Name: a method to inflict closed head traumatic brain injury in drosophila
Uploaded: 2015-06-30T14:00:00.000+00:00
Duration: 5 min 22 s
Description: Watch this Scientific Journal Video about A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila at JoVE.com

Bu çalışma Sağlık hibe, R01 AG033620 (BG) Ulusal Sağlık Enstitüleri tarafından ve Robert Draper Teknoloji İnovasyon Finansman (DAW) tarafından desteklenmiştir.

HIT Cihazın 1. İnşaat <ol><li> İki kelepçeler ve dört vidayı (Şekil 1A) kullanarak kuruluna yayı takın. Yönetim kurulu genişliğine göre kelepçeleri ortalamak ve yönetim kurulu kenarı ile dış kelepçe floş ile birbirlerine karşı onları popo. Önce kelepçeler takılarak için, yay üzerinde sıkıca uyacak şekilde pense ile bükün. NOT: HIT cihazı oluşturmak için gerekli malzemelerin açıklamaları için Tablo 1&#39;e bakınız. Baharın kenetlenmiş uç kurulu kenarından 1/8 inç (3.2 mm) olmalıdır ve serbest ucu 3/4 inç (19 mm) ile tahta üzerinde uzanmalıdır. Bu yönetim kurulu uzunluğu ile paralel yatıyor böylece yayı ayarlayın. </li><li> Velcro döngüler yapışkan bant kez etrafında bahar serbest ucunu sarın. Velcro dış kenarı bahar sonu ile aynı hizada olmalıdır. O CRE tarafından bahar flakon güvenliğini sağlamak için kullanılan, çünkü Velcro önemlidirSıkı bir sıkıştırma uydurma ating. Velcro, aynı zamanda pek çok küçük şişeler kısa bir süre içinde işlenecek sağlayan, kolay bağlantı ve şişeler çıkarılmasını mümkün kılar. </li><li> Sıkı tahta karşı merkezli baş aşağı buz kovası kapağı yerleştirin. Uzun kenarı kurulu genişliğine paralel olacak şekilde buz kovası kapağının kaldırılmış bölgesini yönlendirmek. Bir şişe yayı bağlıyken bahar tahtada düz yalan olmayacak şekilde buz kovası yükseltilmiş bölge, tahta daha 1/2 inç (13 mm) yüksek olduğunu unutmayın. </li><li> Buz kovası kapağı kurulu ve nesne arasında sıkışmış ve hareket etmiyor, böylece, örneğin bir duvar gibi sabit bir nesneye karşı tüm cihaz kaydırın. </li><li> Bant, bir karton altına kağıt iletki flakon tepsiyi sinek ve mükemmel dikey konumuna geri çekildiğinde 90 ° işareti yay ile aynı hizada olacak şekilde kurulu uzunluğuna karşı kenarında stand it. </li></ol> 2.HIT Cihazının Operasyonu <ol><li> Boş bir şişe içinde uçar ve bir dar pamuk kullanarak flakon kapağı kapatılır -anesthetized 1 ile 60 CO 2 arasındaki yeri. </li><li> Bu alttan 1 inç (2.5 cm) kadar şişe içine pamuk iterek şişenin taban 1 inç (2.5 cm) sinekler öngörebilir. Bu 1 inç (2.5 cm) işaretine flakon üzerinde bir çizgi çizmek için yararlıdır. Şişenin büyük veya daha küçük bölgelere sinekler hapsetmesi fenotipleri şiddetini etkileyebilir unutmayın. </li><li> Sinekler CO 2 hareketlilik kurtarmak için 5 dakika bekleyin. O 5 dk tamamen CO 2 etkilerini ortadan kaldırmak için yeterli olup olmadığı bilinmemektedir unutmayın. </li><li> Velcro iç kenarı flakon (Şekil 1B) üst ile aynı hizaya gelene kadar şişenin içine yayın ucunu. Bahar düz yalan olduğunda, flakonun 1 inç (2.5 cm) buz kovası kapağının kaldırılmış bölgeyi örtüşmelidir. Şişeler m yeniden kullanılabilirher zaman. </li><li> Otururken, sol elin baş ve işaret parmağı kullanılarak Velcro bölgede flakon tutun. Sağ elinizi kullanarak Benchtop yönetim kurulu sıkı tutun. Alternatif olarak, masa üstü sıkı yönetim kurulu tutmak için C-kelepçeler kullanın. </li><li> Mükemmel düz geri istenen açıya yayı çekin. Bahar bırakın. Bahar tamamen durmasını bekleyin. </li><li> Bahar şişe çıkarın ve sinekler ≥5 dk kurtarmak için izin verir. Başka bir greve sinekler Konu veya sinek gıda ile flakon sinekler aktarın. Not: birçok analiz HIT cihazından vuruş fenotipik etkilerini değerlendirmek için kullanılabilir. Örneğin, uzun ömürlü etkileri yaralanma sonrası zaman hayatta sinekler yüzde analizi ile tespit edilebilir, beyin morfolojisi üzerinde etkisi kafasının histolojik analiz ile tespit edilebilir, ve gen ifadesi üzerindeki etkisi, mRNA seviyelerinin niceliksel analizi ile belirlenebilir 10. </li><li> Determinaynı grev tabi değildir kontrol sinekler tedavi ederek grev nedeniyle değil prosedürün e etkileri. Buz kovası kapağı karşı flakon etkisi bir gürültü üretir, çünkü işitme koruması giyin. </li></ol>

