The authors want to thank Dr. Tadmiri Venkatesh for his encouragement to prepare this manuscript, Dova Brenman and Selwyn Chui for their constructive comments, Elyssa Burg and Wayne Rasband for designing the macro in ImageJ for all interfly distances and for nearest neighbor distances. The authors also want to thank the reviewers for their constructive comments.
A.A.A, M.C.C. and A.F.S were responsible for research design; S.N.J., A.A.A, M.N., Z.R., and A.J.M. performed the experiments. A.A.A, M.N., A.J.M. and M.C.C and A.F.S. analyzed the data; A.R.M. and A.F.S. wrote the manuscript.
This work was supported by PSC-CUNY research awards, jointly funded by The Professional Staff Congress and The City University of New York to A.F.S.; by internal funding from Western University to A.F.S.; by a Mathematics, Biology, Chemistry, and Geology majors scholarship for teachers-in-training and by a Louis Stokes Alliance for Minority Participation scholarship to A.A.A.

In-house düzenlendi 1. Ekipman ve Reaktifler (Diğerleri için malzemeler gör Liste) <ol><li> Daha önce 8 açıklandığı gibi bir Drosophila soğuk anestezi cihazı hazırlayın. </li><li> Daha önce 13 açıklandığı gibi bir sinek aspiratör hazırlayın. </li><li> Sosyal uzay odaları ve tutucular hazırlayın. <ol><li> Sipariş veya sosyal alan odaları oluşturmak için cam bölmeleri ve akrilik ayırıcılar yapmak. Her sosyal alanı bölmesi 0.3 cm kalınlığında, 16.5 cm, 8,9 cm bir bazın bir yüksekliğe sahip, iki dik üçgen akrilik aralayıcılar ((0,3 cm kalınlığında, 17.6 cm 17,6 cm) bir, iki kare cam bölmeden oluşur ) ve iki dikdörtgen alanlar (0,3 cm kalınlığında 1,5 cm 9 cm) (Şekil 1A). </li><li> Bu Şekil 1 B &#39;de bölme ile aynıdır, öyle ki cam ve akrilik sosyal alan bölmesini monte edin. Bunu yapmak için, öyle ki cam bir kare bölmesinin üstüne bir üçgen boşluk düz koyarak başlamak dik açıÜçgen aralama kare bölmesinde köşelerinden biri ile uyumludur. Sonraki ilk üçgen ayırıcı yansıtma, kare bölmesinin üstündeki ikinci üçgen boşluk düz yerleştirin. NOT: elinden yağlar ve kokuları ile parçaları kontamine etmeyecek şekilde eldiven giymek emin olun. </li><li> Kapsamında değildir bölmesinin yan tarafı boyunca, kare bölmesinin en düz iki küçük dikdörtgen ayırıcılar yerleştirin. Kare düzlemin üstünde akrilik ayırıcılar şimdi üçgen arenada oluşturmalıdır. </li><li> Aşağıda cam orijinal bölmesinin üzerinde hizalanacak şekilde, akrilik aralama üstünde cam bir ikinci kare bölme yerleştirin. </li><li> Sosyal uzay odasını oluşturmak üzere bir araya bölme ve ara sabitleyen dört bağlayıcı klipleri kullanın. Cam bölmeler içinde onları güvence üçgen aralama her uzun kenarı boyunca, köşeye yakın tek klibi yerleştirin. Bu aynı tarafta, onları güvence dikdörtgen aralama her aşkın, bitişik köşede bir klip yerleştirmekCamların yan. </li><li> Bir destek standı ve sosyal alan odasının çalışma yüzeyinin üstünde onun kenarında dinlendiği gibi kelepçe, dik konumda sosyal alan odasını koruyacaktır böyle bir şişeye kelepçe birleştirin. </li><li> Deneyde her tekrarı için bir sosyal alan odasını montajı ve durmak destekliyoruz. </li></ol></li><li> Test sineklerin tırmanma yeteneği kontrol etmek için bir tırmanma tahlil yanıt cihazı hazırlayın. <ol><li> Daha önce 14,15 tarif edildiği gibi, bir karşı cihazı kullanın. </li></ol></li><li> Beyaz tezgah kapağı ve beyaz zemin önünde kaplı bir çalışma yüzeyine deney yaparak homojen aydınlatma koşulları sağlamak. </li></ol> 2. Deney öncesi Sinekler hazırlanması <ol><li> Standart Drosophila içeren şişelerde sinekler yiyecek sinek koruyun. 