In the nonsocial condition, infants view objects on computer screens. The joint attention condition involves an experimenter directing the infant's attention to pictures. The joint attention condition includes three types of social input: language, face-to-face interaction, and the presence of joint attention. Differences in infant EEG between the nonsocial and joint attention conditions could be due to any of these three types of input. Therefore, two additional conditions (one with language input while the experimenter is hidden behind a screen and one with face-to-face interaction) were included to assess the driving contextual factors in patterns of infant neural activation. Representative results demonstrate that infant EEG power varied by condition, both overall and differentially by brain region, supporting the functional nature of infant EEG power. This technique is advantageous in that it includes conditions that are clearly social or nonsocial and allows for examination of how specific types of social input relate to EEG power. This paradigm can be used to assess how individual differences in age, affect, socioeconomic status, and parent-infant interaction quality relate to the development of the social brain. Based on the demonstrated functional nature of infant EEG power, future studies should consider the role of EEG recording context and design conditions that are clearly social or nonsocial.

This novel protocol is designed to assess the neural bases of social interaction in infants. The paradigm is designed to tease apart how various social inputs such as language, joint attention, and face-to-face interaction relate to infant neural activation. Infant EEG power is recorded during both social and nonsocial conditions.

Bir içi konular Deneysel Protokol Bebek EEG Sosyal Input Etkilerinin Değerlendirmek için

Despite the importance of social interactions for infant brain development, little research has assessed functional neural activation while infants ...

Testing Animal Anxiety in Rats: Effects of Open Arm Ledges and Closed Arm Wall Transparency in Elevated Plus Maze Test

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral science, conflicting outcomes are often provided from different laboratories. To identify reasons for the different outcomes, we previously focused on arm features, which differ between laboratories, most notably the presence/absence of ledges at the sides of open arms and the transparency/opaqueness of closed arm walls. In a previous report, we used a custom designed container to compare rat behavior on different combinations of open and closed arm designs under otherwise identical experimental conditions, and showed that differences in arm features interfere with experimental outcomes. In brief, open arm ledges significantly increased anxiety-like behavior in rats, while transparent arms may also have decreased this behavior. Furthermore, we verified a higher detection sensitivity of the effect of an anxiolytic drug in a combination of no-ledged open arm + opaque walled closed arm compared with a combination of ledged open arm + transparent walled closed arm. In this report, we introduce our protocol for the elevated plus maze test, together with discussion of the key results from the previous report and our experimental experience. We believe this report will provide useful information for researchers who have employed or who plan to use the elevated plus maze in their studies.

Rats' anxiety-like behavior tested by the elevated plus maze varies highly depending on the testing environment. Here we show how apparatus settings, especially arm structure, affect behavior on the maze, and we explain a reliable protocol to detect effects of anxiolytic drugs. This report will contribute to anxiety research.

Hayvan kaygı Rat test: açık kol çıkıntıları ve kapalı kol etkileri duvar yükseltilmiş şeffaflık artı labirent testi

The elevated plus maze test is a behavioral test for assessing animal anxiety in rodents. Although this test is widely applied in the field of behavioral ...

Assessment of Social Transmission of Food Preferences Behaviors

Olfactory recognition deficits are suggested to be able to serve as clinical marker to differentiate Alzheimer&#39;s disease (AD) subjects from healthy aging groups. For example, olfactory dysfunction in AD can present as impairment in olfactory recognition, emerging during early stages of the disease and worsening while the disease progresses. The social transmission of food preferences (STFP) task is based on a rudimentary form of communication between rodents concerning distant foods dependent on the transmission of olfactory cues. Healthy wild-type mice would prefer to eat a novel, flavored food that was previously cued by a conspecific, and this food preference would be hampered in transgenic AD mice, such as the APP/PS1 model. Indeed, a strong preference for the cued food in C57Bl6/J mice of 3 months of age was found, and this was reduced in 3 months old transgenic APP/PS1 mice. In summary, STFP task could be a powerful measure to be integrated in present subclinical detection assays of AD.

This paper presents a protocol for the investigation of social transmission of food preference in mice. The advantages and possible applications for this procedure, for instance, in detecting early changes in AD mouse models, are highlighted. To conclude, interpretation of the results in light of critical details are discussed.

Sosyal iletim gıda tercihleri davranışların değerlendirilmesi

Olfactory recognition deficits are suggested to be able to serve as clinical marker to differentiate Alzheimer&#39;s disease (AD) subjects from healthy ...