<ol>
	<li>Harrison-Felix, C. L., Whiteneck, G. G., Jha, A., DeVivo, M. J., Hammond, F. M., Hart, D. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mortality+over+four+decades+after+traumatic+brain+injury+rehabilitation:+A+retrospective+cohort+study.">Mortality over four decades after traumatic brain injury rehabilitation: A retrospective cohort study.</a> Arch Phys Med Rehabil. 90, 1506-1513 (2009).</li><li>Coronado, V. G., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Surveillance+for+traumatic+brain+injury-related+deaths+&#8211;+United+States.">Surveillance for traumatic brain injury-related deaths &#8211; United States.</a> MMWR Surveill Summ. 60, 1-32 (1997).</li><li>Masel, B., DeWitt, D. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Traumatic+brain+injury:+A+disease+process,+not+an+event.">Traumatic brain injury: A disease process, not an event.</a> J. Neurotrauma. 27, 1529-1540 (2010).</li><li>Blennow, K., Hardy, J., Zetterberg, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+neuropathology+and+neurobiology+of+traumatic+brain+injury.">The neuropathology and neurobiology of traumatic brain injury.</a> Neuron. 76, 886-899 (2012).</li><li>Prins, M., Greco, T., Alexander, D., Giza, C. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+pathophysiology+of+traumatic+brain+injury+at+a+glance.">The pathophysiology of traumatic brain injury at a glance.</a> Disease Models Mech. 6, 1307-1315 (2013).</li><li>Menon, D. K. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Unique+challenges+in+clinical+trails+in+traumatic+brain+injury.">Unique challenges in clinical trails in traumatic brain injury.</a> Crit Care Med. 37, S129-S135 (2009).</li><li>Xiong, Y., Mahmood, A., Chopp, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Animal+models+of+traumatic+brain+injury.">Animal models of traumatic brain injury.</a> Nature Rev Neurosci. 14, 128-142 (2013).</li><li>Balsiger, Z., Leudkte, J., Mawer, S., Willey, M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> HIT device high speed analysis. , (2014).</li><li>Davceva, N., Janevska, V., Illevski, B., Petrushevska, G., Popeska, Z. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+occurrence+of+acute+subdural+haematoma+and+diffuse+axonal+injury+as+two+typical+acceleration+injuries.">The occurrence of acute subdural haematoma and diffuse axonal injury as two typical acceleration injuries.</a> J Forensic Leg Med. 19, 480-484 (2012).</li><li>Katzenberger, R. J., Loewen, C. A., Wassarman, D. R., Petersen, A. J., Ganetzky, B., Wassarman , D. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+Drosophila.+model+of+closed+head+traumatic+brain+injury.">A Drosophila. model of closed head traumatic brain injury.</a> Proc Natl Acad Sci USA. 110, E4152-E4159 (2013).</li><li>Fang, Y., Bonini, N. M. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Axon+degeneration+and+regeneration:+insights+from+Drosophila+.models+of+nerve+injury.">Axon degeneration and regeneration: insights from Drosophila .models of nerve injury.</a> Annu Rev Cell Biol. 28, 575-597 (2012).</li><li>Babcock, D. T., Ganetzky, B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=An+improved+method+for+accurate+and+rapid+measurement+of+flight+performance+in+Drosophila.">An improved method for accurate and rapid measurement of flight performance in Drosophila.</a> J Vis Exp. (84), e51223 (2014).</li><li>Tully, T., Preat, T., Boynton, S. C., Vecchio, M. D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genetic+dissection+of+consolidated+memory+in+Drosophila.">Genetic dissection of consolidated memory in Drosophila.</a> Cell. 79, 35-47 (1994).</li><li>Andretic, R., Shaw, P. J. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Essentials+of+sleep+recordings+in+Drosophila.:+moving+beyond+sleep+time.">Essentials of sleep recordings in Drosophila.: moving beyond sleep time.</a> Methods Enzymol. 393, 759-772 (2005).</li></ol>