12 saat aydınlık / karanlık döngüsünde 25 ° C&#39;de bir kuluçka bölmesinde muhafaza edin. </li><li> E Bir iki gün önceXperiment, toplamak ve daha önce 8 açıklandığı gibi cinsiyet, soğuk anestezi altında uçuyor. <ol><li> Soğuk anestezi cihazı Chill -4 ° C. Yeri 50 ml&#39;lik plastik tüplere uçar. Tamamen sinekler hareketsiz olmak için en az 5 dakika bekleyiniz, yalıtılmış bir buz kovası, buz içine sinekler içeren plastik tüpler daldırın. </li><li> Soğuk anestezi cihazının polietilen levha üzerine sinekler yerleştirin. Oda sıcaklığında, kadınlarda gelen erkeklerin ayırmak için Stereomikroskopta kullanın. Standart Drosophila içeren şişeler içinde, gruplar halinde, sinekler koruyun flakon başına 40 sinekleri aşmayan, gıda sinek. </li></ol></li><li> İki saat deney başlamadan önce, deney gerçekleştirilir oda sıcaklığı 24-25 ° C arasındadır ve nem yaklaşık olarak% 50 olduğundan emin olun. </li><li> Gıda içeren yeni şişe içine sinekler aktarın ve deney yapılacaktır çalışma yüzeyine 2 saat koyun. NOT: Bu experimen içints, kullanılan sinek suşları Drosophila melanogaster suşları vardı: 1118 w, Cs 10 (veya W - Kanton-S 10 kez çaprazlanırlar 1118 w) Kanton-Özel veya Kanton-S (CS), Oregon ve Semerkand sinekler laboratuvarımızda tüm vardı hisse senetleri 16; Elwood sinekler Long Island, New York, ABD 8, Huntington Elwood Mahallesi&#39;nde Sonbahar 2011&#39;de toplanmıştır. Aksi belirtilmediği zaman dışında, sunulan sonuçlar Kanton-S (kırmızı tonlarında) uçar ile elde edilmiştir. </li></ol> 3. Deneme Sahne <ol><li> (- Işık başladıktan sonra saat zaman - Zeitgeber zamanlı ZT 4 ila 7) 12 pm ve 3 saatleri arasında deney yapın. </li><li> Sinekler transferi için sosyal alan odasını hazırlayın. <ol><li> Vücudunuza yakın dikdörtgen aralayıcıları içeren tarafı, bir çalışma yüzeyine bir sosyal alan kamara düz yerleştirin. </li><li> O Kaldırne vücudunuzun en yakın klip ve dikdörtgen spacers arasında yaklaşık 1 cm boşluk yaratarak, dışarıya tek dikdörtgen ayırıcı kaydırın. </li><li> Bandı ve kalem kullanarak, cinsiyet, gerginlik ve tekrar sayısı ile bir üst köşede sosyal alan odasını etiket. İç üçgen arenada kısmını kapsamaz bandı sağlamak için özen gösterin. </li></ol></li><li> Sosyal uzay odasına sinekler aktarın. <ol><li> Aktarım, yeni, boş bir şişe içine gıda içeren flakon kendi uçar. Aspire boş şişeye uçar ve sosyal alan odasına aktarabilirsiniz. <ol><li> Aspiratör ucu içine sinekler çizmek Nefes. Sosyal uzay odasının dikdörtgen aralama arasında 1 cm boşluk içine ucu yerleştirin ve iç üçgen arenaya sinekler zorlamak için tutarlı bir oranda nefes verin. </li><li> Hemen iç üçgen arena tabanını kapanış yerine geri dikdörtgen ayırıcı kaydırın ve tekrar bağlayıcı klibi yerleştirin. </li></ol></li&gt; </ol></li><li> Deneysel çalışmalar gerçekleştiği yerlerdir farklı bankta bulunan bir vurma pedi, üzerinde, dikdörtgen aralama alt tarafta olduğu gibi dik sosyal alan odasını tutun. Tüm sinekler sağlamak için Sterlini üç kez arena altına düşmüş. NOT: sinekler altına düştüğü sağlamak için aparat güvenli bir tutuş korurken küçük odacık boyutu (Şekil 1D) dışarı çıkmış akrilik ayırıcı için çalışma yüzeyinin üzerine dirseklerinizi patlama nedeniyle. </li><li> Bir zamanlayıcı başlatın. </li><li> Çalışma yüzeyine sosyal alan odasına yerleştirin ve dik tutmak için destek standı ve şişe kelepçe kullanın. İç üçgen alanda herhangi bir bölümünü kaplayan bir cetvel ya da sosyal alan odasına karşı düz bilinen uzunlukta bir etiket değil, yerleştirin. <ol><li> Yatay konumlandırılmış deneyler için, destek stand sosyal alan odasına koymayın; yerine çalışma yüzeyine sosyal alan kamara düz yatıyordu. </li></ol&gt; </li><li> Sinekler yerleşti zaman genellikle yaklaşık 30 dakika sonra, sosyal alan odasının bir resim çekmek. Çerçeve tüm iç üçgen arena, cetvel ve etiketi içerdiğinden emin olun. </li><li> Her genotip ve durum (ideal 3 dahili çoğaltır ve 3 bağımsız tekrarlar) için deney tekrarlayın. </li></ol> 4. Sosyal Uzay Veri Analizi <ol><li> ImageJ 17 aşağıdaki makrolar alma <ol><li> ImageJ buradan ulaşabilirsiniz: http://rsbweb.nih.gov/ij/. </li><li> Makro alt adlı &#39;Measure_Distances.txt&#39; ImageJ / plugins klasöründeki bir dosyaya aşağıdaki makro kaydetme ve Yardım&gt; Güncelleme Menüler komutunu kullanarak Eklentiler menüsünden, bir &#39;Ölçü Mesafeler&#39; komutunu oluşturabilirsiniz. &#39; </li><li> Bir .txt kopya ek veriler verilmektedir ve ilk 3&#39;te yayınlanan makro dosyası. </li></ol></li><li> Bir bilgisayara resim yüklemek ve bir pictu açınImageJ kullanarak yeniden. <ol><li> Etiketinde için (aynı yaklaşımı resimde cetvel üzerinde 1 cm işaretleri 0 cm bir çizgi çizerek bir ölçek oluşturmak ve Analiz sekmesi altında, o mesafe için 1 cm&#39;lik bir ölçek ayarlamak için Set Ölçek özelliğini seçin Bilinen uzunluk). Resim ölçeği