Tickling, a Technique for Inducing Positive Affect When Handling Rats

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk for both the animals and the hands of their handlers, decreased animal welfare, and less valid research data. To minimize negative effects on experimental results and human-animal relationships, research animals are often habituated to being handled. However, the methods of habituation are highly variable and often of limited effectiveness. More potently, it is possible for humans to mimic aspects of the animals&#39; playful rough-and-tumble behavior during handling. When applied to laboratory rats in a systematic manner, this playful handling, referred to as tickling, consistently gives rise to positive behavioral responses. This article provides a detailed description of a standardized rat tickling technique. This method can contribute to future investigations into positive affective states in animals, make it easier to handle rats for common husbandry activities such as cage changing or medical/research procedures such as injection, and be implemented as a source of social enrichment. It is concluded that this method can be used to efficiently and practicably reduce rats&#39; fearfulness of humans and improve their welfare, as well as reliably model positive affective states.

This article demonstrates the standardized application of playful handling, a tickling technique designed to mimic rat rough-and-tumble play. This technique is effective at reducing fearful reactions to humans and generating positive affect when rats are handled for common husbandry activities and medical and research procedures such as injection.

Gıdıklama, fareler işlerken olumlu etkiler Inducing tekniği

Handling small animals such as rats can lead to several adverse effects. These include the fear of humans, resistance to handling, increased injury risk ...

Using a Classroom-Based Deese Roediger McDermott Paradigm to Assess the Effects of Imagery on False Memories

Associated word list procedures can elicit false memories in predictable ways by inducing associative processing, thus making it harder to monitor the accuracy of memories. The purpose of the method presented here was to induce false memories using lists of either semantically or phonologically related words and to assess the effects of imagery instructions on the recall and recognition of those false memories. To do this, we used a modified version of the Deese Roediger McDermott (DRM) paradigm. We adapted word lists from previous DRM studies to suit imagery procedures and created an automated presentation to present the word lists in classroom settings. We then recruited undergraduate classes and instructed some of the classes to create mental images of the list words as they were being presented, while instructing the other classes to simply remember the words. The automated presentation presented word lists to participants, one word at a time, alternating between phonologically and semantically related lists. Participants used paper-pencil recall packets to immediately recall list items, complete a distractor activity, and take a subsequent final recognition test. Often, participants immediately recalled and later recognized words that were related to the list items but were not actually presented; these are known as critical lures and indicate a false memory. The protocol detailed here describes a four-step procedure - list presentation, immediate recall, distractor phase, and final recognition - that can assess the effects of list type and imagery instruction within the DRM paradigm on memory. The automated nature of the list presentation provides the ability to systematically vary variables of interest, and the paper and pencil method of data collection affords an easily accessible method for collecting data in classroom settings. The protocol also offers options to modify the procedure to a more traditional DRM paradigm without imagery and/or list type manipulations. The use of this protocol can provide results relevant to both classroom learning and cognitive science principles.

The method presented here induced false memories using lists of related words and also assessed the effects of imagery instructions on the recall and recognition of those false memories. This protocol details a modified version of the Deese Roediger McDermott (DRM) paradigm.

Sahte anılar görüntüleri etkilerini değerlendirmek için bir sınıf tabanlı Deese Roediger McDermott paradigması kullanarak

Associated word list procedures can elicit false memories in predictable ways by inducing associative processing, thus making it harder to monitor the ...

Assessing the Coherence of Parents' Short Narratives Regarding their Child Using the Five-Minute Speech Sample Procedure

Valid and efficient measures for assessing the quality of parent-child relationships are needed to facilitate research and evidence-based practice with parents. This paper focuses on such a method, namely Five-Minute Speech Sample-Coherence (FMSS-Coherence). In this method, a parent is asked to speak for five uninterrupted minutes about her/his child and their relationship. The resulted narrative is coded for coherence, namely the extent to which the parent provides&#160;in the narrative&#160;a clear, consistent, multidimensional and well-supported portrayal of the child. FMSS-Coherence is based on attachment research that shows that the coherence of parents&#8217; narratives is indicative of the quality of the parent-child relationship and child adjustment. It overcomes the limitations of attachment narrative measures which are typically labor intensive. FMSS-Coherence is less nuanced than extant attachment narrative measures. Yet, studies of families from different cultural backgrounds, across different child ages and in the context of typically developing children as well as children with special needs suggest that coherence can be reliably evaluated using the FMSS procedure. Furthermore, parents&#8217; FMSS-Coherence is associated with parenting quality and children&#8217;s socio-emotional adjustment. Thus, it holds promise for researchers and practitioners who seek a relatively time- and cost-effective method for assessing the coherence of parents&#8217; narratives regarding their child.

Assessing the Coherence of Parents&#039; Short Narratives Regarding their Child Using the Five-Minute Speech Sample Procedure

This paper introduces a method for assessing the coherence of parents' short narratives regarding their child and their relationship using the five-minute speech sample procedure.