Biz ifşa herhangi bir çıkar çatışmaları var.

HIT cihaz yöntemi TBI 11 delici yerine kapalı kafa neden gerçeği ile sinekler travmatik yaralanma indirebilmek diğer yöntemlerden ayrılır. Ayrıca, HIT cihaz yöntemi birçok sinekler TBI indirebilmek için daha az zaman, çaba ve beceri alır, bu yüzden yöntem büyük ölçekli genetik ekranlar diğer yöntemlere göre daha müsait. Son olarak, HIT cihazı tarafından uygulanan birincil yaralanmalar, beyin sınırlı değildir aslında bir sınırlama ve bir avantaj niteliğindedir. Ek çalışmala...

An author's name was corrected in the publication of <a href="http://www.jove.com/video/52905">A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila</a>. The second to last author's was spelled incorrectly. It has been updated from:
Barry Ganetky
to:
Barry Ganetzky

An author's name was corrected in the publication of <a href="http://www.jove.com/video/52905">A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila</a>.

Erratum: A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila

Travmatik beyin hasarı (TBI), harici bir mekanik kuvvet ile ilgili beyin yaralanması olarak tanımlanmaktadır. En yaygın tür künt kuvvetler ve atalet hızlanma ve beyin kafatasının içini grev neden yavaşlama güçleri olarak kapalı kafa kuvvetlerinden TBI sonuçlar. Amerika Birleşik Devletleri&#39;nde, 50.000 kişi TBI her yıl ölmektedir ve 2,5-6.500.000 bireyler, TBI sonuçları ile yaşayan fiziksel, bilişsel zayıflatıcı dahil ve 1,2 davranış sorunları olduğu tahmin edilmektedir. TBI sonuçları beyne primer mekanik yaralanma için değil, aynı zamanda zaman 3-5 içinde meydana beyin sekonder hücresel ve moleküler yaralanmalar gibi diğer dokularda değil sadece bulunmaktadır. teşhis ve TBI tedavi yaklaşımların geliştirilmesi TBI karmaşık bir hastalık süreci olduğu için zor olduğu kanıtlanmıştır. Birincil yaralanmalar, insan fizyolojisi ve çevresel faktörlerin değişken doğası heterojen ikincil i sonuçlanırnjuries ve patolojileri. Altta yatan değişken faktörler bireyin temel yaralanmanın şiddetini, tekrarlayan primer yaralanma arasındaki süreyi ve yaş ve genotipi içermektedir. Her bir değişken faktör TBI sonuçları nasıl katkıda anlama teşhis ve TBI 6,7 tedavisinde yaklaşımlar geliştirilmesine yardımcı olmak için muhtemeldir. Burada TBI sonuçları değişken faktör katkı tanımlamak için kullanılabileceğini Drosophila melanogaster (meyve sineği) &#39;de kapalı baş TBI kasten için bir yöntem tarif eder. yöntem yoğun bir elin avuç içi karşı bir sinek kültür flakon yan isabet vahşi tip neden bir ilk gözlem dayanmaktadır geçici TBI olası bir sonucu sakat hale uçar. Böylece, el vurma eylem hızlanma ve yavaşlama kuvvetleri özetlemek için Yüksek Etki Travma (HIT) aygıtı inşa. Yüksek hızlı film gösterir tek bir grevCihaz neden HIT onların baş ve gövdesinin 8 flakon duvarı birkaç kez temas uçar. Bir dereceye kadar, tüm kişiler sekerek ve düşme ve araba kazası 9 insanlara ne benzer kafa kapsül, karşı deforme olmasına sinek beyin neden muhtemeldir. Buna göre, beyinde 10 ataksi ardından geçici ehliyetini kaybetmesi, hareketlilik kademeli bir toparlanma, baş gen ifade değişiklikleri ve ilerleyici sinir dejenerasyonuna dahil beyin hasarı, tutarlı HIT cihaz ekran fenotipleri ile tedavi sinekler. Böylece, HIT cihazı mümkün deneysel araçları ve sinekler için geliştirilen tekniklerin büyük cephanelik kullanarak TBI çalışma yapar.