uygulamadan önce Küresel seçeneği seçin. </li><li> Mümkün olduğunca resmin geri kalanı kadar çıkarırken, bu sinek tümünü içerir böyle Görüntü sekmesi altında Kırpma özelliğini kullanarak resim kırpın. </li><li> Görüntü sekmesi altında Tipi seçeneğinden 8-bit seçerek resim siyah ve beyaz yapın. </li><li> Görüntü sekmesinin ayarla seçeneği altında Eşik özelliği giderek resimden tüm arka plan gürültü çıkarın. Geliştirmek veya her sineğin beden imajı açıkça başka işaretler olmadan görülebilir böylece kontrast kaldırmak için sürgüleri sürükleyin. Değil sinekler olan işaretler varsa, dikdörtgen aracı ile onları yakalamak ve onları silin. </li><li> Yı kurAnaliz sekmesi altında Set Ölçümleri aracını kullanarak ölçümler. Alan, Kütle, Geometrik Merkezi ve Görüntü Etiket seçin. Ardından, analiz Parçacıklar sinekler temsil tüm siyah noktalar numaralı bir liste oluşturmak için Analiz sekmesi altında özelliğini seçin. <ol><li> Tüm parçacıkların analiz kullanılarak set boyutu 0,01-0,1 (piksel birimi seçin DEĞIL); dairesellik 0,00-1,00; göstermek özetliyor; sonuçlarını görüntülemek ve yöneticiye ekleyin. </li><li> Her kara nokta (her parçacık) orijinal resme numaralı liste karşılaştırarak, orijinal resimde olan sinekler doğru bir temsilidir olduğundan emin olun. NOT: birbirine çok yakın olan bazı sinekler tek parçacık olarak sayılmasına, el ikili görüntüde iki sinekler ayırmak için beyaz bir çizgi çizin. </li></ol></li><li> Ea dan, cm, mesafeleri içeren yeni bir liste oluşturmak için Eklentiler sekmesinde ikinci Makro seçeneği altında Liste Mesafeler makro - liste seçili iken, En Yakın Komşu kullanınch kendilerine en yakın komşusu uçmak. </li></ol></li><li> ImageJ en yakın komşu mesafeleri kopyalayın ve elektronik tablo programı sütuna yapıştırın. <ol><li> Aynı e-tabloya üzerine her tekrar tüm verileri derlemek ve genotip ve durumuna göre düzenliyoruz. </li></ol></li><li> İstatistiksel yazılımı kullanarak veri analizi yapın. Bu deneyde, Graph Pad Prism (MacOSX sürüm 6, GraphPad Yazılım, San Diego California USA, www.graphpad.com) tek yönlü ANOVA ve Kruskal Wallis Testleri, Tukey en ve Dunnet Post-Hoc testleri yürütmek için kullanılmıştır. </li><li> Mesafeler dağılımı olmayan bir parametrik dağılımı 1 izler ve veri kutusu ve Tukey bıyıkları (outliers ortadan kaldırmak için) olarak temsil edilmektedir. </li></ol> 5. Tırmanma Testi (Kontrol Davranışı) <ol><li> Yeteneği 14,15,18 tırmanma testi sinekler bir kontrol olarak bir tırmanma tahlil kullanın. <ol><li> Karşı akım cihazı kullanın şekilde üç deneme cBir paralel çalıştırılabilir. </li></ol></li><li> Karşıt konumlarda taze boş şişeleri ile karşı akım aparatı dibinde 1., 3 rd içine 100 naif sinekler üç farklı test şişelerde (daha önce test edilmemiş sinekler) ve bunları ek Transfer 50 ve son yuvaları. </li><li> Aparatın altındaki boş yuvalara taze, boş şişeleri yerleştirin. </li><li> Denemeyi başlatmak için, bütün sinekler her tüpün dibinde öyle ki, aygıtına üç kere aşağı dokunun. </li><li> 15 saniye Sayacı başlat (üst flakon ulaşmaya 3-7 gün eski Kanton-S ~% 100 için yeterli zaman - Şekil 3F bakınız). </li><li> Bir yuva ile üst şişeleri yerini almaya, karşı-akım cihazının üst kısmını kaydırın. </li><li> Alt şişelerde tüm sinekler getirmek için aşağı aparatı dokunarak sinekler toplayın. <ol><li> 1 ve 2. tüpleri (veya 3 ve 4., 5. </s&gt; ve 6 th) kontör ulaşamadı sinekler ve üst şişe ulaştı sinekler sırasıyla gelmektedir. </li></ol></li><li> Performans Endeksi (PI) hesaplayın. <ol><li> Her flakon sineklerin sayısını. </li><li> PI üst tüp tırmanmak mümkün sinekler yüzdesidir. </li><li> PI araçları normal dağılıma 1 izleyin ve veri ortalama (SEM) ile ortalama artı veya eksi standart hata sütun grafikleri olarak temsil edilmektedir. NOT: Alternatif olarak, PI eski sinekler için alt flakon (üst kısmını ulaşmak mümkün sinekler yüzdesi olarak hesaplanır, 5 sn 12 gün eski enfekte enfekte olan ve olmayan arasındaki yeteneği tırmanma fark ölçmek için yeterli zaman Hareketsiz bir resimden miktarı Kanton-S: sonuçlarını görmek). Diğerleri de yeteneği 19-22 tırmanma ölçmek için uygun irkilme-kaynaklı olumsuz geotaxis performans farklı tedbirler, kullandık. </li></ol></li></ol>