Beş Dakikalık Konuşma Örnek Prosedürü Kullanarak Ebeveynlerin ÇocuklarıYla İlgili Kısa Anlatımlarının Tutarlılığının Değerlendirilmesi

Valid and efficient measures for assessing the quality of parent-child relationships are needed to facilitate research and evidence-based practice with ...

Applying an eMASS Customization Program as a Research Tool to Evaluate Consumer Benefits

As many scholars and practitioners study personalization and relationship marketing, it is important to provide personalization such as mass customization through marketing technology. The purpose of this study is to examine how to conduct consumer research using an online survey and analysis of data. This study examines consumers&#39;&#160;perceived benefits while customizing a product as well as emotional product attachment, attitudes toward a customization program, and loyalty intentions in the context of online retailing. In addition, this study investigates how consumer responses are different based on individual characteristics such as fashion innovativeness. An online survey company in South Korea recruited 290 female apparel shoppers who purchased apparel online. To enhance external validity, this study used an existing retail website with a well-established mass customization program. After completing the customization program, participants complete the online questionnaire. Structural equation modeling (SEM) and latent mean analyses (LMAs) are then performed for analyses. This study stresses the importance of testing measurement invariance for mean comparisons. Before the SEM and LMA, this study follows the hierarchy of invariance tests (configural invariance test, metric invariance test, and scalar invariance test), which are not considered by traditional approaches such as ANOVA. These statistical analyses provide applicability of the invariance test procedures and LMA to consumer behaviors. The conclusions of mean differences have integrity and validity because they are guided by a sophisticated statistical procedure to ensure measurement invariance.

Presented here is a protocol to examine consumer responses toward mass customization in the context of online retailing. The protocol details the online survey procedure and how to analyze data using structural equation modeling and group differences using latent mean analyses.

Tüketici Faydalarını Değerlendirmek Için Araştırma Aracı Olarak EMASS Özelleştirme Programı Uygulamak

As many scholars and practitioners study personalization and relationship marketing, it is important to provide personalization such as mass customization ...

An Experimental Paradigm for Measuring the Effects of Ageing on Sentence Processing

Previous studies have found that older adults have greater difficulties in processing syntactically complex sentences than younger adults. However, the exact regions where the difficulties arise have not been fully identified. In this study, a maze task was implemented to investigate how older adults and younger adults differentially processed two types of sentences with different levels of syntactic complexity, namely subject relative clauses and object relative clauses. Participants were asked to choose between two alternatives at each segment of the sentences. The task required participants to engage in a strictly incremental mode of processing. The reading times for each segment were recorded, allowing the quantification of the difficulty of sentence reading. The task allowed us to identify the exact locations of the processing difficulty and thus facilitate a more accurate assessment of the age-related decline in sentence processing. The results indicate that the effect of ageing was found mainly at the head nouns, but not at other regions of the sentences, a finding which suggests that the maze task is an effective method to identify the exact location of the ageing effect on sentence processing. The implications of this experimental paradigm for investigating the effect of ageing on sentence processing are discussed.

Here, we present a protocol to examine the age-related decline in sentence processing using a maze task that allowed us to localize the processing difficulty at each word of the sentences during reading.

Yaşlanmanın Cümle İşleme Üzerindeki Etkilerini Ölçmeye Yönelik Deneysel Bir Paradigma

Previous studies have found that older adults have greater difficulties in processing syntactically complex sentences than younger adults. However, the ...

The Use of Traditional Fear Tests to Evaluate Different Emotional Circuits in Cattle

Animal temperament is complex and has implications for productivity and economic profitability. Quantifying an animal&#39;s response to differing stimuli may facilitate breeding selections and identify animals that are better suited to specific management strategies. Multiple tests have been developed to evaluate cattle temperament (e.g., exit velocity, chute score, pen score, open field test, startle test, bovine zero maze), but each of these tests evaluates the animal&#39;s response to different stimuli (e.g., isolation, novel environment, startle, willingness to enter an enclosed area). Cattle temperament has been observed to be relatively stable over time. However, the evaluation of temperament has the potential to be influenced by current conditions, previous experiences, and observer bias. Many of these temperament tests have been improperly categorized as fear tests and have also been criticized for being subjective. This paper provides a framework for standardizing behavioral tests for cattle and suggests that these different evaluations assess different aspects of the animal&#39;s overall temperament.

Here, we present a protocol to conduct a variety of behavioral tests in cattle that have been designed to evaluate emotions. A battery of behavioral tests (open field test, startle test, bovine zero maze, exit velocity, pen score, and chute score) were conducted to evaluate different components of animal temperament.

Sığırlarda Farklı Duygusal Devreleri Değerlendirmek Için Geleneksel Korku Testlerinin Kullanımı

Animal temperament is complex and has implications for productivity and economic profitability. Quantifying an animal&#39;s response to differing stimuli ...