<table><tbody><tr><td>Zinc plated compression spring</td><td>The Hillman&amp;nbsp; Group</td><td>540189</td><td>9 7/8 inch (length, 2.2 cm), 15/16 inch (outer diameter, 2.4 cm), 0.12 inch (wire size, 0.3 cm)</td></tr><tr><td>Wooden board</td><td></td><td></td><td>9 inch (length, 22.9 cm), 6.5 inch (width, 16.5 cm), 0.75 inch (height, 1.9 cm)</td></tr><tr><td>Clamps</td><td>Sigma Electrical Manufacturing Corporation</td><td>49822</td><td>3.10 inch (length, 7.9 cm), 0.68 inch (width, 1.7 cm), 1.11 inch (height, 2.8 cm), EMT Two Hole Straps, click on type for 1 inch (2.5 cm) steel EMT conduit</td></tr><tr><td>Loop half of self-adhesive velcro</td><td></td><td></td><td>3 inch (length, 7.6 cm), (3/4 inch width, 1.9 cm)</td></tr><tr><td>Polyurethane ice bucket cover</td><td>Fisher Scientific</td><td>02-591-45</td><td>9 1/8 inch (length, 23.2 cm), 9 1/8 inch (width, 23.2 cm), 1 1/4 inch (height, 3.2 cm)</td></tr><tr><td>Plastic fly vials</td><td>Applied Scientific</td><td>AS-510</td><td>3 11/16 inch (height, 9.4 cm), 1 1/16 inch (inner diameter, 2.7 cm), 1 1/8 inch (outer diameter, 2.9 cm)</td></tr><tr><td>Large cotton balls</td><td>Fisher Scientific</td><td>22-456-883</td><td></td></tr><tr><td>Paper protractor</td><td></td><td></td><td>10 inch (diameter, 25.4 cm)</td></tr></tbody></table>

a method to inflict closed head traumatic brain injury in drosophila

Travmatik beyin hasarı (TBH), fiziksel, bilişsel, davranışsal ve fonksiyonları ve ölüm bozukluğu neden her yıl milyonlarca insanı etkilemektedir. Drosophila kullanılarak yapılan çalışmalar nörolojik süreçlerin anlaşılmasında önemli atılımlar katkıda bulunmuştur. Böylece, insanlarda TBI patolojilerin hücresel ve moleküler temelini anlamak amacıyla, biz sinek kapalı kafa TBI indirebilmek için High Impact Travma (HIT) cihazı geliştirdi. Sinekler gibi geçici ehliyetini kaybetmesi ve ilerici nörodejenerasyona gibi insan TBI ile uyumlu HIT cihaz ekran fenotipleri tabi. HIT cihaz sinek beyinde mekanik hasara neden bir şişenin duvara sinekleri itmek için bir yay-tabanlı mekanizması kullanır. Cihaz operasyon basit ve hızlı olan, yapımı pahalı olmayan, kolayca ve tekrarlanabilir sonuçlar üretir. Sonuç olarak, HIT cihazı mevcut deneysel araçları ve sinekler temel adrese teknikleri ile kombine edilebilirTBI için teşhis ve tedavilerin gelişmesine yol açabilir TBI ilgili sorular. Özellikle, HIT cihazı TBI patolojilerin genetik temelini anlamak için geniş çaplı genetik ekranlar gerçekleştirmek için kullanılabilir.