<ol>
	<li>Simon, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+simple+assay+to+study+social+behavior+in+Drosophila.:+measurement+of+social+space+within+a+group.">A simple assay to study social behavior in Drosophila.: measurement of social space within a group.</a> Genes Brain Behav. 11, 243-252 (2012).</li><li>Kaur, K., Simon, A. F., Chauhan, V., Chauhan, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Effect+of+bisphenol+A+on+the+behavior+of+Drosophila+melanogaster.+-+Potential+use+of+Drosophila+as+a+model+in+the+study+of+neurodevelopmental+disorders.">Effect of bisphenol A on the behavior of Drosophila melanogaster. - Potential use of Drosophila as a model in the study of neurodevelopmental disorders.</a> Behavioural Brain Research. , (2015).</li><li>Burg, E. D., Langan, S. T., Nash, H. A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila+social+clustering+is+disrupted+by+anesthetics+and+in+narrow+abdomen+ion+channel+mutants.">Drosophila social clustering is disrupted by anesthetics and in narrow abdomen ion channel mutants.</a> Genes Brain Behav. 12, 338-347 (2013).</li><li>Wise, A., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=The+autism+candidate+gene+Neurobeachin+(Rugose)+mutants+in+Drosophila+exhibit+neuro-developmental+disorders,+aberrant+synaptic+properties,+altered+locomotion,+impaired+adult+social+behavior+and+activity+patterns.">The autism candidate gene Neurobeachin (Rugose) mutants in Drosophila exhibit neuro-developmental disorders, aberrant synaptic properties, altered locomotion, impaired adult social behavior and activity patterns.</a> J Neurosci. , 1-9 (2015).</li><li>Parrish, J. K., Edelstein-Keshet, L. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Complexity,+pattern,+and+evolutionary+trade-offs+in+animal+aggregation.">Complexity, pattern, and evolutionary trade-offs in animal aggregation.</a> Science. 284, 99-101 (1999).</li><li>Sokolowski, M. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Social+interactions+in+&#8216;&#8216;simple&#8217;&#8217;+model+systems.">Social interactions in &#8216;&#8216;simple&#8217;&#8217; model systems.</a> Neuron. 65, 780-794 (2010).</li><li>Rittschof, C. C., Robinson, G. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Genomics:+moving+behavioural+ecology+beyond+the+phenotypic+gambit.">Genomics: moving behavioural ecology beyond the phenotypic gambit.</a> Animal Behaviour. 92, 263-270 (2014).</li><li>Fernandez, R. W., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Straightforward+assay+for+quantification+of+social+avoidance+in+Drosophila+melanogaster.">Straightforward assay for quantification of social avoidance in Drosophila melanogaster.</a> JoVE. (94), e52011 (2014).</li><li>Hahn, N., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Monogenic+heritable+autism+gene+neuroligin+impacts+Drosophila.+social+behaviour.">Monogenic heritable autism gene neuroligin impacts Drosophila. social behaviour.</a> Behav Brain Res. 252, 450-457 (2013).</li><li>Mogilner, A., Edelstein-Keshet, L., Bent, L., Spiros, A. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Mutual+interactions,+potentials,+and+individual+distance+in+a+social+aggregation.">Mutual interactions, potentials, and individual distance in a social aggregation.</a> J Math Biol. 47, 353-389 (2003).</li><li>Liu, L., Davis, R. L., Roman, G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Exploratory+activity+in+Drosophila+requires+the+kurtz+nonvisual+arrestin.">Exploratory activity in Drosophila requires the kurtz nonvisual arrestin.</a> Genetics. 175, 1197-1212 (2007).</li><li>Soibam, B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Open-field+arena+boundary+is+a+primary+object+of+exploration+for+Drosophila.">Open-field arena boundary is a primary object of exploration for Drosophila.</a> Brain Behav. 2, 97-108 (2012).</li><li>Ejima, A., Griffith, L. C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Ch.+30.">Ch. 30.</a> Drosophila Neurobiology - A laboratory Manual., Ch. , 475-481 (2010).</li><li>Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Behavioral+mutants+of+Drosophila+melanogaster.+isolated+by+countercurrent+distribution.">Behavioral mutants of Drosophila melanogaster. isolated by countercurrent distribution.</a> PNAS. 58, 1112-1119 (1967).</li><li>Connolly, J. B., Tully, T., Roberts, D. B. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila:+A+practical+approach.">Drosophila: A practical approach.</a> 1, 265-317 (1998).</li><li>Simon, A. F., Shih, C., Mack, A., Benzer, S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Steroid+control+of+longevity+in+Drosophila+melanogaster.">Steroid control of longevity in Drosophila melanogaster.</a> Science. 299, 1407-1410 (2003).</li><li>Rasband, W. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> ImageJ. , (1997).</li><li>Simon, A. F., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Drosophila,+vesicular+monoamine+transporter+mutants+can+adapt+to+reduced+or+eliminated+vesicular+stores+of+dopamine+and+serotonin.">Drosophila, vesicular monoamine transporter mutants can adapt to reduced or eliminated vesicular stores of dopamine and serotonin.</a> Genetics. 181, 525-541 (2009).</li><li>Barone, M. C., Bohmann, D. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assessing+neurodegenerative+phenotypes+in+Drosophila+.dopaminergic+neurons+by+climbing+assays+and+whole+brain+immunostaining.">Assessing neurodegenerative phenotypes in Drosophila .dopaminergic neurons by climbing assays and whole brain immunostaining.</a> JoVE. (74), e50339 (2013).</li><li>Ali, Y. O., Escala, W., Ruan, K., Zhai, R. G. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Assaying+locomotor,+learning,+and+memory+deficits+in+Drosophila.+models+of+neurodegeneration.">Assaying locomotor, learning, and memory deficits in Drosophila. models of neurodegeneration.</a> JoVE. , e2504 (2011).</li><li>Gargano, J. W., Martin, I., Bhandari, P., Grotewiel, M. S. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Rapid+iterative+negative+geotaxis+(RING):+a+new+method+for+assessing+age-related+locomotor+decline+in+Drosophila.">Rapid iterative negative geotaxis (RING): a new method for assessing age-related locomotor decline in Drosophila.</a> Exp Gerontol. 40, 386-395 (2005).</li><li>Simon, A. F., Liang, D. T., Krantz, D. E. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+decline+in+behavioral+performance+of+Drosophila+melanogaster.+with+age.">Differential decline in behavioral performance of Drosophila melanogaster. with age.</a> Mech Ageing Dev. 127, 647-650 (2006).</li><li>Khalil, S., Jacobson, E., Chambers, M. C., Lazzaro, B. P. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Systemic+bacterial+infection+and+immune+defense+phenotypes+in+Drosophila+melanogaster.">Systemic bacterial infection and immune defense phenotypes in Drosophila melanogaster.</a> JoVE. , (2015).</li><li>Fernandez, R. W., Akinleye, A. A., Nurilov, M., Rouzyi, Z., Simon, A. F. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=.">.</a> , (2013).</li><li>Suh, G. S. B., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=A+single+population+of+olfactory+sensory+neurons+mediates+an+innate+avoidance+behaviour+in+Drosophila.">A single population of olfactory sensory neurons mediates an innate avoidance behaviour in Drosophila.</a> Nature. 431, 854-859 (2004).</li><li>Helfrich-Fo&#776;rster, C. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Differential+control+of+morning+and+evening+components+in+the+activity+rhythm+of+Drosophila+melanogaster.--Sex-specific+differences+suggest+a+different+quality+of+activity.">Differential control of morning and evening components in the activity rhythm of Drosophila melanogaster.--Sex-specific differences suggest a different quality of activity.</a> J. Biol. Rhythms. 15, 135-154 (2000).</li><li>Fujii, S., Krishnan, P., Hardin, P. E., Amrein, H. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Nocturnal+male+sex+drive+in+Drosophila.">Nocturnal male sex drive in Drosophila.</a> Curr Biol. 17, 244-251 (2007).</li><li>Pellegrino, A. C., et al. <a target="_blank" href="http://www.ncbi.nlm.nih.gov/entrez/query.fcgi?db=PubMed&cmd=Search&doptcmdl=Citation&defaultField=Title+Word&term=Weather+forecasting+by+insects:+modified+sexual+behaviour+in+response+to+atmospheric+pressure+changes.">Weather forecasting by insects: modified sexual behaviour in response to atmospheric pressure changes.</a> PLoS One. 8, e75004 (2013).</li></ol>

The authors declare that they have no competing financial interests.

Bu protokol, sosyal alan ölçümü için detaylı bir prosedür tarif edilmiştir. Denemeyi sağlamak için bazı önemli adımlar başarılı şunlardır: 1) temizlik ve 2) sinekler önce en az bir gün toplanır sağlamak, aparatın iç odasının kapalı kendi yağlar ve kokular tutmak, aparat kurarken hep eldiven kullanın Deney soğuk anestezi olası etkilerini azaltmak için, 3) deneyden önce 2 saat sinekleri hasret değil, kendilerini temizlemiş sağlamak için taze gıda içeren yeni şişeleri sağlamak, 4) ...

Sosyal etkileşimler, bir bütün olarak, bir grup içindeki bireylerin doğru gelişmesi ve sağlığı için çok önemlidir ve bu meyve sinekleri (Drosophila melanogaster) 5,6 olarak basit organizmalar için insanlarda (Homo sapiens) dan, çok sayıda türler arasında görülebilir. Işitsel, görsel, koku, dokunma, tatma veya: Tek bir meyve sineği ya da insan payı ortak araçlar duyusal o olsun bu etkileşimler sırasında bilgi, işlemek için. Biz ve diğerleri sosyal etkileşimler ve evrimsel olabilir ilgili nöronal hücreleri ve genler 7 korunmuş olduğu davranışsal tepkileri altında yatan potansiyel ortak neurocircuitry olduğunu varsayımında. İlk etkileşim meydana geldi sonra, etkileşim, bireyler arasındaki sosyal alan olacak, ya bir artış (sosyal kaçınma 8) veya azaltmak (grup oluşumu / yığılması 5). Daha karmaşık etkileşimler, saldırganlık ya da kur gibi, o zaman gerçekleşebilir. <p class = &quot;jove_content&quot;&gt; sofistike araçlar ve yöntemler, ne zaman ve eğitim büyük yatırımlar ne güçlü bir analitik araç haline toplumsal davranışın bu basit formu ölçmek için gereklidir. Burada, aşağıdaki çalışmalarda 1-4,9 kullanılan, Drosophila melanogaster stabil gruplarında sosyal etkileşim değerlendirmek arası uçucu mesafe veya sosyal alan nicelleştiren basit bir protokol açıklar. Sosyal alan sinek ve en yakın komşusu 10 arasındaki mesafe bir ölçüsü anlamına gelir. Sosyal alan D. verilen nüfus için tutarlı deneysel koşullar (yaklaşık 1-2 içinde vücut uzunluklarının ortalama) korunmuş ve bireysel izolasyonu 1 muhafaza edilmiş ise artan sineklerin sosyal deneyim açısından farklılık vardır melanogaster. Doğru görme, klasik koku veya SVO algı 1 normal bir sosyal mesafeyi korumak için gerekli değil ama. Sosyal alan ölçüsü böylece olabilirSosyal etkileşimleri analiz ve D&#39;de sosyal davranışı ölçmek için bir tanı aracı olarak kullanılan melanogaster 1.. Biz bu ölçümü gerçekleştirmek için, ve ne ölçüde ortak deneysel değişkenler bu davranışını etkileyen nasıl ayrıntılarıyla burada açıklamak. Bir ölçüde - - yapılacak sosyal alan etki Biz deney gerçekleştirilir boşluğun yanı sıra, sineklerin sayısı yönü göstermektedir. Daha önce kamara geometri sinekler 11,12 spontan keşif hareketi etkilediği gösterilmiştir ve onlar yerleşmeye karar nerede bu fenomen sonuçta etkileyebilir. Ancak, sürece sinek yoğunluğu (sinek / cm 2) ve bölme yönelim aynı tutulur, sineklerin sosyal alan da sabit kalır. Bu testte sağlamlığı bağımsız laboratuvarlar wh mutantlar tarafından görüntülenen sonucu çoğaltabilirsiniz farklı odacık boyutlarını, şeklini kullanarak ve oryantasyon gerçeği ile gösterilmektedirbir artış, sosyal alan olan ite geni (göz pigmentasyon etkileyen), (1 dikey üçgen veya yatay daire, 3, hava akımı ile yatay kare). Biz erkekler değil, kadınlar, daha da ayrı akşamları olduğunu göstermektedir Bizim sonuçları, sosyal alan deney yapıldığı zaman muhafaza sonuçların tutarlılığı açısından son derece önemli olduğunu göstermektedir. Ancak, gündüz ve akşam saatleri arasında görülen farklar sineklerin faaliyet farklılıklara bağlı değildir ve sosyal alanı ile ilişkili olmadığını aktivite düzeylerini gösteren argümanları tartışmak. Son olarak, beyaz mutant tarafından belirtildiği gibi toplumsal alanın belirlenmesi genetik temelleri şimdiden 1,3 tarif vardır, ve biz burada sunuyoruz sinekler çeşitli kendilenmiş ve vahşi yakalanmış suşlar arasındaki farklar. Bu nedenle, bu deney, mükemmel bir araç f yaparveya genetik etkilerini yanı sıra çevresel faktörleri araştırmak.

<table><tbody><tr><td>Stereo Zoom Microscope&amp;nbsp;</td><td>Nikon&amp;nbsp;&amp;nbsp;</td><td>SMZ-645</td><td>Any other standard scope for fly handling would work</td></tr><tr><td>Small paint brushes&amp;nbsp;</td><td></td><td></td><td>for pushing flies</td></tr><tr><td>Jazz-mix</td><td>Fisher</td><td>33545</td><td>any other standard drosophila food would work</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Mini-Alarm Timer/Stopwatch</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>&amp;nbsp;Sharpie pens</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Adhesive Tape</td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Medium size binder clips</td><td>Staples</td><td></td><td>to hold the chambers together: 1-1/4&quot; (32mm) medium clips with 5/8&quot; capacity</td></tr><tr><td>small SupportStands</td><td>Carolina&amp;nbsp;</td><td>707161</td><td>to hold the chambers in a vertical orientation</td></tr><tr><td>Buret clamps</td><td>Carolina</td><td>707362</td><td></td></tr><tr><td>Digital Camera</td><td>Nikon</td><td>&amp;nbsp;Coolpix S8000&amp;nbsp;</td><td>to take the still pictures</td></tr><tr><td>small ruler</td><td></td><td></td><td>to be able to scale the picture</td></tr><tr><td>trifold board and white bench cover</td><td></td><td></td><td>to provide a white background, and a homogeneous light.</td></tr><tr><td>pounding pad</td><td></td><td></td><td>any mouse pad works.</td></tr><tr><td></td><td></td><td></td><td></td></tr><tr><td>Prism 6</td><td>GraphPad Software Inc.</td><td>Prism 6 for Mac OS X</td><td>Any statistical analysis software with t-test, one-way and two ANOVA would work</td></tr></tbody></table>

conditions affecting social space in drosophila melanogaster

Ya da diğer küçük böcekler - - basit bir şekilde burada açıklanan sosyal alan tahlil Drosophila melanogaste r sosyal etkileşimlerini ölçmek için kullanılabilir. Daha önce 1 gösterdiği gibi, iki boyutlu bir oda içinde, ilk önce, sıkı bir grubu oluşturmak için sinekler kuvvet, daha sonra, birbirlerinden kendi tercih edilen mesafe almaya izin verir. Sinekler yerleşmiş sonra, biz ücretsiz çevrimiçi yazılımları (ImageJ) ile statik bir resim işleme, yakın komşuya (veya sosyal alan) mesafeyi ölçün. Potansiyel karıştırıcı faktörlerin kontrol altında tutarken en yakın komşusu mesafe analizi, araştırmacılar sosyal etkileşim üzerine genetik ve çevresel faktörlerin etkilerini belirlemek için izin verir. Böyle tırmanma yeteneği, gün, cinsiyet zaman ve sinek sayısı gibi çeşitli faktörler, sineklerin sosyal aralığı değiştirebilirsiniz. Böylece bu karıştırıcı etkilerini azaltmak amacıyla deneysel kontrollerin bir dizi öneriyorum. Bu tahlil canen az iki amaçlar için kullanılabilir. İlk olarak, araştırmacılar (örneğin izolasyon, sıcaklık, stres veya toksinler gibi) sevdikleri çevresel vardiya sosyal aralığı 1,2 nasıl etkileyeceğini belirleyebilirsiniz. İkincisi, araştırmacılar sosyal davranış 1,3 bu temel formu genetik ve sinirsel temellerini incelemek olabilir. Özellikle, bu tür insanlarda 4 otizm için aday genlerin gibi diğer organizmalar, sosyal davranış dahil olmak üzere düşünce orthologous genlerin rolünü araştırmak için bir tanı aracı olarak kullanılır.