Biz sinekler birincil yaralanma kısa bir süre sonra ölür neden anlamak ilgilendi. Ölümü ölçmek için, birincil yaralanma 24 saat içinde ölen sineklerin yüzde 24 saatte Ölüm İndeksi (MI 24), tespit. HIT cihazdan saldırılarından Sinekler uçucu gıda ile bir şişe içinde 25 ° C&#39;de inkübe edilmiştir, ve ölü sinek sayısı, 24 saat sonra sayılmıştır. Biz MI 24 etkileyen faktörleri belirlemek için bu yaklaşımı kullanılır ve MI 24 bir şişeye (10 ila 60...

Watch this Scientific Journal Video about A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila at JoVE.com

A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila

Burada Drosophila kapalı kafa travmatik beyin hasarı (TBI) indirebilmek için bir yöntem açıklanmaktadır. Bu yöntem, sinekler için deneysel araçları ve teknikleri geniş bir dizi kullanarak TBI patolojiler altında yatan hücresel ve moleküler mekanizmaları araştırmak için bir ağ geçidi sağlar.

Kapalı Başkanı Travmatik Beyin yaralayabilecek Bir Yöntem<em&gt; Drosophila</em

Traumatic brain injury (TBI) affects millions of people each year, causing impairment of physical, cognitive, and behavioral functions and death. Studies ...

a-method-to-inflict-closed-head-traumatic-brain-injury-in-drosophila

Research

JoVE Journal

Neuroscience

A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila

11.4K Görüntüleme.  University of Wisconsin-Madison.  Burada Drosophila kapalı kafa travmatik beyin hasarı (TBI) indirebilmek için bir yöntem açıklanmaktadır. Bu yöntem, sinekler için deneysel araçları ve teknikleri geniş bir dizi kullanarak TBI patolojiler altında yatan hücresel ve moleküler mekanizmaları araştırmak için bir ağ geçidi sağlar. 

Video: A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila

Using Microfluidics Chips for Live Imaging and Study of Injury Responses in Drosophila Larvae

Live imaging is an important technique for studying cell biological processes, however this can be challenging in live animals. The translucent cuticle of the Drosophila larva makes it an attractive model organism for live imaging studies. However, an important challenge for live imaging techniques is to noninvasively immobilize and position an animal on the microscope. This protocol presents a simple and easy to use method for immobilizing and imaging Drosophila larvae on a polydimethylsiloxane (PDMS) microfluidic device, which we call the 'larva chip'. The larva chip is comprised of a snug-fitting PDMS microchamber that is attached to a thin glass coverslip, which, upon application of a vacuum via a syringe, immobilizes the animal and brings ventral structures such as the nerve cord, segmental nerves, and body wall muscles, within close proximity to the coverslip. This allows for high-resolution imaging, and importantly, avoids the use of anesthetics and chemicals, which facilitates the study of a broad range of physiological processes. Since larvae recover easily from the immobilization, they can be readily subjected to multiple imaging sessions. This allows for longitudinal studies over time courses ranging from hours to days. This protocol describes step-by-step how to prepare the chip and how to utilize the chip for live imaging of neuronal events in 3rd instar larvae. These events include the rapid transport of organelles in axons, calcium responses to injury, and time-lapse studies of the trafficking of photo-convertible proteins over long distances and time scales. Another application of the chip is to study regenerative and degenerative responses to axonal injury, so the second part of this protocol describes a new and simple procedure for injuring axons within peripheral nerves by a segmental nerve crush.

Using Microfluidics Chips for Live Imaging and Study of Injury Responses in Drosophila Larvae

Drosophila larvae are an attractive model system for live imaging due to their translucent cuticle and powerful genetics. This protocol describes how to utilize a single-layer PDMS device, called the &#39;larva chip&#39; for live imaging of cellular processes within neurons of 3rd instar Drosophila larvae.

Canlı Görüntüleme ve Yaralanma Yanıtları Çalışması için Mikroakiskan Chips kullanma<em&gt; Drosophila</em&gt; Larva

Live imaging is an important technique for studying cell biological processes, however this can be challenging in live animals. The translucent cuticle of ...

Biyomühendislik

A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila

Chronic Traumatic Encephalopathy (CTE) is an established neurodegenerative disease that is closely associated with exposure to repetitive mild Traumatic Brain Injury (mTBI). The mechanisms responsible for its complex pathological changes remain largely elusive, despite a recent consensus to define the neuropathological criteria. Here, we describe a novel method to develop a model of CTE in Drosophila melanogaster&#160;(Drosophila&#160;)&#160;in an attempt to identify the key genes and pathways that lead to the characteristic hyperphosphorylated tau accumulation and neuronal death in the brain. Adjustable-strength impacts to inflict mild closed injury are delivered directly to the fly head, subjecting the head to rapid acceleration and deceleration. Our method eliminates the potential problems inherent with other Drosophila mTBI models (e.g.,animal death might be induced by damage to other parts of the body or to internal organs). The less labor- and cost-intensive animal care, short life span, and extensive genetic tools make the fruit fly ideal to study CTE pathogenesis and make it possible to perform large-scale, genome-wide forward genetic and pharmacological screens. We anticipate that the ongoing characterization of the model will generate important mechanistic insights on disease prevention and therapeutic approaches.

A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila

Here, we describe a new approach to inflict closed-head traumatic brain injury in Drosophila melanogaster. Our method has the advantage of directly delivering repetitive impacts with adjustable strength to the head alone. Further exploration of the invertebrate system will help to illuminate the pathogenesis of chronic traumatic encephalopathy.

Kronik Travmatik Ensefalopatiyi Modelleyen Yeni Bir Yöntem<em&gt; Drosophila</em

Chronic Traumatic Encephalopathy (CTE) is an established neurodegenerative disease that is closely associated with exposure to repetitive mild Traumatic ...

Nörobilim

Monitoring Cell-to-cell Transmission of Prion-like Protein Aggregates in Drosophila Melanogaster

Protein aggregation is a central feature of most neurodegenerative diseases, including Alzheimer&#39;s disease (AD), Parkinson&#39;s disease (PD), Huntington&#39;s disease (HD), and amyotrophic lateral sclerosis (ALS). Protein aggregates are closely associated with neuropathology in these diseases, although the exact mechanism by which aberrant protein aggregation disrupts normal cellular homeostasis is not known. Emerging data provide strong support for the hypothesis that pathogenic aggregates in AD, PD, HD, and ALS have many similarities to prions, which are protein-only infectious agents responsible for the transmissible spongiform encephalopathies. Prions self-replicate by templating the conversion of natively-folded versions of the same protein, causing spread of the aggregation phenotype. How prions and prion-like proteins in AD, PD, HD, and ALS move from one cell to another is currently an area of intense investigation. Here, a Drosophila melanogaster model that permits monitoring of prion-like, cell-to-cell transmission of mutant huntingtin (Htt) aggregates associated with HD is described. This model takes advantage of powerful tools for manipulating transgene expression in many different Drosophila tissues and utilizes a fluorescently-tagged cytoplasmic protein to directly report prion-like transfer of mutant Htt aggregates. Importantly, the approach we describe here can be used to identify novel genes and pathways that mediate spreading of protein aggregates between diverse cell types in vivo. Information gained from these studies will expand the limited understanding of the pathogenic mechanisms that underlie neurodegenerative diseases and reveal new opportunities for therapeutic intervention.

Monitoring Cell-to-cell Transmission of Prion-like Protein Aggregates in Drosophila Melanogaster

Accumulating evidence supports the idea that pathogenic protein aggregates associated with neurodegenerative diseases spread between cells with prion-like properties. Here, we describe a method that enables visualization of cell-to-cell spreading of prion-like aggregates in the model organism, Drosophila melanogaster.

Drosophila Melanogaster deli dana gibi Protein toplamları izleme hücre hücre iletim

Protein aggregation is a central feature of most neurodegenerative diseases, including Alzheimer&#39;s disease (AD), Parkinson&#39;s disease (PD), ...