Sosyal uzay odasının Drosophila melanogaster sosyal davranışlarını ölçmek için bir araç olarak kullanılabilir. Akrilik aralama ve cam levhalar birçok potansiyel karıştırıcı ipuçlarının olmaksızın stabil grupları oluşturabilirler uçan olan bir iki boyutlu alanı sağlayan bir iç üçgen arena oluşturmak üzere birlikte kırpılır. Sinekler dikey arenada transfer edildiğinde, onlar aşağı vurdu edilerek ürküyor ve onlar bir kaçış davranışı ile cevap vardır: Negatif geotaxis...

Watch this Scientific Journal Video about Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster at JoVE.com

Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

The effect of genes and environment on social space of Drosophila melanogaster can be quantified through a powerful but straightforward analytical paradigm. We show here different factors that can affect this social space, and thus need to be taken into consideration when designing experiments in this paradigm.

Sosyal Space Etkileyen Koşullar<em&gt; Drosophila melanogaster</em

The social space assay described here can be used to quantify social interactions of Drosophila melanogaster &#8212; or other small insects &#8212; in a ...

conditions-affecting-social-space-in-drosophila-melanogaster

Research

JoVE Journal

Neuroscience

Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

12.1K Görüntüleme.  University of Western Ontario. The effect of genes and environment on social space of Drosophila melanogaster can be quantified through a powerful but straightforward analytical paradigm. We show here different factors that can affect this social space, and thus need to be taken into consideration when designing experiments in this paradigm.

Video: Conditions Affecting Social Space in Drosophila melanogaster

Rearing the Fruit Fly Drosophila melanogaster Under Axenic and Gnotobiotic Conditions

The influence of microbes on myriad animal traits and behaviors has been increasingly recognized in recent years. The fruit fly Drosophila melanogaster is a model for understanding microbial interactions with animal hosts, facilitated by approaches to rear large sample sizes of Drosophila under microorganism-free (axenic) conditions, or with defined microbial communities (gnotobiotic). This work outlines a method for collection of Drosophila embryos, hypochlorite dechorionation and sterilization, and transfer to sterile diet. Sterilized embryos are transferred to sterile diet in 50 ml centrifuge tubes, and developing larvae and adults remain free of any exogenous microbes until the vials are opened. Alternatively, flies with a defined microbiota can be reared by inoculating sterile diet and embryos with microbial species of interest. We describe the introduction of 4 bacterial species to establish a representative gnotobiotic microbiota in Drosophila. Finally, we describe approaches for confirming bacterial community composition, including testing if axenic Drosophila remain bacteria-free into adulthood.

Rearing the Fruit Fly Drosophila melanogaster Under Axenic and Gnotobiotic Conditions

A method for rearing Drosophila melanogaster under axenic and gnotobiotic conditions is presented. Fly embryos are dechorionated in sodium hypochlorite, transferred aseptically to sterile diet, and reared in closed containers. Inoculating diet and embryos with bacteria leads to gnotobiotic associations, and bacterial presence is confirmed by plating whole-body Drosophila homogenates.

Meyve Fly Yetiştirme<em&gt; Drosophila melanogaster</em&gt; Aksenik ve gnotobiyotik Koşullarında

The influence of microbes on myriad animal traits and behaviors has been increasingly recognized in recent years. The fruit fly Drosophila melanogaster is ...

Gelişim Biyolojisi

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

An individual's sexual drive is influenced by genotype, experience and environmental conditions. How these factors interact to modulate sexual behaviors remains poorly understood. In Drosophila melanogaster, environmental cues, such as food availability, affect mating activity offering a tractable system to investigate the mechanisms modulating sexual behavior. In D. melanogaster, environmental cues are often sensed via the chemosensory gustatory and olfactory systems. Here, we present a method to test the effect of environmental chemical cues on mating behavior. The assay consists of a small mating arena containing food medium and a mating couple. The mating frequency for each couple is continuously monitored for 24 h. Here we present the applicability of this assay to test environmental compounds from an external source through a pressurized air system as well as manipulation of the environmental components directly in the mating arena. The use of a pressurized air system is especially useful to test the effect of very volatile compounds, while manipulating components directly in the mating arena can be of value to ascertain a compound's presence. This assay can be adapted to answer questions about the influence of genetic and environmental cues on mating behavior and fecundity as well as other male and female reproductive behaviors.

A Method to Test the Effect of Environmental Cues on Mating Behavior in Drosophila melanogaster

We demonstrate an assay to analyze the environmental and genetic cues that influence mating behavior in the fruit fly Drosophila melanogaster.

Çevresel İpuçlarının Eklem Davranışı Üzerine Etkisini Test Etmek İçin Bir Yöntem<em&gt; Drosophila melanogaster</em

An individual's sexual drive is influenced by genotype, experience and environmental conditions. How these factors interact to modulate sexual behaviors ...

Davranış

Methods to Assay Drosophila Behavior

Drosophila melanogaster, the fruit fly, has been used to study molecular mechanisms of a wide range of human diseases such as cancer, cardiovascular disease and various neurological diseases1. We have optimized simple and robust behavioral assays for determining larval locomotion, adult climbing ability (RING assay), and courtship behaviors of Drosophila. These behavioral assays are widely applicable for studying the role of genetic and environmental factors on fly behavior. Larval crawling ability can be reliably used for determining early stage changes in the crawling abilities of Drosophila larvae and also for examining effect of drugs or human disease genes (in transgenic flies) on their locomotion. The larval crawling assay becomes more applicable if expression or abolition of a gene causes lethality in pupal or adult stages, as these flies do not survive to adulthood where they otherwise could be assessed. This basic assay can also be used in conjunction with bright light or stress to examine additional behavioral responses in Drosophila larvae. Courtship behavior has been widely used to investigate genetic basis of sexual behavior, and can also be used to examine activity and coordination, as well as learning and memory. Drosophila courtship behavior involves the exchange of various sensory stimuli including visual, auditory, and chemosensory signals between males and females that lead to a complex series of well characterized motor behaviors culminating in successful copulation. Traditional adult climbing assays (negative geotaxis) are tedious, labor intensive, and time consuming, with significant variation between different trials2-4. The rapid iterative negative geotaxis (RING) assay5 has many advantages over more widely employed protocols, providing a reproducible, sensitive, and high throughput approach to quantify adult locomotor and negative geotaxis behaviors. In the RING assay, several genotypes or drug treatments can be tested simultaneously using large number of animals, with the high-throughput approach making it more amenable for screening experiments.