A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System

The regrowth capacity of damaged neurons governs neuroregeneration and functional recovery after nervous system trauma. Over the past few decades, various intrinsic and extrinsic inhibitory factors involved in the restriction of axon regeneration have been identified. However, simply removing these inhibitory cues is insufficient for successful regeneration, indicating the existence of additional regulatory machinery. Drosophila melanogaster, the fruit fly, shares evolutionarily conserved genes and signaling pathways with vertebrates, including humans. Combining the powerful genetic toolbox of flies with two-photon laser axotomy/dendriotomy, we describe here the Drosophila sensory neuron &#8211; dendritic arborization (da) neuron injury model as a platform for systematically screening for novel regeneration regulators. Briefly, this paradigm includes a) the preparation of larvae, b) lesion induction to dendrite(s) or axon(s) using a two-photon laser, c) live confocal imaging post-injury and d) data analysis. Our model enables highly reproducible injury of single labeled neurons, axons, and dendrites of well-defined neuronal subtypes, in both the peripheral and central nervous system.

A Drosophila In Vivo Injury Model for Studying Neuroregeneration in the Peripheral and Central Nervous System

Here, we present a protocol using the Drosophila sensory neuron - dendritic arborization (da) neuron injury model, which combines in vivo live imaging, two-photon laser axotomy/dendriotomy, and the powerful fly genetic toolbox, as a platform for screening potential promoters and inhibitors of neuroregeneration.

Neuroregeneration periferik ve santral sinir sistemi çalışmak için bir Vivo Drosophila yaralanma modeli

The regrowth capacity of damaged neurons governs neuroregeneration and functional recovery after nervous system trauma. Over the past few decades, various ...

Tıp

Stimulating and Analyzing Adult Neurogenesis in the Drosophila Central Brain

The molecular and cellular mechanisms underlying neurogenesis in response to disease or injury are not well understood. However, understanding these mechanisms is crucial for developing neural regenerative therapies. Drosophila melanogaster is a leading model for studies of neural development but historically has not been exploited to investigate adult brain regeneration. This is primarily because the adult brain exhibits very low mitotic activity. Nonetheless, penetrating traumatic brain injury (PTBI) to the adult Drosophila central brain triggers the generation of new neurons and new glia. The powerful genetic tools available in Drosophila combined with the simple but rigorous injury protocol described here now make adult Drosophila brain a robust model for neural regeneration research. Provided here are detailed instructions for (1) penetrating injuries to the adult central brain and (2) dissection, immunohistochemistry, and imaging post-injury. These protocols yield highly reproducible results and will facilitate additional studies to dissect mechanisms underlying neural regeneration.

Stimulating and Analyzing Adult Neurogenesis in the Drosophila Central Brain

This article provides detailed protocols for inflicting Penetrating Traumatic Brain Injury (PTBI) to adult Drosophila and examining the resulting neurogenesis.

Drosophila Merkezi Beyninde Yetişkin Nörogenezini Uyarmak ve Analiz Etmek

The molecular and cellular mechanisms underlying neurogenesis in response to disease or injury are not well understood. However, understanding these ...

Mechanically Injuring Drosophila Larvae Segmental Nerves to Induce Neurodegeneration

Source: Danella, E. B., et al. <a href="https://app.jove.com/v/56128">A Simple Neuronal Mechanical Injury Methodology to Study Drosophila Motor Neuron Degeneration.</a> J. Vis. Exp. (2017).
The video demonstrates inducing neurodegeneration in Drosophila larva segmental nerves via mechanical injury. The ventral cuticle of anesthetized larvae is pinched using forceps to cause injury to the segmental nerves. The injured larvae are maintained with food, allowing the injury to cause degeneration of the motor neurons in the nerves, causing disruption of their neuromuscular junctions (NMJs).

Nörodejenerasyonu İndüklemek için Drosophila larvalarının segmental sinirlerini mekanik olarak yaralamak

1. Preparation of Reagents and Equipment 

	Prepare 1x Dissection Buffer (70 mM NaCl, 5 mM KCl, 0.02 mM CaCl2, 20 mM MgCl2, 10 mM NaHCO3, 115 mM sucrose, ...