Methods to Assay Drosophila Behavior

Drosophila melanogaster is a genetically and behaviorally tractable model system that has been used to understand the molecular and cellular basis of many important biological processes for over a century 1. Drosophila has been well exploited to gain insights into the genetic basis of fly behavior.

Test için Yöntemler Drosophila Davranış

Drosophila melanogaster, the fruit fly, has been used to study molecular mechanisms of a wide range of human diseases such as cancer, cardiovascular ...

Nörobilim

An Automated Method to Determine the Performance of Drosophila in Response to Temperature Changes in Space and Time

Temperature is a ubiquitous environmental factor that affects how species distribute and behave. Different species of Drosophila fruit flies have specific responses to changing temperatures according to their physiological tolerance and adaptability. Drosophila flies also possess a temperature sensing system that has become fundamental to understanding the neural basis of temperature processing in ectotherms. We present here a temperature-controlled arena that permits fast and precise temperature changes with temporal and spatial control to explore the response of individual flies to changing temperatures. Individual flies are placed in the arena and exposed to pre-programmed temperature challenges, such as uniform gradual increases in temperature to determine reaction norms or spatially distributed temperatures at the same time to determine preferences. Individuals are automatically tracked, allowing the quantification of speed or location preference. This method can be used to rapidly quantify the response over a large range of temperatures to determine temperature performance curves in Drosophila or other insects of similar size. In addition, it can be used for genetic studies to quantify temperature preferences and reactions of mutants or wild-type flies. This method can help uncover the basis of thermal speciation and adaptation, as well as the neural mechanisms behind temperature processing.

An Automated Method to Determine the Performance of Drosophila in Response to Temperature Changes in Space and Time

Here we present a protocol to automatically determine the locomotor performance of Drosophila at changing temperatures using a programmable temperature-controlled arena that produces fast and accurate temperature changes in time and space.

Drosophila sıcaklık değişiklikler uzay ve zaman içinde performansını belirlemek için otomatik yöntemi

Temperature is a ubiquitous environmental factor that affects how species distribute and behave. Different species of Drosophila fruit flies have specific ...

Flypub To Study Ethanol Induced Behavioral Disinhibition and Sensitization

Alcohol use disorder (AUD) remains a serious problem in our society. To develop effective interventions for addiction, it is important to understand the underlying neurobiological mechanisms, for which diverse experimental approaches and model systems are needed. The main ingredient of alcoholic beverages is ethanol, which causes adaptive changes in the central nervous system and behavior upon chronic intake. Behavioral sensitization (i.e., escalated responses) in particular represents a key adaptive change underlying addiction. Most ethanol-induced behavioral sensitization studies in animal models have been conducted on the locomotor activating effect of ethanol. A prominent effect of ethanol is behavioral disinhibition. Behavioral sensitization to the disinhibition effect of ethanol, however, is underrepresented. To address this issue, we developed the Flypub assay that allows measuring the escalated increase in disinhibited courtship activities upon recurring ethanol exposure in Drosophila melanogaster.&#160;Here, we report the step-by-step Flypub assay including assembly of ethanol exposure chambers, setup of the assay station, criteria for fly care and collection, ethanol delivery, quantification of disinhibited courtship activities, data processing and statistical analysis. Also provided are how to troubleshoot critical steps, overcome limitations and expand its utility to assess additional ethanol-induced behaviors. The Flypub assay in combination with powerful genetic tools in Drosophila melanogaster will facilitate the task of discovering the mechanism underlying ethanol-induced behavioral sensitization.

The Flypub assay measures the behaviors that the fruit fly Drosophila melanogaster displays under the influence of ethanol. The assay can be readily mastered by experimenters at all levels and applied to various vaporized stimuli, facilitating substance abuse and addiction studies.

Flypub Etanol Kaynaklı Davranış saldirisi ve Sensitizasyon Çalışma

Alcohol use disorder (AUD) remains a serious problem in our society. To develop effective interventions for addiction, it is important to understand the ...

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such behavior is spontaneous locomotor activity. Here we describe our protocol that utilizes Drosophila population monitors and a tracking system that allows continuous monitoring of the spontaneous locomotor activity of flies for several days at a time. This method is simple, reliable, and objective and can be used to examine the effects of aging, sex, changes in caloric content of food, addition of drugs, or genetic manipulations that mimic human diseases.

Determination of the Spontaneous Locomotor Activity in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster are useful in studying genetic or environmental manipulations that affect behaviors such as spontaneous locomotor activity.&#160; Here we describe a protocol that utilizes monitors with infrared beams and data analysis software to quantify spontaneous locomotor activity.&#160;

Olarak spontan lokomotor aktivitenin belirlenmesi<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Drosophila melanogaster has been used as an excellent model organism to study environmental and genetic manipulations that affect behavior. One such ...

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by stressed conspecifics due to an odorant released during stress known as the Drosophila stress odorant (dSO). Through the use of the T-maze apparatus, one can quantify the avoidance of the dSO by responder flies in a very affordable and robust assay. Conditions necessary to obtain a strong performance are presented here. A stressful experience is necessary for the flies to emit dSO, as well as enough emitter flies to cause a robust avoidance response to the presence of dSO. Genetic background, but not their group size, strongly altered the avoidance of the dSO by the responder flies. Canton-S and Elwood display a higher performance in avoiding the dSO than Oregon and Samarkand strains. This behavioral assay will allow identification of mechanisms underlying this social behavior, and the assessment of the influence of genes and environmental conditions on both emission and avoidance of the dSO. Such an assay can be included in batteries of simple diagnostic tests used to identify social deficiencies of mutants or environmental conditions of interest.

Straightforward Assay for Quantification of Social Avoidance in Drosophila melanogaster

Here, we present a protocol to quantify the avoidance of stressed individuals. This paradigm is powerful yet user-friendly and can be used to assess the influence of genes and environment on one kind of social interaction in Drosophila melanogaster.

Sosyal Kaçınma Niceleme için Basit Testi<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Drosophila melanogaster is an emerging model to study different aspects of social interactions. For example, flies avoid areas previously occupied by ...