JoVE Encyclopedia of Experiments

Neuropathology

Neurodegenerative Diseases

Drosophila Adult Brain Dissection: A Method in Fly Neurobiology

Source: Kelly, S. M., et al. <a href="https://www.jove.com/video/56174/" target="_blank">Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains</a>. J. Vis. Exp. (2017).
This video describes how to dissect and isolate the adult Drosophila brain&#8211;a procedure necessary for visualizing the organ, which is otherwise obscured by the cuticle, eye, and tracheal tissue. The example protocol shows a detailed demonstration yielding high-quality preparations that can be used for immunostaining and imaging methods in Drosophila neurobiology.

Drosophila Erişkin Beyin Diseksiyonu: Sinek Nörobiyolojisinde Bir Yöntem

Source: Kelly, S. M., et al. Dissection and Immunofluorescent Staining of Mushroom Body and Photoreceptor Neurons in Adult Drosophila melanogaster Brains. ...

Biyoloji

Drosophila melanogaster (meyve sineği)

Yetişkin

Inducing Targeted Neuronal Injury Using a High-Power Laser in a Drosophila Larva

Source: Li, D., Li, F., et al. <a href="https://app.jove.com/v/57557">A Drosophila in vivo injury model for studying neuroregeneration in the peripheral and central nervous system.</a> J. Vis. Exp. (2018)
This video demonstrates a method for inducing targeted neuronal injury in Drosophila larvae using a high-power laser. After positioning the larva under a microscope, a low-power laser scans for fluorescent neurons, and then the laser power is increased to induce localized damage. The injury is confirmed by increased fluorescence and a crater at the injury site.

Source: Li, D., Li, F., et al. A Drosophila in vivo injury model for studying neuroregeneration in the peripheral and central nervous system. J. Vis. Exp. ...

Trauma

Source: Katzenberger, R. J., et al.,&#160;<a href="https://app.jove.com/v/52905">A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila.</a> J. Vis. Exp. (2015).
The video demonstrates the use of a High-Impact Trauma (HIT) device to induce closed-head traumatic brain injury (TBI) in Drosophila. TBI causes mechanical brain trauma affecting neuronal function, which over time leads to neurodegeneration and mortality.

Source: Katzenberger, R. J., et al.,&#160;A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila. J. Vis. Exp. (2015).
The video ...

A Technique to Inflict Closed-Head Traumatic Brain Injury in Drosophila Flies

Source: Sun, M., et al. <a href="https://app.jove.com/v/55602">A Novel Method to Model Chronic Traumatic Encephalopathy in Drosophila.</a> J. Vis. Exp. (2017).
This video demonstrates a procedure to inflict a closed-head traumatic injury in anesthetized Drosophila flies using a strike device with a gas-propelled impactor. The injury affects neuronal function and impairs walking ability.

Drosophila Sineklerinde Kapalı Kafa Travmatik Beyin Hasarı Uygulamak İçin Bir Teknik

1. Assembly of the Strike Device (Figure 1)

	Remove the plunger from a 1 mL tuberculin syringe. Cut the barrel at the 1 mL mark.
	Remove an aerosol ...

Kapalı Başkanı Travmatik Beyin yaralayabilecek Bir Yöntem

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Canlı Görüntüleme ve Yaralanma Yanıtları Çalışması için Mikroakiskan Chips kullanma

Kronik Travmatik Ensefalopatiyi Modelleyen Yeni Bir Yöntem

Drosophila Melanogaster deli dana gibi Protein toplamları izleme hücre hücre iletim

Neuroregeneration periferik ve santral sinir sistemi çalışmak için bir Vivo Drosophila yaralanma modeli

Drosophila Merkezi Beyninde Yetişkin Nörogenezini Uyarmak ve Analiz Etmek

Nörodejenerasyonu İndüklemek için Drosophila larvalarının segmental sinirlerini mekanik olarak yaralamak

Drosophila Erişkin Beyin Diseksiyonu: Sinek Nörobiyolojisinde Bir Yöntem

Inducing Targeted Neuronal Injury Using a High-Power Laser in a Drosophila Larva

A Method to Inflict Closed Head Traumatic Brain Injury in Drosophila

Drosophila Sineklerinde Kapalı Kafa Travmatik Beyin Hasarı Uygulamak İçin Bir Teknik