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This complex behavior is influenced by genetic, hormonal and environmental factors. As in many organisms, previous fighting experience influences the fighting strategy of flies and the outcome of later contests: losing a fight increases the probability of losing later contests, revealing &#34;loser&#34; effects that likely involve learning and memory 2-4. The learning and memory that accompanies expression of complex social behaviors like aggression, is sensitive to pre-test handling of animals 5,6. Many experimental procedures are used in different laboratories to study aggression 7-9, however, no routinely used protocol that excludes handling of flies is currently available. Here, we report a new behavioral apparatus that eliminates handling of flies, using instead their innate negative geotactic responses to move animals into or out of fighting chambers. In this protocol, small circular fight arenas containing a food cup are divided into two equal halves by a removable plastic slider prior to introduction of flies. Flies enter chambers from their home isolation vials via sliding chamber doors and geotaxis. Upon removal of plastic sliders, flies are free to interact. After specified time periods, flies are separated again by sliders for subsequent experimentation. All of this is done easily without handling of individual flies. This apparatus offers a novel approach to study aggression and the associated learning and memory, including the formation of &#34;loser&#34; effects in fly fights. In addition, this new general-purpose behavioral apparatus can be employed to study other social behaviors of flies and should, in general, be of interest for investigating experience-related changes in fundamental behavioral processes.

A New Approach that Eliminates Handling for Studying Aggression and the "Loser" Effect in Drosophila melanogaster

During fruit fly fights, the behavioral patterns observed, fight dynamics, and associated learning and memory are influenced by experimental conditions. The protocol presented here describes a novel procedure that entirely eliminates handling of flies during experiments. This improves fight dynamics and allows formation of strong &#34;loser&#34; effects.

Saldırganlık incelenmesi için Handling ortadan kaldırır Yeni Bir Yaklaşım ve &quot;Loser&quot; Etkisi içinde<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Aggressive behavior in Drosophila melanogaster is composed of the sequential expression of stereotypical behavioral patterns (for analysis see 1). This ...

Measuring and Altering Mating Drive in Male Drosophila melanogaster

Despite decades of investigation, the neuronal and molecular bases of motivational states remain mysterious. We have recently developed a novel, reductionist, and scalable system for in-depth investigation of motivation using the mating drive of male Drosophila&#160;melanogaster (Drosophila), the methods for which we detail here. The behavioral paradigm centers on the finding that male mating drive decreases alongside fertility over the course of repeated copulations and recovers over ~3 d. In this system, the powerful neurogenetic tools available in the fly converge with the genetic accessibility and putative wiring diagram available for sexual behavior. This convergence allows rapid isolation and interrogation of small neuronal populations with specific motivational functions. Here we detail the design and execution of the satiety assay that is used to measure and alter courtship motivation in the male fly. Using this assay, we also demonstrate that low male mating drive can be overcome by stimulating dopaminergic neurons. The satiety assay is simple, affordable, and robust to influences of genetic background. We expect the satiety assay to generate many new insights into the neurobiology of motivational states.

Measuring and Altering Mating Drive in Male Drosophila melanogaster

This article describes a behavioral assay that uses male mating drive in Drosophila melanogaster to study motivation. Using this method, researchers can utilize advanced fly neurogenetic techniques to uncover the genetic, molecular, and cellular mechanisms that underlie this motivation.

Ölçme ve Male Değiştirme Çiftleşme Sürücü<em&gt; Drosophila melanogaster</em

Despite decades of investigation, the neuronal and molecular bases of motivational states remain mysterious. We have recently developed a novel, ...

Drosophila Courtship Conditioning As a Measure of Learning and Memory

Many insights into the molecular mechanisms underlying learning and memory have been elucidated through the use of simple behavioral assays in model organisms such as the fruit fly, Drosophila melanogaster. Drosophila is useful for understanding the basic neurobiology underlying cognitive deficits resulting from mutations in genes associated with human cognitive disorders, such as intellectual disability (ID) and autism. This work describes a methodology for testing learning and memory using a classic paradigm in Drosophila known as courtship conditioning. Male flies court females using a distinct pattern of easily recognizable behaviors. Premated females are not receptive to mating and will reject the male&#39;s copulation attempts. In response to this rejection, male flies reduce their courtship behavior. This learned reduction in courtship behavior is measured over time, serving as an indicator of learning and memory. The basic numerical output of this assay is the courtship index (CI), which is defined as the percentage of time that a male spends courting during a 10 min interval. The learning index (LI) is the relative reduction of CI in flies that have been exposed to a premated female compared to na&#239;ve flies with no previous social encounters. For the statistical comparison of LIs between genotypes, a randomization test with bootstrapping is used. To illustrate how the assay can be used to address the role of a gene relating to learning and memory, the pan-neuronal knockdown of Dihydroxyacetone phosphate acyltransferase (Dhap-at) was characterized here. The human ortholog of Dhap-at, glyceronephosphate O-acyltransferase (GNPT), is involved in rhizomelic chondrodysplasia punctata type 2, an autosomal-recessive syndrome characterized by severe ID. Using the courtship conditioning assay, it was determined that Dhap-at is required for long-term memory, but not for short-term memory. This result serves as a basis for further investigation of the underlying molecular mechanisms.

Drosophila Courtship Conditioning As a Measure of Learning and Memory

This protocol describes a Drosophila learning and memory assay called courtship conditioning. This classic assay is based on a reduction of male courtship behavior after sexual rejection by a non-receptive premated female. This natural form of behavioral plasticity can be used to test learning, short-term memory, and long-term memory.

Öğrenme ve Bellek Tedrisi Olan Drosophila Kurbanlığı İklimlendirme

Many insights into the molecular mechanisms underlying learning and memory have been elucidated through the use of simple behavioral assays in model ...

Sosyal Space Etkileyen Koşullar

Özet

Daha Fazla Video Keşfet

Bu videodaki bölümler

Meyve Fly Yetiştirme

Çevresel İpuçlarının Eklem Davranışı Üzerine Etkisini Test Etmek İçin Bir Yöntem

Test için Yöntemler Drosophila Davranış

Drosophila sıcaklık değişiklikler uzay ve zaman içinde performansını belirlemek için otomatik yöntemi

Flypub Etanol Kaynaklı Davranış saldirisi ve Sensitizasyon Çalışma

Olarak spontan lokomotor aktivitenin belirlenmesi

Sosyal Kaçınma Niceleme için Basit Testi

Saldırganlık incelenmesi için Handling ortadan kaldırır Yeni Bir Yaklaşım ve "Loser" Etkisi içinde

Ölçme ve Male Değiştirme Çiftleşme Sürücü

Öğrenme ve Bellek Tedrisi Olan Drosophila Kurbanlığı İklimlendirme